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    不同品牌和年份普洱茶的主要品質(zhì)成分比較研究

    2021-08-26 10:42:00高熳熳張林奇王曉蕊翁彥如馬立娟杜麗平
    食品研究與開發(fā) 2021年16期
    關(guān)鍵詞:浸出物甲氧基普洱茶

    高熳熳,張林奇,王曉蕊,翁彥如,馬立娟,杜麗平

    (工業(yè)發(fā)酵微生物教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津市工業(yè)微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院,天津 300457)

    普洱茶(熟茶)是黑茶的典型代表之一,是以云南大葉種的曬青毛茶為原料,經(jīng)渥堆發(fā)酵形成的后發(fā)酵茶,因其獨(dú)特的風(fēng)味與其健康的特性備受國(guó)內(nèi)外消費(fèi)者和研究者的關(guān)注[1-2]。普洱茶中的內(nèi)含物質(zhì)在渥堆發(fā)酵過程中經(jīng)濕熱作用及微生物的酶促作用,發(fā)生氧化聚合、轉(zhuǎn)化等反應(yīng),形成了普洱茶醇和回甘的獨(dú)特品質(zhì)[3]。香氣是各種揮發(fā)性、半揮發(fā)性成分以不同濃度組合協(xié)同作用的結(jié)果,給消費(fèi)者帶來的是一種綜合的氣味感知,這種氣味感知難以準(zhǔn)確測(cè)定,但對(duì)茶葉品質(zhì)以及消費(fèi)者的喜好和選擇起著決定性的作用[4]。

    呂海鵬等[5]采用高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)等方法查明普洱茶中的游離氨基酸總量、兒茶素總量、DL-兒茶素、沒食子兒茶素沒食子酸酯、有機(jī)酸總量、檸檬酸和酒石酸等7種化合物的含量水平是影響普洱茶滋味品質(zhì)得分的最主要因素;QIN等[6]通過分析黑曲霉和煙曲霉發(fā)酵系統(tǒng)中普洱茶的茶多酚和嘌呤生物堿含量發(fā)現(xiàn),兒茶素、酯兒茶素和沒食子酸是發(fā)酵過程中的主要中間產(chǎn)物;XIE等[7]研究發(fā)現(xiàn)普洱熟茶茶葉(干重)中茶黃素、茶紅素和茶褐素的含量分別為0.16%~0.29%、0%~0.99%和8.33%~13.65%;XU等[8]采用頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定普洱茶中揮發(fā)性組分發(fā)現(xiàn),醇、甲氧基苯和酮在成熟的普洱茶的特殊風(fēng)味中起著至關(guān)重要的作用;PANG 等[9]發(fā)現(xiàn)芳樟醇、α-紫羅蘭酮、1,2,4-三甲氧基苯、1,2,3-三甲氧基-5-甲基苯、1,2,3,4-四甲氧基苯和1,2,3-三甲氧基苯可用作普洱生茶和普洱熟茶鑒別的潛在氣味活性標(biāo)記。然而目前普洱茶市場(chǎng)有許多品牌,由于生產(chǎn)廠家所處地理環(huán)境與生產(chǎn)原料、工藝的差異,各品牌的普洱茶具有不同的特點(diǎn)。本研究對(duì)3個(gè)品牌、5個(gè)年份的普洱熟茶產(chǎn)品的主要內(nèi)含物質(zhì)與香氣成分進(jìn)行了比較研究,為進(jìn)一步幫助消費(fèi)者了解不同品牌的普洱茶的品質(zhì)提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    普洱茶(2013年~2017年):品牌1(嘜號(hào)7572),品牌 2(嘜號(hào) 7578),品牌 3(嘜號(hào) 0081)。

