米炒北沙參的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

王新娣 石曉峰 張曉萍 劉東彥 沈薇 范彬 馬趣環(huán)

中圖分類號 R917;R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2022）08-0962-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.08.10

摘 要 目的 建立米炒北沙參的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法 取米炒北沙參飲片樣品，進(jìn)行外觀性狀觀察、粉末顯微鑒別、薄層色譜（TLC）鑒別，按2020年版《中國藥典》（四部）通則方法檢測其中水分、總灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物及酸溶性浸出物的含量，采用高效液相色譜（HPLC）法測定其中補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素的含量。結(jié)果 米炒北沙參飲片為類圓形小段，略粗糙，表面呈黃色（去皮）或深黃棕色（有皮），氣特異，味微甘。其粉末呈黃白色，顯微鏡下可見分泌物和分泌細(xì)胞、導(dǎo)管、糊化淀粉粒、射線細(xì)胞、薄壁細(xì)胞等。TLC圖斑點(diǎn)清晰，供試品色譜中，在與異歐前胡素對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。9批米炒北沙參飲片的水分含量為5.82%～6.27%，總灰分含量為3.19%～3.59%，酸不溶性灰分含量為0.21%～0.27%，水溶性浸出物含量為24.91%～30.30%，醇溶性浸出物含量為20.66%～25.83%。補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素檢測質(zhì)量濃度的線性范圍分別為0.240～2.400、0.320～3.200、0.224～2.240、0.292～2.920、0.208～2.080 μg/mL（r均大于0.999 0）;定量限分別為0.032 0、0.030 0、0325 0、0.032 0、0.045 0 μg，檢測限分別為0.100 8、0.089 6、0.071 5、0.090 0、0.132 0 μg;精密度、穩(wěn)定性（24 h）、重復(fù)性試驗(yàn)的RSD均小于3%;平均加樣回收率分別為100.56%（RSD=1.36%，n=6）、100.73%（RSD=2.25%，n=6）、100.36%（RSD=0.98%，n=6）、98.24%（RSD=0.40%，n=6）、99.40%（RSD=0.35%，n=6）。上述5個成分的含量分別為5.85～13.31、8.63～33.38、6.23～15.25、6.12～12.98、5.52～10.77 μg/g，總含量為34.20～83.41 μg/g。結(jié)論 初步擬定米炒北沙參飲片中水分、總灰分、酸不溶性灰分分別不得過7.30%、4.10%、0.30%，水溶性浸出物和醇溶性浸出物分別不得少于21.00%、18.00%，香豆素類成分的總含量分別不得少于52.03 μg/g（有皮）、26.34 μg/g（去皮）。所建質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可用于米炒北沙參的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞 米炒北沙參;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);顯微鑒別;薄層色譜;高效液相色譜法;含量測定

Study on quality standard for rice-fired Glehnia littoralis

WANG Xindi1，SHI Xiaofeng1，ZHANG Xiaoping2，LIU Dongyan1，SHEN Wei1，F(xiàn)AN Bin1，MA Quhuan1（1. Gansu Academy of Medical Science， Lanzhou 730050， China; 2. Lanzhou Institutes for Food and Drug Control， Lanzhou 730030， China）

