微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究進(jìn)展

解維俊 姜海濱

摘 要：近年來(lái)，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的集約化、規(guī)模化發(fā)展導(dǎo)致抗生素的濫用，大部分細(xì)菌都產(chǎn)生了不同程度的抗性，更有甚者成為超級(jí)細(xì)菌，致使大多數(shù)抗生素失去作用，并且抗生素還有致癌、致畸、致突變等缺點(diǎn)，若長(zhǎng)時(shí)間向水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物投喂，會(huì)間接危害人類健康。作為抗生素的替代品，微生態(tài)制劑具有凈化水質(zhì)、促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)等功能，且使用后無(wú)毒副作用、無(wú)污染、無(wú)耐藥性和投入成本低，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)增加了不可估量的生態(tài)效益和經(jīng)濟(jì)效益，符合當(dāng)前可持續(xù)發(fā)展的綠色環(huán)保理念。該文主要從微生態(tài)制劑的發(fā)展歷史、基本特征、使用方式、作用原理、注意事項(xiàng)、存在不足、發(fā)展趨勢(shì)和展望等方面進(jìn)行了闡述，并著重介紹了光合細(xì)菌作為水質(zhì)改良劑和飼料添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：微生態(tài)制劑;益生菌;光合細(xì)菌;水產(chǎn)養(yǎng)殖;應(yīng)用

中圖分類號(hào) S963文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 1007-7731（2021）22-0103-06

Application and Research Progress of Microecological Preparations in Aquaculture

XIE Weijun et al.

（Shanghai Ocean University， Shanghai 201306， China）

Abstract： In recent years， the intensive and large-scale development of the aquaculture industry has led to the abuse of antibiotics. Most bacteria have developed resistance to varying degrees， and even more have become super bacteria， rendering most antibiotics ineffective and causing cancer， Teratogenic， mutagenic and other shortcomings， if fed to aquaculture animals for a long time will indirectly endanger human health. As an alternative to antibiotics， microecological preparations have the ability to purify water quality and promote the growth of aquatic animals， and have no toxic side effects， no pollution， no drug resistance and low input cost after use， which adds immeasurable ecological benefits to the aquaculture industry And economic benefits are in line with the current green environmental protection concept of sustainable development. This article mainly narrates the development history， basic characteristics， use mode， principle of action， precautions， current deficiencies， development trends and prospects of microecological preparations in detail， introduces the use of photosynthetic bacteria as water quality improvers and feed additives.

Key words： Microecological preparations;Probiotics;Photosynthetic bacteria;Aquaculture;Application

1 我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖發(fā)展現(xiàn)狀和污染情況

我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)自1980年起就處于世界前列的地位，至2018年，歷經(jīng)40年，水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量翻了42倍[1]。1970—2017年間，隨著養(yǎng)殖技術(shù)的提升和普及，養(yǎng)殖魚(yú)類產(chǎn)品產(chǎn)量年均增長(zhǎng)率（7.92%）遠(yuǎn)大于捕撈魚(yú)類產(chǎn)品產(chǎn)量年均增長(zhǎng)率（0.66%）[2]。根據(jù)《2019年中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒》報(bào)道，我國(guó)2018年水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量為4991.06萬(wàn)t，捕撈產(chǎn)量?jī)H為1466.60萬(wàn)t，養(yǎng)殖產(chǎn)量和捕撈產(chǎn)量的比例高達(dá)77.3∶22.7[3]。漁業(yè)養(yǎng)殖的迅猛發(fā)展在給我國(guó)帶來(lái)了巨大經(jīng)濟(jì)效應(yīng)的同時(shí)，也給生態(tài)環(huán)境造成了巨大的壓力。據(jù)《第二次污染源普查公報(bào)》報(bào)道，我國(guó)2017年水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)水污染物排放量為：化學(xué)需氧量66.60萬(wàn)t，氨氮2.23萬(wàn)t，總氮9.91萬(wàn)t，總磷1.61萬(wàn)t，這對(duì)于我國(guó)的糞污處理能力是一個(gè)很大的壓力[4]。由于近20年來(lái)中國(guó)池塘采用集約化養(yǎng)殖，投入了大量的餌、肥料以及大量的抗生素等魚(yú)藥，導(dǎo)致每年3億m3水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水的排放，加劇了江河湖庫(kù)的富營(yíng)養(yǎng)化和污染程度，導(dǎo)致我國(guó)七大水系50%河段不符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)[5]，海洋水污染現(xiàn)狀也不容樂(lè)觀。如果不加強(qiáng)對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖水域環(huán)境污染的防治，將會(huì)影響我國(guó)漁業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。除此之外，隨著抗生素的限制使用，尋找相應(yīng)的替代品也是急需解決的問(wèn)題。而微生態(tài)制劑作為一款新型生物制劑，具有凈化水質(zhì)、改善魚(yú)類腸道細(xì)菌群、可以作為飼料添加劑等優(yōu)點(diǎn)，近幾年來(lái)已被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中。

