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    樹莓酒最佳降酸工藝

    2021-06-28 14:20:14吳林生施洪亮尚興榮
    食品工業(yè) 2021年6期
    關(guān)鍵詞:降酸蘋果酸果酒

    吳林生,施洪亮,尚興榮

    合肥師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院(合肥 230601)

    樹莓又稱山莓、覆盆子、托盤等,是一種多年生落葉灌木果樹,其產(chǎn)量高,抗高寒,適應(yīng)性強,對土壤及環(huán)境條件要求低,易于栽培。果實為漿果,柔嫩多汁,風(fēng)味獨特,營養(yǎng)豐富,被賦予“水果之王”“黃金漿果”的美稱[1]。樹莓果實的營養(yǎng)豐富,其中含有大量的維生素及十幾種氨基酸,其中的主要有機酸為檸檬酸和蘋果酸[2]。此外樹莓含有豐富的Fe、Zn等礦物質(zhì)元素,還富含花青素、揮發(fā)油、花青素、酚酸、萜類等營養(yǎng)成分[3],還具有預(yù)防和緩解心腦血管疾病的功效。樹莓可被直接應(yīng)用于各種食品加工業(yè),如加工成果汁、果醬、果酒及凍干果等,還可被開發(fā)應(yīng)用于醫(yī)藥、美容、染料等多個領(lǐng)域。中國在全球范圍內(nèi)成為樹莓產(chǎn)品生產(chǎn)和消費的大國,并且對全球樹莓消費市場產(chǎn)生巨大影響[4]。隨著樹莓的產(chǎn)量不斷增加,樹莓加工品越來越受消費者青睞,但因為樹莓果自身的酸度過高,所以擁有一種能夠?qū)漭七M行降酸且能夠加工出優(yōu)質(zhì)樹莓酒的方法勢在必行。因此,試驗充分利用樹莓的高營養(yǎng)價值,研究樹莓酒的降酸工藝及對其進行優(yōu)化,得到制備高品質(zhì)樹莓酒的降酸工藝。果酒降酸的方法大多是物理降酸法和化學(xué)降酸法,但這2種方法對蘋果酸不起作用,而蘋果酸在果酒有機酸中含量又較高,除此之外這2種方法對果酒品質(zhì)的影響也較大。為避免上述問題,采取生物降酸方法——蘋果酸-乳酸發(fā)酵(MLF)法[5],通過在樹莓酒發(fā)酵過程中接種乳酸菌凍干粉,將其中的蘋果酸轉(zhuǎn)化為乳酸。

    國內(nèi)對果酒的生物降酸研究起步較晚,但已取得諸多進展,如張春暉等[6]對葡萄酒進行MLF降酸;王治同[7]利用裂殖酵母進行生物降酸,釀造全汁越桔干型酒,降酸效果可觀。國內(nèi)外在果酒的釀造工業(yè)上,果酒降酸的方法逐漸從原本的物理、化學(xué)降酸法向生物降酸法轉(zhuǎn)變,如可以進行MLF的乳酸菌[8]。關(guān)于對果酒進行生物降酸這一方面的研究在國外開展較早,早在18世紀國外就大量生產(chǎn)樹莓加工品。在釀造生產(chǎn)紅葡萄酒的過程中利用MLF進行生物降酸[9]。該降酸方法是在乳酸菌作用下,以誘導(dǎo)酶也就是蘋果酸-乳酸酶的催化作用將樹莓酒酒中的L-蘋果酸分解為L-乳酸,并釋放出CO2過程[10-11]。進行MLF的方法有2種,分別是自然誘導(dǎo)與人工接種[12-13]。自然誘導(dǎo)即提供啟動MLF所需要的適宜條件,讓反應(yīng)自發(fā)進行,這其中合適的pH、低濃度SO2、適宜的溫度為主要因素。但即便提供這些反應(yīng)條件,MLF的啟動也非常困難。所以人工接種乳酸菌的方法成為工業(yè)降酸中的常用途徑,相比較自然誘導(dǎo)MLF,人工接種誘導(dǎo)MLF克服發(fā)酵周期長、發(fā)酵不易控制、對環(huán)境條件要求高及對酒質(zhì)可能有負面影響等方面的不足[14]。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    紅樹莓(安徽省藍莓工程中心);果酒酵母、果膠酶、乳酸菌凍干粉(上海鼎唐貿(mào)易有限公司);偏重亞硫酸鉀(國藥集團試劑有限公司);白砂糖(市售,食品級)。

    1.2 儀器與設(shè)備

    發(fā)酵罐(武漢精享達機械設(shè)備有限公司);溫度傳感器(PT100,杭州晨奕儀器儀表有限公司);pH傳感器(JY-PH2.0,廣州佳儀精密儀器有限公司);糖度傳感器(HEEYII,杭州恒儀儀表科技有限公司);酒精濃度計(AR-120ET,深圳市拓宏達科技有限公司);聲光報警器(HAX-B02485,杭興智能科技有限公司);攝像頭(1201D-I3,杭州??低晹?shù)字技術(shù)股份有限公司);網(wǎng)絡(luò)IO控制器(USRIO808,山東有人信息技術(shù)有限公司);云端服務(wù)器(ECS-G5,阿里云云計算有限公司);計算機(天逸510Pro,聯(lián)想集團有限公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 樹莓酒發(fā)酵工藝流程