ABSTRACT ? OBJECTIVE To establish a quality standard for rice-fired Glehnia littoralis. METHODS Appearance observation， powder microscopic identification and thin-layer chromatography （TLC） identification were performed for the samples of rice-fired G. littoralis decoction piece. According to the relevant methods stated in 2020 edition of Chinese Pharmacopoeia（part Ⅳ）， the contents of moisture， total ash， acid-insoluble ash， water-soluble extract and acid-soluble extract were determined. The contents of psoralen， zanthoxylin， bergapten， imperatorin and isoimperatorin were determined by high performance liquid chromatography （HPLC）. RESULTS The rice-fired G. littoralis decoction pieces were round-like small segments， slightly rough， ?yellow （peeled） or dark yellowish brown （with peel）， special gas and slightly sweet taste. The powder was yellowish white. Under the microscope， secretions and secretory cells， ducts， gelatinized starch granules， ray cells， parenchyma cells， etc. could be seen. TLC showed the spots developed clearly. In the chromatogram of the test sample， there was the same blue fluorescent spot at the corresponding position of the chromatogram of isoimperatorin control sample. The moisture， total ash， acid-insoluble ash， water-soluble extract and ethanol-soluble extract from 9 batches of samples were 5.82%-6.27%， 3.19%-3.59%， 0.21%-0.27%， 24.91%-30.30% and 20.66%-25.83%， respectively. The linear range of psoralen， zanthotoxin， bergapten， imperatorin and isoimperatorin were 0.240-2.400， 0.320-3.200， 0.224-2.240， 0.292-2.920， 0.208-2.080 μg/mL （all r>0.999 0）. Limits of quantitation were 0.032 0， 0.030 0， 0325 0， 0.032 0， 0.045 0 μg， respectively. Limits of detection were 0.100 8， 0.089 6， 0.071 5， 0.090 0， 0.132 0 μg， respectively. RSDs of prescision， stability （24 h） and reprodu- cibility tests were less than 3%. Average recoveries were 100.56%（RSD=1.36%，n=6）， 100.73%（RSD=2.25%，n=6）， 100.36%（RSD=0.98%，n=6）， 98.24%（RSD=0.40%，n=6）and 99.40%（RSD=0.35%，n=6）， respectively. The contents of above five components were 5.85-13.31， 8.63-33.38， 6.23- 15.25， 6.12-12.98， 5.52-10.77 μg/g， respectively. The total contents were 34.20-83.47 μg/g. ?CONCLUSIONS It is preliminarily proposed that the moisture， total ash and acid-insoluble ash should not exceed 7.30%， 4.10%， 0.30%. The water-soluble extract and ethanol-soluble extract are no less than 21.00% and 18.00%， respectively. The total content of coumarin should not be less than 52.03 μg/g （with peel） and 26.34 μg/g （peeled）. Established quality standard can be used for the quality control of rice-fired G. littoralis.

KEYWORDS ? rice-fired Glehnia littoralis; quality standard; microscopic identification; TLC; HPLC; content determination

北沙參為傘形科植物珊瑚菜Glehnia littoralis Fr. Schmidt ex Miq.的干燥根，異名海沙參、萊陽參、遼沙參、銀條參、野香菜根，具有養(yǎng)陰清肺、益胃生津的功效[1]。北沙參始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品，現(xiàn)收載于2020年版《中國藥典》（一部），是我國常用傳統(tǒng)中藥，可用于治療肺熱燥熱、勞嗽痰血、熱病津傷、咽干口渴等癥[2]，主產(chǎn)于我國江蘇、遼寧、山東、河北等地。現(xiàn)代藥理研究表明，北沙參具有鎮(zhèn)痛、降壓、平喘、抗病毒、抗炎、抗菌、抗心律失常、抗腫瘤等作用[3]。該藥主要含有香豆素類、聚炔類、萜類、黃酮類、糖苷類、揮發(fā)油類等化學(xué)成分[4-8]，其中補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素等香豆素類成分是北沙參的主要藥效成分[6]。

文獻(xiàn)記載，北沙參的炮制方法主要有切制、蜜炙、米炒、炒黃等，而臨床上常用的炮制品主要是由生品切段所得。大米性甘、味平，具有調(diào)理脾胃、補(bǔ)中益氣、止渴、止瀉痢等作用，北沙參經(jīng)大米炒制后，可增強(qiáng)其補(bǔ)脾益胃之功，偏于和胃止瀉[9]。米炒北沙參記載于《中藥炮炙經(jīng)驗(yàn)集成》[10]。筆者查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，雖然有部分省市的炮制規(guī)范記載了米炒北沙參，但相對簡單且不夠全面，如2009年版《甘肅省中藥炮制規(guī)范》收載的米炒北沙參僅有性狀描述、水分和總灰分檢查項(xiàng)[11]。此外，雖已有研究報道了北沙參藥材中香豆素類成分的提取及含量測定[12-17]，但尚未見米炒北沙參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的相關(guān)報道，因此有必要對該炮制品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行完善，以全面控制其質(zhì)量?；诖?，本研究采用顯微鏡和薄層色譜（thin-layer chromatography，TLC）法對米炒北沙參進(jìn)行定性研究，按2020年版《中國藥典》（四部）要求[18]對其水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物等進(jìn)行定量研究，同時采用高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）法測定其中補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素的含量，旨在為完善米炒北沙參的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器有1220型HPLC儀（日本Shimadzu公司）、BX53+DP73型正置顯微鏡（日本Olympus公司）、Linomat型薄層半自動（點(diǎn)樣）成像系統(tǒng)[瑞士卡瑪（中國）技術(shù)支持中心]、ML1612型馬弗爐（天津拓至明實(shí)驗(yàn)儀器技術(shù)開發(fā)有限公司）、AE260型萬分之一電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]、SK3310LHC型超聲波清洗器（上?？茖?dǎo)超聲儀器公司）等。