2 微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的研究

2.1 發(fā)展歷史 微生態(tài)制劑初期的研究是從“有益細(xì)菌”即“益生菌”開(kāi)始的[6]。1965年，Liliy首次提出益生菌這一概念，特指某種微生物分泌的能促進(jìn)其他微生物生長(zhǎng)的物質(zhì)[7]。隨后在1974年，Parker進(jìn)行了修訂并將益生菌定義為：有助于腸道菌群平衡的微生物和物質(zhì)[8]。1988年，F(xiàn)uller將其再做修改并加以補(bǔ)充，他認(rèn)為益生菌應(yīng)當(dāng)是活的微生物飼料添加劑，可以通過(guò)改善生物的腸道微生物平衡而對(duì)其產(chǎn)生有益影響，該定義相對(duì)科學(xué)且流傳最廣[9]?？萍妓降目焖侔l(fā)展帶動(dòng)了人們對(duì)益生菌的深入研究，發(fā)現(xiàn)益生菌與生物之間的相互作用不僅僅存在與腸道，例如益生菌可作用于水體從而改善水生生物的生活環(huán)境。于是在2000年，Laurent對(duì)益生菌的定義做了進(jìn)一步的修改補(bǔ)充，將益生菌定義為：能改善宿主相關(guān)或周圍微生物群落、能提高飼料營(yíng)養(yǎng)、能增強(qiáng)宿主對(duì)疾病抵抗力或提高周圍生活環(huán)境質(zhì)量的微生物[10]。益生菌于1986年首次被應(yīng)用于水生動(dòng)物，Kozasa將分離得到的東洋芽孢桿菌（Bacillus toyoi）作用于感染了愛(ài)德華氏菌（Edwardsiella）的日本鰻鱺（Anguilla japonica），發(fā)現(xiàn)死亡率有效降低[11]。自此，益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中得到了快速發(fā)展。目前，相關(guān)研究人員普遍將益生菌定義為：適當(dāng)濃度的添加可以改善與水產(chǎn)動(dòng)物相關(guān)或周圍的微生物群落，從而提高水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)飼料的利用效率和對(duì)病害的抵抗力，或者通過(guò)調(diào)理水質(zhì)使其適合水產(chǎn)動(dòng)物的健康生長(zhǎng)發(fā)育的一類活性微生物的總稱[12]。實(shí)際應(yīng)用的微生態(tài)制劑一般包括益生菌的活菌體、死菌體、菌體成分、代謝產(chǎn)物以及活性生長(zhǎng)促進(jìn)物質(zhì)[6]。

2.2 分類 目前，微生態(tài)制劑有多種分類方式，按照其組成成分劃分，一般可分為三大類型，即益生菌（Probitics）、益生元（Prebiotics）和合生素（Synbiotics）。益生菌又稱益生素或活菌制劑;益生元是可以通過(guò)調(diào)節(jié)宿主腸道微生態(tài)環(huán)境使其達(dá)到平衡狀態(tài)，從而促進(jìn)宿主健康生長(zhǎng)的一類物質(zhì)，如低聚糖類，此外還包括一些具有益生元作用的中草藥;合生素是指同時(shí)含有益生菌和益生元的制劑[13];按照微生態(tài)制劑的菌種成分劃分，可分為：光合細(xì)菌類微生態(tài)制劑、乳酸菌類微生態(tài)制劑、酵母菌類微生態(tài)制劑、蛭弧菌類微生態(tài)制劑、優(yōu)干菌類微生態(tài)制劑、芽孢桿菌類微生態(tài)制劑和雙歧桿菌類微生態(tài)制劑等[14];按照作用對(duì)象劃分，可分為水質(zhì)微生態(tài)調(diào)控制劑和飼料微生態(tài)添加制劑[15];微生態(tài)制劑按照菌種組成結(jié)構(gòu)可分為單一型和復(fù)合型。單一型指只含有一種益生菌的制劑，復(fù)合型指含有不同益生菌按照不同比例配制的制劑，市場(chǎng)目前主要出售的為復(fù)合型制劑;按照劑型分為液體型、粉劑、顆粒型和膏體型[16]。目前，微生態(tài)制劑市場(chǎng)上常見(jiàn)的劑型主要是以菌液的形式存在，一般認(rèn)為其菌體含量應(yīng)當(dāng)≥3×108CFU/mL，也存在粉末狀和固體狀的制劑[17]。

2.3 常用的微生態(tài)制劑 目前，國(guó)際水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中最常用的微生態(tài)制劑的有效微生物種類包括芽孢桿菌類（如地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、蠟樣芽胞桿菌等），乳酸菌類（乳酸乳桿菌、嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、乳腸球菌等），酵母類（產(chǎn)朊假絲酵母、釀酒酵母）和光合細(xì)菌（沼澤紅假單胞菌）[18]。我國(guó)農(nóng)業(yè)部目前允許使用的有益菌種有干酪乳桿菌、嗜乳酸桿菌、乳鏈球菌、枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、啤酒芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌等12種[19]。所以當(dāng)前我國(guó)使用較多的益生菌為：乳酸菌、光合細(xì)菌、芽孢桿菌、小球藻和幾種酵母菌，大量研究表明菌與菌之間具有協(xié)同作用，例如光合細(xì)菌可以在一定程度上促進(jìn)芽孢桿菌的生長(zhǎng)，菌與藻之間也具有一定的益生作用，能對(duì)養(yǎng)殖的水生動(dòng)物和水體產(chǎn)生有益的影響[20]。我國(guó)對(duì)微生態(tài)制劑的開(kāi)發(fā)利用時(shí)間相對(duì)于世界其他國(guó)家來(lái)說(shuō)相對(duì)較晚，但由于國(guó)際上對(duì)微生態(tài)制劑已經(jīng)有了較成熟的研究和利用，因此我國(guó)微生態(tài)制劑的發(fā)展速度非常快，年使用量達(dá)到1000t左右[21]。

