連續(xù)4年施用生物炭對(duì)植煙褐土微生物群落結(jié)構(gòu)的影響

殷全玉, 劉健豪, 劉國(guó)順, 楊欣鈴, 李小福,張玉蘭, 李陽(yáng), 葉紅朝

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草學(xué)院, 鄭州 450002; 2.河南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司技術(shù)中心, 鄭州 450000; 3.河南省煙草公司洛陽(yáng)市公司, 河南 洛陽(yáng) 471000)

生物炭是由生物質(zhì)原料(動(dòng)物骨骼及殘骸、植物殘?bào)w、農(nóng)作物廢棄物等)在缺氧或無(wú)氧的條件下經(jīng)相對(duì)較低的溫度(一般不超過(guò)700 ℃)熱裂形成的高穩(wěn)定性的富含碳的物質(zhì)[1]。由于生物炭在有機(jī)廢棄物資源化、土壤改良、肥料創(chuàng)新和溫室氣體減排等方面具有重要意義，近年來(lái)被廣泛研究[2]。生物炭自身多孔、表面積較大，含有較多碳源的性質(zhì)，能為土壤微生物提供優(yōu)良的生存空間和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，直接影響微生物生長(zhǎng)，也可以通過(guò)施入土壤改變土壤各項(xiàng)理化性質(zhì)(水分、肥力、pH、CEC、EC等)來(lái)改變土壤資源儲(chǔ)備、土壤非生命成分及固定土壤污染物等方面，間接影響土壤微生物的生活[3]。

生物炭近年來(lái)被廣泛應(yīng)用于土壤改良和修復(fù)，而微生物作為土壤的重要組成部分，其自身生長(zhǎng)代謝的影響受生物炭的影響，在一定水平上反映了生物炭對(duì)土壤質(zhì)量的影響效果[4-5]。生物炭對(duì)土壤微生物活性和群落結(jié)構(gòu)組成的改變往往與試驗(yàn)條件、生物炭自身性質(zhì)、土壤質(zhì)地及肥力水平等密切相關(guān)[6]。已有研究表明，不同原材料(如廢棄物[7]、木材[8]、作物秸稈[9]等)對(duì)土壤微生物的影響差異顯著，這是由于原材料不同的生物炭其自身結(jié)構(gòu)、組分不同，常會(huì)被不同的微生物群體所利用[10]。土壤類型也是影響生物炭對(duì)土壤微生物作用的重要因素[11]，由于我國(guó)面積廣闊，土壤類型不一，生物炭對(duì)不同土壤的影響效果也不同。如生物炭在黑土和紅壤中微生物量和群落結(jié)構(gòu)特征影響效果相反[12]，在灰漠土和風(fēng)沙土上對(duì)微生物多樣性也有差異[13]。適宜的生物炭用量可以促進(jìn)作物生長(zhǎng)，然而過(guò)量的生物炭對(duì)作物生產(chǎn)不利，且對(duì)微生物產(chǎn)生毒性[3，14]，如何確定合適的生物炭量來(lái)修復(fù)土壤，維持土壤微生物環(huán)境穩(wěn)定十分必要。

褐土是華北平原主要的耕地土壤之一，但多分布于丘陵山地，土壤侵蝕現(xiàn)象嚴(yán)峻，具有有機(jī)質(zhì)含量偏低，保肥保水性能較差等特點(diǎn)[15]。目前生物炭對(duì)于土壤的修復(fù)研究多為短期實(shí)驗(yàn)，而關(guān)于長(zhǎng)期施用生物炭對(duì)褐土土壤微生物影響的報(bào)道尚不多見(jiàn)。本試驗(yàn)因地制宜，利用當(dāng)?shù)刂饕魑锘ㄉ鷼樯锾吭?，通過(guò)4年的定位試驗(yàn)，并利用高通量技術(shù)檢測(cè)土壤微生物的主要特征結(jié)構(gòu)，為確定長(zhǎng)期使用花生殼生物炭改良褐土微生物群落結(jié)構(gòu)提供支撐。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2014—2017年在河南農(nóng)業(yè)大學(xué)許昌校區(qū)現(xiàn)代煙草農(nóng)業(yè)科教園區(qū)(北緯34°01′，東經(jīng)113°49′)進(jìn)行，供試土壤類型為褐土，質(zhì)地中壤，有機(jī)質(zhì)含量12.77 g·kg-1，堿解氮含量81.6 mg·kg-1，速效磷含量14.4 mg·kg-1，速效鉀含量61.22 mg·kg-1，pH 7.56。供試生物炭是由河南惠農(nóng)土質(zhì)保育研發(fā)有限公司提供的在350 ℃條件下加工成的花生殼生物炭，其理化性狀如表1所示。供試煙草品種為K326，由本實(shí)驗(yàn)室保存。

表1 花生殼生物炭理化性質(zhì)Table 1 Physicochemical properties of peanut shell biocharcoal.