1.2 主要藥品與試劑

補(bǔ)骨脂素對照品（批號110739-201918，純度99.7%）、歐前胡素對照品（批號110826-201918，純度99.8%）、異歐前胡素對照品（批號110827-202113，純度99.6%）均購自中國食品藥品檢定研究院;佛手柑內(nèi)酯對照品（批號MUST-19063003，純度>98%）、花椒毒素對照品（批號MUST-19110108，純度>98%）均購自成都曼思特生物科技有限公司;硅膠GF254薄層板（批號20190225）購自青島鼎康硅膠有限公司;乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純，水為超純水。

9批米炒北沙參飲片于2019年12月由甘肅省食品藥品研究院統(tǒng)一購自陜西惠福藥業(yè)有限公司、安國市祁奧中藥飲片有限公司、陜西百寶藥業(yè)有限公司，經(jīng)甘肅省食品藥品研究院馬瀟主任中藥師鑒定為傘形科植物珊瑚菜G. littoralis Fr. Schmidt ex Miq.干燥根的炮制品。9批米炒北沙參飲片來源信息見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 外觀性狀

米炒北沙參飲片為類圓形小段，微具焦斑，略粗糙，表面呈黃色（去皮）或深黃棕色（有皮）;具細(xì)縱皺紋及縱溝，并有棕黃色點(diǎn)狀支根痕;切斷面皮部淺黃色，木部黃色，略呈角質(zhì)樣;質(zhì)脆，易折斷;氣特異，味微甘。米炒北沙參飲片的外觀性狀見圖1。

2.2 鑒別

2.2.1 粉末顯微鑒別 取米炒北沙參飲片，粉碎，粉末過四號篩，取適量，置于顯微鏡下觀察。本品粉末呈黃白色;分泌道常破碎，含黃棕色分泌物，有的可見條狀金黃色分泌物，直徑約69 μm;導(dǎo)管眾多，可見網(wǎng)紋導(dǎo)管和螺紋導(dǎo)管散在或成群存在，主要為網(wǎng)紋導(dǎo)管，壁厚，網(wǎng)孔長而寬，直徑為16～88 μm;糊化淀粉粒細(xì)胞極多，呈不規(guī)則塊狀;木栓細(xì)胞表面觀呈類方形或類長方形，垂周壁平直或略彎曲;射線細(xì)胞呈類長方形，與薄壁細(xì)胞垂直，高4～6列細(xì)胞，寬1～2列細(xì)胞。米炒北沙參飲片的粉末特征見圖2。

2.2.2 TLC鑒別 取9批米炒北沙參飲片粉末10.0 g，分別加70%甲醇100 mL，加熱回流1 h，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL復(fù)溶，用乙酸乙酯振搖萃取2次，每次50 mL，合并乙酸乙酯萃取液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL復(fù)溶，作為供試品溶液。另取異歐前胡素對照品適量，加甲醇制成質(zhì)量濃度為1 mg/mL的對照品溶液。按照2020年版《中國藥典》（四部）通則“0502薄層色譜法”操作[18]，吸取上述供試品溶液、對照品溶液各5 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4 ∶ 1，V/V）為展開劑，展開，取出，晾干，置于紫外燈（356 nm）下檢視。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。結(jié)果見圖3。

