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    肇慶地產(chǎn)高要藿香植物學(xué)性狀及總黃酮含量分析

    2021-04-15 03:18:38楊永石邵玲陳小欣林澤純
    關(guān)鍵詞:抗氧化活性總黃酮

    楊永石 邵玲 陳小欣 林澤純

    摘要:【目的】分析高要藿香植株不同部位總黃酮含量及其抗氧化活性差異,評(píng)鑒品種的適生性狀和入藥部位質(zhì)量,為科學(xué)制定高要藿香種植技術(shù)規(guī)程及提升其藥用品質(zhì)提供科學(xué)依據(jù)?!痉椒ā恳?年生高要藿香為研究對(duì)象,觀察并記錄植株根、莖、葉等主要營(yíng)養(yǎng)器官的植物學(xué)形態(tài)特性;測(cè)定不同葉齡和年份莖段、不同營(yíng)養(yǎng)器官的含水量、總黃酮含量及對(duì)DPPH自由基(DPPH·)的清除能力,綜合分析其各部位的入藥品質(zhì)?!窘Y(jié)果】高要藿香的莖分為直立莖和匍匐莖,通常第4~10節(jié)的節(jié)部氣生根或根凸明顯;主莖匍匐,被栓皮,皮孔密集;直立莖節(jié)部的對(duì)生葉、腋芽和氣生根三者一般協(xié)同生長(zhǎng)。全葉被密集細(xì)絨狀表皮毛或腺毛,部分匍匐莖長(zhǎng)有1~2條大于90o分支的直立莖,植株叢生狀。不同葉齡含水量為嫩葉>成熟葉>老葉,不同年份莖段含水量為1年生莖段>2年生莖段>3年生莖段,植株各營(yíng)養(yǎng)器官含水量依次為葉>莖>根。高要藿香植株各部位均含有黃酮類(lèi)化合物,各部位的總黃酮含量分別為嫩葉>成熟葉>老葉>1年生莖段>2年生莖段>3年生莖段>根。其中,葉部的總黃酮含量達(dá)6.86±0.034 mg/g,為根的8.07倍和莖的2.36倍。植株葉和莖對(duì)DPPH·的清除率分別為90.71%和37.53%,而根僅為15.61%,表明廣藿香植株的抗氧化活性表現(xiàn)為葉>莖>根?!窘Y(jié)論】肇慶高要藿香的植物學(xué)特性更有利于其繁茂生長(zhǎng)。根據(jù)植株不同葉齡和年份莖段的總黃酮含量及抗氧化活性差異,高要藿香的入藥部位以葉為優(yōu),莖次之,根最差。結(jié)合廣藿香以全草或地上部分采收的傳統(tǒng),建議以采收當(dāng)年種植的植株較合適,同時(shí)去除根系和老莖段,取其嫩葉、成熟葉和1年生莖段入藥為宜。

    關(guān)鍵詞: 高要藿香;植物學(xué)性狀;總黃酮;抗氧化活性;入藥部位

    中圖分類(lèi)號(hào): S567.239? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號(hào):2095-1191(2021)12-3446-08

    Botanical characteristics and total flavonoids content of Pogostemon cablin(Blanco) Benth. ‘Gaoyaoensis

    produced in Zhaoqing

    YANG Yong-shi, SHAO Ling*, CHEN Xiao-xin, LIN Ze-chun

    (School of Life Sciences, Zhaoqing University, Zhaoqing, Guangdong? 526061, China)

