瀉白散大鼠體內(nèi)入血成分研究

徐東川 劉瑾 李曉晶 楊青 楊宗統(tǒng) 張會(huì)敏 蘇本正 隋在云

摘 要 目的 研究瀉白散的體內(nèi)入血成分。方法 采用超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行分析。將SD大鼠隨機(jī)分為空白組和給藥組，每組10只?？瞻捉M大鼠灌胃水，給藥組大鼠灌胃2 g/mL（以生藥量計(jì)）瀉白散溶液，給藥體積均為11.3 mL/kg，每日2次，連續(xù)3 d。末次給藥1.5 h后，各組大鼠腹主動(dòng)脈取血，將血清處理后取上清液進(jìn)樣分析;采集正、負(fù)離子模式下的相關(guān)數(shù)據(jù)，利用自建二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)并查閱相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)瀉白散入血成分進(jìn)行分析鑒定。結(jié)果 共鑒定出17種瀉白散入血成分，其中6種來(lái)源于君藥桑白皮，7種來(lái)源于臣藥地骨皮，12種來(lái)源于佐使藥甘草，分別為地骨皮甲素、綠原酸、tachiogroside B、astringin、新甘草苷、甘草素、壬二酸、異甘草苷、glycyroside、芒柄花苷、癸二酸、parthenolide、刺芒柄花素、18β-甘草次酸、6-姜酚、棕櫚酰胺、芥酸酰胺，這些化合物主要是黃酮類、生物堿類和有機(jī)酸類成分。結(jié)論 本研究初步確定了瀉白散的17種入血成分，這些成分與瀉白散的作用相一致，可能是瀉白散的藥效物質(zhì)。

關(guān)鍵詞 瀉白散;超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜;入血成分;大鼠

中圖分類號(hào) R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2022）01-0038-08

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2022.01.07

ABSTRACT? ?OBJECTIVE To study the absorbed components of Xiebai powder in blood. METHODS UPLC-Q-TOF-MS/MS method was adopted. SD rats were randomly divided into blank group and administration group， with 10 rats in each group. Blank group was given water intragastrically， and administration groups were given 2 g/mL （by the amount of crude drug） Xiebai powder solution intragastrically. Administration volume was 11.3 mL/kg， twice a day for 3 days. One point five hours after last administration， blood was taken from the abdominal aorta of each rat， the serum was processed to obtain the supernatant for analysis; the relevant data in positive and negative ion mode were collected， and the absorbed components of Xiebai powder in blood were analyzed and identified by using self-built secondary mass spectrometry database and consulting the relevant literature. RESULTS Totally 17 components from Xiebai powder were identified， among which 6 components came from sovereign Moru salba， 7 from minister Cortex Lycii， 12 from assistant Glycyrrhiza uralensis， i.e. kukoamine A， chlorogenic acid， tachiogroside B， astringin， neoglycyrrhizin， glycyrrhizin， azelaic acid， isoglycyrrhizin， glycyroside， anthocyanin， sebacic acid， parthenolide， anthocyanin， 18β-glycyrrhetinic acid， 6-gingerol， palmitoamide， erucamide. These compounds were mainly flavonoids， alkaloids and organic acids.? CONCLUSIONS In this study， 17 absorbed components of Xiebai powder in blood are preliminarily determined， which are consistent with the effect of Xiebai powder. They may be the pharmacodynamic substances of Xiebai powder.