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2014年設(shè)4個(gè)處理，分別是CK(30 kg·hm-2純氮)、B1.5(1.5 t·hm-2生物炭+30 kg·hm-2純氮)、B15(15 t·hm-2生物炭+30 kg·hm-2純氮)，B45(45 t·hm-2生物炭+30 kg·hm-2純氮)，每個(gè)處理占地面積333 m2(33.3 m×10 m)，設(shè)三次重復(fù)，采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，分為三個(gè)小區(qū)，每年3月中旬撒施生物炭，4月下旬起壟施化肥，5月1日移栽煙苗，9月底煙葉采收結(jié)束，拔除煙桿，犁地耙平，至第二年3月再撒施生物炭。除生物炭用量外，其他田間措施保持一致。

1.3 樣品采集

于2018年3月中旬施炭前采集0—20 cm土壤樣品，每個(gè)小區(qū)采用 5 點(diǎn)法取土后混勻，共12個(gè)樣品，用冰盒帶回實(shí)驗(yàn)室，每個(gè)樣品分為2份，其中一份置于-80 ℃冰箱內(nèi)保存，用于提取土壤DNA，分析微生物多樣性；另一份樣品室內(nèi)晾干、過(guò)篩，用于土壤基礎(chǔ)肥力測(cè)試。

1.4 指標(biāo)測(cè)定及分析方法

1.4.1土壤理化指標(biāo)分析方法 全氮、全炭用全自動(dòng)CN分析儀(vario MAX CN，德國(guó))測(cè)定；硝態(tài)氮和銨態(tài)氮用全自動(dòng)化學(xué)分析儀(Smartchem140，意大利)測(cè)定；土壤pH采用電位法(ZD-型酸度計(jì))；有機(jī)質(zhì)采用紫外分光光度法；速效磷含量采用0.5 mol·L-1NaHCO3浸提-鉬銻抗比色法；速效鉀含量采用NH4OAc浸提-火焰光度計(jì)法，堿解氮用全自動(dòng)化學(xué)分析儀(Smartchem140，意大利)測(cè)定[16]。

1.4.2土壤樣品DNA提取、擴(kuò)增與測(cè)序 本試驗(yàn)將凍存的土壤樣品用干冰包裝后送至北京諾禾致源生物信息科技有限公司提取樣品總DNA，以土壤總DNA為模板，以515F(5′-GTGCCAGCMGC-CGCGGTAA-3′) 和 806R(5′-GGACTACHVGGGT-WTCTAAT-3′)為引物擴(kuò)增細(xì)菌16S V3-V4區(qū)DNA序列，以3F(5′-GGAAGTAAAAGTCGTAAC-AAGG-3′) 和4R(5′-GCTGCGTTCTTCATCGAT-GC-3′)為引物擴(kuò)增真菌ITS1區(qū)DNA序列，利用New England Biolabs 公司的NEB Next?UltraTMDNA Library Prep Kit for Illumina構(gòu)建文庫(kù)，使用HISeq(HISeq PE300，美國(guó))測(cè)序。

1.4.3數(shù)據(jù)分析方法 使用Cutadapt(V1.9.1)、UCHIME Algorithm對(duì)序列進(jìn)行閱讀、處理，去除嵌合體序列得到最終的有效數(shù)據(jù)。利用Uparse 軟件(Uparse v7.0.1001)以97%的相似性將序列聚類，并與SSUrRNA數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)分析。

使用Qiime軟件(Version 1.9.1)計(jì)算Chao1、Shannon、Simpson、ACE指數(shù)，PCA分析、RDA分析、mantel text檢驗(yàn)均使用R軟件分析，使用SPSS 22軟件進(jìn)行單因素方差分析與Pearson相關(guān)性分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理用 Microsoft Excel 2016 進(jìn)行整理。

