對(duì)蒲公英及其相關(guān)產(chǎn)物抗腫瘤作用的研究

史易暖，馬志軍，王曉武

（青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤外科，青海 西寧 810001）

近年來，全球各醫(yī)療機(jī)構(gòu)雖已在癌癥治療中取得了較大的進(jìn)展，但罹患癌癥仍是導(dǎo)致患者死亡的主要原因之一[1]。目前，臨床上主要是采用傳統(tǒng)療法（手術(shù)、放療、化療等）與新療法（靶向療法、免疫療法等）治療癌癥。但是，上述療法均會(huì)對(duì)癌癥患者的機(jī)體產(chǎn)生不良影響，嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量。因此，尋找更為有效且患者更易耐受的抗腫瘤藥物就成為癌癥治療研究的重點(diǎn)課題。近年來，隨著中藥學(xué)研究的不斷深入，中藥在抑制腫瘤進(jìn)展、減少腫瘤切除術(shù)后并發(fā)癥、提高放化療的敏感性、改善癌癥患者機(jī)體的免疫功能及減輕由手術(shù)、放化療所致?lián)p害等方面均起到較大的作用。有研究表明，蒲公英及其相關(guān)產(chǎn)物可有效地抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，提高患者機(jī)體的免疫力[2]。本次研究主要是探討蒲公英及其相關(guān)產(chǎn)物的抗腫瘤作用。

1 蒲公英及其相關(guān)產(chǎn)物可有效地抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡

