翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子3及白細(xì)胞介素-10聯(lián)合臨床特征預(yù)測(cè)男性肛管內(nèi)尖銳濕疣復(fù)發(fā)的價(jià)值

段寶學(xué), 吳要群

(湖北省襄陽(yáng)市第一人民醫(yī)院 皮膚科, 湖北 襄陽(yáng), 441000)

尖銳濕疣是一種人乳頭瘤病毒(HPV)感染引發(fā)的皮膚黏膜增生性疾病，大多通過(guò)性接觸傳播，多發(fā)于生殖器及肛周部位，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1]。研究[2]顯示，尖銳濕疣的復(fù)發(fā)率高達(dá)30%～70%, 因此如何預(yù)防尖銳濕疣并減少?gòu)?fù)發(fā)是臨床醫(yī)學(xué)較為關(guān)注的課題。目前，研究[3]認(rèn)為，尖銳濕疣的發(fā)生及復(fù)發(fā)與局部細(xì)胞免疫功能低下有關(guān)，其中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)作為一類具有免疫負(fù)性調(diào)節(jié)作用的CD4+T細(xì)胞亞群，可能在尖銳濕疣的復(fù)發(fā)中發(fā)揮了重要的作用。翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子3(Foxp3)是Treg中的特異性轉(zhuǎn)錄因子，可直接反映Treg細(xì)胞功能狀態(tài)，Treg則可以通過(guò)抑制白細(xì)胞介素-10(IL-10)而發(fā)揮感染耐受和免疫抑制的雙重功能[4]。本研究探討Foxp3、IL-10與尖銳濕疣復(fù)發(fā)的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析本院2016年10月—2019年10月收治的160例男性肛管內(nèi)尖銳濕疣患者的臨床資料，按照3個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)情況分為復(fù)發(fā)組98例(肉眼可見疣體在初次治療消除后3個(gè)月內(nèi)在原部位復(fù)現(xiàn))和未復(fù)發(fā)組62例(肉眼可見疣體在初次治療消除后3個(gè)月內(nèi)未復(fù)現(xiàn))。所有患者出院前均進(jìn)行物理治療或免疫治療，疣體消除范圍及深度均較為滿意，調(diào)查期間均進(jìn)行嚴(yán)格的消毒隔離。

納入標(biāo)準(zhǔn): ① 復(fù)發(fā)組患者均符合《尖銳濕疣診療指南(2014)》[5]肛管內(nèi)尖銳濕疣診斷標(biāo)準(zhǔn)，未復(fù)發(fā)組經(jīng)檢查未發(fā)現(xiàn)明顯異常; ② 年齡18～65歲; ③ 復(fù)發(fā)組患者醋酸白實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示為陽(yáng)性[6]; ④ 患者臨床病理資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 心、肝、腎功能檢查存在明顯異常者; ② 隨訪期間仍有性生活者; ③ 非肛管內(nèi)尖銳濕疣患者或因同性性行為致病者; ④ 存在認(rèn)知功能障礙或其他精神性疾病者; ⑤ 女性尖銳濕疣患者或合并梅毒、艾滋病等性行為相關(guān)疾病者; ⑥ 不愿意接受實(shí)驗(yàn)室檢查或不能按時(shí)復(fù)診者。

1.2 研究方法

收集2組患者年齡、病程、治療方案、熬夜史、嗜酒史、吸煙史、人類乳頭瘤病毒-脫氧核糖核酸(HPV-DNA)分型、合并癥、皮損數(shù)量、疣體直徑、安全套使用情況、藥物中斷情況、Foxp3水平、IL-10水平等臨床資料。HPV-DNA分型依據(jù)手術(shù)時(shí)獲取的疣體表面上皮細(xì)胞組織的實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)定位法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷，本研究共檢測(cè)出21種亞型，低危型包括HPV-6、11、42、43、44、81等亞型，高危型包括HPV-16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68等亞型。抽取患者術(shù)后空腹靜脈血檢測(cè)Foxp3、IL-10水平，離心后采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)定位法檢測(cè)Foxp3水平，儀器為美國(guó)Bio-Rad公司生產(chǎn)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)IL-10水平，儀器為日立7060型全自動(dòng)生化分析儀及配套試劑盒。安排患者每隔2周來(lái)院進(jìn)行復(fù)檢，3個(gè)月內(nèi)復(fù)現(xiàn)肉眼可見疣體的患者進(jìn)行病理組織染色檢查，將呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果的患者定義為復(fù)發(fā)。

