臭氧聯(lián)合黃連膏封包外敷對(duì)銀屑病患者的臨床療效及其對(duì)皮損處IL-17、IL-22水平的影響

桂俊芳，張怡，李影，鄧文婭，章瑜，蔣裔

(同濟(jì)大學(xué)附屬皮膚病醫(yī)院皮膚科，上海 200443)

銀屑病是一種慢性皮膚病，俗稱“牛皮癬”，主要表現(xiàn)為紅斑鱗屑，以尋常型銀屑病較為常見[1]。該病病程較長，且易復(fù)發(fā)，給許多患者帶來很大煩惱，影響其生活質(zhì)量。該病發(fā)病機(jī)制不清，可能與遺傳、免疫、代謝、精神等相關(guān)，目前無特效藥，如何簡(jiǎn)單快速地控制疾病仍是目前的研究重點(diǎn)[2]。祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為銀屑病屬于“白疕”范疇，起病以血熱為主，多為情志內(nèi)傷、外邪侵襲、血燥失養(yǎng)所致，因而治療應(yīng)以涼血、潤燥、祛風(fēng)為主[3]。黃連膏出自醫(yī)宗金鑒，其主要成分為黃連，具有祛風(fēng)除濕、溫經(jīng)散寒的功效，可治療濕熱諸瘡，被廣泛用于在外科、口腔、兒科等[4]。封包療法是采用薄膜或醫(yī)用輔料等對(duì)患者涂敷藥處進(jìn)行封閉式包裹，以提高皮膚對(duì)藥物的吸收效率[5]。臭氧水則具有殺菌止癢、消炎止痛、促進(jìn)血管形成等作用，毒副作用極少，具有天然、環(huán)保的優(yōu)勢(shì)[6]。本研究采用臭氧聯(lián)合黃連膏封包外敷治療銀屑病，探究其臨床療效，及其對(duì)皮損處白細(xì)胞介素-17(interleukin-17，IL-17)、IL-22的影響，以期為臨床治療銀屑病提供一定的參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2020年1月至2020年8月在同濟(jì)大學(xué)附屬皮膚病醫(yī)院就診的68例銀屑病患者，按照不同的治療方案分成觀察組和對(duì)照組，每組各34例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合銀屑病[7]診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)符合中醫(yī)中“白疕”[8]診斷標(biāo)準(zhǔn)；(3)治療前1個(gè)月內(nèi)未使用過激素、免疫抑制劑等藥物；(4)患者均知情并同意參與本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)伴有嚴(yán)重心、肝、腎功能障礙患者；(2)伴有惡性腫瘤患者；(3)存在其他皮膚病患者；(4)對(duì)本研究藥物過敏患者；(5)因外傷或燙傷等影響皮膚屏障功能患者；(6)妊娠及哺乳期女性。觀察組中，男性18例，女性16例；年齡(31.25±6.28)歲，平均病程(6.32±1.25)年；牛皮癬面積和嚴(yán)重程度指數(shù)(psoriasis area and severity index，PASI)評(píng)分(7.46±5.18)分。對(duì)照組中，男性17例，女性17例；年齡(31.48±6.19)歲；平均病程(6.11±1.06)年；PASI評(píng)分(7.34±5.27)分。兩組患者的一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 對(duì)照組采用消銀膠囊(陜西摩美得制藥有限公司)，5～7粒/次，3次/d，治療1個(gè)月。觀察組采用消銀膠囊與臭氧聯(lián)合黃連膏封包外敷聯(lián)合治療，臭氧水療：采用HZ-2600A臭氧水療儀(陜西凱思特電子科技有限公司)進(jìn)行治療，臭氧水濃度為3～5 mg/L，每次20 min，每日1次。將黃連膏(成分：黃連9 g、當(dāng)歸15 g、黃柏9 g、生地黃30 g、姜黃9 g、麻油360 g、黃蠟120 g)涂于皮損處，并用塑料保鮮膜封包。