2.4 微生態(tài)制劑的特征和理想菌株的特點(diǎn) 微生態(tài)制劑應(yīng)具有以下3個(gè)基本特征：（1）在體內(nèi)感染試驗(yàn)中，投入微生態(tài)制劑后養(yǎng)殖動(dòng)物對(duì)病原體的提抗力得到增強(qiáng)，并且也提高了養(yǎng)殖動(dòng)物的生長(zhǎng)率;（2）微生態(tài)制劑中的益生菌能在養(yǎng)殖動(dòng)物的腸道和養(yǎng)殖水體存活生長(zhǎng)，不僅可以改善宿主腸道的微生態(tài)環(huán)境，而且可以減少養(yǎng)殖動(dòng)物的排泄物以及食物殘?jiān)鼘?duì)水體的污染;（3）在體外實(shí)驗(yàn)中能抑制病原菌的生長(zhǎng)和降解有機(jī)質(zhì)[22]。所以能被應(yīng)用于微生態(tài)制劑的理想菌種應(yīng)具備以下特點(diǎn);（1）菌種選擇的首要原則是安全性和非病原性，菌種能與養(yǎng)殖動(dòng)物即宿主共生，而且不與病原微生物雜交;（2）微生態(tài)制劑中的菌株應(yīng)是養(yǎng)殖動(dòng)物某個(gè)部位的“土著菌”或者來(lái)源于生活環(huán)境，研究人員發(fā)現(xiàn)從健康的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物腸道分離得到的菌株可以作為優(yōu)秀的微生態(tài)制劑使用，此外，水體和底泥也是重要來(lái)源。采用雙層、交叉或平行條紋技術(shù)觀察益生菌是否能對(duì)病原菌產(chǎn)生抑菌斑[14];（3）菌種必須具備特定的生態(tài)效應(yīng)和穩(wěn)定的生物學(xué)特性，不會(huì)發(fā)生負(fù)性突變，影響微生態(tài)制劑發(fā)揮作用甚至可能淪為有害菌：（4）能與其他益生菌聯(lián)合使用，不產(chǎn)生拮抗作用，最好可以互利共生，達(dá)到1+1>2的效果;（5）菌種在水體或者動(dòng)物體內(nèi)可以快速增殖，并且可以忍受極端的pH值，在生物腸道內(nèi)生存成為“土著菌”;（6）菌種可以進(jìn)行工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，作為飼料添加劑時(shí)，在室溫下能保持穩(wěn)定和較好的存活狀態(tài)[23]。綜上所述，根據(jù)微生態(tài)制劑的基本特征以及理想菌種的特點(diǎn)，我們可以總結(jié)出篩選益生菌的過(guò)程：第1步，選擇合適的益生菌來(lái)源;第2步，分離得到預(yù)備微生態(tài)制劑菌株，并進(jìn)行純化;第3步，設(shè)計(jì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)該菌株對(duì)病原菌是否具有抑制或者拮抗作用;第4步，進(jìn)行安全性試驗(yàn)，檢驗(yàn)該菌株于水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物是否有害;第5步，將該菌株應(yīng)用于實(shí)踐生產(chǎn)中，確定其實(shí)際作用效果并加以評(píng)估;第6步，確定其經(jīng)濟(jì)利用價(jià)值，最終投入工業(yè)化生產(chǎn)[23]。

2.5 微生態(tài)制劑的使用方式和作用機(jī)理 微生態(tài)制劑出廠投入使用時(shí)，一般分為3種使用方式：（1）直接潑灑于養(yǎng)殖水體，但要注意的是部分益生菌在投放前需要活化，例如芽孢桿菌;（2）混合于飼料或者通過(guò)餌料生物被養(yǎng)殖動(dòng)物攝食;（3）浸浴或者人工注射[14]。不同的使用方式對(duì)應(yīng)的作用方式不同，由于現(xiàn)在集約化高密度的養(yǎng)殖模式，產(chǎn)生了大量的飼料殘餌和養(yǎng)殖生物的排泄物，養(yǎng)殖水體容易呈富營(yíng)養(yǎng)化，潑灑于水體可以調(diào)節(jié)水質(zhì)和降解底泥中的有機(jī)質(zhì)等污染源，有利于水體物質(zhì)的循環(huán);添加于飼料是為了提高飼料營(yíng)養(yǎng)，改善養(yǎng)殖動(dòng)物腸道菌落環(huán)境，抑制體內(nèi)腸道致病菌的生長(zhǎng)，從而促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物生長(zhǎng)，也可以提高生物體的免疫力，增強(qiáng)對(duì)病原菌的抵抗力;浸浴或注射是由于此類微生態(tài)制劑具有特殊功能，在實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中應(yīng)當(dāng)根據(jù)需要選擇合適的使用方式[24]。當(dāng)前，微生態(tài)制劑的作用機(jī)理有如下幾種：（1）.維持水產(chǎn)養(yǎng)殖生物腸道微生態(tài)平衡，當(dāng)宿主處于疾病狀態(tài)，腸道內(nèi)的微生態(tài)環(huán)境處于不平衡狀態(tài)，此時(shí)宿主抵抗力下降，病情可能會(huì)進(jìn)一步加重，益生菌的加入可使腸道恢復(fù)微生態(tài)平衡，使養(yǎng)殖生物恢復(fù)健康;（2）三流運(yùn)轉(zhuǎn)，微生態(tài)制劑或益生菌的代謝產(chǎn)物能調(diào)節(jié)宿主的非特異性免疫，確保微生態(tài)系統(tǒng)中的能量流、物質(zhì)流和基因流的正常運(yùn)轉(zhuǎn);（3）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)合成，一部分益生菌可以在宿主體內(nèi)產(chǎn)生各種消化酶，幫助宿主攝食利用營(yíng)養(yǎng)成分，從而提升飼料轉(zhuǎn)化率。一部分益生菌可以在宿主體內(nèi)合成并釋放不同的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、多種維生素（維生素B、葉酸等）等;（4）生物奪氧和御菌屏障，有益菌與病原微生物搶占黏膜上皮細(xì)胞的生態(tài)位點(diǎn)或者合成釋放藥理活性物質(zhì)阻遏病原微生物增殖，微生態(tài)制劑一般在動(dòng)物幼體時(shí)投喂效果最好，動(dòng)物腸道內(nèi)的“土著菌”一般為厭氧菌，此時(shí)益生菌若能定殖于動(dòng)物腸道，由于在其增殖過(guò)程中消耗氧氣是必要的，其他兼性厭氧菌和好氧菌就無(wú)法肆意生長(zhǎng)，養(yǎng)殖生物腸道微生態(tài)平衡就可以得以保持;（5）改良養(yǎng)殖環(huán)境，包括調(diào)理改善水質(zhì)，降解消除底泥有機(jī)質(zhì)等;（6）通過(guò)與微藻的協(xié)同作用遏制病原菌的增殖，提升水產(chǎn)生物對(duì)飼料的利用率;（7）蛭弧菌是一種特殊的微生態(tài)制劑，可以減少環(huán)境中弧菌種群數(shù)量，降低其危害，作用方式是通過(guò)寄生、裂解弧菌，從而破壞其結(jié)構(gòu)使其失活[14，25]。