    沒食子酸(gallic acid,GA)、兒茶素(catechin,C)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)、表兒茶素沒食子酸酯[(-)-epicatechin gallate,ECG]:阿拉丁試劑(上海)有限公司;福林酚:天津大茂化學(xué)試劑廠;濃硫酸(優(yōu)先級(jí))、冰乙酸、苯酚、葡萄糖:北京化工廠;正丁醇、甲醇:天津市化學(xué)試劑一廠;草酸:天津市化學(xué)試劑批發(fā)公司;碳酸氫鈉、無水碳酸鈉、乙腈(色譜純):天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠;無水乙醇(色譜級(jí)):天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所;其他試劑均為分析純。1,2,3-三甲氧基苯、1,2-二甲氧基苯、1,2,4-三甲氧基苯(色譜級(jí)):美國(guó)sigma公司;3,4-二甲氧基苯(色譜級(jí)):TCI(上海)化成工業(yè)發(fā)展有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    FA2004型電子天平:上海精科科學(xué)儀器有限公司;UV-1200型紫外可見分光光度計(jì):上海美譜儀器有限公司;5804R型高速離心機(jī):eppendorf公司;H1650-W型臺(tái)式高速離心機(jī):湖南湘儀試驗(yàn)儀器有限公司;DH-204型電熱恒溫干燥箱:天津市中環(huán)試驗(yàn)電路有限公司;Hei-VAP Value Digital型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:德國(guó)海道夫公司;1260型高效液相色譜儀、7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS):美國(guó)Agilent公司;75 μm CAR/PDMS萃取頭、手動(dòng)固相微萃取進(jìn)樣器:美國(guó)Supelco公司;IT-09A5恒溫磁力攪拌器:上海一恒科學(xué)儀器有限公司。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 普洱茶內(nèi)含物質(zhì)分析

    干物質(zhì)含量測(cè)定參照GB/T 8303—2013《茶磨碎試樣的制備及其干物質(zhì)含量測(cè)定》[10];水浸出物測(cè)定參照GB/T 8305—2013《茶水浸出物測(cè)定》[11];茶多酚和沒食子酸含量的測(cè)定參照GB/T 8313—2018《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法》[12];茶多糖含量的測(cè)定采用苯酚-硫酸法[13];茶褐素測(cè)定采用系統(tǒng)分析法[14]。

    1.3.2 普洱茶揮發(fā)性化合物分析

    1.3.2.1 頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用(headspace solid phase microextraction gas chromatography mass spectrometry,HS-SPME-GC-MS)條件

    HS-SPME條件:稱取2.00 g茶樣置于20 mL頂空瓶中,樣品瓶置于70℃水浴中、400 r/min條件下平衡10 min后,插入75 μm CAR/PDMS萃取頭,萃取50 min取出固相微萃取儀插入GC-MS進(jìn)樣口250℃解吸附5 min。

    GC 條件:HP-5MS(60 m×0.32 mm×0.25 μm)石英毛細(xì)管柱;進(jìn)樣口溫度250℃,載氣為高純氦氣>99.999%,流速0.8 mL/min;不分流進(jìn)樣;色譜柱升溫程序:初始溫度40℃,保持3min,以4℃/min升至150℃,保持1min,以8℃/min升至250℃,運(yùn)行時(shí)間為51.17min。

    MS條件:離子源為EI源,離子源溫度230℃,電離能量70 eV;四極桿溫度150℃;接口溫度280℃;質(zhì)量掃描m/z為35 amu~500 amu。

    1.3.2.2 甲氧基苯類化合物定量分析

    普洱茶樣品中甲氧基苯類化合物的定量分析參照文獻(xiàn)[15]中的方法進(jìn)行。

    1.3.3 數(shù)據(jù)分析

    通過Microsoft Office Excel 2010軟件分析試驗(yàn)數(shù)據(jù),并繪制相關(guān)圖表,均以3次重復(fù)試驗(yàn)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差進(jìn)行結(jié)果分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 普洱茶樣品中干物質(zhì)的含量