    1.3.1.1 工藝流程

    冷凍樹莓→解凍→破碎→加入果膠酶→接種酵母菌→調(diào)糖→主發(fā)酵→皮渣分離→理化指標檢測→降酸處理(生物、化學(xué)以及物理降酸)→理化指標測定

    1.3.1.2 流程要點

    原料預(yù)處理。常溫下將冷凍的樹莓解凍,破碎。

    果膠酶的添加。添加果膠酶能夠提高樹莓酒的出汁率,試驗果膠酶添加量50 mg/L,并且在30 ℃條件下酶解2 h。

    調(diào)糖。樹莓打漿后,通過蒽酮比色法對其糖濃度進行檢測,殘?zhí)橇繎?yīng)低于4 g/L。

    主發(fā)酵。26 ℃下發(fā)酵5 d。

    皮渣分離與澄清。取洗凈并且滅菌的紗布(3層),將發(fā)酵后的樹莓酒連同殘渣一起倒入紗布中過濾到新的發(fā)酵罐中。

    蘋果酸-乳酸發(fā)酵。樹莓酒酸度18.65 g/L、總殘?zhí)橇?.3 g/L、花青素質(zhì)量濃度267.29 mg/L、酒精度15.8%vol,添加乳酸菌凍干粉,對樹莓酒進行生物降酸。

    化學(xué)降酸。取300 mL樹莓酒樣分裝至6個三角瓶中備用,分別向其中加入CaCO3、KHCO3、CaCO3·KHCO3聯(lián)合降酸,K2C4H4O6、KHCO3與K2C4H4O6聯(lián)合降酸,以及復(fù)鹽法降酸。重復(fù)3次上述步驟,測得的樹莓酒酸度前后變化取平均值,以減少誤差。

    物理降酸。1)低溫冷凍法,主要是利用冷凍設(shè)備對樹莓酒進行降溫,使酒體中的酒石酸鹽類結(jié)晶沉淀,從而達到降酸的目的,通常可以降低酸度0.5~2.0 g/L不等(以酒石酸計)。2)稀釋法降酸,采用稀釋法降酸對樹莓酒進行處理,在每100 mL樹莓果汁中分別按不同比例添加白砂糖,用玻璃棒攪拌均勻后監(jiān)測pH和酸度的變化。

    生物降酸。利用微生物分解酸,從而達到降酸目的。降酸微生物根據(jù)產(chǎn)物的不同大體可分2種,一是將原有的酸分解成乙醇和二氧化碳,二是將原有的酸分解成更弱的酸和二氧化碳,而被降低的酸主要是蘋果酸。

    1.3.2 單因素試驗及正交試驗

    選擇乳酸菌接種量、降酸溫度、降酸時間為樹莓酒降酸工藝優(yōu)化試驗的單因素,單因素試驗設(shè)計見表1,每種因素水平的設(shè)計見表2,進行3次平行試驗。

    表1 單因素試驗

    表2 正交試驗因素及水平設(shè)計

    1.3.3 理化指標測定方法

    樹莓酒理化指標檢測[15-20]:總酸濃度測定采用酸堿滴定法;殘?zhí)橇繙y定采用斐林試劑滴定法;花青素質(zhì)量濃度測定采用pH示差法;酒精度測定采用酒精計法。

    感官評價:隨機選取20名學(xué)生(男女各10名)通過眼、口、鼻等感覺器官對試驗中釀造的樹莓酒中進行感官評價,主要針對樹莓酒的色澤、香氣、滋味及其典型風(fēng)味等方面進行評價,設(shè)定評定滿分100分,具體標準見表3。

    表3 樹莓酒感官評分標準

    2 結(jié)果與分析

    2.1 MLF(蘋果酸-乳酸發(fā)酵)降酸單因素試驗結(jié)果與分析

    2.1.1 不同乳酸菌接種量的試驗結(jié)果

    乳酸菌接種量6%,降酸溫度22 ℃時,根據(jù)不同的降酸時間,各理化指標的變化如表4和圖1所示。分析可得,乳酸菌接種量在4%~8%內(nèi)逐漸增大時,樹莓酒酸度會隨之逐漸降低,乳酸菌接種量8%時,樹莓果酒的酸度達最小值11.6 g/L;但乳酸菌接種量大于8%時,樹莓酒酸度會隨之增加而升高,可能是因為乳酸菌接種量過高,對蘋果酸-乳酸的轉(zhuǎn)換起到負反饋作用,揮發(fā)酸含量減小,降酸效果反而較差;故乳酸菌接種量8%時,其對樹莓酒的降酸效果最好;乳酸菌接種量10%時,樹莓果酒的色澤紅艷,口感香醇,酒香味濃且酒體穩(wěn)定;乳酸菌接種量對殘?zhí)橇?、酒精度及花青素含量的影響較小。