2.6 微生態(tài)制劑使用的注意事項(xiàng) 盡管微生態(tài)制劑具有使用范圍廣，作用效果明顯，發(fā)揮時(shí)間持久等優(yōu)點(diǎn)，但并不是用的越多越好，由于市場(chǎng)主要以復(fù)合型微生態(tài)制劑為主，每一種產(chǎn)品中菌種的配伍和濃度是不同的，所以使用方法也各具千秋。在實(shí)際應(yīng)用中，我們要根據(jù)作用對(duì)象的種類和環(huán)境選擇適宜的菌種和比例[26]。投放時(shí)要注意如下幾點(diǎn)：（1）使用微生態(tài)制劑時(shí)要依據(jù)不同的情況選擇不同的投放方式，做到適當(dāng)、適時(shí)、科學(xué)合理。投放光合細(xì)菌、硝化細(xì)菌時(shí)最好與沸石粉混合使用，同時(shí)開(kāi)啟增氧設(shè)備增加水體溶氧量，使益生菌快速繁殖生長(zhǎng);部分制劑在投放前要進(jìn)行活化培養(yǎng)，芽孢桿菌在投放前需在蜂蜜水或紅糖水培養(yǎng)4～5h再潑灑，活化處理后的益生菌在水體中增殖速度快，利用效率高;（2）微生態(tài)制劑在養(yǎng)殖過(guò)程中都可以使用，但本著盡早使用原則，最好在魚(yú)苗期使用，魚(yú)苗期動(dòng)物腸道內(nèi)菌群數(shù)量較少，只存在少許的“土著菌”，此時(shí)投喂益生菌，可以競(jìng)爭(zhēng)到更多的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，迅速在宿主腸道定殖并成為優(yōu)勢(shì)菌群，減少或抑制病原菌的定居，達(dá)到預(yù)防病害的效果。投喂在水體的微生態(tài)制劑要遵循定期使用的原則，因?yàn)榧尤氲剿w中的益生菌經(jīng)過(guò)一段時(shí)間會(huì)自然消亡，要讓其在水體中保持優(yōu)勢(shì)菌群，就要定期、連續(xù)使用，這樣才能保持凈化養(yǎng)殖環(huán)境的最佳狀態(tài);（3）微生態(tài)制劑禁止與抗生素、消毒殺菌藥或具有抗菌作用的中草藥同時(shí)使用，因?yàn)榇祟愃幬飼?huì)抑制細(xì)胞壁及蛋白質(zhì)的合成，具有破壞細(xì)胞膜的功能，可能會(huì)殺死或抑制益生菌從而影響微生態(tài)制劑發(fā)揮作用，二者必須間隔7d以上方可使用;（4）益生菌本身對(duì)水溫和水質(zhì)都有要求，所以微生態(tài)制劑不適合在低溫使用，最好在15℃以上特別是25～30℃投放最佳，pH值亦然，過(guò)酸性或過(guò)堿性都會(huì)也會(huì)影響微生態(tài)制劑發(fā)揮效果。投放時(shí)的天氣也很重要，不要在陰天或者下雨等養(yǎng)殖水體易發(fā)生缺氧的時(shí)候使用，因?yàn)槿粑⑸鷳B(tài)制劑中含有好氧菌或兼性厭氧菌，投入水體會(huì)消耗溶解氧，從而可能會(huì)引起水體缺氧;（5）當(dāng)微生態(tài)制劑作為飼料添加劑時(shí)，加工過(guò)程的高溫、高壓、蒸汽等操作可能會(huì)影響微生態(tài)制劑的使用效果，一定要仔細(xì)查閱產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。此外，隨著時(shí)間的流逝，微生態(tài)制劑中的活菌數(shù)也隨著減少，也就意味著其作用也越來(lái)越小，所以在保質(zhì)期限內(nèi)盡快使用[26，27]。

2.7 微生態(tài)制劑應(yīng)用存在的不足 我國(guó)對(duì)微生態(tài)制劑的研究比西方國(guó)家起步晚，目前對(duì)單一型微生態(tài)制劑研究比較透徹，但養(yǎng)殖水體是一個(gè)復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)，該類制劑作用比較單一，無(wú)法完全取代抗生素。我國(guó)對(duì)于復(fù)合型微生態(tài)制劑的研究還處于起步狀態(tài)，復(fù)合型微生態(tài)制劑在凈化水體、脫氮方面還存在很多不足[28]，如：（1）我國(guó)對(duì)水產(chǎn)微生態(tài)制劑應(yīng)用研究較多，基礎(chǔ)研究較少，對(duì)于制劑中各種菌種的作用機(jī)理尚不明確，菌種之間的相互作用關(guān)系也不甚了解，不確定是協(xié)同還是拮抗作用;（2）復(fù)合型微生態(tài)制劑中各菌種的混合比例也會(huì)影響菌株之間的相互作用，進(jìn)而影響微生態(tài)制劑的使用效果;（3）從自然界分離得到的益生菌通常只具備較低的活性且耐受性較差，達(dá)不到當(dāng)前工業(yè)化生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)應(yīng)用微波、離子注入、原生質(zhì)體融合、原生質(zhì)體誘變和基因工程技術(shù)等前沿的誘變技術(shù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)益生菌的活性有了明顯的提升并且降低了生產(chǎn)成本，達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)，尋找一種簡(jiǎn)單易行的改良路線和快速有效的篩選模式是菌種改良選育的關(guān)鍵[29];（4）目前用于水質(zhì)凈化的微生態(tài)制劑對(duì)溶解氧的要求較高，在有氧條件下凈化水體的效果要遠(yuǎn)大于無(wú)氧條件，甚至在無(wú)氧條件下微生態(tài)菌群不能促進(jìn)對(duì)COD的去除[30]。對(duì)此，筆者認(rèn)為厭氧不產(chǎn)氧光合細(xì)菌今后可能在凈化水質(zhì)方向有很大的發(fā)展前景;（5）目前市場(chǎng)出售的微生態(tài)制劑性狀不穩(wěn)定，使用效果不理想，且普遍保質(zhì)期短，一經(jīng)開(kāi)啟必須短時(shí)間內(nèi)用完。水產(chǎn)工作人員在使用微生態(tài)制劑時(shí)，也存在不按產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)規(guī)范操作的現(xiàn)象;（6）在開(kāi)發(fā)益生菌時(shí)，安全性是首要且應(yīng)當(dāng)永遠(yuǎn)考慮的問(wèn)題，因?yàn)槟承┘?xì)菌是天然條件致病菌，而有些微生物可以攝取外源DNA，進(jìn)而轉(zhuǎn)化為致病菌[28，31]。但不幸的是由于微生態(tài)制劑的生產(chǎn)在我國(guó)屬于新興產(chǎn)業(yè)，目前其市場(chǎng)處于混亂局面，沒(méi)有相對(duì)統(tǒng)一的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，沒(méi)有相關(guān)的監(jiān)管部門(mén)，從而導(dǎo)致了許多不具有生產(chǎn)條件的企業(yè)進(jìn)行微生態(tài)制劑的生產(chǎn)，這樣生產(chǎn)出的制劑的純度、活性、安全性以及有效活菌數(shù)都可能達(dá)不到實(shí)際投放的要求。相關(guān)學(xué)者進(jìn)行隨機(jī)抽檢發(fā)現(xiàn)市場(chǎng)某些產(chǎn)品中的益生菌實(shí)際上并沒(méi)有凈化水質(zhì)的功能，甚至有的微生態(tài)制劑中含有致病菌[32]。韋成相于2016年對(duì)3種市售水產(chǎn)復(fù)合型微生態(tài)制劑A、B、C進(jìn)行了菌群數(shù)量檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)B、C制劑中菌群實(shí)際數(shù)量與標(biāo)注數(shù)量相差較大，A、C制劑中有霉菌檢測(cè)出[33]。