    Abstract:【Objective】The differences in the total flavonoid content and antioxidant activity of different parts of Pogostemon cablin(Blanco)Benth. ‘Gaoyaoensis were analyzed. And the suitable traits and the quality of the medicinal parts were evaluated to provide scientific basis for scientifically formulating the planting technical regulations of P. cablin and improving the medicinal quality. 【Method】Taking the three-year-old P. cablin as the research object, observed and recorded the botanical morphological characteristics of roots, stems, leaves and other main vegetative organs. The water content, total flavonoids content and DPPH free radical(DPPH·) scavenging ability in stems and vegetative organs of different leaf ages and years were determined, and the medicinal quality of each part was comprehensively analyzed. 【Result】The stems of P. cablin were divided into erect stems and stolons, usually the 4th to 10th nodes had obvious aerial roots or prominent roots. The main stem was prostrate, corrugated, densely lenticels. The opposing leaves, axillary buds and aerial roots of the upright stem nodes generally grew cooperatively. The whole leaves were densely velvety epidermal hairs or glandular hairs, and some stolons had 1 to 2 upright stems with branches greater than 90°.? The plants were tufted. The water content of different leaf ages was tender leaves>climax leaves>old leaves. The water content of stem segments in different years was annual stems> biennial stems>triennial stems. The order of water content of vegetative organs was leaf> stem>root. All parts of P. cablin contained flavonoids. The total flavonoids of each part of the plant was tender leaves>climax leaves>old leaves>annual stems>biennial stems>triennial stems>roots. The total flavonoids in leaves was 6.86±0.04 mg/g, which was 8.07 times as that of roots and 2.36 times as that of stems respectively. The DPPH·scavenging rates of leaves and stems were 90.71% and 37.53% respectively, while that of roots was only 15.61%. It showed that the antioxidant activity of patchouli was:leaves>stems>roots. 【Conclusion】The botanical characteristics of P. cablin produces in Zhaoqing are more conducive to its lush growth. According to the difference in total flavonoid content and antioxidant activity of stems and leaves are of different leaf ages and years, the medicative part of P. cablin is the best in leaves,stems second,and roots the worst. Combining with the tradition that P. cablin is harvested from whole plant or above ground, it is recommended to harvest the P. cablin planted in the current year, remove the old stems of the root and take the tender leaves, climax leaves and annual stems as medicine.

    Key words: Pogostemon cablin(Blanco) Benth. ‘Gaoyaoensis; botanical characteristics; total flavonoids; antioxidant activity; medicinal parts

    Foundation item: Research and Development Program in Key Areas of Guangdong(2021B0707010010); Serving Rural Revitalization Key Area Special Project of Department of Education of Guangdong(2019KZDZX2011); National College Students Innovation and Entrepreneurship Training Project (202010580008);? Zhaoqing Science and Technology Planning Project (2021N017)

