BS-100冰點(diǎn)滲透壓測(cè)定儀的性能驗(yàn)證

周杰，冼煒瑩

(深圳大學(xué)總醫(yī)院，廣東 深圳 518055)

0 引言

尿滲透壓是評(píng)價(jià)腎臟濃縮稀釋功能的常見(jiàn)指標(biāo)，在腎臟疾病的診斷和鑒別診斷中具有重要作用。溶液的滲透壓與溶液的冰點(diǎn)下降值成比例關(guān)系，BS-100冰點(diǎn)滲透壓測(cè)定儀是通過(guò)測(cè)量溶液的冰點(diǎn)來(lái)計(jì)算溶液的滲透壓，用來(lái)測(cè)定各種溶液滲透壓的儀器。既往研究中多是討論滲透壓與腎臟疾病關(guān)系[1]，但是滲透壓測(cè)定儀性能驗(yàn)證的討論還罕見(jiàn)報(bào)道，本研究旨在對(duì)BS-100冰點(diǎn)滲透壓儀的性能問(wèn)題進(jìn)行探討，驗(yàn)證其精密度、正確度、參考范圍是否能滿足臨床在尿滲透壓方面的需求。

1 材料與方法

1.1 儀器

BS-100冰點(diǎn)滲透壓測(cè)定儀。

1.2 試劑

1.2.1 校準(zhǔn)品

BS-100冰點(diǎn)滲透壓測(cè)定儀低值定標(biāo)品300mOsm/L(批號(hào)202050801)、高值定標(biāo)品900mOsm/L(批號(hào)2020050802)。

1.2.2 質(zhì)控品

BS-100冰點(diǎn)滲透壓測(cè)定儀提供的兩水平質(zhì)控品，批號(hào)分別為46377、46388。

1.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 精密度驗(yàn)證

依據(jù)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布的衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T492-2016文件《臨床檢驗(yàn)定量測(cè)定項(xiàng)目精密度與正確度性能驗(yàn)證》[2]進(jìn)行精密度驗(yàn)證。選擇兩個(gè)不同濃度的質(zhì)控品，連續(xù)測(cè)定五天，每天一個(gè)分析批，每批兩個(gè)濃度水平，每一個(gè)濃度水平同一樣品重復(fù)測(cè)定三次。如果因?yàn)橘|(zhì)量控制程序或操作問(wèn)題判斷一批為失控，應(yīng)剔除數(shù)據(jù)，并增加執(zhí)行一個(gè)分析批。根據(jù)上述檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，分別計(jì)算總均值、批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差、批間方差、批間標(biāo)準(zhǔn)差、批間變異系數(shù)(CV)，并與廠家聲明的允許誤差進(jìn)行比較。

1.3.2 正確度驗(yàn)證

依據(jù)WS/T 492-2016文件《臨床檢驗(yàn)定量測(cè)定項(xiàng)目精密度與正確度性能驗(yàn)證》[2]進(jìn)行正確度驗(yàn)證。選擇兩個(gè)濃度水平的定標(biāo)品，連續(xù)測(cè)定五天，每天一個(gè)分析批，每批兩個(gè)濃度水平，每一個(gè)濃度水平同一樣品重復(fù)測(cè)定兩次。計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差以及置信區(qū)間，驗(yàn)證靶值是否在置信區(qū)間。

1.3.3 參考區(qū)間驗(yàn)證

依據(jù)WS/T402-2012文件《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》[3]進(jìn)行參考區(qū)間小樣本驗(yàn)證，篩選參考個(gè)體20人，采樣并測(cè)定，測(cè)定值剔除離群值后若不滿20例需補(bǔ)足。將這20個(gè)測(cè)定值與需驗(yàn)證的參考區(qū)間比較，若落在參考限外的測(cè)定值不超過(guò)兩個(gè)，則該參考區(qū)間可直接使用。若超過(guò)2個(gè)以上測(cè)定值超出，則需重新篩選20人，重復(fù)上述操作，若還是不能通過(guò)，則實(shí)驗(yàn)室應(yīng)重新檢查所用的分析程序，考慮是否有人群差異，考慮是否需要自己建立參考區(qū)間。根據(jù)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版[4]，正常人禁飲12小時(shí)后尿滲透壓的參考區(qū)間大于800mOsm/(kg·H2O)[4]，本次參考個(gè)體留樣要求也是嚴(yán)格遵循禁飲12小時(shí)后留取尿液樣本后檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 精密度驗(yàn)證結(jié)果

根據(jù)表1，低濃度水平、高濃度水平質(zhì)控品的批內(nèi)CV分別為0.34%和0.12%，批間CV分別為0.16%和0.09%。CLIA'88允許誤差為20%，批內(nèi)CV均小于CLIA'88的1/4允許誤差；批間CV均小于CLIA'88的1/3允許誤差。同時(shí)與廠家聲明的濃度≤300mOsm/(kg·H2O)時(shí)，基本允許誤差是±4 mOsm/(kg·H2O)；濃度＞300mOsm/(kg·H2O)時(shí)，基本允許誤差是該濃度的±1%，重復(fù)誤差CV≤1.5%相符合。

表1 精密度驗(yàn)證的原始數(shù)據(jù)計(jì)算結(jié)果

2.2 正確度驗(yàn)證結(jié)果

根據(jù)表2，低濃度校準(zhǔn)品共檢測(cè)5批次，均值為301.16mOsm/(kg·H2O)，標(biāo)準(zhǔn)差為1.49，上置信限為302.69mOsm/(kg·H2O)，下置信限為299.63mOsm/(kg·H2O)。該校準(zhǔn)品靶值為300mOsm/(kg·H2O)，95%置信區(qū)間包括靶值。