KEYWORDS? ?Xiebai powder; UPLC-Q-TOF-MS/MS; absorbed component; rat

瀉白散又名瀉肺散，出自北宋錢乙《小兒藥證直訣》，現(xiàn)為國(guó)家中醫(yī)藥管理局2018年公布的《古代經(jīng)典名方目錄（第一批）》中的經(jīng)典名方之一，具有清瀉肺熱、止咳平喘的功效，主治肺熱咳喘癥[1]。瀉白散主要由桑白皮、地骨皮和甘草3味藥材組成，方中桑白皮專入肺經(jīng)，且甘寒入肺、清瀉肺熱，雖瀉肺但不傷肺，為君藥;地骨皮甘淡性寒，清透肺中郁火，涼血退蒸，且有養(yǎng)陰之功，為臣藥;甘草養(yǎng)胃和中，培土生金以扶肺氣，并能調(diào)和諸藥，為佐使藥[2-3]。瀉白散中的成分眾多，主要為黃酮類和香豆素類化合物[2]，在治療肺部炎癥等方面具有顯著的效果，但其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚不明確，從而在一定程度上影響了瀉白散的開(kāi)發(fā)與使用。

相關(guān)研究顯示，藥物進(jìn)入血液后才有可能發(fā)揮療效[4-5]，因此，有必要分析藥物的入血成分，以便找到藥物發(fā)揮作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。近年來(lái)，血清藥物化學(xué)研究方法被廣泛地應(yīng)用到中藥化學(xué)成分鑒定、指紋圖譜、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)等研究中，具有較好的應(yīng)用前景[6-7]。基于此，本研究利用超高效液相色譜-四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技術(shù)分析大鼠體內(nèi)的瀉白散入血成分，以期為闡明瀉白散藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器有Nexera UHPLC LC-30A型超高效液相色譜儀（日本Shimadzu公司）、Triple TOF 5600型高分辨質(zhì)譜儀（美國(guó)AB Sciex公司）、Heraeus Fresco17型離心機(jī)（美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司）、BSA124S-CW型萬(wàn)分之一電子天平（德國(guó)Sartorius公司）、JXFSTPRP-24型研磨儀（上海凈信科技有限公司）、D24 UV型純水儀（美國(guó)Merck公司）、YM-080S型超聲儀（深圳市方奧微電子有限公司）。

1.2 主要藥品與試劑

炒桑白皮（批號(hào)190901）購(gòu)自亳州京皖飲片有限公司，地骨皮（批號(hào)191101）購(gòu)自浙江中醫(yī)藥大學(xué)飲片廠，炒甘草（批號(hào)190704）購(gòu)自四川中藥飲片廠，上述藥材經(jīng)山東省中醫(yī)藥研究院中藥資源室林慧彬研究員鑒定為真品。6-姜酚、地骨皮甲素的對(duì)照品（批號(hào)分別為P19O9F72930、W01N9Z73848，純度均大于98%）均購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司;甘草素、18β-甘草次酸的對(duì)照品（批號(hào)分別為PRF20111303、PRF21013044，純度均大于98%）均購(gòu)自成都普瑞法科技開(kāi)發(fā)有限公司;綠原酸、芒柄花苷、刺芒柄花素的對(duì)照品（批號(hào)分別為PS000627、PS000671、PS000674，純度均大于98%）均購(gòu)自成都普思生物科技股份有限公司;其余試劑為實(shí)驗(yàn)室常用規(guī)格，水為純凈水。

1.3 動(dòng)物

本研究所用動(dòng)物為SPF級(jí)SD大鼠，雄性，體質(zhì)量160～200 g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK（京）2016-0006。大鼠飼養(yǎng)于室溫25 ℃、相對(duì)濕度50%～60%、每12 h明暗交替的環(huán)境中，均自由攝食、飲水。本研究的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)程序均經(jīng)山東省中醫(yī)藥研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利與倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號(hào)為SDZYY20181201005），且實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有操作均符合“3R”原則。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜與質(zhì)譜條件

2.1.1 色譜條件 色譜柱為UPLC BEH C18（1.7 μm×2.1μm，100 mm），流動(dòng)相為0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈溶液（B）（梯度洗脫：0～3.5 min，5%B→15%B;3.5～6 min，15%B →30%B;6～6.5 min，30%B;6.5～12 min，30%B→70%B;12～12.5 min，70%B;12.5～18 min，70%B→100%B;18～25 min，100%B;25～26 min，100%B→5%B;26～30 min，5%B），進(jìn)樣量為5 μL，流速為400 μL/min，柱溫為40 ℃。

