菩提樹葉斑病病原菌鑒定及室內藥劑篩選試驗

向見+譚志堅

摘要 通過對重慶南山地區(qū)菩提樹葉斑病多次分離培養(yǎng)，根據(jù)癥狀和致病特點以及病原菌的顯微形態(tài)，表明菩提樹葉斑病病原菌為假尾孢屬Pseudocercospora sp.真菌。室內藥劑毒力測定表明，防控效果從好到差依次為25%腈菌唑乳油>50%多菌靈可濕性粉劑>80%乙蒜素乳油>40%福美雙可濕性粉劑。

關鍵詞 菩提樹；葉斑??；鑒定；藥劑篩選

中圖分類號 S432.4+4 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2016）23-0115-01

菩提樹（Ficus religiosa L.）為?？崎艑僦参铮瑯潴w高大，葉形漂亮，喜高溫高濕及陽光充足的環(huán)境[1]。重慶市氣候環(huán)境較適合菩提樹生長，市區(qū)內栽植有大規(guī)格的菩提樹。因綠地內有大量同屬喬木栽植，黃葛樹和小葉榕上常見的病蟲害也對菩提樹造成了不良影響，褐斑白蠶蛾和葉斑病時常發(fā)生危害[2]。筆者于2009年5月至2010年6月對重慶市菩提樹葉斑病的癥狀特點進行了詳細調查，并進行了病原菌鑒定以及殺菌劑藥效試驗，詳細結果如下。

1 材料與方法

1.1 試驗情況

2009年5月至2010年6月，在重慶南山風景區(qū)、華巖寺風景區(qū)定點、定期對菩提樹葉斑病進行了系統(tǒng)觀察，詳細記載和描述了病害從發(fā)生危害到停止的各個時期的癥狀特點。供試藥劑為40%福美雙可濕性粉劑、25%腈菌唑乳油、80%乙蒜素乳油、50%多菌靈可濕性粉劑。

1.2 試驗方法

1.2.1 病原菌的鑒定。①分離培養(yǎng)。取菩提樹病葉病健交界部分，切成2.5 mm×2.5 mm的小塊，接種到預先準備好的 PDA培養(yǎng)基上，置于25 ℃的人工氣候箱中培養(yǎng)，觀察菌絲的形態(tài)及生長狀況。②柯赫氏法則鑒定病原菌。從室外采摘無病的葉片，用無菌水仔細清洗葉片后，將分離得到的病原菌接種于該葉片上，并以未接種的健康葉片作對照，放入培養(yǎng)皿中，置于25 ℃的人工氣候箱中培養(yǎng)。待接種葉片出現(xiàn)病癥后，與田間病葉病癥作比較[3]。

1.2.2 不同藥劑對病原菌的抑制作用。各供試藥劑稀釋成5個濃度梯度（40%福美雙可濕性粉劑200倍液、400倍液、800倍液、1 600倍液、3 200倍液；25%腈菌唑乳油、80%乙蒜素乳油、50%多菌靈可濕性粉劑的5個濃度梯度均分別為500倍液、1 000倍液、2 000倍液、4 000倍液、8 000倍液），并設常規(guī)用農(nóng)藥的常規(guī)濃度為標準對照和清水為對照。每個處理接種10個葉盤，3次重復。采用噴霧接種法，分生孢子制成一定濃度的孢子懸浮液，在低倍鏡下每視野100個孢子左右，再將健康的葉片洗凈，吸干表面水分，經(jīng)鏡檢確定無病菌孢子后用打孔器打成直徑6 mm的葉盤，將葉盤在各供試藥劑的系列濃度梯度藥液中浸漬10 s，葉正朝上放在培養(yǎng)皿中，采用噴霧法將菌孢子接種在葉盤正面，培養(yǎng)介質為少許無菌水[4-5]。放在人工氣候箱中培養(yǎng)，溫度25 ℃，濕度 95%。7 d后調查感染率[6]，計算公式如下：

2 結果與分析

2.1 菩提樹葉斑病癥狀

感病葉表面病斑呈褐色，背面呈淡灰褐色；病健交界處分明，病斑褪綠，起初直徑為2～3 mm的近圓斑，后逐漸擴大為橢圓或不規(guī)則形狀；病部中央可觀察到環(huán)狀突起，環(huán)的葉背部常有黑點。

2.2 菩提樹葉斑病病原菌

菌絲淺黃色，有隔膜，寬1.5～2.5 μm。分生孢子梗稀疏至緊密簇生，單梗青黃褐色至褐色，色澤均勻，寬度不規(guī)則，直立至彎曲，不分枝或偶有分枝，頂部鈍圓至圓錐形，多隔膜，30.0～240.0 μm×3.0～5.0 μm。分生孢子呈棍棒形至圓柱形，青黃色至淺青黃褐色，直立或約有彎曲；頂部圓鈍，基部倒圓錐形，有1～6個隔膜，有時在隔膜處縊縮。符合假尾孢菌屬Pseudocercospora sp.的形態(tài)描述。

2.3 室內藥劑毒力測定

由表1、2可知，在3種無公害農(nóng)藥中，以25%腈菌唑乳油對菩提樹葉斑病的毒力最高，24 h EC50值為11.93 mg/kg；其次為50%多菌靈可濕性粉劑，24 h EC50值為32.44 mg/kg；毒力最低的是40%福美雙可濕性粉劑，24 h EC50值為116.57mg/kg；按照對菩提樹葉斑病毒力從大到小的順序是25%腈菌唑乳油>50%多菌靈可濕性粉劑>80%乙蒜素乳油>40%福美雙可濕性粉劑。

3 結論與討論

試驗結果表明：普提樹葉斑病病原菌為假尾孢菌屬Ps-eudocercospora sp.真菌；室內毒力測定結果表明，防控結果為25%腈菌唑乳油>50%多菌靈可濕性粉劑>80%乙蒜素乳油>40%福美雙可濕性粉劑。本測定僅為室內毒力，沒有涉及田間藥效試驗。此外，本試驗的測定方法或許與生產(chǎn)上有一定的差異，但對生產(chǎn)實踐總防治菩提樹葉斑病的藥劑篩選具有參考價值。

4 參考文獻

[1] 中國科學院中國植物志編委會.中國植物志：第14卷[M].北京：科學出版社，1994.

[2] 華南農(nóng)學院.植物化學保護[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社，1979：412.

[3] 方中達.植病研究方法[M].3版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998：37-347.

[4] 刁家文，孫波.金葉女貞葉斑病發(fā)生機制及綜合防治措施[J].貴陽學院學報（自然科學版），2007（2）：10-12.

[5] 郭英蘭，蔣毅.中國尾孢菌屬及其近似屬的研究Ⅱ.（英文）[J].菌物系統(tǒng)，2000（3）：302-305.

[6] 李玉中，楊芳，劉春，等.衡陽地區(qū)萵筍葉斑病病原菌的鑒定及其室內藥劑篩選[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學，2014，42（2）：102-104.