機采血小板中枸櫞酸鈉含量對獻血者血清Ca2+干擾的研究

曾賓，王忠良，張宇達，肖維茹

梅州市中心血站，廣東 梅州 514011

機采血小板在臨床輸血應(yīng)用廣泛，枸櫞酸鹽反應(yīng)是機采血小板獻血者中最常見的獻血反應(yīng)[1]。常規(guī)血液保存液中的枸櫞酸鈉易與游離血清中的Ca2+結(jié)合，形成難于離解的可溶性枸櫞酸鈉鈣螯合物。如果進入體內(nèi)的枸櫞酸鈉過多過快，超過機體骨鈣動員入血以及肝臟代謝能力，則出現(xiàn)枸櫞酸中毒反應(yīng)，表現(xiàn)為獻血者口周及面部麻木、手足抽搐等臨床表現(xiàn)，嚴重時可能出現(xiàn)心律不齊、室顫及心臟停博等。目前機采血小板的相關(guān)研究內(nèi)容主要為血細胞分離機、采集血小板效率影響因素，以及獻血反應(yīng)發(fā)生情況等[2]。本研究觀察了不同含量的枸櫞酸鈉對獻血者血清Ca2+的干擾，以及體質(zhì)量、性別與血清Ca2+干擾率、枸櫞酸鈉中毒反應(yīng)的相關(guān)性，現(xiàn)將結(jié)果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇梅州中心血站2018年3～5月期間男女各100例機采血小板獻血者，均符合《獻血法》中外周指端血血小板(Plt)＞150×109/L的規(guī)定。年齡18～55歲，中位年齡36.5歲。

1.2 標本采集 獻血前和機采血小板后采集靜脈枸櫞酸鈉抗凝血5 mL(抗凝管中枸櫞酸鈉濃度為32.1 g/L)，將采集的全血標本2 000 r/min離心10 min，分離上層血清，每份標本取100μL樣本用于檢測，并在當天完成檢測。

1.3 檢測儀器及試劑 四通道半自動生化分析儀(XD811F)；MCS+增強型多功能血細胞采集儀(美國Haemonetics Corporation)。分析純枸櫞酸鈉(C6H5Na3O7·2H2O)(天津市凱通化學試劑有限公司)。

1.4 檢測方法 采用鄰甲酚酞鉻合酮比色法[3]，用生化分析儀平行兩次檢測血清Ca2+濃度，以均值為定值，將分析純枸櫞酸鈉分別配制成0.037 g/mL、0.073 g/mL、0.15 g/mL、0.37 g/mL、0.55 g/mL、0.73 g/mL的不同濃度的枸櫞酸鈉溶液，將其加入到100μL到已定值的血清中，然后再用生化分析儀平行兩次測定血清Ca2+濃度。采用鄰甲酚酞鉻合酮比色法檢測機采血小板前后的獻血者樣本中的血清Ca2+濃度并計算干擾率，干擾率=加入不同含量枸櫞酸鈉血清Ca2+測定值/不含枸櫞酸鈉血清Ca2+測定值。

1.5 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 枸櫞酸鈉濃度與所檢測血清游離Ca2+濃度干擾率的相關(guān)性 經(jīng)Pearson相關(guān)分析顯示，血清加入枸櫞酸鈉的濃度與血清游離Ca2+的干擾率呈正相關(guān)性(r=0.984，P＜0.05)，見表1和圖1。

圖1 機采血小板獻血者血清中加入不同濃度枸櫞酸鈉與血清游離Ca2+干擾率散點圖

表1 不同濃度的枸櫞酸鈉與檢測血清游離Ca2+的干擾率的關(guān)系

2.2 機采血小板獻血者性別、體質(zhì)量與血清游離Ca2+干擾率的關(guān)系 男性獻血者捐獻機采血小板時，體質(zhì)量60～75 kg組游離Ca2+的干擾率為0.85～0.98時比例明顯高于體質(zhì)量55～59 kg組，女性55～65 kg組相應(yīng)明顯高于50～54 kg組，差異均有統(tǒng)計學意義(χ2=11.490、16.931，P＜0.05)。其中以干擾率為0.52～0.70的女性獻血者中毒比例最高(100%，10/10)，見表2。

表2 機采血小板獻血者性別、體質(zhì)量與血清游離Ca2+干擾率的關(guān)系[例(%)]

