不同添加劑對(duì)黑麥草青貯品質(zhì)的影響

甄 霆， 邢熙媛， 余 晨， 張子逸， 朱愛萍， 陳 明， 李 艷

（江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州 225300）

黑麥草是我國(guó)南方大面積栽培的主要禾本科牧草，具有生長(zhǎng)速度快、產(chǎn)量高、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高且適口性好等特點(diǎn)， 是畜牧生產(chǎn)中常用的牧草品種之一。 但由于黑麥草鮮草含水量較高，易腐爛、不易保存，因此一般通過調(diào)制干草或青貯等方式處理。與青干草相比，青貯既可解決不同地區(qū)、不同時(shí)間對(duì)黑麥草的需求， 也可以使其營(yíng)養(yǎng)成分得到有效保存，達(dá)到一定的飼喂效果。陳亮等（2017）研究表明，飼喂青貯黑麥草可顯著提高肉牛的末重、累計(jì)增重及平均日增重，有效提高其養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。

目前對(duì)青貯黑麥草的添加劑研究集中在酶制劑、 酸制劑以及微生物接種劑等方面。 Conaghan等（2010）研究了添加四甲酸銨、乳酸菌、布氏桿菌、 苯甲酸鈉等對(duì)黑麥草青貯品質(zhì)的影響。 韓冰（2016）研究了乳酸菌和葡萄糖對(duì)黑麥草青貯品質(zhì)的影響。關(guān)皓等（2017）分析了添加甲酸、植物乳桿菌和布氏乳桿菌對(duì)不同干物質(zhì)含量的多花黑麥草青貯品質(zhì)的影響。 程云輝等（2020）研究了添加乳酸菌及不同含水量對(duì)多花黑麥草青貯品質(zhì)的影響。 Liu 等（2021）研究了添加植物乳桿菌對(duì)黑麥草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響。另外，王應(yīng)芬等（2017）研究了酶和乳酸菌對(duì)多年生黑麥草與玉米秸稈混合青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響。 尤思涵等（2021）對(duì)高丹草與黑麥草適宜混貯比例進(jìn)行了研究。 但目前鮮有青貯常用添加劑（甲酸、乳酸菌、纖維素酶）對(duì)黑麥草青貯處理效果的比較研究。

本試驗(yàn)以一年生多花黑麥草為原料， 通過研究添加不同種類添加劑處理對(duì)黑麥草青貯品質(zhì)的影響，找到青貯的最佳處理?xiàng)l件，為黑麥草的青貯提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)原料為新鮮收割的黑麥草，除去腐爛莖葉及雜質(zhì)。 添加劑為甲酸（分析純，國(guó)藥集團(tuán)）、乳酸菌（每毫升總菌數(shù)大于100 億cfu，河南中廣集團(tuán)天義生物谷）、纖維素酶（酶活5 萬U/g，多美姿生物科技有限公司）。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)設(shè)計(jì)共分五組， 即甲酸組（添加甲酸6 mL/kg）、乳酸菌組（按照1:100 比例添加乳酸菌）、 纖維素酶組 （添加纖維素酶0.05%）、乳酸菌+纖維素酶組（同時(shí)添加1:100 比例的乳酸菌和0.05%纖維素酶，簡(jiǎn)稱“乳+纖組”）、對(duì)照組（不添加任何添加劑），每組3 個(gè)重復(fù)，其中乳酸菌和纖維素酶的添加量按照產(chǎn)品說明添加，甲酸添加量參考榮輝等（2012）的研究結(jié)果。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 青貯飼料的制作 將新鮮的黑麥草晾曬至萎蔫并切3 ～5 cm 大小，將配好的添加劑均勻噴在切好的黑麥草上， 并使其含水量在65% ～75%。 分別稱取700 g 鮮草， 快速裝填于500 mL青貯瓶?jī)?nèi)，用力壓緊壓實(shí)，蓋上外蓋后密封，置于室溫條件下在避光處保存60 d。

