齊成媚 ,楊靜蕓,劉怡君,盧雯,楊永雪,全沁果 *
1. 湖南科技學(xué)院化學(xué)與生物工程學(xué)院(永州 425199);2. 土傳病害綠色防控湖南省工程研究中心(永州 425199);3. 湘南優(yōu)勢植物資源綜合利用湖南省重點實驗室(永州 425199)
百合(Lilium)是百合科百合屬多年生草本球根植物,在我國分布廣泛,占到了世界上百合資源總量的50%以上,超過了36個種為中國特有[1]。百合鱗莖是已知的具有高蛋白、低脂肪特性的保健食品,且為首批藥食同源的食物[2]。《中華人民共和國藥典》對百合的理脾健胃、潤肺止咳、寧心安神、止血等功效有明確記載,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)亦證明,百合鱗莖有廣譜的抗癌活性,臨床中已應(yīng)用于鼻咽癌、白血病等癌癥的輔助治療[3]。
隨著農(nóng)業(yè)部對“精準營養(yǎng)”概念的提出,人們對飲食健康問題的關(guān)注度持續(xù)提高,這也促使食品工業(yè)加大了對功能性食品的研發(fā)力度。功能型糯米甜酒不僅保留了糯米甜酒原有的風(fēng)味,還融入了多糖、黃酮、膳食纖維等活性物質(zhì),賦予了傳統(tǒng)酒飲料的保健功效,成為了近年來針對糯米酒配方改良的研究熱點[4-6]。目前,我國百合資源主要以鮮銷和干制品銷售為主,深加工程度低。為此,引入百合作為糯米甜酒的配方之一,以綜合感官評分為指標,采用模糊數(shù)學(xué)感官評價法結(jié)合單因素-響應(yīng)面試驗研究百合糯米甜酒發(fā)酵工藝的配方,以期進一步提高百合的產(chǎn)業(yè)附加值。
百合(干品)、糯米及安琪甜酒曲均購于湖南省永州市零陵區(qū);所用其它原料及器具均為食品級,所用試劑均為分析純。
YRE200A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,鞏義市予華儀器有限公司;PHB-10酸度計,上海虹益儀器有限公司,PA1004電子天平,上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司;ATAGO pocket refractometer PAL-1手持式數(shù)顯糖度計,日本艾拓;BS-2E恒溫培養(yǎng)箱,日本島津公司;01J2003-04型立式壓力蒸汽滅菌器筒,上海博迅實業(yè)有限公司。
1) 糯米清洗、浸泡:將糯米淘洗干凈后于涼開水中靜置過夜,次日檢查其吸水膨脹情況,以顆粒均勻、飽滿為宜。
2) 蒸飯:用雙層孔徑0.150 mm的紗布將浸泡后糯米的水分瀝干,隨后移入立式滅菌筒內(nèi),121 ℃滅菌15 min。
3) 淋冷:將糯米取出后用涼開水充分淋洗,使其冷卻至室溫。
4) 調(diào)節(jié)pH和糖度:將百合與糯米充分混合后的料液的pH調(diào)至4.0左右,糖度控制在28%左右,隨后加入糖化酶和酵母菌進行發(fā)酵。
5) 發(fā)酵:將拌好的原料裝入250 mL錐形瓶后于恒溫培養(yǎng)箱中在28 ℃下培養(yǎng)7 d。
參考Sallam[7]的方法,挑選具有食品專業(yè)背景知識的人員10人(男女比例為1∶1),年齡范圍為19—22歲,進行3 d專業(yè)食品感官評定培訓(xùn),組成感官評定小組。在感官評定前12 h內(nèi)禁止飲酒、禁食刺激性食物,根據(jù)糯米酒感官評定標準對產(chǎn)品進行評價,評價表見表1。
表1 糯米酒感官評定標準表
以糯米酒樣品的氣味(u1)、色澤(u2)、形態(tài)(u3)和口感(u4)構(gòu)建單元結(jié)構(gòu),以此子集組成感官評定的因素集U={u1,u2,u3,u4}。
在對各因素感官描述的基礎(chǔ)上確定優(yōu)秀(v1)、良好(v2)、一般(v3)、較差(v4)4個等級為餅干的感官評語集V={v1,v2,v3,v4},其對應(yīng)的分值見表1。
根據(jù)感官評價員對氣味、色澤、形態(tài)、口感的分數(shù)確定每個評定因素的權(quán)重系數(shù),組成權(quán)重集K={氣味k1,色澤k2,形態(tài)k3,滋味k4},滿足k1+k2+k3+k4=1。
將10人感官評價小組對糯米酒的氣味(u1)、色澤(u2)、形態(tài)(u3)和口感(u4)的打分情況匯總,統(tǒng)計其在4個評價等級中的票數(shù),將該票數(shù)分別除以總?cè)藬?shù)得到了感官評價的模糊數(shù)學(xué)關(guān)系矩陣A,對應(yīng)的模糊數(shù)學(xué)評價集則為Y=K×A。設(shè)糯米酒優(yōu)秀、良好、一般和較差的模糊綜合評價等級R={95,85,70,30},則綜合感官評分T=Y×R。