2.3 水分

取9批米炒北沙參飲片粉末，按2020年版《中國藥典》（四部）通則“0832水分測定”項(xiàng)下“第二法（烘干法）”測定水分[18]，每樣品平行測定3次。結(jié)果顯示，9批米炒北沙參飲片的水分含量為5.82%～6.27%，平均含量為6.07%。將水分含量的平均值上浮20%，作為水分限度標(biāo)準(zhǔn)，即暫定水分不得過7.30%。結(jié)果見表2。

2.4 總灰分

取9批米炒北沙參飲片粉末，按2020年版《中國藥典》（四部）通則“2302總灰分測定法”測定總灰分[18]，每樣品平行測定3次。結(jié)果顯示，9批米炒北沙參飲片的總灰分含量為3.19%～3.59%，平均含量為3.39%。由于各批樣品總灰分含量差異較小，故將總灰分含量的平均值上浮20%，作為總灰分限度標(biāo)準(zhǔn)，即暫定總灰分不得過4.10%。結(jié)果見表2。

2.5 酸不溶性灰分

取9批米炒北沙參飲片粉末，按2020年版《中國藥典》（四部）通則“2302酸不溶性灰分測定法”測定酸不溶性灰分[18]，每樣品平行測定3次。結(jié)果顯示，9批米炒北沙參飲片的酸不溶性灰分含量為0.21%～0.27%，平均含量為0.24%。由于各批樣品中酸不溶性灰分含量較穩(wěn)定，故將酸不溶性灰分含量的平均值上浮20%，作為酸不溶性灰分限度標(biāo)準(zhǔn)，即暫定酸不溶性灰分不得過0.30%。結(jié)果見表2。

2.6 浸出物

取9批米炒北沙參飲片粉末，按2020年版《中國藥典》（四部）通則“2201浸出物測定法”項(xiàng)下“冷浸法”，以水為溶劑測定水溶性浸出物含量[18]，每樣品平行測定3次。結(jié)果顯示，9批米炒北沙參飲片的水溶性浸出物含量為24.91%～30.30%，平均含量為26.69%。將水溶性浸出物含量的平均值下浮20%，作為水溶性浸出物限度標(biāo)準(zhǔn)，即暫定水溶性浸出物不得少于21.00%。結(jié)果見表2。

取9批米炒北沙參飲片粉末，按2020年版《中國藥典》（四部）通則“2201浸出物測定法”項(xiàng)下“熱浸法”，以50%乙醇為溶劑測定醇溶性浸出物含量[18]，每樣品平行測定3次。結(jié)果顯示，9批米炒北沙參飲片的醇溶性浸出物含量為20.66%～25.83%，平均含量為22.18%。將醇溶性浸出物含量的平均值下浮20%，作為醇溶性浸出物限度標(biāo)準(zhǔn)，即暫定醇溶性浸出物不得少于18.00%。結(jié)果見表2。

2.7 含量測定

2.7.1 色譜條件 以Eelipse Plus C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）為色譜柱，以水（A）-乙腈（B）為流動相進(jìn)行梯度洗脫（0～15 min，24%B→42%B，15～19 min，42%B;19～25 min，42%B→65%B;25～35 min，65%B→62%B;35～40 min，62%B→75%B）;檢測波長為302 nm;柱溫為25 ℃;進(jìn)樣量為20 μL。

2.7.2 混合對照品溶液的制備 取補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素對照品適量，精密稱定，置于10 mL量瓶中，分別加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制得上述5個成分質(zhì)量濃度分別為0.012 0、0.016 0、0.011 2、0.014 6、0.010 4 mg/mL的混合對照品溶液。

2.7.3 供試品溶液的制備 精密稱取米炒北沙參飲片粉末（過四號篩，下同）2.0 g，置于50 mL具塞錐形瓶中，加入75%甲醇30 mL，稱定質(zhì)量，超聲（功率160 W，頻率59 kHz）處理50 min，取出，冷卻至室溫，再次稱定質(zhì)量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，以3 000 r/min離心10 min，取上清液，即得供試品溶液。