    對(duì)15個(gè)普洱茶樣品中干物質(zhì)含量的分析結(jié)果見表1。

    表1 普洱茶樣品中干物質(zhì)的含量Table 1 The content of dry matter in Pu-erh tea samples %

    由表1可知,所有樣品的干物質(zhì)含量均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),同一品牌不同年份的普洱茶樣品間干物質(zhì)的含量比較穩(wěn)定。品牌1樣品中干物質(zhì)含量范圍為91.07%~91.74%,品牌2樣品中干物質(zhì)含量范圍為90.59%~91.49%,品牌3樣品中干物質(zhì)含量范圍為88.82%~89.78%。而不同品牌的普洱茶樣品間干物質(zhì)的含量存在著一定的差異,每個(gè)年份3個(gè)品牌的干物質(zhì)含量依次為品牌1>品牌2>品牌3;品牌1和品牌2中干物質(zhì)含量均大于90%,而品牌3中,干物質(zhì)的含量整體低于90%。

    2.2 普洱茶樣品中水浸出物的含量

    水浸出物指茶葉中能溶于熱水的可溶性物質(zhì)的統(tǒng)稱,包括可溶性糖、氨基酸、茶多酚等多種物質(zhì),其含量的高低顯著影響茶葉的品質(zhì)[16-17]。3個(gè)品牌普洱茶樣品中的水浸出物的含量分析結(jié)果見表2。

    表2 普洱茶樣品中茶水浸出物的含量Table 2 The content of tea extract in Pu-erh tea samples %

    由表2可知,同一品牌不同年份的普洱茶樣品間水浸出物的含量基本穩(wěn)定,而不同品牌的普洱茶樣品間水浸出物的含量存在著一定的差異。15個(gè)普洱茶樣品中水浸出物的含量范圍為20.85%~34.41%,且其中2014年~2016年3個(gè)年份中,茶水浸出物的含量為品牌1>品牌2>品牌3;在2013年和2017年中,茶水浸出物的含量則為品牌2>品牌1>品牌3;品牌1與品牌2的差異不大,而品牌3的水浸出物含量明顯低于品牌1和品牌2。

    2.3 普洱茶樣品中茶多酚的含量

    茶多酚是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,包括黃烷醇類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,占茶葉干質(zhì)量的15%~30%,表現(xiàn)為茶葉的苦澀味,對(duì)茶葉色、香、味的形成有重要作用[18-19]。普洱茶樣品中茶多酚含量的分析結(jié)果見表3。

    表3 普洱茶樣品中茶多酚的含量Table 3 The content of tea polyphenols in Pu-erh tea samples %

    由表3可知,茶多酚含量范圍在6.12%~11.88%之間。品牌1不同年份普洱茶中茶多酚含量較穩(wěn)定,且含量明顯高于品牌2和品牌3;品牌2與品牌3不同年份普洱茶中茶多酚含量不如品牌1穩(wěn)定,其中品牌2中,2015年的普洱茶樣品中茶多酚含量最低(6.85%),2013年的含量最高(8.55%);品牌3中,2014年的普洱茶樣品的茶多酚含量最高為8.24%,2017年的最低(6.12%)。

    2.4 普洱茶樣品中沒食子酸及兒茶素類的含量

    沒食子酸及兒茶素類是茶葉的重要內(nèi)含物質(zhì),其在普洱茶渥堆發(fā)酵過程中發(fā)生了一系列變化[20-21]。本試驗(yàn)對(duì)普洱茶樣品中GA及兒茶素類化合物包括C、EGCG、ECG的含量進(jìn)行了分析,結(jié)果見表4。

    表4 普洱茶樣品中GA、C、EGCG及ECG的含量Table 4 The content of GA,C,EGCG and ECG in Pu-erh tea samples

    由表4可知,普洱茶樣品中沒食子酸的含量范圍為2.39 mg/g~9.79 mg/g,其中品牌1的平均含量大于品牌2和品牌3。兒茶素的含量范圍為0.39 mg/g~0.95 mg/g,3個(gè)品牌的平均含量差別不大;兒茶素沒食子酸酯含量范圍為0.42 mg/g~2.26 mg/g,品牌1的平均含量明顯大于品牌2和品牌3;表兒茶素沒食子酸酯的含量范圍為0.91 mg/g~3.09 mg/g,其中品牌1的平均含量大于品牌2和品牌3。在普洱茶的生產(chǎn)過程中,兒茶素類化合物隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)發(fā)生一系列的氧化作用,此外兒茶素類化合物的氧化衍生會(huì)形成茶色素進(jìn)而使得其含量減少。