2.1.2 質(zhì)譜條件 離子源為電噴霧電離源，霧化氣壓為55 Psi，輔助氣壓為55 Psi，氣簾氣壓為35 Psi，溫度為550 ℃，噴霧電壓為5 500 V（正離子模式）或-4 000 V（負(fù)離子模式），轟擊能量為40 eV，碰撞能差為20 V;掃描范圍質(zhì)荷比（m/z）為100～1 500。

2.2 溶液的制備

2.2.1 瀉白散溶液的制備 稱取炒桑白皮30 g、地骨皮30 g、炒甘草3 g，加入10倍量（mL/g，下同）水，浸泡1 h;加熱回流提取1 h，濾過(guò)，再加8倍量水加熱回流提取1 h，濾過(guò);合并2次濾液，濃縮成質(zhì)量濃度為2 g/mL（以生藥量計(jì)）的瀉白散溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 稱取1 g瀉白散樣品粉末[取炒桑白皮、地骨皮、炒甘草按10 ∶ 10 ∶ 1（m/m/m）混合，然后打粉即得]，加水至30 mL，回流提取1 h，放冷;補(bǔ)足減失質(zhì)量后，以3 000 r/min離心5 min，過(guò)濾;取續(xù)濾液10 mL，加入甲醇（1 ∶ 1，V/V）混勻，靜置過(guò)夜，以去除雜質(zhì);取上清液以0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，即得供試品溶液。

2.2.3 供試品溶液的處理 參考文獻(xiàn)[8]方法進(jìn)行處理。取“2.2.2”項(xiàng)下供試品溶液適量，以12 000 r/min離心15 min;取上清液300 μL，加入80%甲醇溶液1 000? ? μL，渦旋30 s，再于冰水浴條件下超聲（頻率40 kHz，功率480 W）5 min;置于-20 ℃條件下靜置1 h（以沉淀供試品溶液中的蛋白），以12 000 r/min離心15 min，取上清液，以0.2 μm微孔濾膜濾過(guò)，然后取適量進(jìn)樣分析。

2.3 血清樣品的采集及處理

2.3.1 空白血清、含藥血清的采集 將SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為空白組和給藥組，每組10只。空白組大鼠灌胃水，給藥組大鼠灌胃“2.2.1”項(xiàng)下制備的瀉白散溶液，給藥體積均為11.3 mL/kg，每日2次，連續(xù)? 3 d[9]。第3天灌胃前，大鼠禁食不禁水12 h，于末次給藥1.5 h后，腹腔注射1%戊巴比妥鈉進(jìn)行麻醉，然后腹主動(dòng)脈取血;血樣于4 ℃條件下以3 000 r/min離心10 min，收集上層血清，并置于液氮中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.3.2 空白血清、含藥血清的處理 參考文獻(xiàn)[10]方法，將血清樣品于冰上解凍后渦旋30 s，取400 μL加入2 mol/L鹽酸溶液40 μL（以沉淀蛋白），渦旋1 min后，靜置15 min，再重復(fù)渦旋、靜置步驟4次;加入乙腈1 600 μL，渦旋5 min，以12 000 r/min離心5 min;定量吸取上清液1 800 μL置于5 mL離心管中，以氮?dú)獯蹈?殘?jiān)尤?0%甲醇溶液200 μL，渦旋5 min，以12 000 r/min離心15 min，取上清液進(jìn)樣分析。