    0 引言

    【研究意義】廣藿香[Pogostemon cablin(Blanco) Benth. ‘Gaoyaoensis]又名刺蕊草、藿香、枝香,唇形科刺蕊草屬多年生草本植物,以干燥地上部分入藥,為2020版《中國(guó)藥典》收載品種。廣藿香原產(chǎn)于菲利賓、馬來(lái)西亞、印度等熱帶氣候國(guó)家,宋朝時(shí)傳入我國(guó),以扦插繁殖栽培為主(馮耀南和劉明,1995),被歷代醫(yī)家視為暑濕時(shí)令之要藥,臨床應(yīng)用廣泛,療效較佳,是著名的道地南藥(羅集鵬等,2005)。廣東栽培的地方品種有石牌藿香牌香、高要藿香肇香和湛江藿香湛香(何國(guó)振等,2012)。廣藿香是多種中成藥的重要組成藥物(羅集鵬等,2005;馬川等,2020),也是新冠肺炎疫情常態(tài)化防控的中藥防治處方成分之一。此外,從廣藿香中提取的廣藿香油可用于配制食品添加劑、口潔劑、化妝護(hù)膚品、定香劑和殺蟲(chóng)劑等(白衛(wèi)東等,2015),在醫(yī)藥和輕化工業(yè)中具有重要作用。因此,深入了解廣藿香的植物學(xué)性狀,探討植株不同部位有效成分含量的差異,可為科學(xué)發(fā)展廣藿香種植業(yè)、合理提升廣藿香飲片質(zhì)量及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前關(guān)于廣藿香的研究主要集中在本草學(xué)的歷史考證(郝近大和謝宗萬(wàn),1994;吳友根等,2007)、全草中藥飲片揮發(fā)油化學(xué)成分的提取鑒別(楊得彼等,2000)及臨床應(yīng)用和藥理藥效研究等方面(張英等,2006;趙思蕾等,2016)。廣藿香因不同產(chǎn)地的自然環(huán)境、種植習(xí)慣不同,其植物學(xué)形態(tài)、藥材商品性狀和品質(zhì)有所差異。羅集鵬和曾梅華(2002)對(duì)不同居群(產(chǎn)地)的石牌藿香和海南藿香開(kāi)展形態(tài)組織學(xué)鑒別研究,篩選出一些可用于鑒別各產(chǎn)地藥材的性狀與組織學(xué)特征。馮承浩(2006)從組織學(xué)角度對(duì)牌香、肇香和湛香的莖葉內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究,結(jié)果表明,肇香莖內(nèi)的機(jī)械組織和葉內(nèi)柵欄組織均比牌香發(fā)達(dá),植株揮發(fā)油相對(duì)含量較高。廣藿香有廣藿香酮、廣藿香醇和廣藿香烯等類(lèi)型,以廣藿香酮為最佳入藥品種(熊耀坤等,2019;高靜等,2020)。廣州和肇慶地產(chǎn)的牌香、肇香為廣藿香酮型(羅集鵬等,2005)。周旭凱等(2020)從廣藿香酮型提取物中分離到20多個(gè)黃酮類(lèi)單體化合物,其中黃酮及黃酮醇類(lèi)化合物占黃酮化合物的50%以上。廣藿香酮具有抗菌活性,是一類(lèi)在自然界植物中廣泛存在的黃酮類(lèi)次生代謝產(chǎn)物(陳文光等,2011),其含量和質(zhì)量受到藥材產(chǎn)地、入藥部位、藥材采收期、提取工藝、炮制工藝等諸多因素的影響,從而導(dǎo)致所含黃酮類(lèi)化學(xué)成分出現(xiàn)差異,影響廣藿香的藥用療效?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前2020版《中國(guó)藥典》和相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)廣藿香用藥部位的記載為全草類(lèi)藥材或以干燥地上部分入藥(及華和李雪艷,2019;國(guó)家藥典委員會(huì),2020),但入藥部位采購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)各異,導(dǎo)致其種植技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程難以統(tǒng)一,影響了廣藿香種植業(yè)質(zhì)量的提升。近年粵港澳大灣區(qū)生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速,廣藿香種植基地向粵中西部遷移,肇慶地區(qū)廣藿香的種植面積逐年遞增,該區(qū)栽培的廣藿香主要為高要藿香肇香,但目前尚未見(jiàn)對(duì)肇香植物學(xué)性狀及各部位黃酮類(lèi)化合物含量差異研究的報(bào)道?!緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以高要藿香肇香的三年生植株為研究對(duì)象,通過(guò)植物學(xué)形態(tài)特性評(píng)鑒品種的適生性狀,并結(jié)合植株不同部位總黃酮含量和抗氧化能力差異,分析其最優(yōu)入藥部位,為科學(xué)制定高要藿香的種植技術(shù)規(guī)程和采收標(biāo)準(zhǔn)及提升其藥用品質(zhì)提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1. 1 試驗(yàn)材料

    試驗(yàn)于2020年6—10月在肇慶市南藥種植與資源利用生物工程技術(shù)中心進(jìn)行。高要藿香肇香取自廣東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)園(肇慶市高要區(qū)南藥產(chǎn)業(yè)園),由肇慶學(xué)院植物學(xué)教研室陳雄偉教授鑒定。取地生3年的全株,洗凈晾干,剪取根系、1年生莖段、2年生莖段、3年生莖段、嫩葉(形態(tài)學(xué)莖上端第2和第3對(duì)葉)、成熟葉、老葉等部位作為試驗(yàn)材料。蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自四川省維克奇生物科技有限公司,所用化學(xué)試劑均為分析純。