2 結(jié)果與分析

2.1 生物炭對(duì)植煙褐土理化特性的影響

如表2所示,與對(duì)照相比，施用生物炭各處理均顯著提高各處理土壤速效磷、速效鉀、有機(jī)質(zhì)、pH和含水率，顯著降低了土壤容重。隨著生物炭量的不斷提高，土壤速效鉀、有機(jī)質(zhì)、pH和含水率均不斷升高，速效磷含量先降低后升高，土壤容重不斷降低，且不同處理間各項(xiàng)指標(biāo)存在顯著性差異。T2處理顯著提高了土壤銨態(tài)氮含量，但其他處理對(duì)土壤硝態(tài)氮、銨態(tài)氮影響均不顯著。綜上，施用生物炭后土壤的理化性質(zhì)發(fā)生顯著改變，且各項(xiàng)指標(biāo)變化趨勢(shì)均反映出土壤質(zhì)量有所提高，不同生物炭量間對(duì)土壤理化性質(zhì)的影響也有不同，其中T2、T3處理效果較好。

表2 植煙褐土理化特性Table 2 Physicochemical properties of tobacco-growing cinnamon soil.

2.2 樣品測(cè)序結(jié)果分析

各處理樣品覆蓋度均在97%以上，稀釋曲線(圖1)已趨于平穩(wěn)，能夠反映樣本的真實(shí)情況。

共測(cè)得細(xì)菌16S rRNA基因序列850 439條，每個(gè)樣品平均序列70 870條。經(jīng)過(guò)對(duì)序列進(jìn)行聚類劃分后得到OTU數(shù)為4 905，分別歸類于47門、51綱、112目、196科、417屬、253種。

真菌18S rRNA基因序列985 622條，每個(gè)樣品平均序列82 135條。經(jīng)過(guò)對(duì)序列進(jìn)行聚類劃分后得到OTU數(shù)為2 152，分別歸類于14門、38綱、85目、156科、254屬、263種。

各處理間細(xì)菌、真菌OTU數(shù)與α多樣性指數(shù)(表3)均無(wú)顯著性差異，說(shuō)明施用生物炭對(duì)土壤微生物多樣性影響不顯著。

表3 測(cè)序結(jié)果及α多樣性指數(shù)表Table 3 Sequencing results and alpha diversity index table

2.3 生物炭對(duì)優(yōu)勢(shì)菌群相對(duì)豐度的影響

圖2中，變形菌門(Proteobacteria)、酸桿菌門(Acidobacteria)、放線菌門(Actinobacteria)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、綠彎菌門(Chloroflexi)為優(yōu)勢(shì)細(xì)菌，共占細(xì)菌OTU總量的81.62%，各菌種相對(duì)豐度分別為28.52%、21.84%、13.24%、11.34%、6.68%。

圖2中，子囊菌門(Ascomycota)、被孢霉菌門(Mortierellomycota)、擔(dān)子菌門(Basidiomycota)為優(yōu)勢(shì)真菌，共占真菌OTU總量的50.77%，各菌種相對(duì)豐度分別為34.87%、8.30%、7.60%。

與對(duì)照處理相比，T2處理對(duì)優(yōu)勢(shì)細(xì)菌、真菌相對(duì)豐度影響最為顯著，其變形菌門、放線菌門、綠彎菌門、子囊菌門的相對(duì)豐度顯著提高, 酸桿菌門、擬桿菌門的相對(duì)豐度顯著降低。T1處理顯著降低了子囊菌門的相對(duì)豐度，其他處理對(duì)菌群影響均不顯著。說(shuō)明適量生物炭對(duì)土壤優(yōu)勢(shì)菌群影響效果顯著，但用量過(guò)高或過(guò)低對(duì)土壤優(yōu)勢(shì)菌群影響效果較弱。

2.4 生物炭對(duì)群落結(jié)構(gòu)的影響

PCA分析(圖3)中，細(xì)菌第一、二主成分的方差貢獻(xiàn)率分別為14.66、12.09%，真菌第一、二主成分的方差貢獻(xiàn)率分別為13.26%、11.08%。各處理所含樣品點(diǎn)大多分布較近，且不同處理間有明顯的分離現(xiàn)象。說(shuō)明生物炭改變了土壤細(xì)菌、真菌群落結(jié)構(gòu)分布，且不同生物炭量間群落結(jié)構(gòu)也存在差異，低生物炭量對(duì)細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)影響較小，對(duì)真菌群落結(jié)構(gòu)影響較大，隨著生物炭量的提高，細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)差異不斷增大，而真菌群落結(jié)構(gòu)差異先增大后減小。