3 光合細(xì)菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用

微生態(tài)制劑在被應(yīng)用于凈化水質(zhì)時(shí)可能存在一些不足，如果投入過(guò)多好氧菌，會(huì)增加水體的耗氧，且這類菌無(wú)法在底泥中生存，凈化能力大大削弱。而光合細(xì)菌因其獨(dú)特的兼性厭氧生活方式，能夠在下層缺氧或低氧的環(huán)境中有效發(fā)揮作用，降解養(yǎng)殖水體或底質(zhì)中的毒害物質(zhì)[34]，相比于硝化細(xì)菌、芽孢桿菌等有氧呼吸微生物在調(diào)節(jié)養(yǎng)殖水體更有效，是一種較好的選擇，引發(fā)了研究者新的思考。

3.1 光合細(xì)菌的發(fā)展歷史 1836年，Ehrenberg首次發(fā)現(xiàn)光合細(xì)菌，并表示2種能使沼澤或湖泊水體變紅的光合微生物的生長(zhǎng)與光、硫化氫的存在有關(guān)[35]。1883年，Engelmann發(fā)現(xiàn)紅菌聚集生長(zhǎng)的環(huán)境中光線波長(zhǎng)與其細(xì)胞內(nèi)色素吸收波長(zhǎng)一致，因此認(rèn)定該菌進(jìn)行光合作用。1931年，美國(guó)微生物學(xué)家Van Nile提出了光合作用的共同反應(yīng)式，用生物化學(xué)統(tǒng)一性的觀點(diǎn)解釋了光合成現(xiàn)象，為現(xiàn)代光合細(xì)菌的研究奠定了基礎(chǔ)[36]。20世紀(jì)60年代，日本學(xué)者小林正泰發(fā)現(xiàn)光合細(xì)菌能夠有效凈化有機(jī)廢水，開(kāi)創(chuàng)了用光合細(xì)菌法處理污水的先河，并開(kāi)始研發(fā)光合細(xì)菌的培養(yǎng)技術(shù)，隨后基本完善了光合細(xì)菌規(guī)模培養(yǎng)的生產(chǎn)工藝，使光合細(xì)菌大規(guī)模運(yùn)用成為現(xiàn)實(shí)[47]。1987年，于上海舉辦的“第一屆中日光合細(xì)菌國(guó)際學(xué)術(shù)會(huì)議”促進(jìn)了我國(guó)對(duì)光合細(xì)菌的研發(fā)進(jìn)程，從此，光合細(xì)菌在廢水處理和飼料添加劑中的應(yīng)用成為科學(xué)家研究的熱門(mén)。

3.2 光合細(xì)菌的定義和特性 光合細(xì)菌（Photosynthetic bacteria，PSB）是一類在地球上出現(xiàn)最早的可以利用光能進(jìn)行光合作用的原核微生物，能夠以光作為能源、在厭氧光照或好氣黑暗條件下利用自然界的有機(jī)物、硫化物、氨作為供氫體兼碳源進(jìn)行光合作用，大部分的光合作用都發(fā)生在厭氧條件下，且不放氧。根據(jù)在光合作用中是否產(chǎn)生氧氣，可以將光合細(xì)菌分為不產(chǎn)氧光合細(xì)菌（Anoxygenic photosynthetic bacteria，APB）和產(chǎn)氧光合細(xì)菌（Oxygenic photoynthetic bacteria）兩大類。在水產(chǎn)的實(shí)際生產(chǎn)中研究較多的是APB類群的紫色非硫細(xì)菌科，包括紅假單胞菌屬、紅螺菌屬、紅球菌屬等[38-40]。

