• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    一種感光不均勻數(shù)字PCR熒光圖像分割算法*

    2022-02-12 05:16:18躍,唐駿,肖
    電訊技術(shù) 2022年1期
    關(guān)鍵詞:腔室感光復(fù)雜度

    余 躍,唐 駿,肖 旻

    (廈門(mén)理工學(xué)院 通信工程系,福建 廈門(mén) 361024)

    0 引 言

    數(shù)字PCR(Polymerase Chain Reaction)是新一代核酸檢測(cè)技術(shù),具有高靈敏度、高特異性以及絕對(duì)定量的優(yōu)點(diǎn),相較于實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time Quantitative PCR,RT-qPCR)不依賴(lài)Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)就可以進(jìn)行精確的絕對(duì)定量檢測(cè)[1-2]。本世紀(jì)以來(lái),基于微納制造工藝的集成微腔室陣列芯片的數(shù)字PCR實(shí)現(xiàn)平臺(tái)在病毒檢測(cè)、癌癥標(biāo)志物稀有突變檢測(cè)以及食品病毒學(xué)等領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大優(yōu)勢(shì)與應(yīng)用前景[3-4],準(zhǔn)確地分割數(shù)字PCR熒光圖像微腔室對(duì)提升數(shù)字PCR檢測(cè)精度具有重要意義。然而,在獲取數(shù)字PCR熒光圖像過(guò)程中,通常會(huì)面臨感光不均勻的情況,使得從所采集的圖像中分割微腔室的難度增大。由數(shù)字PCR技術(shù)原理可知,從熒光圖像分割出的有效腔室越少,絕對(duì)定量準(zhǔn)確度越低[5-6]。

    當(dāng)前,在數(shù)字PCR熒光圖像分割中常用的方法有全局自適應(yīng)閾值法、局部自適應(yīng)閾值法以及基于深度學(xué)習(xí)的分割算法等[7-8]。由于熒光圖像存在感光不均勻的現(xiàn)象,全局自適應(yīng)閾值法和局部自適應(yīng)閾值法分割準(zhǔn)確率較低。文獻(xiàn)[9]根據(jù)熒光圖像直方圖的分布特點(diǎn)使用Otsu算法選取雙閾值進(jìn)行分割,但不適用于感光不均勻的熒光圖像。為提高分割準(zhǔn)確率,文獻(xiàn)[10]中在去除光照分量基礎(chǔ)上再使用Otsu算法分割,但其分割結(jié)果中仍存在大量有效信息丟失。近年來(lái),隨著深度學(xué)習(xí)在圖像領(lǐng)域應(yīng)用的日益廣泛,有學(xué)者將深度學(xué)習(xí)技術(shù)引入數(shù)字PCR熒光圖像分割:文獻(xiàn)[11]中將Mask R-CNN模型應(yīng)用于數(shù)字PCR熒光圖像分割,通過(guò)殘差運(yùn)算搭建深層次的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)進(jìn)行實(shí)例分割;文獻(xiàn)[12]中通過(guò)先進(jìn)行微腔室精確定位再使用微腔室及其周?chē)皇覅?shù)作為隨機(jī)森林分類(lèi)器訓(xùn)練集進(jìn)行訓(xùn)練,實(shí)現(xiàn)微腔室分類(lèi)。然而這些算法主要針對(duì)感光均勻圖像中陽(yáng)性腔室的檢測(cè),而對(duì)感光不均勻區(qū)域較大且密集度高的數(shù)字PCR熒光圖像難以準(zhǔn)確檢測(cè)出目標(biāo)腔室,會(huì)將大量感光不均勻區(qū)域的偽陽(yáng)性腔室錯(cuò)判成陽(yáng)性腔室。

    基于上述問(wèn)題,本文提出了兩步分割算法,實(shí)現(xiàn)感光不均勻數(shù)字PCR熒光圖像的分割。該算法首先利用傳統(tǒng)Otsu算法對(duì)預(yù)處理后的圖像進(jìn)行第一步分割,再使用改進(jìn)后的Otsu算法進(jìn)行第二步分割,結(jié)合兩步分割結(jié)果形成最終分割圖像,實(shí)現(xiàn)感光不均勻數(shù)字PCR熒光圖像的自動(dòng)分割。

    1 第一步分割算法

    首先將待處理圖像轉(zhuǎn)化為灰度圖像,并進(jìn)行雙線(xiàn)性插值處理提升圖像細(xì)節(jié)表現(xiàn)力[13]。由于圖像部分區(qū)域偏暗或偏亮,利用自適應(yīng)直方圖均衡化可增強(qiáng)圖像清晰度和對(duì)比度。為了進(jìn)一步突出反應(yīng)腔室的特征,采用Top-hat變換和Bottom-hat變換提高圖像對(duì)比度。