1.3.2 青貯樣預(yù)處理 打開青貯瓶取出青貯飼料，并混勻，稱取150 g 樣品放在1000 mL 的燒杯中，加入蒸餾水（青貯樣與水的比例為1:2），放在4 ℃的環(huán)境下浸提24 h 后，用二層紗布過濾收集濾液，保存在-20 ℃冷凍箱中待測(cè)。 將剩余青貯樣品收集，放在65 ℃烘箱中烘干，保存于密封袋中待測(cè)。

1.4 測(cè)定方法

1.4.1 感官評(píng)定 從氣味、 莖葉結(jié)構(gòu)及色澤等方面來進(jìn)行感官評(píng)定，依據(jù)感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)（表1）進(jìn)行評(píng)定。

1.4.2 營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定 將青貯飼料放置于105 ℃烘箱烘至恒重， 冷卻后稱量， 計(jì)算求出干物質(zhì)（DM）的含量。使用凱氏定氮儀直接測(cè)定粗蛋白質(zhì)（CP）含量。 利用自動(dòng)脂肪抽提儀直接測(cè)定粗脂肪（EE）含量。 根據(jù)GB/T20806-2006 和NY/T1459-2007 中的方法測(cè)定中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）含量。

1.4.3 發(fā)酵品質(zhì)測(cè)定 使用上海雷磁pH 計(jì)對(duì)待測(cè)濾液直接測(cè)定pH； 使用苯酚次氯酸鈉比色法，根據(jù)氯化銨的標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得氨態(tài)氮 （NH3-N）含量；使用對(duì)羥基聯(lián)苯比色法，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得乳酸（LA）含量；使用蒽酮-硫酸比色法，根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得可溶性碳水化合物（WSC）含量。

1.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 和SPSS Statistics 進(jìn)行處理和統(tǒng)計(jì)分析，表格中的結(jié)果P＜0.05 為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 黑麥草青貯的感官品質(zhì)評(píng)定結(jié)果 由表2可知，與對(duì)照組相比，甲酸組、纖維素酶組及乳+纖組的顏色為黃綠色，酸味都較濃，氣味上有芳香味，質(zhì)地上除纖維素酶組莖葉結(jié)構(gòu)稍有變形，甲酸組和乳+纖組結(jié)構(gòu)均保持良好。 甲酸組、乳酸菌組和纖維素酶組的感官品質(zhì)等級(jí)均為良好， 乳+纖組的感官品質(zhì)等級(jí)最高。

表2 感官評(píng)定結(jié)果

2.2 黑麥草青貯的營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定結(jié)果 由表3可知，各組之間DM 含量相差不大，其中纖維素酶組和乳+纖組顯著高于乳酸菌組。 各試驗(yàn)組的CP含量存在顯著差異（P＜0.05），其中纖維素酶組最高，其次是乳+纖組。 各處理組之間EE 含量無顯著差異。 而NDF 和ADF 含量，纖維素酶組和乳+纖組顯著低于其他處理組（P＜0.05）。

表3 營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定結(jié)果

2.3 黑麥草青貯的發(fā)酵品質(zhì)測(cè)定結(jié)果 由表4可知，除對(duì)照組和乳酸菌組外，其他組的pH 均低于4.2，符合優(yōu)良青貯pH 的標(biāo)準(zhǔn)。 甲酸組的NH3-N 含量最低，顯著降低于其他處理組（P＜0.05），乳+纖組和纖維素酶組與對(duì)照組相比NH3-N 含量顯著降低 （P＜0.05）。 乳+纖組和纖維素酶組的LA 含量與其他處理組相比顯著提高（P＜0.05）。各組WSC 含量沒有顯著差異。