    1. 2 試驗(yàn)方法

    1. 2. 1 高要藿香植物學(xué)性狀及各部位含水量測(cè)定

    隨機(jī)選樣,觀察并記錄高要藿香3年生植株根、莖、葉等主要營(yíng)養(yǎng)器官的表觀形態(tài)特性。參考謝胤等(2021)的方法測(cè)定含水量,用JA2003型電子天平(上海精科儀器有限公司)稱(chēng)量廣藿香植株各部位鮮重(g),然后置于DHG-9145A型電熱鼓風(fēng)干燥箱(上海一恒科學(xué)儀器有限公司),50 ℃烘干至恒重,記錄此時(shí)廣藿香各部位干燥后的質(zhì)量,即為干重(g),計(jì)算含水量:含水量(%)=(鮮重-干重)/鮮重×100。樣品再用XT-350型粉碎機(jī)(浙江永康市紅太陽(yáng)機(jī)電有限公司)粉碎,過(guò)40目篩,密封備用。

    1. 2. 2 高要藿香黃酮類(lèi)化合物的定性檢測(cè) 用金屬鋁鹽絡(luò)合反應(yīng)定性檢測(cè)高要藿香的黃酮類(lèi)化合物屬性(馬陶陶等,2008;陳文光等,2011)。取植株各部位的干燥樣品粉1 g,溶于95%乙醇中,經(jīng)KJ-B型超聲波清洗機(jī)(廣州番禺科進(jìn)超聲波設(shè)備廠)超聲提取、過(guò)濾,配制成一定濃度的供試液,先用0.5%亞硝酸鈉0.4 mL還原,再加入1%硝酸鋁溶液0.4 mL絡(luò)合,最后加入0.5%氫氧化鈉溶液4.0 mL,觀察生成的絡(luò)合物顏色,鑒別測(cè)試樣品是否含有黃酮類(lèi)化合物。

    1. 2. 3 高要藿香植株各部位總黃酮含量測(cè)定 參考馬宏芳等(2008)、陳文光等(2011)的方法,以蘆丁為黃酮標(biāo)準(zhǔn)品,用亞硝酸鈉—硝酸鋁—?dú)溲趸c比色法測(cè)定樣品總黃酮含量。分別稱(chēng)取高要藿香的嫩葉、成熟葉、老葉、1年生莖段、2年生莖段、3年生莖段、根、莖(各年份莖段等量混合)和葉(3種葉齡等量混合)的干燥粉末各1.0 g,置于具塞錐形瓶中,加入95%乙醇溶液20 mL,用B-5200 DTD型超聲波清洗儀(寧波新芝生物科技股份有限公司)70 ℃超聲處理30 min,提取液經(jīng)過(guò)濾即為待測(cè)樣液。各樣液用95%乙醇定容至50 mL,密封,置于4 ℃冰箱中避光備用。按照制備標(biāo)準(zhǔn)曲線的反應(yīng)流程,分別量取適量待測(cè)樣液,在510 nm處測(cè)定反應(yīng)體系的吸光值,以蘆丁標(biāo)曲為依據(jù),計(jì)算廣藿香植株各部位的總黃酮含量??傸S酮含量(mg/g)=樣液中總黃酮濃度×提取液定容體積×稀釋倍數(shù)/稱(chēng)取的樣品質(zhì)量。

    1. 2. 4 高要藿香植株各部位對(duì)DPPH自由基(DPPH·)清除能力的測(cè)定 DPPH·清除能力按照張靈幫等(2019)的方法進(jìn)行測(cè)定。稱(chēng)取純度為98%的1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH·)19.86 mg,用95%乙醇充分溶解,定容至250 mL棕色容量瓶中,濃度為2×10-4 mol/L,避光保存。

    分別稱(chēng)取高要廣藿香各部位干燥粉末1 g置于具塞錐形瓶中,按照上述總黃酮待測(cè)樣液的超聲提取法制備樣品貯備液。然后取各貯備液5 mL,加95%乙醇定容至10 mL,配制成為10000 μg/mL的樣品母液,再用移液槍分別吸取樣品母液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL定容為10 mL,配制成為0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20、1.40 mg/mL的樣品溶液備用。吸取上述各待測(cè)樣液2 mL(以95%乙醇作為對(duì)照),分別置于潔凈試管中,再加入0.2 mmol/L的DPPH·乙醇溶液2 mL,振搖混勻,室溫黑暗放置30 min,待測(cè)樣液與紫紅色的DPPH·乙醇溶液進(jìn)行充分反應(yīng)后,利用DPPH·乙醇溶液特征紫紅色團(tuán)的吸收峰,于波長(zhǎng)517 nm處測(cè)定樣品對(duì)DPPH·紫紅色液的褪色程度,吸光值記為Ax,用95%乙醇作為空白組,測(cè)定吸光值記為A0,計(jì)算DPPH·清除率。DPPH·清除率(%)=[1-(A1-A2)/A0]×100,式中,A0為2 mL DPPH·+2 mL 95%乙醇的吸光值;A1為2 mL DPPH·+2 mL樣品溶液的吸光值;A2為2 mL 95%乙醇+2 mL樣品溶液的吸光值。