3.3 光合細(xì)菌作為水質(zhì)改良劑的應(yīng)用 光合細(xì)菌在進(jìn)行光合作用時(shí)，具有固碳、固氮和脫氮、氧化硫化物以及氫代謝等功能，在水產(chǎn)上可以降解養(yǎng)殖水體的有機(jī)物、氨氮、含硫化合物等，起到調(diào)節(jié)和穩(wěn)定水質(zhì)的作用。林東年等（2007）在羅非魚(yú)養(yǎng)殖池塘中投放光合細(xì)菌后，發(fā)現(xiàn)兩試驗(yàn)組中光合細(xì)菌種群由開(kāi)始的2.3%、9.8%上升至73.9%、93.4%，成為優(yōu)勢(shì)種群，從而抑制水體中異養(yǎng)菌的生長(zhǎng)，還降低了水體中COD、氨氮，提高亞硝態(tài)氮，使得養(yǎng)殖水體的溶氧、pH值、透明度、氮結(jié)構(gòu)符合養(yǎng)殖水體標(biāo)準(zhǔn)[41]。王緒峨等每天向扇貝苗養(yǎng)殖池塘潑灑光合細(xì)菌2～6mg/L并減少1/3的換水量，檢測(cè)到氨態(tài)氮降低0.004～0.012mg/L，pH降低0.05～0.07，同時(shí)發(fā)現(xiàn)單純使用光合細(xì)菌作為幼體的開(kāi)口餌料，不如將光合細(xì)菌用作餌料添加劑效果更為顯著，因?yàn)樯蓉愑左w和仔魚(yú)需要大量的必須脂肪酸，但光合細(xì)菌中的亞油酸和亞麻酸含量很低[42]。王蘭等從養(yǎng)蝦池底泥分離得到4株光合細(xì)菌，將其混合培養(yǎng)后處理養(yǎng)蝦池水，結(jié)果表明，光合細(xì)菌可以有效分解底泥中污染物，去除水體中的COD、氨氮（第4天COD去除率為72.59%，氨氮去除率達(dá)89.2%），水質(zhì)得到了明顯的改善[43]。此外，通過(guò)在養(yǎng)殖水體投放光合細(xì)菌，可以增加綠藻和硅藻等有益藻類的數(shù)量，降低藍(lán)藻等雜藻的含量，改善養(yǎng)殖水體生態(tài)環(huán)境，保障水產(chǎn)生物健康生長(zhǎng)。孫繼芳等在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)30d時(shí)，投放0.5%和1%光合細(xì)菌的水箱水體呈淺褐色，滿足水產(chǎn)養(yǎng)殖提出的“肥活嫩爽”要求，且水樣測(cè)定中的硅藻含量大于26%，為水產(chǎn)生物營(yíng)造良好的養(yǎng)殖環(huán)境[44]。Hargreaves研究發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖水體中光合細(xì)菌和藻類配合使用，可以有效降低水體中氨氮的含量，并增加水體溶氧，養(yǎng)殖水體污染得到了有效控制[45]。

3.4 光合細(xì)菌作為飼料添加劑的應(yīng)用 光合細(xì)菌體內(nèi)富含蛋白質(zhì)、維生素、輔酶Q10、細(xì)菌葉綠素、類胡蘿卜素等生理活性物質(zhì)，作為飼料添加劑或餌料可以有效促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)、提高飼料利用率。唐龍等在養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)飼料中添加2.0%光合細(xì)菌能夠促進(jìn)卵形鯧鲹的生長(zhǎng)，提高了其特定生長(zhǎng)率，并降低魚(yú)體脂肪肝的發(fā)病率[46]。方衛(wèi)東等從養(yǎng)殖基地底泥中篩選得到的光合細(xì)菌添加到中華鱉的養(yǎng)殖池塘中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)施菌量為9×104 CFU/mL時(shí)，70d后甲魚(yú)的增重率和存活率都明顯提高，分別為31%、14%[47]。光合細(xì)菌在水產(chǎn)生物育苗階段發(fā)揮著重要的作用，可以顯著提高魚(yú)苗的成活率和品質(zhì)，一般情況下成活率可提高20%～60%，被稱為魚(yú)苗的“守護(hù)神”[48]。Olafsen等在養(yǎng)殖水體潑灑光合細(xì)菌后，發(fā)現(xiàn)蝦苗的成活率由27%～30%提高到了50%～77%，且無(wú)病苗、苗強(qiáng)壯、出苗整齊等[49]。劉中等給鰱、鳙魚(yú)苗投喂光合細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)苗存活率為61.3%，而對(duì)照組僅為54%，魚(yú)苗平均體長(zhǎng)為17.10cm，而對(duì)照組僅為13.74cm[50]。此外，光合細(xì)菌定殖在水產(chǎn)生物消化道內(nèi)，可以調(diào)節(jié)改善水產(chǎn)動(dòng)物消化道內(nèi)微生態(tài)環(huán)境，從而提高水產(chǎn)動(dòng)物的抵抗力和消化能力[51]。王夢(mèng)亮等在鯉魚(yú)飼料添加光合細(xì)菌并投喂，發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組腸道內(nèi)光合細(xì)菌數(shù)量顯著增加，最高檢出數(shù)可達(dá)4.78±0.75（logn/克腸道內(nèi)容物），有害菌大腸桿菌、擬桿菌的數(shù)量顯著低于對(duì)照組，有益菌乳酸桿菌數(shù)量顯著高于對(duì)照組，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)光合細(xì)菌可以提高腸道中淀粉酶和蛋白酶的活性[52]。

綜上所述，光合細(xì)菌無(wú)論作為水質(zhì)改良劑還是飼料添加劑，都發(fā)揮了強(qiáng)大的作用且具有極大的發(fā)展?jié)摿?。一般新鮮菌液的添加效果要明顯優(yōu)于真空冷凍干燥菌體和熱噴干燥菌體的添加形式，但作為飼料添加劑時(shí)，可能面臨高溫、高壓，從而降低其活性，因而尋找新的添加方式也是十分有必要的。