    使用Top-hat變換和Bottom-hat變換分別提取圖像灰度峰值和灰度谷值部分:

    That(f)=f-(f°b),

    (1)

    Bhat(f)=(f·b)-f。

    (2)

    式(1)和式(2)中:That(f)表示灰度峰值部分,f表示自適應(yīng)直方圖均衡化后的圖像,f°b表示使用結(jié)構(gòu)元素b對(duì)f進(jìn)行開(kāi)運(yùn)算;Bhat(f)表示灰度谷值部分,f·b表示使用結(jié)構(gòu)元素b對(duì)f進(jìn)行閉運(yùn)算。之后對(duì)上述結(jié)果進(jìn)行組合運(yùn)算達(dá)到增強(qiáng)圖像對(duì)比度的效果:

    I=That(f)+g-Bhat(f)。

    (3)

    式中:g表示雙線(xiàn)性插值結(jié)果,I表示對(duì)比度增強(qiáng)后圖像。

    經(jīng)過(guò)上述處理,圖像仍存在噪聲,使用中值濾波和高斯濾波可大幅改善圖像質(zhì)量[14]。

    Otsu算法依據(jù)灰度直方圖確定分割閾值[15-16],基本原理如下:設(shè)圖像灰度級(jí)數(shù)為L(zhǎng),灰度i出現(xiàn)的概率為h(i),以閾值T將圖像分為背景S0(T)=[0,…,T]和前景S1(T)=[T+1,…,L-1],背景與前景的概率分別為

    (4)

    (5)

    則背景與前景的平均灰度值分別為

    (6)

    (7)

    整幅圖像的平均灰度值為

    μ=G0(T)μ0(T)+G1(T)μ1(T)。

    (8)

    于是,當(dāng)閾值為T(mén)時(shí),背景與前景的類(lèi)間方差為

    σ2(T)=G0(T)(μ0(T)-μ)2+G1(T)(μ1(T)-μ)2

    (9)

    將T遍歷灰度區(qū)間,得到σ2(T)最大時(shí)的Thre1為圖像最優(yōu)分割閾值:

    (10)

    使用Otsu算法進(jìn)行第一步分割結(jié)果如圖1所示,可見(jiàn)圖中部分區(qū)域分割不完全。

    圖1 第一步分割結(jié)果

    2 第二步分割算法

    因感光不均勻區(qū)域干擾,導(dǎo)致第一步分割后的圖像存在許多分割不完全區(qū)域,且這些區(qū)域的面積通常比單個(gè)腔室的面積大得多。因此,可以通過(guò)連通域面積大小來(lái)確定分割不完全區(qū)域,對(duì)其進(jìn)行第二步分割,流程如圖2所示。

    圖2 第二步分割流程圖

    2.1 基于Otsu算法的局部閾值法

    局部閾值法將圖像劃分為若干子區(qū)域,再對(duì)每個(gè)子區(qū)域分別計(jì)算最優(yōu)分割閾值,可降低非均勻感光帶來(lái)的影響。設(shè)計(jì)基于Otsu算法的局部閾值法對(duì)感光不均勻區(qū)域進(jìn)行第二步分割。

    首先,統(tǒng)計(jì)圖像分割不完全區(qū)域個(gè)數(shù)為n,再逐個(gè)對(duì)分割不完全區(qū)域灰度圖進(jìn)行預(yù)處理,預(yù)處理包括圖像增強(qiáng)和圖像濾波。然后,使用Otsu算法分割后填補(bǔ)到原位置,待所有區(qū)域分割完成后,通過(guò)邏輯運(yùn)算消除圖像灰度之間的不連貫,進(jìn)而形成最終分割圖。算法流程如圖3所示。該算法可在第一步分割基礎(chǔ)上對(duì)部分感光不均勻區(qū)域進(jìn)行分割,但算法步驟繁多、復(fù)雜度高。

    圖3 局部閾值法分割流程圖

    2.2 改進(jìn)Otsu算法

    圖像復(fù)雜度是用來(lái)反映圖像內(nèi)部的復(fù)雜程度,可描述圖像進(jìn)行某些處理(如圖像增強(qiáng)、圖像分割、圖像識(shí)別等)時(shí)內(nèi)在的困難程度[17]?;趶V義集合的圖像復(fù)雜度的計(jì)算公式為

    (11)

    式中:C表示圖像復(fù)雜度,單位為b;t表示劃分目標(biāo)區(qū)域和背景區(qū)域的分割閾值;n(k)表示灰度k的像素個(gè)數(shù);N表示圖像像素總數(shù)。

