代謝相關(guān)脂肪性肝病患者血清高遷移率族蛋白A1的表達(dá)及意義

程銀飛, 黃 偉, 陸翠華

(1. 江蘇省如東縣人民醫(yī)院 消化內(nèi)科, 江蘇 南通, 226000; 2. 南通大學(xué)附屬醫(yī)院 消化內(nèi)科, 江蘇 南通, 226000)

代謝相關(guān)脂肪性肝病(MAFLD)是指基于肝活檢組織學(xué)或影像學(xué)、血液生物標(biāo)志物檢查提示存在脂肪肝，且合并超重/肥胖或2型糖尿病或代謝功能障礙的全身代謝性疾病[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，中國MAFLD的患病率為29.2%[2], 全球患者數(shù)量高達(dá)10億[3], 并且尚無理想的治療藥物。研發(fā)[4]發(fā)現(xiàn)糖尿病小鼠模型的高遷移率族蛋白A1(HMGA1)顯著上調(diào)和積聚。鑒于糖尿病有很高的肝病進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)，本研究推測(cè)HMGA1與MAFLD存在一定的關(guān)聯(lián)性。本研究探討MAFLD患者血清HMGA1的表達(dá)及臨床意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取如東縣人民醫(yī)院2020年5月—2021年1月診斷為MAFLD的34例患者為MAFLD組，另選取同期36例健康體檢者為對(duì)照組。MAFLD組男19例，女15例; 年齡23～75歲，平均(57.91±12.36)歲。對(duì)照組男20例，女16例; 年齡40～76歲，平均(60.28±9.99)歲。2組患者性別、年齡等基礎(chǔ)資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

MAFLD診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]: 基于常規(guī)檢測(cè)手段(包括活檢、影像學(xué)及生化指標(biāo))提示存在脂肪肝，且合并2型糖尿病或超重/肥胖或代謝功能障礙。代謝功能障礙需滿足至少以下2項(xiàng): 腹型肥胖、高血壓、甘油三酯(TG)水平升高、高密度脂蛋白(HDL)水平下降、血糖升高但無糖尿病、胰島素抵抗指數(shù)升高、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)升高。

納入標(biāo)準(zhǔn): ① MAFLD患者及同期體檢健康人群; ② 患者及家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 孕婦或哺乳期婦女; ② 合并其他肝病(如病毒性肝炎、自身免疫性肝病、酒精性肝病、肝豆?fàn)詈俗冃砸约案闻K惡性腫瘤、感染和膽道疾病)者; ③ 嚴(yán)重的全身系統(tǒng)疾病者; ④ 需要放化療或者最近服用過免疫抑制劑者; ⑤ 外科手術(shù)、應(yīng)激反應(yīng)、感染、腫瘤等引發(fā)急性炎癥反應(yīng)或慢性炎癥等影響體內(nèi)白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平的疾病者。

1.2 人體測(cè)量學(xué)指標(biāo)[5]

采用標(biāo)準(zhǔn)身高測(cè)定尺和RGZ120型體質(zhì)量計(jì)，由專人測(cè)定身高、體質(zhì)量，身高測(cè)量精確至0.01 m, 體質(zhì)量測(cè)量精確至1 kg, 計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)(BMI)。

1.3 生物化學(xué)指標(biāo)

抽取所有患者清晨空腹靜脈血5 mL, 將全血標(biāo)本室溫放置2 h, 經(jīng)1 000×g離心20 min, 取上清置于-80 ℃保存。采用己糖激酶法測(cè)定血清血糖(GLU)水平; 利用高效液相色譜法測(cè)定血清糖化血紅蛋白(GHb)水平; 利用酶法測(cè)定血清TG、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平; 利用IFCC速率法測(cè)定血清谷氨酸-丙酮酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)水平[6-7]; 采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA), 采用日立7600自動(dòng)生化分析儀在450 nm波長下測(cè)定IL-6和HMGA1吸光度，計(jì)算樣品濃度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 2組血清HMGA1含量比較

MAFLD組HMGA1含量為(11.97±0.45) ng/mL, 高于對(duì)照組的(8.34±0.40) ng/mL, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

2.2 Pearson相關(guān)性分析

HMGA1與BMI、IL-6、GLU、GHb、TG、ALT均呈線性正相關(guān)(P<0.05或P<0.01), 與LDL-C、AST、ALP、GGT無相關(guān)性(P>0.05)。見圖1。