楊超等[3]在提取蒲公英揮發(fā)油中的有效成分（亞麻酸、棕櫚酸等）后，將其用于抗腫瘤實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示蒲公英中的亞麻酸、棕櫚酸等揮發(fā)油有效成分不僅可使乳腺癌MCF-7 細(xì)胞的排列稀疏、減少細(xì)胞的數(shù)目，還可有效地抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。Xiao Hong Li等[4]的研究發(fā)現(xiàn)，蒲公英提取物（ETM）可顯著降低乳腺癌MDA-MB-231 細(xì)胞的活力，觸發(fā)癌細(xì)胞G2/M 期阻滯，促使癌細(xì)胞的凋亡。該研究還進(jìn)一步證實(shí)了蒲公英提取物可激活3 種內(nèi)源性激活PKR 樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）應(yīng)激相關(guān)信號(hào)通路，增加轉(zhuǎn)錄激活子4（ATF 4）、轉(zhuǎn)錄激活子6（ATF 6）、X- 盒結(jié)合蛋白（XBP 1s）、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白（GRP 78）和CHOP 基因的表達(dá)，促使磷酸化激酶（PERK）、真核起始因子2α（EIF-2α）、IRE1 蛋白的水平升高，增強(qiáng)CHOP 及GRP 78 下游分子的表達(dá)，進(jìn)而為治療三陰性乳腺癌提供了新的思路。Gauhar R 等[5]關(guān)于蒲公英根甲醇提取物對(duì)肝癌細(xì)胞株HepG2 抗增殖活性和細(xì)胞生存力的研究中證實(shí)，濃度為500 μg/ml 的蒲公英根甲醇提取物可顯著降低HepG2 細(xì)胞系的生長(zhǎng)，提高HepG2 細(xì)胞的腺嘌呤核苷酸依賴的蛋白激酶（AMPK）磷酸化水平。因此，MEDr 可提高AMPK 磷酸化水平被認(rèn)為是治療惡性腫瘤及各類代謝性疾病的關(guān)鍵。楊慶華等[6]通過調(diào)控胰腺癌缺失位點(diǎn)4(DPC 4)的研究發(fā)現(xiàn)，ETM 可通過上調(diào)DPC 4 的表達(dá)促進(jìn)大腸癌細(xì)胞株HT-29 的凋亡，抑制癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力，且呈現(xiàn)明顯的濃度依賴性，此機(jī)制可能與ETM 能夠促進(jìn)DPC 4蛋白的表達(dá)有關(guān)。孫玉成等[7]的研究表明，ETM 可通過下調(diào)癌基因Survivin 基因及蛋白的表達(dá)抑制低分化胃癌MKN 45 的惡性增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。Pamela O 等[8]的體外系統(tǒng)研究分析，蒲公英根水提取物（DRE）在幾種癌細(xì)胞模型中均具有抗腫瘤的潛力，而且對(duì)非癌細(xì)胞沒有毒性作用，其作用機(jī)制為DRE 可活化caspase-8 細(xì)胞的死亡途徑。結(jié)腸癌患者在使用DRE 治療后的48 h 內(nèi)，可選擇性地誘導(dǎo)95% 以上的癌細(xì)胞出現(xiàn)程序性死亡，但與p53 信號(hào)通路的狀態(tài)無關(guān)。Zhu H 等[9]的研究發(fā)現(xiàn)，DRE 可通過下調(diào)胃癌細(xì)胞中癌基因lncRNA 結(jié)腸癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子-1（CCAT1）的表達(dá)抑制癌細(xì)胞的增殖及遷移能力。Hui H 等[10]對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901 進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，ETM 對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901 具有抑制增殖及遷移的作用。大量的臨床實(shí)踐證實(shí)，活化的PI3K/AKT/mTOR 通路在乳腺癌、肝癌、結(jié)腸癌、直腸癌等惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中具有重要的作用。Ren F 等[11]的研究表明，蒲公英多糖(DP) 能夠通過抑制PI3K/AKT/mTOR 信號(hào)通路對(duì)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)產(chǎn)生較強(qiáng)的抑制作用，而且在體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的耐受性，故可將其作為治療肝癌（HCC）的一種潛在天然藥物。Ren F 等[11]的研究還發(fā)現(xiàn)，DP 可通過PI3K/AKT 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路降低缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF) 等關(guān)鍵因子調(diào)控肝癌血管生成蛋白的水平。另外，DP 還可通過抑制VEGF 和HIF-1a 的表達(dá)抑制肝癌血管的生成[12]。Chen Qin 等[13]的研究表明，ETM 能夠通過上調(diào)Bax 蛋白的表達(dá)、下調(diào)Blc-2 蛋白的表達(dá)、抑制PI3K/AKT 和STAT3 信號(hào)通路的磷酸化抑制肺癌A549 細(xì)胞的體外增殖能力，進(jìn)而誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡及細(xì)胞S 期周期阻滯。Tung C J 等[14]的研究表明，ETM 可通過抑制細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶的活性控制非小細(xì)胞肺癌(NSCLC) 患者腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移，且呈現(xiàn)出劑量依賴性。ETM 具有較高的抗氧化能力，較強(qiáng)的1，1- 二苯基-2- 苦酰肼(DPPH) 自由基清除能力及鐵螯合能力，對(duì)肺癌有潛在的預(yù)防和治療價(jià)值。Leena T 等[15]在治療慢性粒單核細(xì)胞白血病患者時(shí)使用了DRE，結(jié)果顯示其骨髓成纖維細(xì)胞的計(jì)數(shù)顯著改善，提示DRE 具有抗癌活性。Menke 等[16]研究了ETM 對(duì)成人及兒童腫瘤細(xì)胞的抑制作用，結(jié)果顯示與成人相比，ETM 抑制兒童神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株SH-SY5Y 和Kelly 生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移的能力明顯增強(qiáng)，且破壞線粒體結(jié)構(gòu)的能力更為顯著。