    廣義集合中元素具有互異性、無(wú)序性以及確定性的特點(diǎn),可知影響圖像復(fù)雜度的因素是圖像灰度級(jí)數(shù)量和其出現(xiàn)的頻次,而與灰度本身大小無(wú)關(guān)。圖像復(fù)雜度是圖像的一種客觀屬性,由其性質(zhì)可知,圖像整體復(fù)雜度大于等于各部分復(fù)雜度之和[18],故圖像灰度級(jí)數(shù)量與其出現(xiàn)頻次的變化會(huì)影響圖像復(fù)雜度大小。由傳統(tǒng)Otsu算法原理可知,當(dāng)圖像暗像素過(guò)多時(shí)會(huì)拉低分割閾值,亮像素過(guò)多時(shí)會(huì)拉高分割閾值[19]。因此,在確定分割閾值前,利用圖像復(fù)雜度的性質(zhì)確定待分割區(qū)域的大致灰度范圍,減少較低和較高灰度對(duì)分割閾值確定的影響,再基于該灰度范圍內(nèi)灰度統(tǒng)計(jì)信息計(jì)算最優(yōu)分割閾值。這樣克服了傳統(tǒng)Otsu算法需要統(tǒng)計(jì)所有灰度信息再計(jì)算分割閾值的缺點(diǎn),閾值的選取會(huì)更加快速準(zhǔn)確,且分割效果更好。

    假設(shè)待分割圖像f(x,y)總像素?cái)?shù)為N0,灰度級(jí)數(shù)為L(zhǎng),灰度值為k的像素?cái)?shù)為n(k),利用公式(11)計(jì)算全局圖像復(fù)雜度為

    (12)

    圖像最小灰度值和最大灰度值分別記做Zmin和Zmax。由于待分割圖像為第一步分割不完全區(qū)域,待分割區(qū)域灰度范圍最小值和最大值應(yīng)位于閾值Thre1兩側(cè),故令初始閾值T0為T(mén)hre1。以迭代步長(zhǎng)為1的速度同時(shí)縮減圖像灰度區(qū)間兩端灰度值,縮減后最小灰度值和最大灰度值分別為α和β。設(shè)灰度區(qū)間(α,T0)和(T0+1,β)的像素總數(shù)分別為N1和N2,則兩區(qū)間內(nèi)圖像復(fù)雜度C1和C2分別為

    (13)

    (14)

    灰度區(qū)間(α,T0)和(T0+1,β)內(nèi)像素總數(shù)占灰度區(qū)間(α,β)內(nèi)像素總數(shù)的比例分別為r1和r2:

    (15)

    (16)

    則灰度區(qū)間(α,β)的平均復(fù)雜度為

    (17)

    假設(shè)存在任意大于0的數(shù)ε,當(dāng)最小灰度值為α、最大灰度值為β時(shí)滿(mǎn)足迭代條件

    (18)

    α和β的取值范圍分別為

    Zmin≤α

    式(18)中:ΔC表示灰度縮減前后圖像復(fù)雜度的變化量;ε用于控制灰度縮減程度,ε越大,表示待分割區(qū)域灰度范圍越小。ε的數(shù)值可根據(jù)圖像感光不均勻程度確定。經(jīng)仿真驗(yàn)證,針對(duì)數(shù)字PCR熒光圖像感光不均勻區(qū)域的分割,ε取0.5C0時(shí)計(jì)算的分割閾值更準(zhǔn)確。

    通過(guò)上述算法確定最終待分割區(qū)域的灰度范圍為(α,β),統(tǒng)計(jì)該范圍灰度信息,尋找使該范圍的類(lèi)間方差最大的閾值Thre2,再利用Thre2對(duì)圖像進(jìn)行分割:

    (19)

    最后通過(guò)邏輯運(yùn)算將第一步分割結(jié)果與f*(x,y)合并,形成最終分割圖像。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

    為驗(yàn)證本文算法的有效性,對(duì)感光不均勻數(shù)字PCR熒光圖像進(jìn)行了仿真實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)平臺(tái)是Intel(R)Core(TM)i5-8265U CPU @ 1.60 GHz,編程環(huán)境為Matlab R2020a。圖1(a)是一幅數(shù)字PCR熒光圖像局部,可以看出該圖中含有感光不均勻區(qū)域。圖4(a)描述的是熒光圖像第1 360列的第1 220~1 500行灰度在對(duì)比度增強(qiáng)前后的波動(dòng)曲線(xiàn),分析可知,圖像對(duì)比度增強(qiáng)后波動(dòng)曲線(xiàn)的波峰與波谷之間灰度差值增加,達(dá)到了圖像對(duì)比度增強(qiáng)的效果。圖4(b)是預(yù)處理后的圖像,可以看出預(yù)處理不僅改善了圖像灰度分布的均勻性,而且使腔室特征更加明顯。提取第一步分割不完全區(qū)域使用局部閾值法進(jìn)行第二步分割結(jié)果如圖4(c)所示,該法雖然分割了該圖的微腔室,但耗時(shí)較長(zhǎng),魯棒性不好,算法復(fù)雜度高。