    1. 3 統(tǒng)計(jì)分析

    試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù),每個(gè)重復(fù)設(shè)3個(gè)平行組,結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示。用Excel 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)的整理及圖表繪制,使用SPSS Statistics 24.0進(jìn)行數(shù)據(jù)間的差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2. 1 高要藿香的植物學(xué)形態(tài)性狀

    3年生高要藿香植株形態(tài)學(xué)高度約60~90 cm,枝葉茂盛,叢生狀。植株分直立莖和匍匐莖,枝條曲折。主莖為匍匐莖,實(shí)際長(zhǎng)度可達(dá)110~150 cm;直立莖由匍匐莖的節(jié)部分枝,通常第4~10節(jié)的節(jié)部氣生根明顯,近地側(cè)節(jié)間表皮有白色的不定根根凸,量多。莖枝鈍方形,被柔毛,隨著枝齡的增加,枝條各節(jié)段表皮顏色從綠色、紫紅色、黃棕色、土黃色逐漸過(guò)渡,直立莖表皮以紫紅色為主,匍匐莖為土黃色、略帶微綠。匍匐莖粗壯,被栓皮,皺裂明顯,皮孔數(shù)量密集。廣藿香節(jié)間長(zhǎng)達(dá)7~13 cm,莖的橫截面由直立莖的鈍方形逐漸過(guò)渡到匍匐莖的類(lèi)圓形,髓部明顯,白色。莖枝節(jié)部明顯,節(jié)間稍膨大,老枝節(jié)部?jī)蓚?cè)有葉痕。高要藿香葉對(duì)生,腋芽明顯,通常腋芽和對(duì)生葉共同成長(zhǎng),故直立莖枝葉繁茂。葉柄長(zhǎng)1.0~8.2 cm,綠色或紫紅色。葉片較厚,有皺折,葉形橢圓形,葉緣具不規(guī)則鈍齒,葉尖短尖或鈍圓,葉基楔形,葉面色澤濃綠,葉背稍紅紫色,全葉被密集細(xì)絨狀表皮毛或腺毛。成熟葉長(zhǎng)≥10.5 cm,葉寬≥8.5 cm,葉片具特異香氣、味濃。主莖匍匐生長(zhǎng),節(jié)部老葉脫落,部分莖節(jié)長(zhǎng)有1~2條大于90o分支的直立莖,所在的節(jié)部一般生長(zhǎng)有須狀根系,土黃色,有利于直立莖的生長(zhǎng),故植株呈叢生狀。

    2. 2 高要藿香植株各部位含水量的比較

    2. 2. 1 不同葉齡和不同年份莖段的含水量 由圖1-A可看出,高要藿香嫩葉含水量為(82.99±1.67)%、成熟葉為(80.33±0.45)%、老葉為(79.57±0.75)%,不同葉齡含水量依次為嫩葉>成熟葉>老葉。老葉和嫩葉含水量相差3.42%,差異顯著(P<0.05,下同)。圖1-B顯示,植株不同年份莖段的含水量依次為1年生莖段>2年生莖段>3年生莖段。一年生莖段含水量為(77.60±0.38)%,極顯著高于2年和3年生莖段的含水量(P<0.01,下同),2年生莖段與3年生莖段含水量均值相差2.15%,差異不顯著(P>0.05,下同)。

    2. 2. 2 植株各營(yíng)養(yǎng)器官的含水量 由圖2可看出,廣藿香植株各營(yíng)養(yǎng)器官含水量依次為葉>莖>根。葉的含水量為(80.96±0.70)%,莖含水量為(72.71±1.11)%,根含水量為(69.50±0.51)%,三者間含水量差異均達(dá)極顯著水平。