2.4 瀉白散 UPLC-Q-TOF-MS/MS總離子流圖的采集

取“2.2.3”“2.3.2”項(xiàng)下經(jīng)處理后的供試品溶液、空白血清樣品、含藥血清樣品適量，按“2.1”項(xiàng)下色譜與質(zhì)譜條件進(jìn)樣分析，采集正、負(fù)離子模式下的總離子流圖。結(jié)果顯示，在正、負(fù)離子模式下，3種樣品中各代謝物的色譜峰分離良好;空白血清樣品和含藥血清樣品中的代謝物種類和含量有所不同（見(jiàn)圖1、圖2），表明這兩種樣品間的血清代謝物存在差異?；诖?，筆者繼續(xù)采用多元統(tǒng)計(jì)分析法，進(jìn)一步分析空白血清樣品和含藥血清樣品間的血清代謝物差異。

2.5 血清樣品的多元統(tǒng)計(jì)分析

將“2.4”項(xiàng)下空白血清樣品和含藥血清樣品的質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入SIMCA 16.0.2軟件中，對(duì)其進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換和UV格式化處理并建模，采用正交偏最小二乘法-判別分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）法對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析[11-13]，得到正、負(fù)離子模式下2種血清樣品的代謝輪廓主成分分析圖和代謝譜OPLS-DA得分圖（圖3、圖4）。由圖3、圖4可知，空白血清樣品和含藥血清樣品的得分點(diǎn)分布在不同區(qū)域，表明這2種樣本間存在顯著差異。

2.6 瀉白散體內(nèi)入血成分分析與鑒定

將“2.4”項(xiàng)下空白血清樣品和含藥血清樣品的質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入Progenesis QI軟件中，然后進(jìn)行保留時(shí)間矯正、峰識(shí)別、峰提取、峰積分、峰對(duì)齊等操作，同時(shí)建立瀉白散處方中各藥材的代謝庫(kù)。利用自建的二級(jí)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)并查閱相關(guān)文獻(xiàn)[14-17]，對(duì)瀉白散體內(nèi)入血成分進(jìn)行鑒定，具體過(guò)程如下所示：

1號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 530.310 1

[M+H]+，保留時(shí)間（tR）為2.47 min，分子式為C28H42N4O6;碎片離子為m/z 165（由母離子脫去C19H34N4O3所得）、? ?m/z 367（由母離子脫去C9H8O3所得），結(jié)果見(jiàn)圖5。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[18-20]，筆者推測(cè)1號(hào)峰為地骨皮甲素。

2號(hào)峰為負(fù)離子模式下分子離子峰m/z 353.087 2

[M-H]-，tR為5.31 min，分子式為C16H17O9，碎片離子為m/z 191（由母離子脫去C9H6O3所得）、m/z 179（由母離子脫去C7H11O6所得），后者再相繼脫去H2O、CO得到碎片離子m/z 161、m/z 135，結(jié)果見(jiàn)圖6。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[5]，筆者推測(cè)2號(hào)峰為綠原酸。

3號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 432.126 7

[M+H]+，tR為3.53 min，分子式為C18H24O12，碎片離子為m/z 125（由母離子脫去C12H9O9所得）、m/z 161（由母離子脫去C12H15O7所得），后者再脫去C2H4O2得到碎片離子m/z 101，結(jié)果見(jiàn)圖7。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[21]，筆者推測(cè)3號(hào)峰為tachiogroside B。

4號(hào)峰為負(fù)離子模式下分子離子峰m/z 406.125 4

[M-H]-，tR為3.84 min，分子式為C20H22O9，碎片離子為m/z 243（由母離子脫去C6H11O5所得）、m/z 159（由母離子脫去C14H12O4所得），結(jié)果見(jiàn)圖8。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律，筆者推測(cè)4號(hào)峰為astringin。

5號(hào)峰為負(fù)離子模式下分子離子峰m/z 417.118 6

[M-H]-，tR為5.30 min，分子式為C21H22O9，碎片離子為m/z 179（由母離子脫去C15H11O3所得）、m/z 255（由母離子脫去C6H10O5所得），后者再脫去C7H4O2得到碎片離子m/z 135，結(jié)果見(jiàn)圖9。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[22]，筆者推測(cè)5號(hào)峰為新甘草苷。