    2.5 普洱茶樣品中茶多糖的含量

    茶多糖是一種酸性糖蛋白,是由茶葉中糖類、果膠、蛋白質(zhì)等組成的一類復(fù)合物,其含量的高低與普洱茶的品質(zhì)好壞密切相關(guān)[22]。普洱茶樣品中茶多糖含量的分析結(jié)果見表5。

    表5 普洱茶樣品中茶多糖的含量Table 5 The content of tea polysaccharides in Pu-erh tea samples %

    由表5可知,在所測(cè)普洱茶樣品中,茶多糖的含量范圍為4.91%~8.57%。其中2013年普洱茶中茶多糖含量從高到低依次為品牌1>品牌2>品牌3;2016年和2017年的普洱茶中茶多糖的含量從高到低依次為品牌2>品牌3>品牌1;2015年普洱茶中茶多糖的含量從高到低依次為品牌2>品牌1>品牌3。普洱茶中茶多糖含量的差異可能是由原料的差異導(dǎo)致的。

    2.6 普洱茶樣品中茶褐素的含量

    茶褐素通常被認(rèn)為是茶多酚、茶黃素、茶紅素的氧化聚合產(chǎn)物[23],是造成茶湯發(fā)暗、無收斂性的主要原因,其含量與茶葉品質(zhì)呈負(fù)相關(guān)。表6為普洱茶樣品中茶褐素含量的分析結(jié)果。

    由表6可知,不同品牌的普洱茶樣品間茶褐素的含量存在著一定的差異,在2013年和2014年中,普洱茶中茶褐素的含量依次為品牌2>品牌1>品牌3;2015年~2017年中,普洱茶中茶褐素的含量依次為品牌1>品牌2>品牌3。而同一品牌在不同年份中茶褐素的含量差異也較大,其中品牌1普洱茶樣品中茶褐素的含量最低為10.62%,最高達(dá)到15.78%;品牌2普洱茶樣品中茶褐素的含量最低為10.55%,最高達(dá)到13.51%;品牌3普洱茶樣品中茶褐素的含量最低為9.16%,最高為10.36%,含量差異明顯。

    2.7 普洱茶香氣成分比較

    普洱茶樣品中香氣化合物的類型及含量見圖1。

    圖1 普洱茶樣品中香氣化合物的類型及含量Fig.1 Types and contents of aroma compounds in Pu-erh tea samples

    如圖1所示,采用HS-SPME-GC-MS方法對(duì)2015年的3個(gè)品牌的普洱茶香氣進(jìn)行定性分析,檢測(cè)出的化合物包括醛類、醇類、酮類、甲氧基苯類、碳?xì)漕?、酚類、酯類和含氮類?大類化合物。品牌1的香氣成分中各類物質(zhì)含量分別為醛類6.47%、醇類17.01%、酮類5.03%、甲氧基苯類37.32%、碳?xì)漕?.53%、酚類2.24%、酯類5.57%和含氮類3.63%;品牌2的香氣成分中各類物質(zhì)含量分別為醛類2.34%、醇類12.81%、酮類4.65%、甲氧基苯類37.46%、碳?xì)漕?.58%、酚類1.57%、酯類7.23%和含氮類6.30%;品牌3的香氣成分中各物質(zhì)含量分別為醛類3.78%、醇類10.85%、酮類9.12%、甲氧基苯類32.20%、碳?xì)漕?.96%、酯類8.18%和含氮類6.51%。甲氧基苯類物質(zhì)在3個(gè)品牌普洱茶中的含量均較高,品牌1普洱茶的醛類、醇類和碳?xì)漕惢衔锏南鄬?duì)含量高于其它兩個(gè)品牌的普洱茶,品牌3普洱茶的酮類、酯類和含氮類化合物的相對(duì)含量高于其它兩個(gè)品牌,而甲氧基苯類化合物的相對(duì)含量是最低的。