4 微生態(tài)制劑的發(fā)展趨勢(shì)和展望

微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中具有提高飼料營(yíng)養(yǎng)、調(diào)節(jié)養(yǎng)殖水質(zhì)等多種功能，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)有著巨大的應(yīng)用前景，但目前從選種到生產(chǎn)都存在不足。未來(lái)的發(fā)展趨勢(shì)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：（1）加強(qiáng)對(duì)微生態(tài)制劑的基礎(chǔ)研究，弄清益生菌的定植機(jī)制以及環(huán)境因素對(duì)其的影響，提高益生菌的有效性。如水生動(dòng)物與其腸道內(nèi)的益生菌存在長(zhǎng)期的適應(yīng)過(guò)程，并可作為“土著菌”持續(xù)增殖，一旦明白其定殖機(jī)制，今后腸道益生菌的開(kāi)發(fā)將成為微生態(tài)制劑菌種的主要來(lái)源;（2）加強(qiáng)對(duì)益生菌的功能性和地域性菌種的研究，進(jìn)而提高微生態(tài)制劑的針對(duì)性。如益生菌加入養(yǎng)殖水體可以有效抑制單細(xì)胞藻生長(zhǎng)并削弱其毒性，可被用于藍(lán)藻水華的治理。目前，我國(guó)水污染問(wèn)題日趨嚴(yán)重，應(yīng)盡快篩選出用于水質(zhì)改善的特效微生物菌種;（3）改善益生菌在飼料中的添加技術(shù)，提高其在生產(chǎn)成品中的活性。益生菌的發(fā)酵作用可以促使不易被吸收的藻蛋白被吸收，飼料藻蛋白具有替代魚(yú)粉蛋白的潛力，這對(duì)節(jié)約養(yǎng)殖成本和減少環(huán)境污染都有一定的幫助;（4）加強(qiáng)對(duì)復(fù)合型微生態(tài)制劑的研究，提高益生菌的功能多樣性。不僅如此，還應(yīng)當(dāng)將微生態(tài)制劑與其他生物修復(fù)方法相結(jié)合，如進(jìn)行底泥處理時(shí)，可將厭氧不產(chǎn)氧光合細(xì)菌和大型底棲生物結(jié)合使用;（5）微生態(tài)制劑在前沿科學(xué)中具有很大的發(fā)展?jié)摿?，?yīng)用基因工程技術(shù)將有益菌作為載體，將多種有治療效果或有益的基因?qū)胨拗黧w內(nèi)，成為具備特定功效的工程菌制劑。筆者認(rèn)為這不僅僅可運(yùn)用于水生動(dòng)物，經(jīng)進(jìn)一步的篩選開(kāi)發(fā)，確認(rèn)其安全有效性，在不久將來(lái)也可應(yīng)用于人體;（6）微生態(tài)制劑因其質(zhì)量極微，投放于水體后，可能會(huì)由于水流作用被帶到非作用點(diǎn)導(dǎo)致制劑浪費(fèi)，所以研究微生物固定技術(shù)也是當(dāng)務(wù)之急。當(dāng)前存在如下幾個(gè)丞待解決的難題：①開(kāi)發(fā)允許各種微生物共同生長(zhǎng)繁殖的固定化載體;②當(dāng)前微生物固定化方法主要有吸附法、交聯(lián)法和包埋法3種，其中以包埋法最為常用，但是存在機(jī)械強(qiáng)度低，對(duì)微生物細(xì)胞的損害較大等問(wèn)題[53]，探索更好的包埋方式也是解決問(wèn)題的一個(gè)方向;③高效固定化微生物體系的研究;④固定化微生物反應(yīng)器的開(kāi)發(fā)研究等;（7）安全問(wèn)題是首要且最重要的問(wèn)題，安全體系的建立才能保證微生態(tài)制劑穩(wěn)定發(fā)展。從益生菌的分離、篩選到最終應(yīng)用后的調(diào)查，無(wú)論過(guò)程多么繁瑣，都應(yīng)建立安全評(píng)估體系[14，54-55]?？傊⑸鷳B(tài)制劑具有廣闊的應(yīng)用前景，在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的發(fā)展必將突發(fā)猛進(jìn)，最終能夠緩解抗生素導(dǎo)致的生態(tài)壓力也是水產(chǎn)工作者和研究人員翹首以盼的未來(lái)。

參考文獻(xiàn)

[1]楠迪.應(yīng)用生物電化學(xué)技術(shù)解決水產(chǎn)養(yǎng)殖污染研究[D].大連：大連理工大學(xué)，2020.

[2]張智一.產(chǎn)業(yè)集聚背景下海水魚(yú)類不同養(yǎng)殖模式生態(tài)經(jīng)濟(jì)績(jī)效研究[D].上海：上海海洋大學(xué)，2020.

[3]《2019中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒》[J].世界農(nóng)業(yè)，2020（03）：2-5.

[4]第二次全國(guó)污染源普查公報(bào)[J].環(huán)境保護(hù)，2020，48（18）：8-10.

[5]我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖每年排放近三億立方米廢水[J].現(xiàn)代物業(yè)（上旬刊），2014，13（Z1）：93.

[6]王蕓，鄭宗林.微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].飼料與畜牧，2013（02）：18-24.

[7]Lilly DM，Stillwell RH. Probiotics： Growth-Promoting Factors Produced by Microorganisms[J]. Science，1965，147（3659）：747-748.

[8]Parker R B.Probiotics，the other half of the antimicrobial story[J].Animal Nutrition and Health，1974，29：4-8.

[9]R F. Probiotics in man and animals[J]. The Journal of applied bacteriology，1989，66（5）：365-378.

[10]L V，G R，P S，W V. Probiotic bacteria as biological control agents in aquaculture[J]. Microbiology and molecular biology reviews，2000，64（4）：655-671.

[11]Kozasa M.Toyocerin（Bacillus toyoi） as growth promoter for animal feeding[J].Microbiol Aliment Nutr，1986，4（2）：121-135.

[12]劉強(qiáng)強(qiáng).飼料中添加幾種益生菌和益生元（酵母細(xì)胞壁）對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)及免疫的影響[D].天津：天津農(nóng)學(xué)院，2017.

[13]陳謙，張新雄，趙海，等.用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的微生態(tài)制劑的研究和應(yīng)用進(jìn)展[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2012，18（03）：524-530.

[14]張衛(wèi)芳.EM菌和酵母細(xì)胞壁多糖對(duì)淇河鯽養(yǎng)殖及水質(zhì)的影響[D].新鄉(xiāng)：河南師范大學(xué)，2015.

[15]陽(yáng)桂菊.固定化復(fù)合芽孢桿菌微生態(tài)制劑產(chǎn)品研制[D].大連：大連理工大學(xué)，2016.

[16]劉意康.基于基質(zhì)篩選與微生態(tài)制劑組合的自循環(huán)對(duì)蝦養(yǎng)殖系統(tǒng)的構(gòu)建及運(yùn)行效果[D].青島：青島理工大學(xué)，2018.

[17]蘆士杰.兩種微生態(tài)制劑在海參池塘養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究[D].大連：大連工業(yè)大學(xué)，2018.

[18]席峰，張春曉，魯康樂(lè).不同微生態(tài)制劑對(duì)海月水母生存與生長(zhǎng)的影響[J].飼料研究，2019，42（01）：15-20.

[19]黃愛(ài)華，濮加林.水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用的微生物制劑主要種類、特點(diǎn)及注意事項(xiàng)[J].漁業(yè)致富指南，2015（21），39-41.

[20]蘇晨陽(yáng).海水養(yǎng)殖有益菌微生物的篩選鑒定及應(yīng)用[D].青島：中國(guó)海洋大學(xué)，2015.