    2. 3 高要藿香黃酮類(lèi)化合物的定性檢測(cè)

    高要藿香植株嫩葉、成熟葉、老葉、1年生莖段、2年生莖段、3年生莖段和根系的1 g干粉末經(jīng)95%乙醇超聲提取后,醇提物經(jīng)金屬鋁鹽絡(luò)合反應(yīng),各樣液均呈現(xiàn)棕紅色,屬于典型的黃酮類(lèi)化合物顯色反應(yīng)(郭亞健等,2002),表明高要藿香植株的不同葉齡、不同年份莖段及根系均含有黃酮類(lèi)化合物(圖3)。

    2. 4 高要藿香植株各部位總黃酮含量的比較

    2. 4. 1 不同葉齡和不同年份莖段的總黃酮含量

    圖4顯示,不同葉齡高要藿香的總黃酮含量依次為嫩葉>成熟葉>老葉,嫩葉的總黃酮含量達(dá)7.68±0.06 mg/g,是成熟葉總黃酮含量6.34±0.02 mg/g的1.21倍;老葉總黃酮含量為5.53±0.02 mg/g;各葉齡間總黃酮含量差異均達(dá)極顯著水平。不同年份高要藿香的總黃酮含量依次為2.72±0.03 mg/g、2.57±0.03 mg/g和1.61±0.03 mg/g,表現(xiàn)為1年生莖段>2年生莖段>3年生莖段,其中3年生莖段的總黃酮含量極顯著低于1年生和2年生莖段,且各年份莖段的總黃酮含量均極顯著低于不同葉齡高要藿香。

    2. 4. 2 植株各營(yíng)養(yǎng)器官的總黃酮含量 由圖5可看出,3年生的高要藿香植株,葉部的總黃酮含量極顯著高于根和莖。根的總黃酮含量為0.85±0.04 mg/g,莖為2.91±0.04 mg/g,葉為6.86±0.04 mg/g,即每1 g廣藿香葉的干燥粉末總黃酮含量分別為根的8.07倍和莖的2.36倍。

    2. 5 高要藿香各部位乙醇提取物對(duì)DPPH·清除率的比較

    2. 5. 1 不同葉齡和不同年份莖段乙醇提取物對(duì)DPPH·的清除率 植物樣品對(duì)DPPH·清除率的大小是評(píng)價(jià)其總抗氧化能力的指標(biāo)(彭長(zhǎng)連等,2000)。由圖6可知,在一定的試驗(yàn)濃度范圍內(nèi),3種葉的樣品質(zhì)量濃度與清除DPPH·的作用呈現(xiàn)一定的正量效關(guān)系。其中,嫩葉的乙醇提取物樣品質(zhì)量濃度在0.20~0.80 mg/mL時(shí),對(duì)DPPH·清除率快速上升并達(dá)到反應(yīng)體系最大值,隨后各濃度的清除率基本維持在90.00%左右。相同測(cè)試體系內(nèi),3種葉樣品質(zhì)量濃度升至1.40 mg/mL時(shí),廣藿香植株嫩葉、成熟葉和老葉對(duì)DPPH·的清除率分別為95.23%、83.07%和59.07%。廣藿香不同年份莖段對(duì)DPPH·的清除率依次為1年生莖段>2年生莖段>3年生莖段;樣品質(zhì)量濃度為1.40 mg/mL時(shí),1年生、2年生和3年生莖段對(duì)DPPH·的清除率分別為46.00%、42.27%和21.61%??梢?jiàn),廣藿香植株中,嫩葉和成熟葉對(duì)DPPH·的清除率在6個(gè)測(cè)試樣品中相對(duì)較高。