    表4 不同乳酸菌接種量對殘?zhí)橇?、酒精度、感官評價及花青素的影響

    圖1 乳酸菌接種量對酸度的影響

    2.1.2 不同降酸時間的試驗結(jié)果

    乳酸菌接種量6%、降酸溫度22 ℃時,根據(jù)不同的降酸時間,各理化指標的變化如表5和圖2所示。分析可得,降酸時間2~5 d時,隨著降酸時間增加,酸度會隨之降低,降酸時間5 d時,酸度達最小值12.7 g/L;但降酸時間大于5 d時,酸度會隨之增加而升高,可能是因為降酸時間增大后,一部分乳酸又轉(zhuǎn)化成蘋果酸;故降酸時間5 d時,降酸效果最好;降酸時間5 d時,果酒的色澤紅艷,口感香醇,酒香味濃且酒體穩(wěn)定,可能因為酸度最低且色澤香氣都較佳;殘?zhí)橇繒S著降酸時間增加逐漸降低最終趨于4 g/L,相應(yīng)的酒精度隨之增加,最終趨于12.5%vol;花青素質(zhì)量濃度也會隨著降酸時間增長而逐漸降低。

    表5 不同降酸時間對殘?zhí)橇?、酒精度、感官評價及花青素的影響

    圖2 降酸時間對酸度的影響

    2.1.3 不同溫度的試驗結(jié)果

    降酸時間4 d、乳酸菌接種量6%時,隨著溫度的不同,各理化指標的變化如表6和圖3所示。分析可得,降酸溫度18~24 ℃時,酸度會隨著降酸溫度增加而逐漸降低,降酸溫度24 ℃時,果酒的酸度達最小值12.8 g/L,降酸溫度大于24 ℃時,酸度會隨之增加而升高,可能是溫度過高時,其對蘋果酸-乳酸的轉(zhuǎn)換存在影響,使得降酸效果變差。故降酸溫度24 ℃時,降酸效果最佳,果酒的色澤紅艷,口感香醇,酒香味濃且酒體穩(wěn)定;殘?zhí)橇繒S著降酸溫度的上升而逐漸降低并最終趨于4 g/L,酒精度則大約穩(wěn)定在12%vol;花青素質(zhì)量濃度則會隨著降酸溫度增加而逐漸降低,降低趨勢較為緩慢。

    表6 降酸溫度對殘?zhí)橇?、酒精度、感官評價及花青素的影響

    圖3 降酸溫度對酸度的影響

    2.2 MLF(蘋果酸-乳酸發(fā)酵法)正交試驗結(jié)果與分析

    表9 方差分析表

    由表7和表8可得,RB>RC>RA;FB>F0.05,則p<0.05,說明降酸時間對樹莓酒的色澤、口感以及品質(zhì)的影響達到顯著水平;FC>F0.1,則p>0.1,說明乳酸菌接種量對樹莓酒的色澤、口感及品質(zhì)有一定影響。因此,在各個影響因素中對樹莓酒色澤、口感及品質(zhì)的影響程度依次是降酸時間、乳酸菌接種量、降酸溫度,這與正交試驗分析的結(jié)果一致。

    表7 正交試驗水平

    表8 正交試驗結(jié)果

    3 結(jié)論與討論

    通過化學(xué)降酸法、物理降酸法和生物降酸法3種降酸方法,考察這3種方法對干紅樹莓酒理化指標(糖度、酸度、酒精度、干浸出物)、色度、香氣、口感及穩(wěn)定性的影響,篩選出適合干紅樹莓酒最佳降酸方法及最優(yōu)降酸工藝。在對其進行生物降酸,采取生物降酸法——蘋果酸-乳酸發(fā)酵(MLF)法,降酸菌種為乳酸菌,通過在樹莓酒發(fā)酵過程中接種乳酸菌凍干粉,將其中的蘋果酸轉(zhuǎn)化為乳酸,分別研究乳酸菌接種量、降酸時間及降酸溫度3個因素對樹莓干酒進行生物降酸的影響,以所得樹莓干酒對比原始樹莓干酒的酸度、殘?zhí)橇?、酒精度、花青素含量及對二者的色澤、氣味及滋味進行感官評價。通過試驗研究優(yōu)化樹莓酒降酸工藝,結(jié)果發(fā)現(xiàn)最佳的降酸條件為乳酸菌接種量8%、降酸溫度24 ℃、降酸時間5 d。所得樹莓酒酸度11.6 g/L,殘?zhí)橇?.4 g/L,酒精度11.2%vol,花青素質(zhì)量濃度165.22 mg/L,呈玫瑰紅色,口感香醇,酒香味濃且酒體穩(wěn)定。

    在生物降酸的過程中,仍存在有待解決的問題,如采用先發(fā)酵后降酸的方法,雖然能夠得到更好的降酸效果和精準數(shù)據(jù),但對樹莓酒的品質(zhì)有一些影響;如果采用先降酸后發(fā)酵的方法,在一定程度上可以提高樹莓酒質(zhì)量,但因為其在空氣中長時間暴露,可能會造成酒體被污染,對樹莓酒各項理化指標的分析存在一定影響。上述問題有待后續(xù)深入研究加以解決。

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