確定初始配方為:物料質(zhì)量比(百合與糯米)1∶2、糖化酶添加量0.2%、酵母添加量為0.2%、發(fā)酵時間為3 d、料液比為1∶2(g/mL)、發(fā)酵溫度為30 ℃。研究物料質(zhì)量比(1∶2,1∶3,1∶4,1∶5和1∶6)、糖化酶添加量(0.2%,0.3%,0.4%,0.5%和0.6%)、酵母添加量(0.2%,0.3%,0.4%,0.5%和0.6%)和發(fā)酵時間(3,5,7,9和11 d)的改變對糯米酒綜合感官評分的影響。
將糖化酶添加量、酵母添加量和發(fā)酵時間按X1、X2和X3進行編碼,其因素水平表見表2。
表2 響應(yīng)面試驗因素水平表
各試驗組均平行3次,取其平均值。利用Origin 2017作圖,并用SPSS 19.0采用Duncan法對數(shù)據(jù)進行差異顯著性檢驗(p<0.05)。
綜合10名感官評價員的評價結(jié)果,可計算得到糯米酒感官評價的權(quán)重分布,結(jié)果見表3。權(quán)重由高到低排序為口感>氣味>形態(tài)>色澤,將其得分除以100即得權(quán)重集K={氣味,色澤,形態(tài),口感}={0.27,0.14,0.18,0.41}。
表3 糯米酒感官評定權(quán)重分布統(tǒng)計
圖1顯示了物料質(zhì)量比(A)、糖化酶添加量(B)、酵母添加量(C)和發(fā)酵時間(D)的改變對糯米酒綜合感官評分的影響。
由圖1A知,物料質(zhì)量比的變化糯米酒綜合感官評分的影響明顯,總體呈先上升后下降的趨勢。結(jié)果表明,物料質(zhì)量比為1∶3時,糯米酒的綜合感官評分最高,因此確定物料質(zhì)量比1∶3為最適比例。
由圖1B知,隨著糖化酶添加量的增加,糯米酒的綜合感官評分逐漸提升,當加酶量達0.5%以后,綜合感官評分開始下降。因此,確定0.5%附近為響應(yīng)面試驗的研究區(qū)間。
由圖1C知,酵母添加量對糯米酒綜合感官評分的影響較大,添加量在0.4%以前呈逐漸上升的趨勢,當其添加量超過0.4%后,糯米酒的綜合感官評分急劇下降,因此確定0.4%附近為響應(yīng)面試驗研究區(qū)間。
由圖1D知,相比之下,發(fā)酵時間是影響糯米酒品質(zhì)的主要因素,當發(fā)酵時間超過5 d后,糯米酒的綜合感官評分迅速下降。因此,確定5 d附近為響應(yīng)面試驗研究區(qū)間。
圖1 各因素對糯米甜酒綜合感官評分的影響
采用Design Expert 8.0.5b軟件對表4中試驗結(jié)果進行多項擬合回歸,得到水解度對X1、X2和X3的二次多項回歸模型方程:R=91.18+1.45X1-0.60X2+2.45X3-0.05X1X2+0.16X1X3+0.25X2X3-0.52X12-5.83X22-7.72X32。
表4 響應(yīng)面試驗方案及結(jié)果
為了檢驗回歸方程的有效性,進一步確定各因素對水解度的影響程度,對回歸模型進行了方差分析,結(jié)果見表5。模型的F=489.83、p=0.000 5<0.01,差異極顯著;失擬項的p=0.576 6,不顯著,說明數(shù)據(jù)沒有異常點;決定系數(shù)R2=0.957 2、變異系數(shù)CV為2.09%,說明響應(yīng)值的變化有95.72%來源于X1、X2和X3,模型擬合度好;且回歸方程能很好的描述各因素與響應(yīng)值之間的關(guān)系,方法可靠。
回歸模型中一次項的X3的p=0.005 7<0.01,二次項中X22和X32的p值均小于0.01,均達到極顯著水平,表明其對試驗結(jié)果的影響較為明顯。而交互項對試驗?zāi)P偷挠绊戄^弱。表明該模型不是簡單的線性關(guān)系,而是一種非線性關(guān)系。
響應(yīng)曲面坡度越陡峭,表明響應(yīng)值對于操作條件的改變越敏感;反之曲面坡度越平緩,操作條件的改變對響應(yīng)值的影響也就越小[8]。圖2直觀地反映了各因素交互作用對響應(yīng)值的影響,結(jié)合回歸模型亦可發(fā)現(xiàn)交互項p的大小關(guān)系為X2X3>X1X3>X1X2。
表5 回歸模型方差分析
圖2 各因素之間的交互作用影響
用Design Expert 8.0.5b軟件對二次多項式回歸方程進行計算,得到糯米酒最佳工藝條件為糖化酶添加量0.6%、酵母添加量0.4%、發(fā)酵時間為5.34 d,預(yù)測感官評分為92.34??紤]到實際操作的局限性,并結(jié)合單因素結(jié)果,工藝條件最終修正為糖化酶添加量0.5%、酵母添加量0.4%、發(fā)酵時間為5 d。此條件下設(shè)置3次平行試驗驗證,得到糯米酒的綜合感官評分為91.87(±3.06%),與預(yù)測模型相近,表明模型可信。
研究以模糊數(shù)學(xué)綜合感官評價法通過單因素-響應(yīng)面試驗得到了百合糯米酒最佳工藝參數(shù)為百合糯米物料質(zhì)量比1∶3、糖化酶添加量0.5%、酵母添加量0.4%、發(fā)酵時間5 d、料液比為1∶2(g/mL)、發(fā)酵溫度為30 ℃,該條件下綜合感官評分為91.87。釀制的百合糯米酒香氣濃郁、口感適宜,有望進一步延長功能型糯米甜酒的產(chǎn)業(yè)鏈。