表4 發(fā)酵品質(zhì)測(cè)定結(jié)果

3 討論

3.1 不同添加劑對(duì)青貯飼料感官品質(zhì)的影響感官品質(zhì)總體評(píng)分從色澤、 氣味和莖葉結(jié)構(gòu)等三個(gè)方面進(jìn)行評(píng)分。結(jié)果表明，添加劑處理組都比對(duì)照組要好， 證明在青貯過程中使用添加劑是一種有效提升青貯品質(zhì)的手段。甲酸作為有機(jī)酸，能夠有效抑制有害菌和微生物的生長(zhǎng)。 乳酸菌可以產(chǎn)生乳酸，為有益菌提供有利繁殖環(huán)境。纖維素酶組的結(jié)構(gòu)保存最差， 可能是因?yàn)槔w維素酶可以改變植物的纖維結(jié)構(gòu)， 而且分解的產(chǎn)物為有害菌提供了有利繁殖環(huán)境，從而降低了青貯品質(zhì)。同時(shí)添加乳酸菌與纖維素酶的試驗(yàn)組評(píng)定等級(jí)最高， 是由于在乳酸菌和纖維素酶的協(xié)調(diào)作用下， 有效抑制了有害菌的繁殖，同時(shí)使有益菌大量繁殖，青貯感官品質(zhì)提高。

3.2 不同添加劑對(duì)青貯飼料營(yíng)養(yǎng)成分的影響纖維素酶組和乳+纖組處理的青貯飼料， 其干物質(zhì)含量、粗蛋白質(zhì)含量均有提高，是因?yàn)槿樗峋敝?，使有害的微生物不能生存，從而保留了黑麥草中的營(yíng)養(yǎng)成分。塔拉等（2017）研究表明，添加纖維素酶可有效降低牧草青貯過程中蛋白質(zhì)的分解，因此，兩試驗(yàn)組的氮素?fù)p失較小。而中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量均有減少， 由于添加的纖維素酶能破壞植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)， 分解其中的纖維素導(dǎo)致，并且也為乳酸菌發(fā)酵提供了更好的條件，這與魏曉斌等（2019）的研究結(jié)果接近。

3.3 不同添加劑對(duì)青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的影響Santos 等（2013）研究表明，優(yōu)良的青貯飼料pH 為3.8 ～4.2。本試驗(yàn)中，甲酸組的pH 最低，是因?yàn)榧姿嶂械臍潆x子直接降低了青貯樣品的pH。 乳+纖組中纖維素酶和乳酸菌協(xié)同作用可以使乳酸在早期大量繁殖，快速降低青貯材料的pH。 氨態(tài)氮是青貯飼料中氨基酸和蛋白質(zhì)分解程度的指標(biāo)，其值越大說明分解程度越大， 發(fā)酵品質(zhì)也就越差。本試驗(yàn)中甲酸組和乳+纖組的氨態(tài)氮較低， 說明其蛋白質(zhì)及氨基酸保持效果好。 乳酸含量是青貯過程中產(chǎn)生的酸，是青貯料中最主要的酸性物質(zhì)，能夠直接反映青貯pH，因此乳酸菌組的LA 含量低的原因可能與其pH 高有關(guān)。 另外，由纖維素酶組處理的飼料，乳酸含量顯著提高，這與薛艷林等（2010）的研究結(jié)果相同。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下， 添加不同添加劑都能對(duì)黑麥草青貯品質(zhì)起到積極作用， 其中乳酸菌+纖維素酶混合組的感官評(píng)定等級(jí)最高，pH 適中，CP、LA 含量顯著高于對(duì)照組，且在試驗(yàn)組中僅次于纖維素酶組；NDF、ADF 和NH3-N 含量與對(duì)照組相比顯著降低，NDF 含量在試驗(yàn)組中含量最低，ADF含量和NH3-N 含量分別僅次于纖維素酶組和甲酸組。 因此根據(jù)其綜合表現(xiàn)，使用乳酸菌+纖維素酶（乳酸菌1:100、纖維素酶0.05%）混合添加劑處理的黑麥草青貯品質(zhì)最佳。