2 蒲公英及其相關(guān)產(chǎn)物可改善患者機(jī)體的免疫功能、增強(qiáng)其對(duì)化療藥物的敏感性

Ding Aiguo 等[17]的研究發(fā)現(xiàn)，蒲公英根的水提取物不僅能夠有效減輕葡聚糖硫酸鈉所致的體重下降、疾病指數(shù)嚴(yán)重程度評(píng)分增加、縮短結(jié)腸的長(zhǎng)度，還可減輕葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸的炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而減輕其發(fā)生進(jìn)行性急性損傷的程度。于新慧等[18]對(duì)蒲公英對(duì)免疫功能低下小鼠機(jī)體的影響進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示，蒲公英可通過提高巨噬細(xì)胞的生成率和生成水平改善其機(jī)體的免疫狀態(tài)，增強(qiáng)和上調(diào)其機(jī)體的免疫能力。Nguyen C 等[19]的研究結(jié)果顯示，蒲公英根提取物具有選擇性的抗癌活性，在免疫功能低下裸鼠的前列腺癌模型中DRE 以時(shí)間和劑量依賴的方式能夠誘導(dǎo)前列腺癌細(xì)胞的凋亡，且對(duì)其正常細(xì)胞無明顯的影響。另外，與單獨(dú)使用化療藥物相比，在化療藥物紫杉醇和米托蒽醌中添加DRE 可增強(qiáng)化療藥物對(duì)癌細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)能力，提示DRE 可能是一種有效的治療前列腺癌的輔助藥物。但是，Michalska K 等[20]的研究表明，ETM 酒石酸及其衍生物對(duì)3 株人黑色素瘤細(xì)胞系(A 375、HTB 140 和WM 793)和人前列腺癌細(xì)胞系(DU1 45)均有細(xì)胞毒活性，同時(shí)對(duì)正常人的正常角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT)、正常前列腺上皮細(xì)胞(PNT-2) 也有強(qiáng)弱不等的細(xì)胞毒活性。TRAIL(TNF 相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體) 是一種選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的抗腫瘤治療靶點(diǎn)。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，ETM 能夠與肝癌Huh7 細(xì)胞結(jié)合，通過TRAIL 途徑誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡，可作為TRAIL 的增敏劑使用[21]。

3 蒲公英樣結(jié)構(gòu)的抗腫瘤特性

腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMS) 的數(shù)量占腫瘤細(xì)胞數(shù)量的50% 以上。TAMS 在腫瘤患者病情的進(jìn)展中起著重要作用。因此，通過調(diào)節(jié)TAMS 極化重建腫瘤免疫微環(huán)境已成為一種前沿的癌癥治療策略，但高間質(zhì)流體的壓力和致密的細(xì)胞外基質(zhì)可導(dǎo)致納米治療出現(xiàn)滲透性不足的缺陷。為了克服這一缺陷，Guo Q 等[22]設(shè)計(jì)了一種新型的具有有效的腫瘤分布、擴(kuò)散和穿透性的納米蒲公英粒子，該粒子可通過體循環(huán)選擇性地聚集在癌癥患者的腫瘤部位，使腫瘤暴露在酸性的微環(huán)境中，并通過崩解增強(qiáng)穿透腫瘤細(xì)胞的能力。另外，納米蒲公英粒子在三陰性乳腺癌的球體3D 模型及動(dòng)物體內(nèi)腫瘤組織中均顯示出較強(qiáng)的穿透性、有效的巨噬細(xì)胞調(diào)節(jié)能力（可增強(qiáng)腫瘤巨噬細(xì)胞的自噬能力），體現(xiàn)出良好的體內(nèi)抗腫瘤活性。Wang B 等[23]的研究篩選出新型的載體材料構(gòu)建成靶向納米膠束——納米蒲公英，并將其應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌A549 荷瘤裸鼠的抑瘤實(shí)驗(yàn)中，結(jié)果顯示粒徑較小、正態(tài)分布良好的納米蒲公英可通過血管屏障進(jìn)入腫瘤組織內(nèi)，可更好地與TAMs 表面的CD 206 受體結(jié)合,通過重編程后TAMs 被成功地轉(zhuǎn)化為殺傷腫瘤型的巨噬細(xì)胞，提高細(xì)胞的攝取能力和細(xì)胞毒性。具有合適表面電位的納米蒲公英還可長(zhǎng)期保持穩(wěn)定，能夠有效地克服腫瘤的耐藥性，且具有有效的抗腫瘤活性和能減輕藥物副作用的特點(diǎn)。

4 小結(jié)

上述研究結(jié)果表明，蒲公英可通過抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)化療藥物的敏感性及調(diào)節(jié)免疫功能等途徑發(fā)揮抗腫瘤作用。目前，對(duì)蒲公英及其相關(guān)產(chǎn)物抗腫瘤效果的研究多局限于基礎(chǔ)藥理機(jī)制方面，而對(duì)其具體有效成分的用法用量并不明確，需對(duì)此進(jìn)行進(jìn)一步的研究，以使其能夠盡早進(jìn)入臨床，為腫瘤治療提供新的方法。