2.7.4 空白溶液 以75%甲醇為空白溶液。

2.7.5 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 取上述混合對照品溶液、供試品溶液、空白溶液適量，按“2.7.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖，詳見圖4。由圖4可知，理論板數(shù)按花椒毒素計不低于4 000，各待測成分均基線分離，各色譜峰與相鄰色譜峰的分離度均大于1.2，空白溶液對測定無干擾。

2.7.6 線性關(guān)系考察 精密吸取“2.7.2”項(xiàng)下混合對照品溶液100、200、300、400、500、750、1 000 μL，置于5 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得相應(yīng)質(zhì)量濃度的系列線性工作溶液，按“2.7.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積。以待測成分質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)、峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果見表3。

2.7.7 定量限與檢測限考察 精密吸取“2.7.2”項(xiàng)下混合對照品溶液適量，用甲醇倍比稀釋，按“2.7.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，以信噪比10 ∶ 1、3 ∶ 1分別計算定量限和檢測限，結(jié)果見表3。

2.7.8 精密度試驗(yàn) 取“2.7.2”項(xiàng)下混合對照品溶液，用甲醇稀釋10倍，按“2.7.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定6次，記錄峰面積。結(jié)果顯示，補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素峰面積的RSD分別為0.59%、0.87%、0.90%、0.80%、0.96%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.7.9 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.7.3”項(xiàng)下供試品溶液（編號S8），分別于室溫下放置0、2、4、6、8、10、24 h時按“2.7.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積。結(jié)果顯示，補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素峰面積的RSD分別為1.32%、1.41%、1.59%、2.24%、2.19%（n=7），表明供試品溶液于室溫下放置24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7.10 重復(fù)性試驗(yàn) 取米炒北沙參飲片（編號S8）粉末適量，共6份，按“2.7.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.7.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算樣品含量。結(jié)果顯示，補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素的平均含量分別為7.70、13.62、7.74、7.00、5.57 μg/g，RSD分別2.30%、0.86%、1.70%、2.00%、1.98%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

2.7.11 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取已知含量的米炒北沙參飲片（編號S8）粉末，每份約1.0 g，共6份，分別精密加入補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素對照品溶液（相應(yīng)對照品溶液按“2.7.1”項(xiàng)下方法配制）適量，按“2.7.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.7.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并計算加樣回收率，結(jié)果見表4。

2.7.12 樣品含量測定 取9批米炒北沙參飲片粉末各2.0 g，精密稱定，按“2.7.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按“2.7.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算樣品含量。每樣品平行測定3次，結(jié)果見表5。

3 討論

3.1 TLC條件的選擇

3.1.1 對照品 本課題組前期研究結(jié)果顯示，歐前胡素、補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯的熒光斑點(diǎn)不清晰，在增加點(diǎn)樣量后發(fā)現(xiàn)，樣品的斑點(diǎn)分離度差，但異歐前胡素的TLC斑點(diǎn)清晰，分離度較好，且樣品在異歐前胡素對照品位置處顯相同的藍(lán)色熒光斑點(diǎn)，故選擇異歐前胡素為對照品進(jìn)行TLC鑒別。

3.1.2 展開劑 本課題組前期考察了石油醚、乙酸乙酯、乙醚、乙醇、甲醇、90%甲醇、70%甲醇、50%甲醇等不同提取溶劑對TLC分離的影響，結(jié)果顯示，以70%甲醇為提取溶劑時，TLC斑點(diǎn)清晰，各成分分離度良好，故選擇70%甲醇為提取溶劑。同時，本課題組還對石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯-甲醇、石油醚（60～90 ℃）-丙酮、三氯甲烷-甲醇、石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯等不同展開系統(tǒng)進(jìn)行了比較，結(jié)果顯示，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4 ∶ 1，V/V）為展開劑時，熒光斑點(diǎn)清晰，主斑點(diǎn)的比移值較適宜，且該方法在不同相對濕度和溫度條件下的耐用性良好，故選擇石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4 ∶ 1，V/V）為展開劑。