    圖4 預(yù)處理及局部閾值法分割結(jié)果

    使用本文改進(jìn)的Otsu算法進(jìn)行第二步分割,并選擇傳統(tǒng)Otsu算法、自適應(yīng)閾值法以及分塊閾值法同時(shí)進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)。圖5(a)是第一步分割不完全區(qū)域灰度圖,可以看出該圖對(duì)比度低且灰度像素分布不均勻。經(jīng)預(yù)處理后使用傳統(tǒng)Otsu算法分割結(jié)果如圖5(b)所示,由于圖像低灰度像素過(guò)多,嚴(yán)重拉低了分割閾值,導(dǎo)致待分割區(qū)域中央丟失了若干目標(biāo)。圖5(c)是自適應(yīng)閾值法分割結(jié)果,待分割區(qū)域邊緣受到低灰度像素的干擾,幾乎分割不出腔室的形狀,而在其他區(qū)域也存在嚴(yán)重的噪聲干擾,腔室之間粘連嚴(yán)重。圖5(d)是分塊閾值法分割結(jié)果,由于分塊大小固定,受灰度分布不均勻的影響,分割后的圖像不連貫。圖5(e)為本文改進(jìn)的Otsu算法分割結(jié)果,該法消除了過(guò)高與過(guò)低灰度的影響,腔室被準(zhǔn)確分割出來(lái),且邊緣也未受到低灰度像素的干擾。圖5(f)是使用改進(jìn)的Otsu算法進(jìn)行第二步分割并與第一步分割結(jié)果合并形成的最終分割圖,可見(jiàn)本文的兩步分割算法有效分割了光照不均勻熒光圖像的目標(biāo)腔室,分割后的圖像自然連貫,腔室邊緣清晰完整,反映了腔室的實(shí)際情況。

    圖5 第二步分割結(jié)果

    為進(jìn)一步驗(yàn)證本文算法的有效性,又對(duì)另外四幅感光不均勻熒光圖像進(jìn)行了分割,從圖6分割結(jié)果看出,傳統(tǒng)Otsu算法和自適應(yīng)閾值法分割結(jié)果粘粘嚴(yán)重,無(wú)法分割出目標(biāo)腔室;分塊閾值法分割后的圖像塊與塊之間連接不自然,甚至部分區(qū)域有效信息丟失;局部閾值法對(duì)原圖5的分割結(jié)果中部分腔室未能準(zhǔn)確分割;而本文算法對(duì)幾幅圖像都進(jìn)行了準(zhǔn)確分割,所分割的目標(biāo)腔室輪廓清晰,包含腔室質(zhì)心,為熒光信號(hào)提取提供了保障,從而也驗(yàn)證了本文算法的有效性。表1為Otsu算法改進(jìn)前后閾值對(duì)比,可以看出改進(jìn)后Otsu算法分割閾值高于傳統(tǒng)Otsu算法分割閾值。由于第二步分割對(duì)象主要是感光不均勻區(qū)域,其閾值會(huì)高于第一步分割閾值,符合待分割圖像實(shí)際情況。

    圖6 分割算法實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比圖

    表1 Otsu算法改進(jìn)前后閾值對(duì)比

    為測(cè)試改進(jìn)的Otsu算法分割速度,使用不同算法對(duì)五幅圖像第二步分割耗時(shí)進(jìn)行比較,各算法耗時(shí)如表2所示。由表中數(shù)據(jù)可知,本文改進(jìn)的Otsu算法分割耗時(shí)低于其他算法,與局部閾值法相比,不僅提升了分割效果,降低了算法復(fù)雜度,也提高了算法的運(yùn)行速度。

    表2 五種分割算法耗時(shí)對(duì)比

    為對(duì)各算法分割結(jié)果進(jìn)行定量評(píng)估,本文選用人工手動(dòng)分割結(jié)果作為標(biāo)準(zhǔn)二值掩碼(Ground truth,GT)進(jìn)行誤分類(lèi)誤差(Misclassification Error,ME)計(jì)算[20]。ME值可對(duì)各算法分割性能進(jìn)行客觀評(píng)價(jià),ME值越低表示算法分割性能越好,其數(shù)值定義為

