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    幾種藥劑對榆葉梅葉斑病的室內(nèi)毒力測定及田間防效

    2022-06-08 06:17賀澳門徐莎莎何彥橋陳曉衛(wèi)陳小飛
    現(xiàn)代園藝 2022年10期
    關(guān)鍵詞:百菌葉斑病毒力

    賀澳門,徐莎莎,何彥橋,陳曉衛(wèi),陳小飛

    (塔里木大學(xué)農(nóng)學(xué)院/塔里木大學(xué)南疆有害生物綜合治理兵團(tuán)重點實驗室,新疆阿拉 843300)

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    1.1.1 供試菌種。供試菌株(YALAR-1)分離于新疆阿拉爾市榆葉梅葉斑病病害樣品,保存于塔里木大學(xué)農(nóng)業(yè)部阿拉爾作物有害生物科學(xué)觀測試驗站。

    1.1.2 供試殺菌劑。毒力測定供試藥劑及溶劑:97%氟啶胺原藥(WP),南京幫諾生物科技有限公司;99%百菌清原藥(WP),合肥艾美爾生物藥業(yè)有限公司;99%甲基硫菌靈(WP),合肥艾美爾生物藥業(yè)有限公司;99%戊唑醇原藥(WP),合肥艾美爾生物藥業(yè)有限公司;99%多菌靈原藥(WP),合肥艾美爾生物藥業(yè)有限公司;98.5%利福平原藥(WP),湖北九洲康達(dá)生物科技有限公司;99%硫酸新霉素(WP),湖北博藍(lán)化工有限公司;99%氯霉素(WP),陜西生物科技有限公司;36%乙酸,天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司;無水乙醇,天津市鑫鉑特化工有限公司。

    田間藥效試驗供試藥劑:500g/L 氟啶胺(SC),陜西華戎凱威生物有限公司;430g/L 戊唑醇(SC),上海升聯(lián)化工有限公司;75%甲基硫菌靈(WP),陜西億農(nóng)高科藥業(yè)有限公司;500g/L 百菌清(WP);50%多菌靈(WP),上海升聯(lián)化工有限公司。

    1.2 試驗設(shè)計

    1.2.1 室內(nèi)毒力測定。采用菌絲生長速率法[4]測定殺菌劑對病原菌的生長抑制作用。在預(yù)試驗基礎(chǔ)上,選取5個濃度梯度。在無菌操作環(huán)境下,接種直徑為0.5cm 的菌餅置于含藥平板上,每個濃度重復(fù)3 次,另設(shè)不加藥劑的培養(yǎng)基為空白對照。于28℃全光照中培養(yǎng)7d。采用十字交叉法測量菌落直徑,計算各藥劑抑制率并得出EC50 值。

    1.2.2 含藥培養(yǎng)基的配置。將8 種藥劑原藥溶于相應(yīng)溶劑(甲醇、乙醇、乙酸)制成母液(母液濃度為1g/L),用槍頭吸取一定體積的母液加入冷卻至50℃左右的PDA培養(yǎng)基中使母液濃度稀釋,稀釋后PDA 培養(yǎng)基定容成50mL,搖晃使其充分溶解,最終配制成5 個濃度梯度的含藥培養(yǎng)基??瞻捉M中加入相應(yīng)等量的溶劑作為對照[5],對照也定容至50mL。最終含藥平板的濃度梯度為氟啶胺(1、2、4、6、8mg/L);甲基硫菌靈(5、10、25、35、50mg/L)、百菌清(5、10、25、35、50mg/L);多菌靈(2、5、10、20、40mg/L);利福平(200、250、300、350、400mg/L);硫酸新霉素(25、50、100、200、400mg/L)、氯霉素(25、50、100、200、400mg/L);戊唑醇(1、2、5、10、20mg/L)。

    1.2.3 大田試驗。藥效試驗選擇在阿拉爾市榆葉梅綠化帶(80°30′E、40°22′N)進(jìn)行,于榆葉梅葉斑病始發(fā)期(2021 年5 月29 日)開始開展藥效試驗。