1.2.2 皮損處IL-17、IL-22 mRNA水平檢查方法 (1)引物合成：IL-17、IL-22及內(nèi)參β-肌動(dòng)蛋白引物均由上海英駿生物技術(shù)有限公司合成，引物序列如下：IL-22上游引物5’-ACAACACAGACGTTCGTCTCATTG-3’，下游引物5’-GAACAGCACTTCTTCAAGGGTGA-3’，IL-17上游引物5’-CTGTAATGCTGCTGTTGCT-3’，下游引物5’-GGTGTCCCGATAGTCCCT-3’，β-肌動(dòng)蛋白上游引物5’-ATCATGTTTGAGACCTTCAACA-3’，下游引物5’-CATCTCTTGCACGAAGTCCA-3’。(2)總RNA提取及cDNA合成：治療前、后取皮損組織，采用Trizol法提取總RNA，測(cè)定純度并定量后參照試劑盒說明書進(jìn)行cDNA合成，-20 ℃保存。(3)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)反應(yīng)：94 ℃預(yù)變性2 min，94 ℃變性1 min、退火56 ℃ 1min、延伸72 ℃ 1 min，循環(huán)32次，最后72 ℃延伸10 min。PCR產(chǎn)物于1.5%瓊脂糖凝膠電泳后攝像并圖像分析。利用β-肌動(dòng)蛋白作為對(duì)照，采用2-△△t方法計(jì)算IL-17、IL-22 mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

1.2.3 皮膚屏障功能檢查方法 采用Antsci Skin-SP多功能皮膚檢測(cè)儀(Antsci公司)檢測(cè)患者的角質(zhì)層的含水量及油脂含量，分別取頭頸、上肢、軀干、下肢各三處皮損，每處測(cè)量1次，取平均值。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)治療前、后兩組患者皮損程度的PASI評(píng)分[9]。將人體分成頭頸、上肢、軀干、下肢4個(gè)部分，計(jì)算皮損面積(area，A)，再計(jì)算各部分鱗屑(desquamation，D)、浸潤(infiltration，I)、紅斑(erythema，E)的分?jǐn)?shù)，嚴(yán)重程度由無到極重度分別為0、1、2、3、4分，PASI=A頭部×(D頭部+I頭部+E頭部)×0.1+A上肢×(D上肢+I上肢+E上肢)×0.2+A軀干×(D軀干+I軀干+E軀干)×0.3+A下肢×(D下肢+I下肢+E下肢)×0.4。(2)治療前后兩組患者的瘙癢程度，從0～10分別表示無瘙癢～最劇烈的瘙癢[10]。(3)治療前、后兩組患者皮損處的IL-17、IL-22 mRNA表達(dá)水平及皮膚屏障功能。

1.4 療效評(píng)定

(1)療效指數(shù)=(治療前PASI積分-治療后PASI積分)/治療前PASI積分×100%，痊愈：皮損全部消退或療效指數(shù)≥95%；顯效：療效指數(shù)60%～94%；有效：療效指數(shù)為30%～59%；無效：療效指數(shù)<30%。總有效率=痊愈率+顯效率+有效率。(2)安全性評(píng)價(jià)：觀察治療期間，兩組出現(xiàn)不良反應(yīng)的情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床療效比較

治療后，觀察組的總有效率為91.18%，高于對(duì)照組的70.59%(P<0.05)。見表1。

表1 兩組臨床療效比較[n(%)]

2.2 兩組患者PASI評(píng)分及瘙癢程度比較

治療后，兩組患者PASI評(píng)分及瘙癢程度評(píng)分均較治療前降低，且觀察組的上述兩項(xiàng)評(píng)分均低于對(duì)照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組患者PASI評(píng)分及瘙癢程度比較分)

2.3 兩組患者皮損處IL-17、IL-22 mRNA水平比較

治療后，兩組患者皮損處IL-17、IL-22 mRNA水平均較治療前降低，且觀察組的上述兩項(xiàng)指標(biāo)均低于對(duì)照組(P<0.05)。見表3。

表3 兩組患者皮損處IL-17、IL-22mRNA比較

2.4 兩組患者皮膚屏障功能比較

治療后，兩組患者的角質(zhì)層含水量及油脂含量均較治療前高，且觀察組的上述兩項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)均高于對(duì)照組(P<0.05)。見表4。