    (20)

    式中:B0和F0表示標(biāo)準(zhǔn)二值掩碼中的背景和前景,BT和FT表示分割結(jié)果中的背景和前景,|·|表示取集合元素總數(shù)。表3給出了幾種算法分割結(jié)果的ME值,由表中數(shù)據(jù)分析可知,自適應(yīng)閾值法分割誤差最大,本文所提兩步分割算法分割誤差最小且分割效果更好。

    表3 五種分割算法ME值對(duì)比

    4 結(jié)束語(yǔ)

    為了解決感光不均勻數(shù)字PCR熒光圖像分割準(zhǔn)確率低的問(wèn)題,本文提出了一種兩步分割算法。第一步分割使用傳統(tǒng)Otsu算法,第二步分割使用改進(jìn)的Otsu算法。其中,在第二步分割中改進(jìn)了傳統(tǒng)Otsu算法需要統(tǒng)計(jì)所有灰度級(jí)信息再計(jì)算閾值的缺點(diǎn),通過(guò)先確定待分割區(qū)域的閾值范圍,然后基于該范圍的灰度統(tǒng)計(jì)信息計(jì)算分割閾值,提升了閾值選取的準(zhǔn)確性,且分割效果更理想,實(shí)現(xiàn)了感光不均勻數(shù)字PCR熒光圖像的分割。本文算法與局部閾值法、自適應(yīng)閾值法以及分塊閾值法的對(duì)比結(jié)果表明,本文算法魯棒性好、復(fù)雜度低,可以實(shí)現(xiàn)不同程度感光不均勻數(shù)字PCR熒光圖像的分割,分割結(jié)果準(zhǔn)確反映了腔室的實(shí)際情況。這一研究可用于芯片式數(shù)字PCR芯片閱讀儀的分析軟件中,解決目前數(shù)字PCR熒光圖像處理速度慢準(zhǔn)確率低等問(wèn)題。本文算法也可拓展應(yīng)用到其他存在感光不均勻圖像的分割中,具有一定的借鑒意義。但從整體算法流程可知,本文算法需經(jīng)兩步分割完成整幅圖像的分割,接下來(lái)將繼續(xù)對(duì)圖像進(jìn)行算法研究,進(jìn)一步簡(jiǎn)化分割算法流程。