2.5 環(huán)境因子與不同施炭量下微生物群落的冗余分析

從圖4可以看出，細(xì)菌RDA分析中第一、二排序軸解釋量分別為26.15%、20.19%，真菌RDA分析中第一、二排序軸解釋量分別為24.07%、15.58%。各處理均位于不同區(qū)域，也表明不同處理群落結(jié)構(gòu)存在差異，不同土壤理化指標(biāo)指向了不同處理，速效鉀、有機(jī)質(zhì)、含水率與T3處理有較強(qiáng)相關(guān)性，全氮、銨態(tài)氮與T2處理有較強(qiáng)相關(guān)性，說(shuō)明不同土壤理化指標(biāo)在不同處理下的對(duì)微生物群落結(jié)構(gòu)的影響效果并不相同。

2.6 各環(huán)境因子與優(yōu)勢(shì)菌群相關(guān)性分析

2.6.1土壤環(huán)境因子與細(xì)菌和真菌群落結(jié)構(gòu)相關(guān)性分析 由Mantel text檢驗(yàn)結(jié)果(表4)來(lái)看，土壤全氮(r=0.670 1，P=0.001)、銨態(tài)氮含量(r=0.740 2，P=0.001)與細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)有極顯著相關(guān)關(guān)系。土壤銨態(tài)氮含量(r=0.283 3，P=0.039)、速效鉀(r=0.262 3，P=0.049)、土壤容重(r=0.268 4，P=0.034)與真菌群落結(jié)構(gòu)有顯著相關(guān)關(guān)系。說(shuō)明氮素含量是影響土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的主要因素，而真菌則與土壤多項(xiàng)理化指標(biāo)影響有關(guān)。

表4 土壤環(huán)境因子與細(xì)菌和真菌群落結(jié)構(gòu)相關(guān)性Table 4 Mantel test of correlation between soil environmental factors and community structure of bacteria and fungi

2.6.2優(yōu)勢(shì)菌群與土壤理化性質(zhì)相關(guān)性分析

由皮爾遜相關(guān)性分析(表5)表明，Acidobacteria與土壤全氮、銨態(tài)氮顯著負(fù)相關(guān)。Actinobacteria與土壤全氮、銨態(tài)氮顯著正相關(guān)。Chloroflexi與土壤全氮、硝態(tài)氮顯著正相關(guān)。Ascomycota與土壤銨態(tài)氮、pH顯著正相關(guān)，與土壤容重顯著負(fù)相關(guān)。Mortierellomycota與土壤容重顯著負(fù)相關(guān)。說(shuō)明土壤中優(yōu)勢(shì)細(xì)菌相對(duì)豐度主要與土壤全氮、銨態(tài)氮含量有顯著關(guān)系，而優(yōu)勢(shì)真菌則受多種土壤理化性質(zhì)影響，這也與Mantel text檢驗(yàn)(表4)結(jié)果一致。綜上，土壤理化性質(zhì)與土壤優(yōu)勢(shì)細(xì)菌、真菌相對(duì)豐度以及群落結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，土壤理化性質(zhì)的改變能引起土壤優(yōu)勢(shì)細(xì)菌、真菌相對(duì)豐度以及群落結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。

表5 優(yōu)勢(shì)菌群與土壤理化性質(zhì)相關(guān)性Table 5 Correlation between dominant microflora and soil physical and chemical properties