表4 兩組患者皮膚屏障功能比較

2.5 兩組不良反應(yīng)情況

治療期間，兩組均無明顯不良反應(yīng)出現(xiàn)。

3 討論

銀屑病常給患者身心帶來極大痛苦，需采取有效的治療方式以改善臨床預(yù)后[11]。臭氧是氧的同素異形體，具有抗炎、殺菌的作用，且能夠改善微循環(huán)及患者免疫功能，對(duì)銀屑病有一定療效[12]。中醫(yī)中該病屬于“白疕”，與血熱內(nèi)蘊(yùn)相關(guān)，風(fēng)邪郁于皮膚不宣散，發(fā)為紅斑、丘疹，熱則微癢，需清熱解毒、涼血活血[13]。黃連膏為古方，出自醫(yī)宗金鑒，選用黃連、當(dāng)歸、黃柏、生地黃、姜黃，并用麻油、黃臘作為輔料，能夠清熱利濕，瀉火解毒、活血止癢，對(duì)血熱所致皮膚病有良好功效[14]。

本研究觀察組患者治療后的總有效率為91.18%，高于對(duì)照組的70.59%，且其PASI評(píng)分及瘙癢程度評(píng)分均低于對(duì)照組，說明采用臭氧聯(lián)合黃連膏封包外敷對(duì)銀屑病的療效好，可有效改善患者皮損情況及瘙癢程度。黃連膏中黃連黃柏可清熱燥濕、解毒止痛、收斂生肌，苦寒清熱燥濕，當(dāng)歸可活血生肌、消疲止痛，生地黃清熱涼血，姜黃破血行氣、活血化瘀，麻油生肌止痛，黃蠟收澀斂瘡，全方聯(lián)用具有清熱癤腫、通絡(luò)止痛、潤膚生肌、燥濕消腫之效[15]。采用封包外敷的方式，可提高藥物的經(jīng)皮吸收率。臭氧能夠有效殺滅起病過程中的病原微生物，穿透力強(qiáng)，且能夠抑制炎性反應(yīng)因子，促進(jìn)新陳代謝，改善皮膚血液循環(huán)[16]。兩者聯(lián)用可協(xié)同改善銀屑病患者皮損及瘙癢癥狀。

既往研究[17]表明，以輔助性T細(xì)胞(T helper cells，Th細(xì)胞)介導(dǎo)的免疫反應(yīng)與銀屑病的發(fā)病相關(guān)，IL-17是由Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，在皮膚組織中可刺激角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子，并且IL-17與銀屑病患者的皮損程度密切相關(guān)。IL-22則可抑制角質(zhì)形成細(xì)胞的終末分化，與上皮細(xì)胞分化增殖和遷移相關(guān)，而IL-17與IL-22在促進(jìn)皮膚組織炎癥和損傷方面有一定的協(xié)同作用[18]。本研究治療后，兩組患者皮損處IL-17、IL-22 mRNA水平均較治療前降低，且觀察組均低于對(duì)照組，說明臭氧聯(lián)合黃連膏封包外敷能有效降低銀屑病患者皮損處的IL-17、IL-22表達(dá)水平?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明黃連的主要成分黃連素，具有廣譜抗菌及免疫調(diào)節(jié)作用，黃柏可用于抑制金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌等多種細(xì)菌，當(dāng)歸具有抑制血小板聚集的功效，生地黃具有抗炎、調(diào)節(jié)免疫功能的效果，姜黃能夠有效抗革蘭氏陽性菌活性，四者聯(lián)用可有效抗菌消炎，改善患者免疫水平[19]。臭氧能清除炎癥反應(yīng)中的氧化物質(zhì)，并促進(jìn)白細(xì)胞增殖，從而增加抑制炎性反應(yīng)因子水平，臭氧與黃連兩者聯(lián)合作用，可發(fā)揮抗炎殺菌作用[20]。

銀屑病患者的皮膚屏障功能被破壞，皮損處經(jīng)表皮水分丟失，通常用角質(zhì)層含水量及油脂含量來判斷銀屑病患者皮膚屏障功能[21]。治療后，兩組患者的角質(zhì)層含水量及油脂含量均較治療前高，且觀察組均高于對(duì)照組，說明臭氧聯(lián)合黃連膏封包外敷能有效改善銀屑病患者的皮膚屏障功能。臭氧水療聯(lián)合黃連膏封包外敷能夠增加皮膚抵御微生物的能力，增加角質(zhì)層含水量，從而增加局部皮膚的溫度和濕度[22]。治療期間，兩組均無明顯不良反應(yīng)出現(xiàn)，說明臭氧聯(lián)合黃連膏封包外敷具有較高的安全性。

綜上，臭氧聯(lián)合黃連膏封包外敷治療銀屑病療效顯著，能有效改善患者皮損及瘙癢癥狀，并降低患者皮損處IL-17、IL-22水平，改善患者皮膚屏障功能。