    猜你喜歡
    腔室感光復(fù)雜度
    急冷增濕塔以及含硫廢棄物處理系統(tǒng)
    能源化工(2022年1期)2023-01-14 05:59:21
    感光食物,吃了會(huì)變黑?
    好日子(2022年6期)2022-08-17 07:17:06
    類(lèi)橢圓型采油螺桿泵舉升性能分析*
    中國(guó)感光學(xué)會(huì)2019年活動(dòng)計(jì)劃表
    一種低復(fù)雜度的慣性/GNSS矢量深組合方法
    壓電傳感器
    傳感器世界(2019年3期)2019-02-17 13:07:26
    一種光線(xiàn)方向傳感器和采用該傳感器的太陽(yáng)能發(fā)電系統(tǒng)
    求圖上廣探樹(shù)的時(shí)間復(fù)雜度
    某雷達(dá)導(dǎo)51 頭中心控制軟件圈復(fù)雜度分析與改進(jìn)
    出口技術(shù)復(fù)雜度研究回顧與評(píng)述
    色尼玛亚洲综合影院| 亚洲精品一二三| 女性生殖器流出的白浆| a在线观看视频网站| 欧美一级毛片孕妇| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 中文亚洲av片在线观看爽 | 91av网站免费观看| 中文字幕色久视频| 久久久久网色| 99re在线观看精品视频| av网站免费在线观看视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 国产一区二区三区视频了| avwww免费| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 两个人免费观看高清视频| 久久中文字幕一级| 国产单亲对白刺激| 高清欧美精品videossex| 自线自在国产av| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲av国产av综合av卡| 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲精品在线美女| 黄色视频不卡| 日本wwww免费看| 窝窝影院91人妻| 丰满饥渴人妻一区二区三| 人妻 亚洲 视频| 最近最新中文字幕大全免费视频| 人妻久久中文字幕网| 一区二区三区乱码不卡18| 成人国产一区最新在线观看| 国产欧美亚洲国产| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久国产精品人妻蜜桃| 美女视频免费永久观看网站| 久久精品人人爽人人爽视色| 夜夜夜夜夜久久久久| 色综合婷婷激情| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 亚洲熟妇熟女久久| 老司机午夜十八禁免费视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 丝袜人妻中文字幕| 精品一区二区三区av网在线观看 | 满18在线观看网站| 久久久国产一区二区| 老司机深夜福利视频在线观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 窝窝影院91人妻| 国产高清视频在线播放一区| 国产精品一区二区在线观看99| 人人妻人人澡人人看| 在线观看免费高清a一片| 久久久久久久大尺度免费视频| 精品少妇黑人巨大在线播放| bbb黄色大片| 大片免费播放器 马上看| 99久久人妻综合| 露出奶头的视频| 久久这里只有精品19| 9191精品国产免费久久| 国产又爽黄色视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲男人天堂网一区| 国产色视频综合| 精品第一国产精品| 国产亚洲一区二区精品| av有码第一页| 少妇的丰满在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 波多野结衣一区麻豆| 精品一区二区三卡| 免费少妇av软件| 考比视频在线观看| 国产伦人伦偷精品视频| 成人国产av品久久久| 一区二区三区激情视频| 啦啦啦免费观看视频1| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产麻豆69| 91大片在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 欧美性长视频在线观看| 日韩免费av在线播放| kizo精华| 最近最新中文字幕大全免费视频| 一区在线观看完整版| 国产激情久久老熟女| 丝袜美足系列| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 母亲3免费完整高清在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区 | 精品国产乱码久久久久久男人| 免费黄频网站在线观看国产| 免费在线观看日本一区| 国产成人精品久久二区二区免费| 757午夜福利合集在线观看| videos熟女内射| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 天天操日日干夜夜撸| 夜夜爽天天搞| av福利片在线| 99香蕉大伊视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲精品自拍成人| 一级,二级,三级黄色视频| 在线av久久热| 亚洲av成人一区二区三| 黄色 视频免费看| 午夜福利,免费看| 亚洲精品自拍成人| 老司机午夜福利在线观看视频 | 精品一区二区三区av网在线观看 | 丁香欧美五月| 99在线人妻在线中文字幕 | 国产免费福利视频在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 久久久久国产一级毛片高清牌| 亚洲情色 制服丝袜| 我要看黄色一级片免费的| 国产日韩欧美视频二区| 999久久久国产精品视频| 午夜福利乱码中文字幕| 国产精品二区激情视频| 一夜夜www| 欧美日韩视频精品一区| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | www.999成人在线观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 啪啪无遮挡十八禁网站| 香蕉国产在线看| 在线av久久热| 国产片内射在线| 黄色怎么调成土黄色| 大片免费播放器 马上看| 一本久久精品| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 男人舔女人的私密视频| 999精品在线视频| 91成人精品电影| 波多野结衣av一区二区av| 国产又色又爽无遮挡免费看| 国产91精品成人一区二区三区 | 国产成人欧美在线观看 | 最黄视频免费看| 久久久久国内视频| 一区二区三区精品91| 成人黄色视频免费在线看| 69精品国产乱码久久久| 香蕉国产在线看| 精品国产乱码久久久久久小说| 日本vs欧美在线观看视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 精品国产亚洲在线| 亚洲中文字幕日韩| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 黄色视频在线播放观看不卡| 午夜激情av网站| 亚洲欧美激情在线| 999久久久国产精品视频| 一个人免费看片子| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 免费黄频网站在线观看国产| 免费看a级黄色片| 啦啦啦免费观看视频1| 国产在线视频一区二区| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 午夜福利免费观看在线| 午夜福利在线免费观看网站| 久久精品人人爽人人爽视色| 性高湖久久久久久久久免费观看| 欧美日本中文国产一区发布| 99re6热这里在线精品视频| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲久久久国产精品| 韩国精品一区二区三区| 亚洲国产看品久久| h视频一区二区三区| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲精品美女久久av网站| av有码第一页| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 母亲3免费完整高清在线观看| 欧美日韩成人在线一区二区| 