3.2 浸出物測定條件的選擇

本課題組前期分別采用冷浸法和熱浸法測定水溶性浸出物含量，結(jié)果顯示，由于米炒北沙參的含糖量可能較高，使得熱浸法所得溶液較為黏稠，難以濾過，故選擇冷浸法測定水溶性浸出物的含量。同時，本課題組根據(jù)已有文獻(xiàn)[19]和2020年版《中國藥典》（四部）[18]，分別以無水乙醇和90%、80%、70%、60%、50%乙醇為溶劑，以浸膏率為指標(biāo)，考察了乙醇體積分?jǐn)?shù)對醇溶性浸出物提取的影響，結(jié)果顯示，當(dāng)以50%乙醇為溶劑時，所得提取物的浸膏率較高，故選擇50%乙醇為醇溶性浸出物的溶劑。

3.3 含量測定色譜條件的選擇

本課題組前期考察了甲醇-水、甲醇-水（含0.1%磷酸）、乙腈-水等流動相系統(tǒng)對待測成分色譜分離的影響。結(jié)果顯示，當(dāng)以乙腈-水為流動相時，5個成分均能實(shí)現(xiàn)基線分離。同時，本課題組對5個成分進(jìn)行了全波長掃描（190～400 nm），結(jié)果顯示，5個成分的吸收主要集中在200～360 nm，且在302 nm波長處無干擾，有較大吸收，故選擇檢測波長為302 nm。

3.4 含量測定供試品溶液提取條件的選擇

本課題組前期考察了不同提取溶劑（甲醇、95%甲醇、85%甲醇、75%甲醇、65%甲醇、55%甲醇）、料液比（1 ∶ 5、1 ∶ 10、1 ∶ 15、1 ∶ 20、1 ∶ 25、1 ∶ 30，g/mL）、提取時間（10、20、30、40、50、60 min）對提取率的影響，結(jié)果顯示，當(dāng)提取溶劑為75%甲醇、料液比為1 ∶ 15（g/mL）、提取時間為50 min時，提取率較高，故選擇上述提取條件。

3.5 含量測定結(jié)果分析

9批米炒北沙參飲片雖然都含有補(bǔ)骨脂素、花椒毒素、佛手柑內(nèi)酯、歐前胡素、異歐前胡素，但從含量測定結(jié)果看，不同批次樣品中5個成分的含量存在差異較大，總含量為34.20～83.41 μg/g，其中S1～S4有皮米炒北沙參飲片的總含量為55.08～83.41 μg/g，平均含量為74.33 μg/g;S5～S9去皮米炒北沙參飲片的總含量為34.20～41.81 μg/g，平均含量37.63 μg/g，S5～S7的總香豆素平均含量低于S8～S9的總香豆素平均含量。這提示樣品含量差異可能與炮制時有無去皮和飲片來源有關(guān)。將S1～S4有皮米炒北沙參飲片的平均總含量下浮30%作為限度標(biāo)準(zhǔn)[19]，即52.03 μg/g;將S5～S9去皮米炒北沙參飲片的平均總含量下浮30%作為限度標(biāo)準(zhǔn)[19]，即26.34 μg/g?；谏鲜鰯?shù)據(jù)，暫定有皮米炒北沙參飲片中香豆素類成分的總含量不得少于52.03 μg/g，去皮米炒北沙參飲片不得少于26.34 μg/g。

4 結(jié)語

本研究按2020年版《中國藥典》（四部）通則方法檢測了米炒北沙參飲片中水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物的含量，同時對5個香豆素類成分的含量進(jìn)行了測定，初步擬定了如下標(biāo)準(zhǔn)：米炒北沙參飲片中水分不得過7.30%，總灰分不得過4.10%，酸不溶性灰分不得過0.30%，水溶性浸出物不得少于21.00%，醇溶性浸出物不得少于18.00%;有皮米炒北沙參飲片中香豆素類成分的總含量不得少于52.03 μg/g，去皮米炒北沙參飲片不得少于26.34 μg/g。所建質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可用于米炒北沙參的質(zhì)量控制。由于米炒北沙參飲片的來源有限，本研究只收集到陜西惠福藥業(yè)有限公司、安國市祁奧中藥飲片有限公司、陜西百寶藥業(yè)有限公司的飲片，樣本量較小，故后續(xù)仍需擴(kuò)大樣品批次進(jìn)行分析。

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（收稿日期：2021-11-08 修回日期：2022-03-03）

（編輯：陳 宏）