2型糖尿病患者饅頭餐前后血清人神經(jīng)肽水平的變化

伍文耀，何清香，陳秋芳，李德海

（1.陽江中醫(yī)醫(yī)院，廣東陽江 529500； 2.暨南大學(xué)生物醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化研究院）

人神經(jīng)肽（Spexin）是一種全新的高度保守的可分泌性多肽，在人體各組織均廣泛表達(dá)[1-4]，尤其在內(nèi)分泌組織如胰島、腎上腺、內(nèi)臟脂肪、甲狀腺等表達(dá)均高于肌肉和結(jié)締組織[3]。Spexin具有多種生物學(xué)功能，研究發(fā)現(xiàn)Spexin可抑制攝食行為、調(diào)節(jié)血糖穩(wěn)態(tài)、促進(jìn)能量代謝及胃腸運(yùn)動，同時還參與心血管及腎臟功能等調(diào)節(jié)[2,5-7]。糖尿病往往合并脂代謝的異常，Spexin與體重調(diào)控有一定的相關(guān)性, 肥胖人群Spexin基因表達(dá)明顯減少[2]。也有文獻(xiàn)報(bào)道2型糖尿病患者血清Spexin水平要低于正常人群[8]。然而，糖尿病患者血糖水平波動與Spexin水平的關(guān)系國內(nèi)尚未見報(bào)道。本研究檢測40例初發(fā)2型糖尿病患者饅頭餐試驗(yàn)前后血清Spexin水平的變化，并分析其與血糖波動，及血脂、糖化血紅蛋白、BMI、年齡，尿酸的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2017年8月至2018年3月內(nèi)四區(qū)收治的40例初次診斷2型糖尿病患者。診斷標(biāo)準(zhǔn)參考2013年CDS指南推薦的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]確診為糖尿?。╰ype 2 diabetes，T2D）初發(fā)患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重的心、腦血管疾病和肝、腎功能能損害患者，高血壓，感染，酮癥酸中毒，妊娠、哺乳期婦女，自身免疫性疾病患者，以及正在服用糖皮質(zhì)激素類藥物者。研究獲陽江市中醫(yī)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，受試者均簽署知情同意書。

1.2 方法

研究對象受試前登記基本資料，計(jì)算BMI，空腹10h于入院第二天進(jìn)行采血檢測生化指標(biāo)，包括空腹血糖，尿酸，總膽固醇，甘油三酯，高密度脂蛋白膽固醇，低密度脂蛋白膽固醇，糖化血紅蛋白。同時留取靜脈血2ml，然后進(jìn)食以100g標(biāo)準(zhǔn)面粉制作的饅頭，再分別于進(jìn)食后60min、120min及180min取靜脈血2ml，分離血清-80°C保存，待樣品收集完成后，放干冰寄往暨南大學(xué)生命科學(xué)轉(zhuǎn)化研究院進(jìn)行Spexin水平檢測。Spexin采用Elabscience公司的Elisa試劑盒（貨號E-EL-H5607c）進(jìn)行檢測，具體方法參照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有研究數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析和處理。正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，非正態(tài)分布計(jì)量資料于中位數(shù)（四分位數(shù)）表示。采用Spearsman行相關(guān)性分析。多元線性回歸分析篩選對Spexin有影響作用的指標(biāo)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料和生化指標(biāo)與空腹血清Spexin的相關(guān)性分析

40例患者均記錄年齡、BMI、空腹血糖、糖化血紅蛋白、血清總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、甘油三酯、尿酸、HOMA-IR。相關(guān)分析結(jié)果顯示，空腹血清Spexin水平與空腹血糖、糖化血紅蛋白、BMI、低密度脂蛋白膽固醇、尿酸及HOMA-IR均呈負(fù)相關(guān)，結(jié)果均為P＜0.05，見表1：

表1 一般資料和生化指標(biāo)與空腹血清Spexin的相關(guān)性分析

與年齡、血清總膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇及甘油三酯均不相關(guān)，P值均＞0.05。將血清Spexin水平進(jìn)行自然對數(shù)轉(zhuǎn)換正態(tài)分布后，多元線性分析結(jié)果顯示，BMI、糖化血紅蛋白、低密度脂蛋白膽固醇及HOMA-IR與Spexin獨(dú)立相關(guān)，對Spexin有影響作用，見表2：

