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    濰坊市無償獻血人群HTLV 感染情況分析

    2021-05-28 07:04:24楊紅霞王廣成張慶武顏明雙李青璇
    中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè) 2021年6期
    關(guān)鍵詞:初篩濰坊市獻血者

    楊紅霞 ,王廣成 ,張慶武 ,顏明雙 ,李青璇

    1.濰坊市中心血站,山東濰坊 261041;2.濰坊市腫瘤醫(yī)院,山東濰坊 261000

    人類嗜T 淋巴細胞病毒(human T-lymphtropic virus,HTLV)是最早由美國 Poiesz BJ 等[1]和日本 Miyoshi I 等[2]發(fā)現(xiàn)的1 種人類逆轉(zhuǎn)錄病毒,HTLV-1 可感染CD4+淋巴細胞,與癌癥相關(guān)的一種逆轉(zhuǎn)錄病毒。 傳播途徑輸血、注射公用針頭、性接觸、器官移植、母體垂直傳播等。 人感染HTLV 后可引起成人T 淋巴細胞白血?。╝dult T-cell leukemia/lymphoma,ATL)、 熱帶痙攣性麻痹癥、 淋巴結(jié)炎、多肌炎、HTLV 相關(guān)性脊髓病等[3]疾病,臨床危害大,有的甚至導(dǎo)致死亡。 現(xiàn)為止沒有發(fā)現(xiàn)HTLV 的特效藥物,或者說沒有HTLV 的疫苗來預(yù)防。 只有切斷傳播途徑才能有效控制HTLV 的傳播。為了解濰坊市無償獻血者HTLV 的感染情況,保證患者輸血的安全性,并可以為全國范圍內(nèi)普查HTLV 提供該地區(qū)的資料,該文把該市篩查2018 月9—12 月10 120 份標本進行分析,現(xiàn)報道如下。

    1 材料與方法

    1.1 研究材料

    隨機抽取2018 年濰坊市符合《獻血者健康檢查要求》無償獻血標本10 120 人份,年齡18~55 周歲,血漿標本進行檢測。

    1.2 試劑與儀器

    由北京萬泰HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體檢測試劑盒, 采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法,試劑批號T20170904B,均在有效期內(nèi),嚴格按照試劑說明書規(guī)定使用。 MICRO STAR 全自動加樣系統(tǒng)(瑞士HAMILTON)進行加樣,F(xiàn)AME 全自動酶免分析儀(瑞士HAMILTON 公司)進行酶免實驗。

    1.3 方法

    對隨機抽取10 120 份樣本進行HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體檢測。 嚴格按照ELISA 試劑盒說明書規(guī)定計算臨界值(Cut-off)值,臨界值=0.18+陰性對照孔 A 均值。樣本 OD值與臨界值(Cut-off)的比值(S/CO)≧1.0 為陽性,<1 為陰性。 初篩為反應(yīng)性標本的9 份標本分離血漿,送往北京臨檢中心用蛋白印記實驗(Western blot)進行確認。剩余血漿凍存-20℃冰箱,每間隔7 d 取出充分融化,重復(fù)進行檢測。 同時隨機抽取200 份陰性標本按陽性的方式,每7 天的間隔期進行檢測。

    表1 抗-HTLV 反應(yīng)性標本檢測信息表

    2 結(jié)果

    無償獻血者的10 120 份標本經(jīng)抗-HTLV-ELISA檢測,結(jié)果反應(yīng)性標本9 份,兩孔復(fù)檢后確定ELISA 法為陽性。 經(jīng)蛋白印記法確認有1 份不確定性,但未出現(xiàn)特異性條帶。 經(jīng)反復(fù)凍融的反應(yīng)性標本有衰減,陰性標本無任何的變化。 見表1。