视频区欧美日本亚洲| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲人成77777在线视频| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 成人国产av品久久久| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产av国产精品国产| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 丰满少妇做爰视频| 手机成人av网站| 亚洲精品成人av观看孕妇| 午夜激情av网站| 亚洲一区中文字幕在线| 成人特级黄色片久久久久久久 | 捣出白浆h1v1| 免费在线观看完整版高清| 日韩欧美三级三区| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 国产成人精品久久二区二区91| 男女之事视频高清在线观看| av网站免费在线观看视频| 人人妻人人澡人人看| 久久久久精品国产欧美久久久| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 一级毛片女人18水好多| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 大型黄色视频在线免费观看| 国产高清激情床上av| 他把我摸到了高潮在线观看 | 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 纯流量卡能插随身wifi吗| 色在线成人网| 一进一出好大好爽视频| 国产免费现黄频在线看| 精品免费久久久久久久清纯 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产精品偷伦视频观看了| 99久久国产精品久久久| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 午夜日韩欧美国产| 亚洲一区中文字幕在线| 国产高清视频在线播放一区| 精品国产一区二区三区四区第35| 黄片小视频在线播放| 99国产综合亚洲精品| 亚洲五月婷婷丁香| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 我的亚洲天堂| 美女国产高潮福利片在线看| 动漫黄色视频在线观看| 国产成人系列免费观看| 免费在线观看完整版高清| 日韩欧美免费精品| 后天国语完整版免费观看| aaaaa片日本免费| 国产精品 欧美亚洲| 看免费av毛片| 在线观看66精品国产| 成人国产一区最新在线观看| 男女无遮挡免费网站观看| 日韩三级视频一区二区三区| 高清黄色对白视频在线免费看| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 在线观看免费高清a一片| 亚洲欧美激情在线| 日本欧美视频一区| 国产av精品麻豆| 中文字幕人妻熟女乱码| 在线播放国产精品三级| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲专区中文字幕在线| 蜜桃在线观看..| 久久免费观看电影| 一级片'在线观看视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 男人舔女人的私密视频| 亚洲男人天堂网一区| 麻豆av在线久日| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 久久国产亚洲av麻豆专区| 天堂俺去俺来也www色官网| 精品人妻在线不人妻| 国产免费福利视频在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 精品福利永久在线观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 丝袜美足系列| 九色亚洲精品在线播放| av天堂在线播放| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美在线一区亚洲| 黄色片一级片一级黄色片| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 国产精品久久久久成人av| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲久久久国产精品| a级毛片在线看网站| 黑人猛操日本美女一级片| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 亚洲七黄色美女视频| 女人精品久久久久毛片| 在线观看免费高清a一片| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 天天影视国产精品| 欧美激情高清一区二区三区| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲精品av麻豆狂野| 999久久久精品免费观看国产| 国产淫语在线视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产精品欧美亚洲77777| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | av线在线观看网站| 国产成人精品在线电影| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 在线观看舔阴道视频| 悠悠久久av| 18禁国产床啪视频网站| 欧美精品一区二区大全| 性少妇av在线| 国产成人免费无遮挡视频| 动漫黄色视频在线观看| 久久毛片免费看一区二区三区| 最近最新中文字幕大全免费视频| e午夜精品久久久久久久| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲精品国产区一区二| 久久毛片免费看一区二区三区| 在线看a的网站| 亚洲伊人久久精品综合| av国产精品久久久久影院| 婷婷成人精品国产| 亚洲精品美女久久av网站| 久久亚洲真实| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 五月天丁香电影| 一个人免费看片子| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 亚洲av国产av综合av卡| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| av视频免费观看在线观看| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 中文亚洲av片在线观看爽 | 999久久久国产精品视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久99一区二区三区| 操美女的视频在线观看| 亚洲国产欧美网| 99久久人妻综合| 男女床上黄色一级片免费看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 欧美精品亚洲一区二区| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产精品久久久av美女十八| 黄色怎么调成土黄色| 91麻豆av在线| 国产成+人综合+亚洲专区| 老熟女久久久| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 精品第一国产精品| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲第一av免费看| 精品福利永久在线观看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产精品1区2区在线观看. | 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 老司机亚洲免费影院| 精品亚洲成a人片在线观看| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久99热这里只频精品6学生| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 在线观看免费视频网站a站| 99国产综合亚洲精品| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲欧美一区二区三区久久| 韩国精品一区二区三区| 91av网站免费观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 一区二区日韩欧美中文字幕| 性色av乱码一区二区三区2| 91麻豆av在线| 麻豆乱淫一区二区| 90打野战视频偷拍视频| 