2.3 機采血小板獻血者的性別、體質(zhì)量對其血清游離Ca2+干擾率的影響及與獻血者枸櫞酸鈉中毒程度率的關(guān)系 干擾率分別為0.52～0.70、0.70～0.85和0.85～0.98時，本組機采血小板獻血者枸櫞酸鈉中毒率依次為5.5%、23%和1.5%。男性獻血者體質(zhì)量55～59 kg組與60～75 kg組枸櫞酸鈉中毒率分別為21.4%(8/28)、6.94%(5/72)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=8.337，P＜0.05)；女性獻血者體質(zhì)量50～54 kg組與55～65 kg組枸櫞酸鈉中毒率分別為95.8%(23/24)、31.6%(24/76)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=30.231，P＜0.05)。本組單采血小板獻血者的枸櫞酸鈉中毒癥率30.0%(60/200)，其中男性獻血者為6.5%(13/100)、女性獻血者為23.5%(47/100)，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=27.524，P＜0.05)，見表3。

表3 不同性別、體質(zhì)量的機采血小板獻血者與Ca2+干擾率的關(guān)系及枸櫞酸鈉中毒情況[例(%)]

3 討論

目前有關(guān)對機采血小板的研究多涉及的是血細胞分離機本身、獻血者血液因素對采集血小板效率的影響，以及機采血小板獻血者發(fā)生獻血反應(yīng)情況的分析[4-6]。本實驗則對機采血小板過程中，枸櫞酸鈉(抗凝劑)含量對獻血者血清Ca2+干擾率做了研究。枸櫞酸鹽反應(yīng)是機采血小板獻血者中最常見的獻血反應(yīng)，因為常規(guī)血液保存液中的枸櫞酸鈉容易與游離血清中的Ca2+結(jié)合，形成難于離解可溶性枸櫞酸鈉鈣螯合物；當血液保存液中的枸櫞酸鈉隨血液返回獻血者體內(nèi)時，可使其血清Ca2+下降，反饋引起甲狀旁腺分泌甲狀旁腺素動員骨鈣入血能力來維持血清Ca2+濃度[7-8]。如果進入體內(nèi)的枸櫞酸鈉過多過快，超過機體骨鈣動員入血以及肝臟代謝能力，則出現(xiàn)枸櫞酸中毒反應(yīng)，往往表現(xiàn)為口周及面部麻木、手足抽搐等癥狀，嚴重時可能出現(xiàn)心律不齊、室顫及心臟停博等[9-10]。

本組實驗數(shù)據(jù)顯示在所采集、分離的機采血小板獻血者血清中加入的枸櫞酸鈉(濃度)與血清游離Ca2+的干擾率之間呈負的直線相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)，說明枸櫞酸鈉對血清游離Ca2+有負干擾作用。本研究通過對機采血小板獻血者體質(zhì)量與血清游離Ca2+干擾率關(guān)系進行研究發(fā)現(xiàn)：男性獻血者捐獻機采血小板時，體質(zhì)量60～75 kg組游離Ca2+的干擾率為0.85～0.98時比例明顯高于體質(zhì)量55～59 kg組；女性55～65 kg組相應(yīng)高于女性50～54 kg組，說明枸櫞酸鈉對獻血者血清游離Ca2+干擾率隨著獻血者體質(zhì)量的增加而增加。進一步分析了本組機采血小板獻血者枸櫞酸鈉中毒情況與獻血者性別、體質(zhì)量及其對獻血者血清游離Ca2+干擾率關(guān)系影響發(fā)現(xiàn)：(1)有枸櫞酸鈉中毒癥狀的女性獻血者明顯多于男性；(2)較低體質(zhì)量的獻血者枸櫞酸鈉中毒比例較高。究其原因，可能是由于女性獻血者普遍體質(zhì)量較輕，循環(huán)血量少，體內(nèi)的Ca2+水平較低，枸櫞酸鈉代謝能力和骨鈣動員入血能力可能低于男性獻血者，同時女性體質(zhì)量偏輕，身體耐受性亦不及男性，故易出現(xiàn)枸櫞酸鹽中毒反應(yīng)[11]。

基于上述實驗結(jié)果的分析，在篩選機采血小板獻血者時，應(yīng)該科學地依據(jù)獻血者不同個體差異與機采血小板過程中出現(xiàn)的不同情況，從獻血者的實際出發(fā)。例如對低體質(zhì)量獻血者，特別是低體質(zhì)量女性獻血者，可使用預(yù)防性口服鈣劑[12]，同時在機采過程中減慢循環(huán)速率，以有效減少獻血者枸櫞酸鈉中毒反應(yīng)，保護獻血者身體健康，推動無償獻血事業(yè)更好、可持續(xù)發(fā)展。