    3 討論

    在國外流行的地區(qū)為日本、中非、加勒比地區(qū)以及南美洲等[4],超過1 500 萬感染者;我國是自季陽等[5]首次在福建地區(qū)發(fā)現(xiàn)人類嗜T 淋巴細胞病毒存在,之后發(fā)現(xiàn)HTLV 主要是在東南沿海地區(qū),福建省最高[6-9]。 其HTLV 在獻血者的總體流行率為0.024 3%,其中北京2013 年篩查中未檢測出HTLV[10],2002 年天津地區(qū)無償獻血者HTLV 篩查3 509 份樣本檢測1 份陽性,山東地區(qū)分別在關(guān)淑芬等[11]1996 年,Wang.Y 2004—2005 年檢測HTLV 中未檢出陽性標本。從圖表的數(shù)據(jù)觀察到,該市地區(qū)10 120 份標本中檢測出9 份初篩反應(yīng)性標本,經(jīng)臨檢中心確認1 份不確定性,未發(fā)現(xiàn)HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染情況,該地區(qū)屬于低檢出率,符合山東省的HTLV 的檢測情況。

    由于HTLV 致病性較強,輸血是傳播途徑之一,血液篩查HTLV 是有效的控制傳播的措施。 HTLV 的特點是病毒抗原在體內(nèi)很少表達,不能直接大批量檢測,現(xiàn)在采供血機構(gòu)對于HTLV 感染的診斷一般采用抗體檢測,一般采用ELISA,免疫印跡,免疫熒光,化學(xué)發(fā)光法等[12]。國外的很多國家對于HTLV 的感染采取不同的措施,美國,日本將HTLV-I/II 納入獻血者篩查的常規(guī)項目,但是因為檢測成本和獻血者采血困難等問題,只有日本開展HTLV 至今[13]。我國廈門于 2004 年、深圳于 2014 年已對獻血者全面開展HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體檢測[14],其他地區(qū)因為考慮檢測成本,采血困難的問題及地區(qū)不是流行區(qū)域等問題,只是部分篩查檢測,并沒有全部檢測。

    該研究大規(guī)模篩查HTLV 采用國產(chǎn)試劑盒,如北京萬泰試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA),方法局限性敏感性高,特異性差,存在假陽性。實驗過程要注意樣本不能含疊氮鈉(NaN3),以及樣本采集后盡早進行實驗,若不能立即實驗,將標本放入-20℃保存,避免反復(fù)凍融。從表1 中可以分析,HTLV-I 抗體在經(jīng)過一定時間反復(fù)凍融影響實驗結(jié)果。儲存-20℃后第一次檢測率為82.3%,第二次為64.59%(剔除了沒有樣的標本),對于高發(fā)地區(qū)立即檢測標本,或者不能檢測儲存-20℃,可設(shè)置一定的灰區(qū),防止漏檢。對于HTLV 的檢測,該研究初篩可以選擇檢測靈敏度高的試劑,篩選呈反應(yīng)性后標本可以用特異性高些試劑進行復(fù)試檢測,充分利用試劑的靈敏度、特異性,最后進行蛋白印記法(Western Blot)確認,蛋白印記法檢測主要是通過轉(zhuǎn)印技術(shù)將滅活HTLV 病毒粒子產(chǎn)生的特異性蛋白電泳轉(zhuǎn)移到特定載體上,再與檢測血漿進行反應(yīng)。該研究出現(xiàn)的不確定的標本是未出現(xiàn)WB 的特異性條帶,可能是其他的原因造成的。 由于ELISA 實驗的局限性的特點,不可避免地出現(xiàn)初篩反應(yīng)性而確認結(jié)果陰性,可能由于非特異性抗原引起的交叉反應(yīng)。所以要利用實驗方法的特點,起到既能節(jié)約成本,又能保證血液輸血安全的作用。

    國家衛(wèi)健委要求各地區(qū)根據(jù)實際情況制定HTLV篩查策略,該市從病原體不是主流行區(qū)、檢測成本、效益、輸血安全、采血角度綜合分析,可以采?。孩偌訌娙祟愂萒 淋巴細胞病毒HTLV 的知識宣傳,講解HTLV 的知識,傳播途徑,感染后與獻血后的危害。②預(yù)防經(jīng)輸血傳播不僅是對血液進行HTLV 篩查,對血液成分進行白細胞過濾[15],或者存放14 d 以上,也可降低HTLV 的傳播。 ③全部采用了病毒滅活技術(shù)。 ④可以實行初次獻血者采取HTLV 抗體篩查,進一步保證血液的安全,又能節(jié)約成本。

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