    2. 5. 2 植株各營(yíng)養(yǎng)器官對(duì)DPPH·的清除率 由圖7可看出,根、莖、葉營(yíng)養(yǎng)器官中,各樣品醇提物濃度與其對(duì)DPPH·清除率呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系,葉部表現(xiàn)出更強(qiáng)的清除能力。樣品質(zhì)量濃度升高到1.40 mg/mL時(shí),廣藿香植株的葉、莖對(duì)DPPH·的清除率分別為90.71%、37.53%,而根的僅為15.61%,表明廣藿香植株?duì)I養(yǎng)器官的抗氧化活性表現(xiàn)為葉>莖>根。

    3 討論

    中藥材廣藿香是歷版《中國(guó)藥典》的收載品種,具有芳香化濁、開(kāi)胃止嘔、解表消暑的功效,其藥基源植物主要產(chǎn)自嶺南的廣州石牌牌香和肇慶高要肇香(郝近大和謝宗萬(wàn),1994;吳友根等,2007)。近年來(lái)粵港澳大灣區(qū)生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛,廣藿香種植基地快速向粵中西部遷移,肇慶地區(qū)肇香的種植面積逐年遞增,隨著其利用價(jià)值的提高,實(shí)施與藥用采收部位相匹配的規(guī)范化種植技術(shù)更應(yīng)引起重視。高要藿香是廣藿香酮型的藥用地方品種之一,廣藿香酮是廣藿香揮發(fā)油的主要藥用成分。目前已有文獻(xiàn)對(duì)廣藿香植物學(xué)性狀的記載較簡(jiǎn)單,藥典和文獻(xiàn)對(duì)其用藥部位的指引是全草類(lèi)藥材或以干燥地上部分入藥(及華和李雪艷,2019;國(guó)家藥典委員會(huì),2020),遂使各產(chǎn)地飲片廠對(duì)廣藿香原藥材的收購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)并不一致。因此,結(jié)合南藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,有必要準(zhǔn)確認(rèn)識(shí)高要藿香的本草特征和各部位主要有效成分含量,從而科學(xué)指導(dǎo)高要藿香的規(guī)范化種植和合理采收,提高其入藥質(zhì)量。

    高要藿香是多年生草本植物。本研究以3年生植株為研究對(duì)象,能較全面掌握該品種的植物學(xué)形態(tài)特征。2020版《中國(guó)藥典》對(duì)廣藿香原藥材性狀描述為:本品莖略呈方柱形,多分枝,枝條稍曲折,長(zhǎng)30~60 cm,直徑0.2~0.7 cm;表面被柔毛;質(zhì)脆,易折斷,斷面中部有髓;老莖類(lèi)圓柱形,直徑1~1.2 cm,被灰褐色栓皮。經(jīng)鑒定,3年生高要藿香最明顯的特征是莖分為直立莖和匍匐莖;主莖為匍匐莖,發(fā)達(dá)、被栓皮,蔓延地面生長(zhǎng),長(zhǎng)度可達(dá)120~160 cm,栓皮皺裂,皮孔分布密集,有利于主莖呼吸、吸收水分和礦質(zhì)元素等。直立莖由匍匐莖的節(jié)部分枝,并且在匍匐莖近地側(cè)的節(jié)間有大量白色的不定根根凸;同時(shí),直立莖節(jié)部的對(duì)生葉、腋芽和氣生根三者一般協(xié)同生長(zhǎng),導(dǎo)致該位點(diǎn)的生物量變重,最終直立莖觸地生根,又過(guò)渡為匍匐莖。因此,高要藿香植株形態(tài)學(xué)高度一般維持在60~90 cm,叢生狀。高要藿香3種葉齡(嫩葉、成熟葉、老葉)間的含水量差異顯著,葉的含水量高于根和莖,但根的含水量仍達(dá)(69.50±0.50)%??梢?jiàn),植株根莖葉含水量充足,有利于其蔓延和蓬勃生長(zhǎng)。