3 討論

3.1 生物炭對(duì)土壤理化性質(zhì)的影響

施用生物炭較對(duì)照顯著提高了土壤有機(jī)質(zhì)含量，土壤有機(jī)質(zhì)中含有的大量營(yíng)養(yǎng)元素礦化后可以被微生物利用，從而促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)，同時(shí)有助于土壤質(zhì)量的提高，土壤有機(jī)碳作為土壤有機(jī)質(zhì)的重要組成部分，對(duì)土壤肥力和作物產(chǎn)量至關(guān)重要[14]。而生物炭作為富含碳的物質(zhì)，施入土壤后有助于提高土壤碳含量，從而提高土壤有機(jī)質(zhì)含量。已有研究結(jié)果表明，不同生物炭量間對(duì)土壤(水稻土、紫土)有機(jī)碳影響存在差異[17]，而本研究也證明在褐土中，不同生物炭量對(duì)土壤有機(jī)質(zhì)影響差異顯著，而確定最佳的生物炭量是提高土壤質(zhì)量的關(guān)鍵。生物炭對(duì)土壤pH影響并不顯著。這可能與試驗(yàn)地植煙前pH較高有關(guān)，楊鐵釗等[18]提出，生物炭作為堿性物質(zhì)可以直接提高土壤pH，但對(duì)于堿性土壤影響并不顯著，這與本文研究結(jié)果一致。生物炭施入土壤顯著改變了土壤銨態(tài)氮含量，這是由于生物炭可以提高土壤氮肥利用率，同時(shí)，生物炭自身較強(qiáng)的陽(yáng)離子交換能力對(duì)土壤中銨態(tài)氮具有強(qiáng)烈的吸附作用從而提高土壤中銨態(tài)氮含量[19]。

3.2 生物炭對(duì)細(xì)菌多樣性的影響

細(xì)菌通常以群落的形式存在，細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)主要指群落中細(xì)菌種群的種類和豐度[20]。本研究結(jié)果表明，施用生物炭及不同生物炭量較對(duì)照對(duì)土壤細(xì)菌OTU數(shù)量和α多樣性指數(shù)影響不顯著。這主要是由于生物炭自身結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定，其含有的大量芳香烴不易被分解，對(duì)土壤微生物影響較緩慢[21]。有研究指出，生物炭對(duì)土壤細(xì)菌多樣性的影響效果具有高度的時(shí)間依賴性，新應(yīng)用生物炭時(shí)可以短暫提高細(xì)菌多樣性和豐度，而隨著時(shí)間的推移以及重復(fù)添加生物炭對(duì)細(xì)菌群落影響較小[22]，本研究距初次施用生物炭已過(guò)5年，也印證了重復(fù)添加生物炭對(duì)土壤細(xì)菌α多樣性指數(shù)影響不大。PCA分析結(jié)果顯示，與對(duì)照相比，施用生物炭后各處理間細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)存在差異，且差異隨著施用生物炭量的提高而提高，說(shuō)明施用生物炭和不同生物炭量間均能影響細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)組成。結(jié)合本研究RDA分析與Mantel text分析結(jié)果來(lái)看，土壤全氮、銨態(tài)氮是影響細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的主要因素。生物炭對(duì)土壤微生物的影響主要通過(guò)改善土壤理化性質(zhì)以及自身結(jié)構(gòu)為微生物提供生存環(huán)境兩方面發(fā)揮作用[23]，上述結(jié)果中提高生物炭顯著提高了土壤銨態(tài)氮含量，說(shuō)明在氮素用量不變的條件下，生物炭可以通過(guò)改善土壤氮素利用率和提高土壤銨態(tài)氮含量來(lái)影響細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。從門水平優(yōu)勢(shì)細(xì)菌相對(duì)豐度來(lái)看，15 t·hm-2處理對(duì)優(yōu)勢(shì)細(xì)菌相對(duì)豐度影響顯著，變形菌門、放線菌門、綠彎菌門的相對(duì)豐度顯著提升，酸桿菌門、擬桿菌門的相對(duì)豐度顯著降低，這可能是由于不同菌群對(duì)生物炭的利用能力以及環(huán)境因素造成的，放線菌門可以有效地降解生物炭中復(fù)雜的芳香類化合物，從而獲取更多能量生長(zhǎng)繁殖[24]。酸桿菌門是嗜酸性細(xì)菌，酸性土壤環(huán)境有利于酸桿菌門的代謝活動(dòng)，生物炭作為堿性物質(zhì)施入土壤可以提高土壤pH，從而抑制了酸桿菌的相對(duì)豐度，而酸桿菌門相對(duì)豐度降低是土壤質(zhì)量提高的信號(hào)標(biāo)志[25-26]。變形菌門的豐度變化規(guī)律不同，這可能是由于取材的條件差異和植物根際分泌物的影響[27-28]。陳澤斌等[27]的取土部位為根際土，待烤煙成熟期取樣，而本試驗(yàn)的取土?xí)r間為移栽前，根系生長(zhǎng)尚不完全，煙草根系分泌物影響不顯著。也可進(jìn)一步說(shuō)明，隨著煙株生長(zhǎng)，其根系分泌物抑制了變形菌門的生長(zhǎng)。綠彎菌門相對(duì)豐度提高可以固定土壤碳氮，防止土壤養(yǎng)分流失[29]。結(jié)合本研究結(jié)果來(lái)看，酸桿菌門、放線菌門、綠彎菌門與土壤氮素含量存在顯著相關(guān)關(guān)系，施用生物炭對(duì)優(yōu)勢(shì)細(xì)菌相對(duì)豐度的影響對(duì)土壤質(zhì)量提升有一定的促進(jìn)作用。