1.3 觀察指標(biāo)

① 比較2組患者年齡、病程、治療方案、熬夜史、嗜酒史、吸煙史、HPV-DNA分型、合并癥、皮損數(shù)量、疣體直徑、安全套使用情況、藥物中斷情況、Foxp3水平、IL-10水平等臨床指標(biāo)。② 利用受試者工作特征(ROC)曲線分析Foxp3、IL-10水平預(yù)測(cè)尖銳濕疣復(fù)發(fā)的價(jià)值。③ 將2組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的指標(biāo)納入Logistic回歸分析模型，進(jìn)行量化賦值，明確尖銳濕疣復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 尖銳濕疣患者復(fù)發(fā)的影響因素分析

2組年齡、病程、吸煙比率、皮損數(shù)量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05); 復(fù)發(fā)組單純手術(shù)切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型為高危及混合、合并其他性病、疣體直徑≥0.5 cm、藥物中斷患者比率以及Foxp3、IL-10水平高于未復(fù)發(fā)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 尖銳濕疣患者復(fù)發(fā)的影響因素分析

2.2 Foxp3、IL-10預(yù)測(cè)尖銳濕疣復(fù)發(fā)的ROC曲線分析

ROC曲線分析發(fā)現(xiàn), Foxp3、IL-10預(yù)測(cè)尖銳濕疣復(fù)發(fā)的曲線下面積分別為0.881、0.910, 見表2、圖1。

A: Foxp3的預(yù)測(cè)價(jià)值; B: IL-10的預(yù)測(cè)價(jià)值。圖1 Foxp3、IL-10水平預(yù)測(cè)尖銳濕疣復(fù)發(fā)的ROC曲線

表2 Foxp3、IL-10水平預(yù)測(cè)尖銳濕疣復(fù)發(fā)的ROC曲線分析

2.3 尖銳濕疣患者復(fù)發(fā)的多因素Logistic回歸分析

將有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的變量納入Logistic回歸分析模型，并進(jìn)行量化賦值，見表3。Logistic回歸分析顯示, Foxp3≥0.195%、IL-10≥394.210 ng/L、單純手術(shù)切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型為高危及混合、合并其他性病、疣體直徑≥0.5 cm、藥物中斷是尖銳濕疣患者復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素(P<0.05), 見表4。

表3 量化賦值表

表4 尖銳濕疣患者復(fù)發(fā)的多因素Logistic回歸分析

3 討 論

研究[7]報(bào)道，全球每年感染尖銳濕疣病例超過(guò)3 000萬(wàn)，而近10年來(lái)中國(guó)尖銳濕疣的發(fā)病率逐年增長(zhǎng)，約為12.94%, 位居性傳播疾病的第2位。HPV是引發(fā)尖銳濕疣的感染病毒，是一種7 900 bp的環(huán)狀、雙鏈、嗜上皮性的DNA病毒，對(duì)宿主有高度種屬特異性，目前發(fā)現(xiàn)的亞型有200余種[8]。目前，國(guó)內(nèi)治療尖銳濕疣的方法包括局部藥物治療(5%酞丁胺、5%咪喹莫特等)、物理治療(CO2激光、冷凍等)、免疫治療(皮損內(nèi)注射干擾素)，但均存在較易復(fù)發(fā)的情況，因此需要深入研究尖銳濕疣復(fù)發(fā)的高危因素[9]。