    廣藿香酮是廣藿香揮發(fā)油的主要藥效成分。羅集鵬等(2003)應(yīng)用GC/MS聯(lián)用技術(shù)比較廣東和海南6個(gè)產(chǎn)地廣藿香的揮發(fā)油成分,結(jié)果表明,牌香和肇香的廣藿香酮含量高于其他產(chǎn)地品種。對(duì)肇香不同采收期的單株含油率及莖、葉中14個(gè)揮發(fā)油主要成分含量的研究表明,肇香中廣藿香酮含量以7月至11月采收最高(羅集鵬等,2000)。中藥材的入藥部位對(duì)其藥效成分含量和質(zhì)量均有直接影響。廣藿香酮提取物主要為黃酮類(lèi)化合物(馬川等,2020),目前檢測(cè)手段以GC/MS聯(lián)用技術(shù)為主。本研究應(yīng)用金屬鋁鹽絡(luò)合反應(yīng),率先定性檢測(cè)高要藿香的醇提物溶液,結(jié)果表明,植株的根莖葉各部位均含有黃酮類(lèi)化合物,顯色反應(yīng)靈敏,濃度顯色清晰,與羅集鵬等(2000)對(duì)肇香莖葉的研究結(jié)果一致。在參考陳文光等(2011)建立的廣藿香總黃酮含量測(cè)定方法的基礎(chǔ)上,應(yīng)用亞硝酸鈉—硝酸鋁—?dú)溲趸c比色法測(cè)定可知,高要藿香各部位總黃酮含量依次為嫩葉>成熟葉>老葉,葉部總黃酮含量均值達(dá)6.86±0.04 mg/g,分別為莖的2.36倍和根的8.07倍??梢?jiàn),高要藿香根莖葉總黃酮含量差異極顯著,3年生莖段和根部的含量極低。廣藿香的黃酮類(lèi)化合物可起到消除人體內(nèi)氧自由基、延緩皮膚衰老的效果,具有較好的抗氧化特性(張麗珍和周之榮,2009;馬川等,2020)。周旭凱等(2020)研究表明,廣藿香揮發(fā)性成分中的油相成分和水溶性成分均具有較好的清除自由基的活性。本研究也采用DPPH·清除法,評(píng)估高要藿香總黃酮的抗氧化活性,發(fā)現(xiàn)各檢測(cè)部位的總黃酮含量與DPPH·清除能力趨勢(shì)相近,清除率分別為嫩葉>成熟葉>老葉>1年生莖段>2年生莖段>3年生莖段>根,揭示各部位的黃酮類(lèi)化合物對(duì)其抗氧化活性起主要貢獻(xiàn)作用。葉部表現(xiàn)出更強(qiáng)的清除能力,當(dāng)質(zhì)量濃度升高到1.40 mg/mL時(shí),廣藿香植株的葉和莖對(duì)DPPH·的清除率分別為90.71%和37.53%,而根的僅為15.61%,進(jìn)一步驗(yàn)證了廣藿香植株的抗氧化活性為葉>莖>根。

    4 結(jié)論

    肇慶高要藿香的植物學(xué)形態(tài)生長(zhǎng)特性,不僅保留了原物種營(yíng)養(yǎng)繁殖的生存策略,更有利于扦插繁殖后的繁茂生長(zhǎng)。根據(jù)植株不同葉齡和年份莖段的總黃酮含量和抗氧化活性差異,肇香的入藥部位以葉為優(yōu),莖次之,根最差,與肇慶產(chǎn)地藿香采收分揀標(biāo)準(zhǔn)相符。結(jié)合廣藿香中藥材以全草或地上部分采收的傳統(tǒng),建議以采收當(dāng)年種植的高要藿香較合適,同時(shí)去除根系和老莖段,取其嫩葉、成熟葉和1年生莖段入藥為宜。

    致謝:嶺南現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科學(xué)與技術(shù)廣東省實(shí)驗(yàn)室肇慶分中心、肇慶市南藥種植與資源利用生物工程技術(shù)中心、華南農(nóng)業(yè)大學(xué)—肇慶學(xué)院服務(wù)鄉(xiāng)村振興共同體、肇慶市高要區(qū)綠福農(nóng)業(yè)種植專(zhuān)業(yè)合作社、肇慶市高要區(qū)可民南藥種植專(zhuān)業(yè)合作社提供科研條件支持;肇慶學(xué)院張譯文老師及黃棋、朱妙珊、溫璽章、曾潔瑩等同學(xué)參與實(shí)驗(yàn)工作。謹(jǐn)此致謝!

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    (責(zé)任編輯 王 暉)

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