6號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 257.080 9

[M+H]+，tR為5.31 min，分子式為C15H12O4，碎片離子為m/z 137、m/z 147（推測(cè)可能是母離子發(fā)生異構(gòu)變成異甘草素，然后再分別脫去C9H7O2或C7H5O3所得），結(jié)果見(jiàn)圖10。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[23]，筆者推測(cè)6號(hào)峰為甘草素。

7號(hào)峰為負(fù)離子模式下分子離子峰m/z 187.097 5

[M-H]-，tR為6.25 min，分子式為C9H16O4，碎片離子為m/z 169、m/z 57（由母離子分別脫去H2O或C7H12O2所得），結(jié)果見(jiàn)圖11。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[24]，筆者推測(cè)7號(hào)峰為壬二酸。

8號(hào)峰為負(fù)離子模式下分子離子峰m/z 417.118 4

[M-H]-，tR為6.64 min，分子式為C21H22O9，碎片離子為m/z 255、m/z 169（分別由母離子脫去C6H10O5或C15H12O4所得），結(jié)果見(jiàn)圖12。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[25]，筆者推測(cè)8號(hào)峰為異甘草苷。

9號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 562.169 2

[M+H]+，tR為6.66 min，分子式為C27H30O13，碎片離子為m/z 419（由母離子脫去C5H8O4所得），然后再相繼脫去C5H9O5、CH3得到碎片離子m/z 269、m/z 254，結(jié)果見(jiàn)圖13。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[26]，筆者推測(cè)9號(hào)峰為glycyroside。

10號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 430.126 4

[M+H]+，tR為6.81 min，分子式為C22H22O9，碎片離子為? m/z 180（由母離子脫去C16H10O3所得）、m/z 269（由母離子脫去C6H10O5所得），后者再相繼脫去CH3、CO得到碎片離子m/z 254、m/z 226，結(jié)果見(jiàn)圖14。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[27]，筆者推測(cè)10號(hào)峰為芒柄花苷。

11號(hào)峰為負(fù)離子模式下分子離子峰m/z 201.113 2

[M-H]-，tR為7.24 min，分子式為C10H18O4，碎片離子為m/z 183（由母離子脫去H2O所得），然后再相繼脫去C2H4O、C2H2、C4H6得到碎片離子m/z 139、m/z 111、m/z 57，結(jié)果見(jiàn)圖15。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律，筆者推測(cè)11號(hào)峰為癸二酸。

12號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 248.140 9

[M+H]+，tR為8.34 min，分子式為C15H20O3，碎片離子為m/z 231、m/z 185、m/z 145、m/z 91（由母離子相繼脫去H2O、CH2O2、C3H4、C4H6所得），結(jié)果見(jiàn)圖16。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[28]，筆者推測(cè)12號(hào)峰為parthenolide。

13號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 268.073 0

[M-Na+H]+，tR為8.99 min，分子式為C16H12O4，碎片離子為m/z 254（由母離子脫去CH3所得），然后再脫去C8H5O得到碎片離子m/z 137，結(jié)果見(jiàn)圖17。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[29-30]，筆者推測(cè)13號(hào)峰為刺芒柄花素。

14號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 470.339 4

[M+H]+，tR為9.79 min，分子式為C30H16O4，碎片離子為m/z 175（由母離子相繼脫去C16H23O3、CH3O所得）、m/z 262（由母離子脫去C14H24O所得）、m/z 135（由母離子相繼脫去C12H18O、C9H16O2所得），結(jié)果見(jiàn)圖18。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[22]，筆者推測(cè)14號(hào)峰為18β-甘草次酸。

15號(hào)峰為負(fù)離子模式下分子離子峰m/z 293.175 7

[M-H]-，tR為10.34 min，分子式為C17H26O4，碎片離子為m/z 177（由母離子脫去C7H15O所得）、m/z 236（由母離子脫去C4H9所得），后者再脫去CH3得到碎片離子m/z 220，結(jié)果見(jiàn)圖19。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[31]，筆者推測(cè)15號(hào)峰為6-姜酚。