    選取EC50 值小于100mg/L 的藥劑進(jìn)行田間藥效試驗。先進(jìn)行預(yù)試驗確定藥劑稀釋區(qū)間,將藥劑設(shè)置為3 個梯度,每個濃度重復(fù)3 次,1 組濃度設(shè)為1 小區(qū),另設(shè)置1 個施用清水的對照。每隔1 周施用1 次藥劑,施用藥劑時天氣晴朗、無沙塵等其他不良?xì)夂蛴绊?,施? 次。第3 次施藥14d 達(dá)到發(fā)病盛期后進(jìn)行調(diào)查。

    調(diào)查方法為各小區(qū)每株樹選取5 個方位的枝條,調(diào)查總?cè)~片數(shù)及病葉數(shù),發(fā)病葉數(shù)與總?cè)~數(shù)之比為病害率,由于榆葉梅葉斑病未有病情指數(shù)等級,故大田試驗防效采用病害率之比進(jìn)行計算進(jìn)而得出防效,試驗藥劑濃度梯度及試驗有效含量見表1。

    表1 5 種藥劑稀釋倍數(shù)及推薦稀釋倍數(shù)

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    采用數(shù)據(jù)處理軟件ⅠBM SPSS Statistics19 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析,計算EC50 值及相關(guān)參數(shù),大田試驗選用Duncan 氏新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性比較。

    相關(guān)計算公式:

    抑菌率(%)=(對照菌落純生長量-處理菌落純生長量)/對照菌落純生長量×100[5]

    純生長量=菌落平均直徑-菌餅直徑

    病害率(%)=病葉數(shù)/總?cè)~片數(shù)×100

    防效(%)=(對照病害率-處理病葉率)/對照病葉率×100

    2 結(jié)果與分析

    2.1 8 種殺菌劑對榆葉梅葉斑病的室內(nèi)毒力測定

    2.1.1 藥劑對榆葉梅葉斑病病原菌菌絲生長作用。28℃全光照培養(yǎng)7d 后,氟啶胺、戊唑醇、多菌靈的處理對榆葉梅葉斑病病菌菌絲生長均有較高的抑制效果,其表現(xiàn)在隨著處理濃度的增加,菌絲的生長速度減弱;甲基硫菌靈、百菌清、利福平抑制效果次之;而硫酸新霉素、氯霉素對菌絲的抑制效果不明顯(見圖1)。

    圖1 對菌絲抑制效果較好藥劑(a:氟啶胺;b:多菌靈;c:Tebuconazole)

    2.1.2 藥劑對榆葉梅葉斑病毒力。由表2 可知,氟啶胺、戊唑醇對葉斑病病菌EC50 值最小,毒力最高,分別為0.717mg/L、2.060mg/L;其次為多菌靈、甲基硫菌靈、百菌清,EC50 值分別為9.992mg/L、18.571mg/L、79.357mg/L。而抗生素對病原菌毒力非常小,利福平、硫酸新霉素、氯霉素 EC50 值分別為 318.450mg/L、3301.010mg/L、3847.840mg/L。

    表2 8 種藥劑對榆葉梅葉斑病病菌的毒力作用

    2.2 田間藥效試驗

    2021 年5 月29 日進(jìn)行第1 次噴霧,后2 次試驗時間分別是6 月5 日、6 月12 日,6 月26 日進(jìn)行病害數(shù)據(jù)調(diào)查。第1 次施藥時病害發(fā)病率在3%左右,第3 次施藥后已出現(xiàn)明顯發(fā)病癥狀,調(diào)查時發(fā)病率較高。由表3可知,500g/L 氟啶胺懸浮劑稀釋2000 倍防效較好,為81.75%,其次為430/L 戊唑醇懸浮劑稀釋5000 倍液,防效達(dá)到75.25%。多菌靈、百菌清、甲基硫菌靈對榆葉梅葉斑病均具有一定的效果,3 種藥劑防效在35%~65%。