    普洱茶獨(dú)特的陳香風(fēng)味是其品質(zhì)較好判定的主要因子,也是影響普洱茶市場(chǎng)價(jià)值和消費(fèi)者選擇的決定性指標(biāo),而甲氧基苯類化合物及其衍生物是普洱茶中含量最多的化合物,對(duì)普洱茶的陳香味起主要作用[24]。普洱茶樣品中甲氧基苯的含量分析結(jié)果見表7。

    表7 不同品牌普洱茶樣品中甲氧基苯的含量Table 7 The content of methoxybenzene in Pu-erh tea samples μg/g

    續(xù)表7 不同品牌普洱茶樣品中甲氧基苯的含量Continue table 7 The content of methoxybenzene in Pu-erh tea samples μg/g

    由表7可知,1,2-二甲氧基苯的含量范圍為4.94 μg/g ~14.64 μg/g,3,4-二甲氧基苯的含量范圍為2.30 μg/g ~11.73 μg/g,1,2,3-三甲氧基苯的含量范圍為 8.24 μg/g ~23.38 μg/g,1,2,4-三甲氧基苯的含量范圍為 8.97 μg/g ~26.23 μg/g。在品牌 1 中 2013 年的普洱茶樣品中除3,4-二甲氧基苯外,其余3種物質(zhì)的含量均為最低;在品牌2中2013年的普洱茶樣品中除3,4-二甲氧基苯外,其余3種物質(zhì)的含量均為最高;在品牌3的不同年份中1,2,4-三甲氧基苯的含量均為最高。這可能是由于原料及加工工藝不同造成的。

    3 結(jié)論

    普洱茶的內(nèi)含物質(zhì)和香氣成分是評(píng)價(jià)普洱茶風(fēng)格特征的重要指標(biāo)。本研究對(duì)3個(gè)品牌(分別來自勐海、昆明和普洱產(chǎn)區(qū))、5個(gè)年份普洱茶的內(nèi)含物質(zhì)和香氣成分分析表明,不同品牌普洱茶差異明顯,同一品牌不同年份(除個(gè)別年份外)普洱茶品質(zhì)基本穩(wěn)定。從內(nèi)含物質(zhì)結(jié)果來看,品牌1中的干物質(zhì)含量、茶多酚、表沒食子兒茶素和表兒茶素沒食子酸酯的含量最高;品牌2中的兒茶素含量顯著低于其他兩個(gè)品牌;品牌3的茶水浸出物、沒食子酸和茶褐素的含量較低。從香氣成分結(jié)果來看,共鑒定出醛類、醇類、酮類、甲氧基苯類、碳?xì)漕?、酚類、酯類和含氮類?大類化合物,其中使普洱茶具有陳香特征的甲氧基苯類香氣化合物相對(duì)含量均最高。品牌1的醛類、醇類和碳?xì)浠衔锏南鄬?duì)含量高于其它兩個(gè)品牌的普洱茶,品牌2普洱茶樣品中甲氧基苯類化合物相對(duì)含量最高,品牌1僅次之,品牌3普洱茶的酮類、酯類和含氮化合物的相對(duì)含量是最高的。

    隨著普洱茶消費(fèi)市場(chǎng)的擴(kuò)大,普洱茶的品質(zhì)特征也成為消費(fèi)者關(guān)心的話題,而茶葉的特有品質(zhì)與多種因素有關(guān),本研究對(duì)3個(gè)品牌的普洱茶特征品質(zhì)進(jìn)行了初步研究,有必要對(duì)影響普洱茶品質(zhì)特征的各種因素進(jìn)行深入研究,探明其品質(zhì)形成機(jī)制,進(jìn)而支持普洱茶市場(chǎng)的健康發(fā)展,為消費(fèi)者的選擇提供理論依據(jù)。

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