[21]徐芯渝.澳洲淡水龍蝦養(yǎng)殖水體的微生物調(diào)控[D].重慶：重慶大學(xué)，2019.

[22]王慧.氨氮降解菌的分離鑒定與復(fù)合菌劑水質(zhì)調(diào)控效果評(píng)價(jià)研究[D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017.

[23]王文君.一株弧菌拮抗菌的鑒定、抑菌特性及應(yīng)用效果的初步研究[D].青島：中國(guó)海洋大學(xué)，2015.

[24]李冰玉，侯雙迪.益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].南方農(nóng)機(jī)，2017，48（14）：160.

[25]吳定心.微生物制劑對(duì)南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖體系微生態(tài)的影響及其與藻類關(guān)系的研究[D].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

[26]楊秀.水產(chǎn)養(yǎng)殖常用微生態(tài)制劑及使用注意事項(xiàng)[J].黑龍江水產(chǎn)，2018（05）：11-12.

[27]郭兆俊，唐玉華.池塘養(yǎng)殖用好生物制劑[J].農(nóng)家顧問(wèn)，2014（10）：48-49.

[28]李雪.微生態(tài)菌對(duì)養(yǎng)漁水體水質(zhì)及微生物群落結(jié)構(gòu)的影響[D].沈陽(yáng)：遼寧大學(xué)，2019.

[29]趙川，羅建軍，陳少華，等.微生物菌種改良篩選新技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 生物技術(shù)通報(bào)，2009（S1）：118-121+135.

[30]孫德文，詹勇，許梓榮.微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].淡水漁業(yè)，2002（03）：54-57.

[31]鄧斌.施氏假單胞菌SC221-M的反硝化特性及其調(diào)節(jié)草魚(yú)養(yǎng)殖水體水質(zhì)的研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2014.

[32]鄭靜芳.復(fù)合菌制劑的研制及其在富營(yíng)養(yǎng)化水中的初步應(yīng)用[D].廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017.

[33]韋成相，雷奇，張福蓉，等.水產(chǎn)養(yǎng)殖復(fù)合微生物制劑中菌群數(shù)量的分析[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，22（05）：41-45.

[34]馮亞利.海洋光合細(xì)菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D].哈爾濱：哈爾濱工業(yè)大學(xué)，2017.

[35]沈濤，劉斯開(kāi)，傅羅琴，等.光合細(xì)菌在魚(yú)類養(yǎng)殖上的應(yīng)用及其作用機(jī)理[J].水產(chǎn)科學(xué)，2012，31（02）：114-118.

[36]吳向華，楊啟銀，劉五星，等.光合細(xì)菌的研究進(jìn)展及其應(yīng)用[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2004（02）：35-38.

[37]王藝雅，張其中.一株光合細(xì)菌的分離鑒定及該菌對(duì)氨氮和亞硝態(tài)氮的去除作用[J].微生物學(xué)通報(bào)，2019，46（10）：2512-2528.

[38]王小娟.不產(chǎn)氧光合細(xì)菌在養(yǎng)殖水體生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)領(lǐng)域的研究進(jìn)展[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，22（04）：40-45.

[39]田啟文.光合細(xì)菌的分離鑒定與發(fā)酵條件優(yōu)化及在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[D].淮安：淮陰工學(xué)院，2020.

[40]唐婷.光合細(xì)菌固態(tài)制劑研究[D].福州：福州大學(xué)，2015.

[41]林東年，葉寧，劉興華，等.光合細(xì)菌對(duì)羅非魚(yú)塘中水質(zhì)和生態(tài)的影響[J].水土保持研究，2007（02）：207-208，212.

[42]王緒峨，孫昭興，劉信藝，等.光合細(xì)菌在扇貝人工育苗中的應(yīng)用[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1994（01）：65-68.

[43]王蘭，廖麗華.光合細(xì)菌的分離鑒定及對(duì)養(yǎng)殖水的凈化研究[J].微生物學(xué)雜志，2004（02）：7-9，37.

[44]孫繼芳，施韜.光合細(xì)菌對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖水質(zhì)和菌藻生物的影響[J].江西水產(chǎn)科技，2019（05）：19-20.

[45]Hargreaves JA. Photosynthetic suspended-growth systems in aquaculture[J]. Aquacultural Engineering，2006，34（3）：344-363.

[46]唐龍.飼料添加光合細(xì)菌對(duì)卵形鯧鲹生長(zhǎng)性能、肝臟、血清指標(biāo)的影響及其各部位蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)[D].南寧：廣西大學(xué)，2014.

[47]方衛(wèi)東，唐旭，何建林，等.光合細(xì)菌FP04的篩選及對(duì)中華鱉養(yǎng)殖水質(zhì)和生產(chǎn)效益的影響[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2012，3（04）：12-16.

[48]楊熹.光合細(xì)菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].農(nóng)民致富之友，2018（04）：241.

[49]Olafsen JA. Interactions between fish larvae and bacteria in marine aquaculture[J]. Aquaculture，2001，200（1-2）：223-247.

[50]劉中，于偉君，劉義新，等.光合細(xì)菌在淡水養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究[J].水產(chǎn)科學(xué)，1995（01）：13-17.

[51]鐔龍，劉建廣，趙冰海，等.光合細(xì)菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].河北農(nóng)機(jī)，2013（06）：79-80.

[52]王夢(mèng)亮，郭小青，梁生康，等.光合細(xì)菌（PSB）對(duì)鯉魚(yú)腸道菌群及腸消化功能的影響[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，1999（03）：20-21.

[53]劉娥.藻菌固定及其凈化水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水的效果研究[D].上海：上海海洋大學(xué)，2017.

[54]郭同旺，周書(shū)洪，鄭守偉，等.幾種常見(jiàn)水產(chǎn)養(yǎng)殖益生菌的應(yīng)用研究現(xiàn)狀及展望[J].鹽科學(xué)與化工，2020，49（11）：3-7.

[55]郭麗蕓，周國(guó)勤，茆健強(qiáng)，等.微生物制劑在養(yǎng)殖水體修復(fù)中的應(yīng)用及展望[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2015，36（07）：36-40.

（責(zé)編：張宏民）