本研究結(jié)果顯示，復(fù)發(fā)組單純手術(shù)切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型為高危及混合、合并其他性病、疣體直徑≥0.5 cm、藥物中斷患者比率及Foxp3、IL-10水平高于未復(fù)發(fā)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 提示治療方式、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型、合并癥、疣體直徑、藥物中斷及Foxp3、IL-10水平均可能成為影響尖銳濕疣復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。對(duì)肛周濕疣進(jìn)行普通外科治療干預(yù)時(shí)，臨床通常只會(huì)對(duì)肉眼可見的疣體組織進(jìn)行清除，但對(duì)于亞臨床感染病灶卻難以根治，且既往研究[10]表明濕疣皮損周圍1 cm以內(nèi)皮膚均存在HPV感染風(fēng)險(xiǎn)，即使經(jīng)過(guò)外科干預(yù)，亞臨床型也會(huì)生出新的疣體而導(dǎo)致復(fù)發(fā)。應(yīng)用免疫抑制劑、抗病毒藥物、中藥等可以增強(qiáng)患者術(shù)后免疫力，提高機(jī)體對(duì)HPV的抵抗能力，從而降低復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。劉波等[11]研究表明，熬夜和嗜酒會(huì)影響機(jī)體免疫力，降低機(jī)體對(duì)病毒的抵抗能力，增高尖銳濕疣復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

不同類型的HPV在不同部位可能產(chǎn)生不同的損害，根據(jù)誘發(fā)生殖系統(tǒng)腫瘤的概率通常分為高危型和低危型。本研究顯示，復(fù)發(fā)組多為高危及混合型，可能是因?yàn)楦呶５淖儺悂喰蜁?huì)破壞宿主免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致病毒持續(xù)存在，不僅能引起濕疣反復(fù)發(fā)作，還可能促使良性病變組織轉(zhuǎn)化為惡性。高危和低危合并感染的混合型病毒載量更高，致病能力更強(qiáng)，能更快速地引起病變發(fā)展[12]。合并其他性病時(shí)，患者往往因?yàn)橐研袧耩嗲谐g(shù)而造成誤診，治療時(shí)機(jī)被延誤，而其他性病感染的分泌物溢出并污染原皮損部位，給HPV的滋生創(chuàng)造了有利條件，增高了復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。疣體較大時(shí)，其引起的HPV亞臨床感染越不容易被消除，因而術(shù)后生出新疣體的風(fēng)險(xiǎn)增高，這與蔡光輝等[13]關(guān)于疣體大小影響尖銳濕疣復(fù)發(fā)的相關(guān)描述一致。常用藥物治療方案包括間歇性治療和長(zhǎng)期抑制性治療，通常長(zhǎng)期抑制性治療可減少發(fā)作次數(shù)、加速皮損愈合、抑制HPV排毒，從而減少尖銳濕疣的復(fù)發(fā)。

Treg是細(xì)胞免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞，對(duì)于抑制細(xì)胞介導(dǎo)免疫、發(fā)揮免疫監(jiān)視、免疫穩(wěn)定及免疫防御功能具有重要的作用。當(dāng)機(jī)體受到病毒感染時(shí), Treg會(huì)因?yàn)橐种七^(guò)度免疫反應(yīng)造成組織損傷，同時(shí)在抑制某些病原體感染宿主時(shí)發(fā)揮保護(hù)性免疫反應(yīng)，不利于宿主清除病原體[14]。因此, HPV感染時(shí)誘導(dǎo)機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫，導(dǎo)致系統(tǒng)及局部細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)減弱。Foxp3作為Treg最特異的分子標(biāo)記，其表達(dá)增多可能增強(qiáng)局部微環(huán)境的免疫抑制和耐受狀態(tài)，使局部抗病毒免疫應(yīng)答受到抑制，引起局部細(xì)胞免疫功能缺陷，從而造成HPV持續(xù)性感染[15]。IL-10作為Treg分泌的具有廣泛免疫效應(yīng)的細(xì)胞因子，能抑制單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等釋放促炎因子。研究[16-17]表明，患者感染尖銳濕疣后，其外周血IL-10水平會(huì)顯著增高，激活了免疫反應(yīng)的負(fù)向調(diào)節(jié)，使得機(jī)體對(duì)HPV的特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)受到抑制，增高了患者感染及復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述, Foxp3≥0.195%、IL-10≥394.210 ng/L、單純手術(shù)切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型為高危及混合、合并其他性病、疣體直徑≥0.5 cm、藥物中斷是尖銳濕疣患者復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素，需引起臨床醫(yī)師的早期關(guān)注，并盡早實(shí)施對(duì)癥干預(yù)。