16號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 255.256 3

[M+H]+，tR為15.23 min，分子式為C16H33NO，碎片離子為m/z 171、m/z 101、m/z 88，分別由母離子脫去C4H7NO或C11H22或C12H24所得，結(jié)果見(jiàn)圖20。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律及文獻(xiàn)[32]，筆者推測(cè)16號(hào)峰為棕櫚酰胺。

17號(hào)峰為正離子模式下分子離子峰m/z 337.334 7

[M+H]+，tR為18.05 min，分子式為C22H43NO，碎片離子為m/z 72（由母離子脫去C19H37所得），然后再脫去CH2得到碎片離子m/z 59，結(jié)果見(jiàn)圖21。根據(jù)該化合物的裂解規(guī)律，筆者推測(cè)17號(hào)峰為芥酸酰胺。

綜上，筆者將鑒定出的17種瀉白散入血成分進(jìn)行歸納整理，具體見(jiàn)表1。

3 討論

中藥復(fù)方所含成分較多且較為復(fù)雜，因而其具體藥效物質(zhì)基礎(chǔ)以及作用機(jī)制不甚明確?？诜闹兴帍?fù)方可通過(guò)吸收入血的成分發(fā)揮藥效，因此這些入血成分可能是中藥復(fù)方發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ)?；诖?，本研究探討瀉白散的入血成分，以期為闡明其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考。

本研究將大鼠灌胃瀉白散后，取其血清進(jìn)行分析，結(jié)果共鑒定出17種入血成分。其中6種來(lái)源于君藥桑白皮，7種來(lái)源于臣藥地骨皮，12種來(lái)源佐使藥甘草，分別為地骨皮甲素、綠原酸、tachiogroside B、astringin、新甘草苷、甘草素、壬二酸、異甘草苷、glycyroside、芒柄花苷、癸二酸、parthenolide、刺芒柄花素、18β-甘草次酸、6-姜酚、棕櫚酰胺、芥酸酰胺，這些化合物主要是黃酮類、生物堿類和有機(jī)酸類成分。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，地骨皮甲素能顯著降低中耳炎模型大鼠血清中炎癥因子（如腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素6、白細(xì)胞介素1β）的水平[33];綠原酸具有良好的抗炎效果[34];18β-甘草次酸可抑制變應(yīng)性鼻炎模型大鼠血清中免疫球蛋白E以及炎癥因子的水平，減輕鼻黏膜組織的炎癥損傷[35];異甘草苷可抑制脂多糖誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)[36];6-姜酚具有較好的抗炎、抗氧化效果，對(duì)新血管生成可起到一定的促進(jìn)作用[37]，也可通過(guò)抑制病毒復(fù)制起到抑菌、抗病毒的作用[38]。由此可知，這些成分與瀉白散的作用相一致，提示該17種成分可能是瀉白散的藥效物質(zhì)。后續(xù)筆者將深入探討這些成分與瀉白散藥效的關(guān)系，以期為瀉白散在臨床的應(yīng)用提供參考。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 李璐，楊一帆，楊彪，等.瀉白散處方演變歷史及方劑開(kāi)發(fā)的研究進(jìn)展[J].中成藥，2019，41（8）：1920-1926.

[ 2 ] 李婷，張彤，王丹丹.瀉白散文獻(xiàn)分析及研究進(jìn)展[J].中成藥，2019，41（8）：1927-1931.

[ 3 ] 李玉麗，蔣屏，孫夢(mèng)林，等.經(jīng)典名方瀉白散的古今文獻(xiàn)綜述[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2019，47（6）：17-22.

[ 4 ] 王喜軍.中藥及中藥復(fù)方的血清藥物化學(xué)研究[J].世界科學(xué)技術(shù)（中藥現(xiàn)代化），2002，4（2）：1-4.

