對大腸桿菌快速檢測原料4-甲基傘形酮葡糖酸苷在食品檢測中運用分析

鄒琳

【摘要】文章嘗試將大腸桿菌快速檢測原料4-甲基傘形酮葡糖酸苷應(yīng)用于食品檢測過程當(dāng)中，根據(jù)該原料檢測結(jié)果判定食品樣本的合格情況，并對4-甲基傘形酮葡糖酸苷的自制方法以及應(yīng)用效果進行初步分析，希望能夠引起業(yè)內(nèi)有關(guān)人士的關(guān)注與重視。

【關(guān)鍵詞】食品檢測;大腸桿菌;4-甲基傘形酮葡糖酸苷

1 材料與方法

實驗所需準(zhǔn)備材料與儀器包括：孔徑0.45um標(biāo)準(zhǔn)水相濾膜、胰蛋白酶、真空泵、紫外燈、分析純試劑。同時于本地采購全脫脂牛奶、礦泉水、包裝薯片、方便面以及運動飲料等食品樣本分別30份，樣本選取完全隨機。

用精密天平在無菌操作狀態(tài)下精密稱取25.0g劑量固體食品樣本，放入含255.0ml劑量滅菌生理鹽水中，充分混合均勻并振蕩，振蕩后妥善保存。全脫脂牛奶樣品需提前在25.0℃±2.0℃環(huán)境條件下進行蛋白酶的處理，其他液體食品樣品直接用精密儀器稱取25.0ml劑量，提前于容器中置入為225.0ml劑量滅菌生理鹽水，將振蕩器震蕩參數(shù)調(diào)節(jié)為幅度30.0cm，震蕩時間為7.0s，震蕩次數(shù)為25次，制備形成1：10樣品稀釋液，保存?zhèn)溆谩?/p>

在此基礎(chǔ)之上，根據(jù)食品樣品具體情況取濃度1.0mol/l鹽酸或氫氧化鈉對食品樣本稀釋液酸堿值進行調(diào)節(jié)，用9.0ml劑量滅菌生理鹽水對所制備食品樣本稀釋液進行遞增稀釋，倍數(shù)為10倍，以達到最高稀釋度檢測結(jié)果與陰性終點重合為標(biāo)準(zhǔn)。將滅菌過濾裝置與真空抽濾瓶相連接，底座擺放無菌濾膜并妥善固定，過濾器中加入20.0ml劑量無菌標(biāo)準(zhǔn)水，經(jīng)真空泵進行抽吸過濾操作。選擇不同稀釋度食品樣本的稀釋度，經(jīng)反復(fù)多次過濾后加入15.0ml劑量抽吸水，過濾后將真空泵裝置調(diào)節(jié)至關(guān)閉狀態(tài)，濾膜備用。將經(jīng)過上述處理后的濾膜貼防于經(jīng)干燥處理瓊脂平板表面，確保兩者間無起泡，恒溫培養(yǎng)箱恒溫至35℃～37℃，培養(yǎng)時間為120.0min，紫外燈檢測波長為366nm，觀察濾膜上菌落是否呈藍白色熒光狀態(tài)。在此基礎(chǔ)之上，根據(jù)4-甲基傘形酮葡糖酸苷快速檢測原料對大腸桿菌在食品樣本中的含量進行檢測，選取菌落總數(shù)在25～50個范圍內(nèi)瓊脂平板，對藍白色熒光菌落數(shù)進行匯總，與稀釋倍數(shù)進行處理，以得到待測定樣品中大腸桿菌或者大腸菌群的數(shù)量，單位為cfu/ml或cfu/g。

2 結(jié)果與分析

自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷與品牌4-甲基傘形酮葡糖酸苷在食品樣本中對大腸桿菌數(shù)量的檢測結(jié)果以及食品樣本合格情況評價結(jié)果如下：全脫脂牛奶樣本30份，自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格29份，品牌4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格29份;礦泉水樣本30份，自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格26份，品牌4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格26份;包裝薯片樣本30份，自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格27份，品牌4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格26份;方便面樣本30份，自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格24份，品牌4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格24份;運動飲料樣本30份，自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格26份，品牌4-甲基傘形酮葡糖酸苷檢出合格25份。

以上數(shù)據(jù)顯示：從食品樣本檢測合格情況上來看，自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷與品牌4-甲基傘形酮葡糖酸苷所檢測大腸桿菌數(shù)有良好的一致性，提示為控制成本，提高檢測便捷性，可以嘗試以自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷替代傳統(tǒng)進口品牌4-甲基傘形酮葡糖酸苷。

3 結(jié)束語

4-甲基傘形酮葡糖酸苷作為一種特殊生物顯色劑，可以在大腸桿菌糖苷酶作用下發(fā)生水解反應(yīng)，并產(chǎn)生-4-甲級傘形酮，該物質(zhì)具有極強的熒光顯色屬性，試驗人員可以利用該特性直觀判定食品樣本是否存在大腸桿菌污染情況，在實踐應(yīng)用中表現(xiàn)出了檢測時間短、操作簡單、結(jié)果可靠性高等一系列特征，因而在食品安全檢測領(lǐng)域中得到了相當(dāng)廣泛的應(yīng)用。本次實驗結(jié)果顯示：自制4-甲基傘形酮葡糖酸苷與品牌采購4-甲基傘形酮葡糖酸苷在 應(yīng)用于食品樣本中大腸桿菌快速檢測方面所得到的結(jié)果是高度一致的，雖然該結(jié)果無法應(yīng)用于對4-甲基傘形酮葡糖酸苷性狀、純度以及雜質(zhì)評定中，但有關(guān)食品樣本檢測結(jié)果的應(yīng)用是可行的。未來還需要通過進一步對4-甲基傘形酮葡糖酸苷性狀、雜質(zhì)成分、結(jié)構(gòu)等內(nèi)容的研究，以生成更為系統(tǒng)與全面的數(shù)據(jù)信息。

參考文獻：

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