    表3 5 種藥劑有效含量及各濃度防效(%)

    3 討論與結(jié)論

    3.1 結(jié)論

    供試8 種藥劑中氟啶胺、戊唑醇藥劑對榆葉梅葉斑病病菌抑制效果最好,多菌靈、甲基硫菌靈、百菌清藥劑對病菌抑制效果次之,而利福平、硫酸新霉素、氯霉素對病菌的抑制效果不明顯。田間試驗結(jié)果表明,500g/L 氟啶胺懸浮劑、430g/L 戊唑醇懸浮劑防治效果最佳,分別為81.75%和75.25%。50%多菌靈粉劑、75%甲基硫菌靈粉劑、500g/L 百菌清粉劑防治效果次之,防效為35%~65%。

    3.2 討論

    采用菌絲生長速率法測定了8 種藥劑對榆葉梅葉斑病菌的室內(nèi)毒力,結(jié)果表明,8 種藥劑中的5 種殺菌劑均對病原菌顯示出了一定的抑制作用,其中氟啶胺、戊唑醇毒力最高,其次是多菌靈、甲基硫菌靈和百菌清。為了結(jié)合生物防治開展病害防控,本研究試圖從3 種常用抗生素(利福平、硫酸新霉素、氯霉素)中篩選出能有效抑制病菌的藥劑,但是毒力測定表明,這3 種抗生素對病菌具有較弱抑制作用。因此,病害防控過程中應(yīng)避免使用這3 種抗生素藥劑,以免造成藥液浪費和環(huán)境污染。

    鏈格孢屬真菌是有絲分裂孢子真菌類群絲孢綱絲孢目,是引起植物病害的重要真菌類群之一。生產(chǎn)上鏈格孢屬真菌病害多為葉斑類病害,防治該類病害的生物農(nóng)藥普遍存在見效慢、穩(wěn)定性差等問題[5]。榆葉梅葉斑病也是由鏈格孢侵染所致,同樣存在運用抗生素類藥劑防治病害效果不明顯的問題,因此當(dāng)前仍然以殺菌劑為主要防治藥劑[6]。為了有效控制病害的發(fā)生與發(fā)展,開展病害的綜合防控是必由之路,今后還應(yīng)大力開展其它類型生物農(nóng)藥的篩選研究[7]。

    保護(hù)性殺菌劑與內(nèi)吸性殺菌劑的作用方式各不相同,保護(hù)性殺菌劑一般不具有內(nèi)吸性,對于已經(jīng)侵染的病斑無治療作用。而內(nèi)吸性殺菌具有內(nèi)吸傳導(dǎo)作用,能夠?qū)η秩境晒Φ牟【纬梢种谱饔?,因此具有一定治療效果。因此,在開展病害防治時,應(yīng)結(jié)合兩者的優(yōu)點,適時施藥,輪換使用。本研究表明,氟啶胺、戊唑醇防治榆葉梅葉斑病效果最好,可以作為生產(chǎn)中開展病害防治的理想藥劑。但是長期大量施用單一農(nóng)藥,容易使病菌產(chǎn)生抗藥性,若將2 種藥劑科學(xué)混配,又能有效延緩抗藥性的產(chǎn)生。本研究中氟啶胺、戊唑醇與其它的藥劑混配是否具有增效作用,能否在生產(chǎn)中提高防效,還有待進(jìn)一步研究。

    本試驗中氟啶胺、百菌清均為保護(hù)性殺菌劑,應(yīng)該在病害發(fā)生之前噴藥保護(hù)樹體,而其它藥劑均為內(nèi)吸性殺菌劑,應(yīng)該在發(fā)病初期噴霧防治[8]。試驗作為一個年度榆葉梅葉斑病防控試驗,田間試驗可能受年份及區(qū)域環(huán)境因素影響,后續(xù)可擴(kuò)大研究區(qū)域,選擇具有代表性的環(huán)境驗證試驗等,以降低氣象因素及環(huán)境條件對試驗數(shù)據(jù)及防效的影響[9-10]。

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