[ 5 ] 魏文峰，陳宏昌，劉燁，等.基于UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)的刺五加葉血清藥物化學(xué)初步研究[J].中草藥，2017，48（7）：1306-1313.

[ 6 ] LIU H，ZHAO H，HU W Y，et al. A new strategy for the preparation of total iridoids from Radix Gentianae Macrophyllae and anti-inflammatory profile digesting by UPLC- Q-TOF-MS characterization coupled with PLS analysis[J]. Ind Crops Prod，2021，168：113586.

[ 7 ] 樊曉荃，付娟，胡軍華，等. UPLC-Q-TOF-MS/MS快速分析六味地黃苷糖片化學(xué)成分[J].中草藥，2021，52（21）：6473-6484.

[ 8 ] 劉月濤，胡英還，秦雪梅.黃芪建中湯治療大鼠慢性萎縮性胃炎的代謝組學(xué)研究[J].中草藥，2018，49（10）：2312-2319.

[ 9 ] 李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M]. 2版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2006：50-60.

[10] DUNNW B，BROADHURST D，BEGLEY P，et al. Procedures for large-scale metabolic profiling of serum and plasma using gas chromatography and liquid chromatography coupled to mass spectrometry[J]. Nat Protoc，2011，6（7）：1060-1083.

[11] WIKLUND S，JOHANSSON E，SJ?STR?M L，et al. Visualization of GC/TOF-MS-based metabolomics data for identification of biochemically interesting compounds? ? using OPLS class models[J]. Anal Chem，2008，80（1）：115-122.

[12] TRYGG J，WOLD S. Orthogonal projections to latent structures（O-PLS）[J]. J Chemom，2002，16（3）：119-128.

[13] 楊蕊菁，趙磊，夏鵬飛，等.不同產(chǎn)地當(dāng)歸藥材9種成分的含量測(cè)定及主成分分析[J].中藥新藥與臨床藥理，2020，31（4）：473-477.

[14] 馬飛祥，薛培鳳，王媛媛，等.中藥血清藥物化學(xué)研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志，2017，42（7）：1265-1270.

[15] 楊會(huì)錦，尹華.中藥血清藥物化學(xué)研究進(jìn)展[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2013，33（5）：399-402.

[16] 魏元鋒，張寧，馮怡，等.中藥血清藥物化學(xué)在中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用[J].中草藥，2009，40（9）：1489- 1492.

[17] 王喜軍.中藥血清藥物化學(xué)的研究動(dòng)態(tài)及發(fā)展趨勢(shì)[J]. 中國(guó)中藥雜志，2006，31（10）：789-792，835.

[18] 陳葉青，范欣生，朱振華，等.基于UPLC-ESI-Q-TOF- MS/MS技術(shù)分析雙參平肺顆?；瘜W(xué)成分[J].中草藥，2020，51（2）：321-329.

[19] 陳曉鶴，蘇磊，蔣麗娟，等.基于UPLC-LTQ-Orbitrap高分辨質(zhì)譜的地骨皮化學(xué)成分分析[J].中國(guó)中藥雜志，2019，44（20）：4486-4494.

[20] 楊靜，周慧玲，牛陽(yáng). HPLC-IT-TOF法分析補(bǔ)青湯的化學(xué)成分[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，40（2）：235-238.

[21] LIUY N，HUM T，QIAN J，et al. Characterization of the chemical constituents of Jie-Geng-Tang and the metabolites in the serums and lungs of mice after oral administration by LC-Q-TOF-MS[J]. Chin J Nat Med，2021，19（4）：284-294.

[22] 趙艷敏，劉素香，張晨曦，等.基于HPLC-Q-TOF-MS技術(shù)的甘草化學(xué)成分分析[J].中草藥，2016，47（12）：2061- 2068.