圖1 HMGA1與各指標(biāo)的相關(guān)性

2.3 多元線性相關(guān)性分析

經(jīng)多元線性回歸分析發(fā)現(xiàn), HMGA1與IL-6存在顯著相關(guān)性(P<0.05)。見表1。

表1 多元線性相關(guān)性分析

3 討 論

2020年4月，國際專家組[8]對(duì)MAFLD的診斷達(dá)成共識(shí)，即基于肝活檢組織學(xué)或影像學(xué)、血液生物標(biāo)志物檢查提示存在脂肪肝，且合并超重/肥胖或2型糖尿病或代謝功能障礙[1]。高遷移率族蛋白(HMG)在多種惡性腫瘤中高表達(dá)[9-11]。研究[12]發(fā)現(xiàn), HMGB1可介導(dǎo)多種炎癥信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，與肝臟炎癥的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，提示HMGB1在MAFLD的發(fā)生、發(fā)展中起到非常重要的作用。ZHANG Q H等[4]研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病模型小鼠HMGA1顯著上調(diào)和積聚，體外實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)高糖可增加HMGA1的表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)MAFLD患者的血清HMGA1含量顯著高于對(duì)照組，初步證實(shí)血清HMGA1水平與MAFLD的發(fā)生密切相關(guān)。

本研究經(jīng)線性相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，HMGA1與BMI、IL-6、GLU、GHb、TG、ALT均呈線性正相關(guān)。既往關(guān)于BMI動(dòng)態(tài)變化與MAFLD相關(guān)性的隊(duì)列研究[13-14]顯示, BMI長期處于高水平是MAFLD發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。隨著超重/肥胖成為MAFLD的重要確診條件之一, HMGA1與BMI的正相關(guān)性提示HMGA1有可能在MAFLD發(fā)生及病情發(fā)展過程中起到重要作用。IL-6作為炎癥指標(biāo)之一，被認(rèn)為是肝細(xì)胞刺激因子，但是IL-6信號(hào)通路持續(xù)處于激活狀態(tài)不利于肝臟，并可最終引發(fā)肝臟腫瘤[15]。本研究發(fā)現(xiàn)血清HMGA1與IL-6的表達(dá)水平呈正相關(guān)，提示HMGA1與IL-6對(duì)MAFLD的反應(yīng)高度一致。此外, HMGA1與GLU、GHb呈正相關(guān)，亦進(jìn)一步佐證了血清中IL-6與GLU、GHb呈正相關(guān)，與既往關(guān)于IL-6通過NF-κB、AMPK等信號(hào)路徑誘導(dǎo)MAFLD患者產(chǎn)生胰島素抵抗(IR)的研究結(jié)論相一致[16]。值得注意的是，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[17-18]表明敲除C1q/腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白12(CTRP12)的雄性小鼠經(jīng)高脂喂食后，體內(nèi)循環(huán)TG和游離脂肪酸含量明顯降低，導(dǎo)致能量消耗減少、體質(zhì)量增多。CTRP12還可激活PI3K-Akt信號(hào)路徑，以促進(jìn)肝細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取，改善IR。

既往研究[19]在蛋白水平揭示IL-6的異常與MAFLD的進(jìn)展有關(guān)，體現(xiàn)為IL-6在MAFLD患者血清中高表達(dá)。有研究[20]在基因多態(tài)性層面論證IL-6與MAFLD的相關(guān)性，認(rèn)為IL-6基因多態(tài)性與人群中MAFLD的存在有關(guān)。經(jīng)多元線性回歸分析發(fā)現(xiàn), HMGA1與IL-6存在顯著線性正相關(guān)，提示HMGA1在MAFLD致病機(jī)制中發(fā)揮了重要作用，或可作為MAFLD病情嚴(yán)重程度的標(biāo)志物。

本研究揭示HMGA1與MAFLD的關(guān)系更側(cè)重于代謝功能異常方面，并未對(duì)MAFLD病理進(jìn)行分型，為了進(jìn)一步探討HMGA1與MAFLD不同分型的關(guān)系，后續(xù)將開展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，為HMGA1與MAFLD關(guān)系提供更為直接的證據(jù)。此外，鑒于本研究的樣本量較少，后續(xù)將開展大數(shù)量樣本研究進(jìn)一步驗(yàn)證上述結(jié)論。