表2 低濃度校準(zhǔn)品正確度驗(yàn)證原始數(shù)據(jù)

根據(jù)表3，高濃度該校準(zhǔn)品共檢測(cè)5批次，均值為900.09mOsm/(kg·H2O)，標(biāo)準(zhǔn)差為2.43，上置信限為902.59mOsm/(kg·H2O)，下置信限為897.59mOsm/(kg·H2O)。該校準(zhǔn)品靶值為900mOsm/(kg·H2O)，95%置信區(qū)間包括靶值。

表3 高濃度校準(zhǔn)品正確度驗(yàn)證原始數(shù)據(jù)

2.3 參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

根據(jù)20份參考個(gè)體的結(jié)果，驗(yàn)證參考范圍為9012.51-1287.9mOsm/(kg·H2O)?，F(xiàn)行禁飲12小時(shí)后尿的參考范圍為＞800mOsm/(kg·H2O)，20例參考個(gè)體的結(jié)果均在現(xiàn)行參考區(qū)間內(nèi)，因此可判定現(xiàn)行參考范圍有效。

3 討論

滲透壓指的是溶質(zhì)分子通過(guò)半透膜的一種吸水力量，其大小而與溶質(zhì)的分子量、半徑等特性無(wú)關(guān)，由溶質(zhì)顆粒數(shù)目的多少來(lái)決定。近年來(lái)尿滲透壓的臨床應(yīng)用越來(lái)越廣泛，對(duì)多種疾病的診斷治療和預(yù)后具有重要的意義。尿滲透壓又稱尿滲透量、尿滲量，是指腎臟排泄尿內(nèi)全部溶質(zhì)的微?？倲?shù)量，如電解質(zhì)、尿素、糖類、蛋白質(zhì)等。尿滲透壓濃度反映腎臟對(duì)溶質(zhì)和水相對(duì)排泄速度，不受溶質(zhì)顆粒大小和性質(zhì)的影響，只與溶質(zhì)微粒的數(shù)量有關(guān)。正常人尿液滲透 壓 約 為600～1000mOsm/(kg·H2O)，最 大 范 圍 為40～1400 mOsm/(kg·H2O)，正常人禁飲12小時(shí)后尿滲透壓的參考范圍大于800mOsm/(kg·H2O)[4]。腎臟是通過(guò)對(duì)尿液濃縮或稀釋作用來(lái)達(dá)到調(diào)節(jié)體液滲透量的平衡，測(cè)定禁飲12小時(shí)后尿滲透壓能更確切地反映腎臟的濃縮和稀釋功能。目前常用的尿滲透壓測(cè)定的方法為冰點(diǎn)下降法，溶液的冰點(diǎn)下降值與溶質(zhì)滲透壓的摩爾濃度成比例關(guān)系，儀器可通過(guò)測(cè)定溶液的冰點(diǎn)下降值來(lái)計(jì)算溶液的滲透壓。

為提高醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力，中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)在CNAS-CL2012《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》[5]中要求申請(qǐng)認(rèn)可的實(shí)驗(yàn)室，要對(duì)檢驗(yàn)的設(shè)備檢驗(yàn)方法等的主要分析性能進(jìn)行驗(yàn)證，以保證其達(dá)到臨床的要求。在臨床工作中一臺(tái)良好性能的冰點(diǎn)滲透壓測(cè)定儀是正確檢測(cè)溶液滲透壓的重要保障，也是確保滲透壓的分析質(zhì)量的重要前提。本次性能驗(yàn)證中只做了最基本的精密度、正確度和參考范圍三大內(nèi)容。

關(guān)于精密度方面，本次驗(yàn)證過(guò)程體現(xiàn)出該儀器優(yōu)良的精密度，兩個(gè)濃度質(zhì)控品的批內(nèi)CV能做到0.34%和0.12%，結(jié)果的重復(fù)性和再現(xiàn)性非常好。關(guān)于正確度方面，常用的方法有兩種，一是分析具有定值的參考物質(zhì)，二是使用患者樣品來(lái)驗(yàn)證，但是方式二要求有試驗(yàn)方法和比較方法，受限于參考方法的可獲得性，所以本次方案采取了方式一用廠家提供的定標(biāo)品來(lái)做驗(yàn)證，試驗(yàn)結(jié)果也非常理想，經(jīng)過(guò)計(jì)算95%的置信區(qū)間均包括兩個(gè)水平校準(zhǔn)品的靶值濃度。

關(guān)于參考范圍方面，其涉及到臨床的診療方案顯得格外重要。由于廠家沒(méi)有提供相關(guān)參考范圍的數(shù)據(jù)，且滲透壓會(huì)受到飲食飲水的影響，我們實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過(guò)多次與臨床科室的溝通，確立以《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版[4]中提供的資料為標(biāo)準(zhǔn)，確立我們實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)方案為只測(cè)定尿標(biāo)本，以禁飲12小時(shí)后留尿檢測(cè)的滲透壓＞800mOsm/(kg·H2O)作為參考范圍。在本次參考范圍驗(yàn)證中，20例參考個(gè)體的結(jié)果均在現(xiàn)行參考范圍內(nèi)，可判定現(xiàn)行參考范圍有效。

綜上所述，本研究經(jīng)過(guò)對(duì)BS-100冰點(diǎn)滲透壓測(cè)定儀的驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，該儀器的精密度好，正確度高，參考范圍有效，可以判定BS-100冰點(diǎn)滲透壓儀該儀器能基本滿足臨床檢驗(yàn)的要求。但本研究也存在一些不足的地方，性能驗(yàn)證的指標(biāo)還不夠全面，只是做了最基本的精確度、正確度和參考范圍的驗(yàn)證，需要后續(xù)進(jìn)一步的補(bǔ)充研究。