[23] 崔園園，周永峰，馬艷芹，等.基于UPLC-Q-TOF-MS法分析生、炙甘草中化學(xué)成分的差異性[J].中國(guó)藥房，2020，31（9）：1049-1053.

[24] 周潔，湯維維，陳君.基于UPLC-QTOF-MS/MS法的茅蒼術(shù)與北蒼術(shù)化學(xué)成分分析[J].藥學(xué)與臨床研究，2020，28（5）：321-328.

[25] 周秀娟，李燕芳，陳瑩，等.基于UPLC-Q Exactive四極桿-軌道阱液質(zhì)聯(lián)用法快速建立清熱靈顆粒中潛在中藥質(zhì)量標(biāo)志物（Q-Marker）成分庫(kù)[J].中草藥，2017，48（1）：67-74.

[26] 胡英還，許文倩，秦雪梅，等. UHPLC-Q Exactive軌道肼高分辨質(zhì)譜在線快速識(shí)別黃芪建中湯的化學(xué)成分[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2017，52（6）：964-970.

[27] 唐明，高霞，耿婷，等.基于HPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù)的七味通痹口服液化學(xué)成分分析[J].中草藥，2021，52（8）：2226-2236.

[28] 周齊齊.小白菊內(nèi)酯含硫腸道菌代謝產(chǎn)物的分離及體內(nèi)外代謝產(chǎn)物鑒定[D].石家莊：河北醫(yī)科大學(xué)，2020.

[29] 曹輝，周霖，孫志，等.基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS結(jié)合整合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的藤黃健骨膠囊化學(xué)成分識(shí)別及作用機(jī)制初步研究[J].中草藥，2020，51（9）：2408-2417.

[30] WANG F C，HUANG S Y，CHEN Q G，et al. Chemical characterisation and quantification of the major consti-? ?tuents in the Chinese herbal formula Jian-Pi-Yi-Shen pill by UPLC-Q-TOF-MS/MS and HPLC-QQQ-MS/MS[J]. Phytochem Anal，2020，31（6）：915-929.

[31] 閆伊萌，岳可心，劉玉生，等.基于超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的黃英咳喘糖漿化學(xué)成分分析[J].應(yīng)用化學(xué)，2021，38（3）：276-288.

[32] 李子祥，鄧敏，王晨悅，等.基于UPLC/Q-TOF MS/MS的花生油成分分析[J].中國(guó)油脂，2021，46（3）：122-127.

[33] 卡迪麗婭·木拉提，艾力根·阿不都熱依木，張瑾.地骨皮甲素調(diào)節(jié)VEGF信號(hào)通路對(duì)分泌性中耳炎大鼠的作用研究[J].實(shí)用藥物與臨床，2020，23（12）：1069-1073.

[34] 白雪峰，吳正祥，胡正燏. 18β-甘草次酸對(duì)變應(yīng)性鼻炎大鼠鼻黏膜重塑的影響[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，2020，36（14）：2103-2106.

[35] CUIQ X，F(xiàn)U M，ZHOU M G，et al. Bioactivity-based ultra-performance liquid chromatography-coupled quadrupole time-of-flight mass spectrometry for NF-κB inhibitors identification in Chinese Medicinal Preparation Bufei Granule[J]. Biomed Chromatogr，2016，30（8）：1184-1189.

[36] 王鈞楠，周永峰，崔園園，等.甘草增強(qiáng)免疫的物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中草藥，2021，52（6）：1844- 1850.

[37] 侯春，王肅生，梁剛，等.生姜提取物6-姜酚調(diào)節(jié)生長(zhǎng)因子促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)制[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2021，34（9）：920-925.

[38] HAYATIR F，BETTERC D，DENIS D，et al. [6]-gingerol inhibits chikungunya virus infection by suppressing viral replication[J]. Biomed Res Int，2021，2021：6623400.

（收稿日期：2021-08-02 修回日期：2021-11-19）

（編輯：唐曉蓮）