3.3 生物炭對(duì)真菌多樣性的影響

本研究結(jié)果表明，施用生物炭及不同生物炭量較對(duì)照對(duì)土壤真菌OTU數(shù)量和α多樣性指數(shù)影響不顯著，這與Lucheta等[30]和閻海濤等[31]研究結(jié)果一致。真菌在土壤中大多為分解者，對(duì)生物炭中頑固性碳利用能力較強(qiáng)[32]，但固性碳性質(zhì)較穩(wěn)定，需要一定的時(shí)間來(lái)分解，結(jié)合閻海濤等[31]和Yao 等[33]的研究結(jié)果來(lái)看，施用生物炭3～5年對(duì)土壤真菌α多樣性指數(shù)影響不顯著，還需更多的研究結(jié)果來(lái)驗(yàn)證生物炭對(duì)土壤真菌的影響作用。PCA分析結(jié)果顯示，與對(duì)照相比，施用生物炭后各處理間真菌群落結(jié)構(gòu)存在差異，低生物炭量對(duì)真菌群落結(jié)構(gòu)影響較大，隨著生物炭量的增加，群落結(jié)構(gòu)差異先增大后減小，表明生物炭量對(duì)真菌群落的影響在本試驗(yàn)出來(lái)中存在閥值，以致于過(guò)高的生物炭量對(duì)真菌的影響并不能達(dá)到最高。RDA分析與Mantel text分析結(jié)果表明，土壤銨態(tài)氮含量、速效鉀、土壤容重是影響真菌群落結(jié)構(gòu)的主要因子，這與陳坤等[34]研究結(jié)果相近，其中土壤容重作為土壤微生物影響的主要因子報(bào)道較少，土壤容重的改善與生物炭的特性密切相關(guān)，有助于種子的萌發(fā)和植物根系的生長(zhǎng)[35]，本研究施用生物炭后土壤容重顯著降低，表明生物炭可以通過(guò)降低土壤容重影響真菌微生物群落結(jié)構(gòu)。從門水平優(yōu)勢(shì)真菌相對(duì)豐度來(lái)看，15 t·hm-2處理顯著提高了子囊菌門的相對(duì)豐度，其他處理對(duì)優(yōu)勢(shì)真菌相對(duì)豐度影響不大，相關(guān)性分析結(jié)果顯示，子囊菌門與銨態(tài)氮、pH呈顯著正相關(guān)關(guān)系，與土壤容重呈顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，施用生物炭后顯著了提高了土壤銨態(tài)氮、pH，降低了土壤容重，有利于提高子囊菌門相對(duì)豐度。子囊菌門多為腐生菌，可產(chǎn)生抗生素、有機(jī)酸、激素、維生素等有益于作物生長(zhǎng)，也對(duì)分解植物殘?bào)w和降解土壤有機(jī)質(zhì)具有重要作用[36-37]，子囊菌門下的叢赤殼科(Nectricaceae)菌多屬于菌生真菌，可以寄生病原真菌[38]此外還有Incertaesedis 27、毛球殼科(Lasiosphaeriaceae)、假散囊菌科(Pseud-eurotiaceae)可能促進(jìn)土壤中有機(jī)物質(zhì)分解,從而間接促進(jìn)植株根系生長(zhǎng)[39],說(shuō)明施入生物炭使子囊菌門豐度升高有利于土壤質(zhì)量。本試驗(yàn)中另一優(yōu)勢(shì)真菌被孢霉菌門能分解土壤中的糖類和簡(jiǎn)單多糖物質(zhì)，是土壤中有機(jī)質(zhì)和養(yǎng)分含量豐富的標(biāo)志類群[13]。總體來(lái)說(shuō)，施用生物炭對(duì)優(yōu)勢(shì)真菌相對(duì)豐度影響效果并不明顯，表明真菌受生物炭影響效果比細(xì)菌小，具體原因還需要今后更深入的研究。