午夜久久久在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲精品自拍成人| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 天堂俺去俺来也www色官网| 久久毛片免费看一区二区三区| 嫁个100分男人电影在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久久精品区二区三区| 最新在线观看一区二区三区| 在线观看免费高清a一片| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 欧美av亚洲av综合av国产av| 电影成人av| 黑人欧美特级aaaaaa片| 好男人电影高清在线观看| 国产伦人伦偷精品视频| 免费av中文字幕在线| 黄色 视频免费看| 亚洲性夜色夜夜综合| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产精品九九99| 日韩大片免费观看网站| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲男人天堂网一区| 日本vs欧美在线观看视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 深夜精品福利| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 黄色视频在线播放观看不卡| kizo精华| bbb黄色大片| 老司机在亚洲福利影院| 国产欧美亚洲国产| 国产97色在线日韩免费| 久久国产精品影院| 国产在线免费精品| 午夜激情久久久久久久| 动漫黄色视频在线观看| 国产av精品麻豆| 国产高清videossex| 日本五十路高清| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 一区二区三区国产精品乱码| 男女无遮挡免费网站观看| 久久久国产成人免费| 亚洲专区字幕在线| 国产精品免费一区二区三区在线 | 亚洲男人天堂网一区| 两人在一起打扑克的视频| 少妇 在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美黄色淫秽网站| 天堂俺去俺来也www色官网| 国产日韩欧美在线精品| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 18禁观看日本| 欧美在线一区亚洲| 亚洲色图综合在线观看| 啦啦啦免费观看视频1| 69精品国产乱码久久久| 免费日韩欧美在线观看| 91成年电影在线观看| 色尼玛亚洲综合影院| 午夜免费成人在线视频| 十八禁人妻一区二区| 日韩免费高清中文字幕av| 男女床上黄色一级片免费看| 国产区一区二久久| 999久久久精品免费观看国产| 狠狠狠狠99中文字幕| 窝窝影院91人妻| 一进一出好大好爽视频| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲精品国产区一区二| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 丝袜美足系列| 亚洲第一青青草原| 老司机午夜福利在线观看视频 | 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 精品久久久久久电影网| 久久久精品区二区三区| 免费观看av网站的网址| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 一级黄色大片毛片| 一夜夜www| 热re99久久国产66热| 国产免费av片在线观看野外av| 国产区一区二久久| 亚洲精品在线美女| 天天操日日干夜夜撸| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 99re6热这里在线精品视频| √禁漫天堂资源中文www| 涩涩av久久男人的天堂| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 精品少妇久久久久久888优播| 精品人妻在线不人妻| 性少妇av在线| 黄色 视频免费看| 一级,二级,三级黄色视频| 一本大道久久a久久精品| 十八禁网站网址无遮挡| 亚洲综合色网址| 中文字幕制服av| 黄片大片在线免费观看| a级毛片黄视频| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲欧美色中文字幕在线| 欧美黄色淫秽网站| 男人舔女人的私密视频| 欧美乱妇无乱码| 岛国在线观看网站| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产av国产精品国产| 宅男免费午夜| 国产男女内射视频| 午夜福利乱码中文字幕| av又黄又爽大尺度在线免费看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 嫁个100分男人电影在线观看| 老司机亚洲免费影院| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久天堂一区二区三区四区| 国产精品欧美亚洲77777| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 久久精品国产亚洲av高清一级| 久久精品国产综合久久久| 国产欧美日韩精品亚洲av| 久久热在线av| 他把我摸到了高潮在线观看 | 一个人免费看片子| 人人妻人人澡人人看| 成人av一区二区三区在线看| a级毛片在线看网站| 色老头精品视频在线观看| 免费观看人在逋| 大片免费播放器 马上看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 一进一出好大好爽视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 人妻一区二区av| 中文字幕最新亚洲高清| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲国产中文字幕在线视频| 亚洲第一av免费看| 国产成人欧美在线观看 | 丝瓜视频免费看黄片| 操出白浆在线播放| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 成人黄色视频免费在线看| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 俄罗斯特黄特色一大片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲精品粉嫩美女一区| 天堂8中文在线网| 天堂动漫精品| 欧美久久黑人一区二区| 黄片小视频在线播放| 9色porny在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产一区二区 视频在线| 考比视频在线观看| 国产人伦9x9x在线观看| 久久久欧美国产精品| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 欧美变态另类bdsm刘玥| 在线播放国产精品三级| 另类亚洲欧美激情| 午夜久久久在线观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 黄色丝袜av网址大全| 国产精品免费一区二区三区在线 | 国产不卡av网站在线观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产成人欧美| 操出白浆在线播放| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 久久这里只有精品19| 日本五十路高清| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲欧美色中文字幕在线| 91麻豆av在线| 在线观看免费视频网站a站| 色尼玛亚洲综合影院| 久久久欧美国产精品| 最近最新中文字幕大全电影3 | 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 一级片'在线观看视频| 国产av一区二区精品久久| 欧美精品av麻豆av| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 黄色怎么调成土黄色| 欧美激情极品国产一区二区三区| 精品高清国产在线一区| 俄罗斯特黄特色一大片| 757午夜福利合集在线观看| 最近最新免费中文字幕在线| 婷婷成人精品国产| aaaaa片日本免费| 一个人免费看片子| 国产男女内射视频|