表2 對空腹血清Spexin有影響作用的指標(biāo)

2.2 饅頭餐試驗(yàn)后血清Spexin水平的變化及與血糖變化情況的相關(guān)性分析

40例患者均進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)饅頭餐實(shí)驗(yàn)，進(jìn)食饅頭后患者血糖升高明顯，并隨著實(shí)驗(yàn)時間延長逐漸恢復(fù)，到180min接近空腹?fàn)顟B(tài)。血清Spexin濃度在患者進(jìn)食饅頭后逐漸下降，60min時水平最低，后逐漸恢復(fù)，饅頭餐后180min血清Spexin濃度與空腹?fàn)顟B(tài)相似，兩者間差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且血清Spexin濃度與血糖水平呈負(fù)相關(guān)，見表3：

表3 饅頭餐試驗(yàn)后血清Spexin水平的變化及與血糖變化情況的相關(guān)性分析

3 討論

Spexin最早在小鼠中被發(fā)現(xiàn)，隨后被證實(shí)其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)具有高度的保守性，在動物體內(nèi)承擔(dān)重要的調(diào)節(jié)作用且廣泛表達(dá)于多種組織[1]。研究發(fā)現(xiàn)肥胖患者體內(nèi)Spexin mRNA表達(dá)較正常對照組顯著下調(diào)，Spexin可以降低脂肪細(xì)胞對長鏈脂肪酸的攝取，繼而減輕體重[2]。瘦素是一種由成熟脂肪組織合成分泌的蛋白，主要通過中樞和外周兩條途徑抑制脂肪合成、增加能量消耗，減輕體重[10]。肥胖人群由于血清中存在瘦素抵抗，血清瘦素水平明顯高于正常人群，然而，肥胖患者血清中Spexin的平均濃度僅為正常人血清Speixn含量的10%。因此，人血清中循環(huán)Spexin和瘦素間呈現(xiàn)高度顯著的、非線性的負(fù)相關(guān)[2]，提示Spexin可能是一種參與能量代謝的肥胖相關(guān)因子。而本研究結(jié)果也表明，在初次診斷的T2D患者中，血清Spexin水平與患者的BMI呈負(fù)相關(guān)，且BMI與Spexin獨(dú)立相關(guān)，與既往的研究結(jié)果一致。Kolodziejski等[11]發(fā)現(xiàn)，女性肥胖人群Spexin水平較非肥胖人群更低，且Spexin水平與HOMA-IR呈負(fù)相關(guān)，本研究結(jié)果同樣提示，初次診斷T2D的患者血清Spexin水平與HOMA-IR呈負(fù)相關(guān)，且為獨(dú)立相關(guān)，與既往研究結(jié)果一致。

顧麗萍等[8]發(fā)現(xiàn)T2D患者血清Spexin水平明顯低于對照組，且與甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平呈負(fù)相關(guān)，與空腹血糖及糖化血紅蛋白獨(dú)立相關(guān)。而本研究結(jié)果顯示，血清Spexin水平與空腹血糖、糖化血紅蛋白、HOMA-IR、BMI、低密度脂蛋白膽固醇及尿酸呈負(fù)相關(guān)，其中與糖化血紅蛋白、BMI、低密度脂蛋白膽固醇及HOMA-IR獨(dú)立相關(guān)，研究結(jié)果與既往報(bào)道存在個別指標(biāo)的差異，可能與本項(xiàng)目研究樣本量相對較少有關(guān)。但這些結(jié)果均提示Spexin作為一種分泌性多肽，可能參與了T2D患者的糖脂代謝通路。

動物實(shí)驗(yàn)提示Spexin與肥胖、胰島素抵抗及T2D相關(guān)。在肥胖T2D小鼠中，使用Spexin治療不僅可降低小鼠體重，同時還可改善小鼠的糖耐量異常及胰島素抵抗，并降低糖化血紅蛋白[5]。Spexin是GALR2和GLAR3的自然配體[12]，腹腔內(nèi)注射GALR2激動劑M1145可抑制肥胖小鼠胰島素的釋放；注射M1145后的肥胖小鼠葡萄糖耐量試驗(yàn)和胰島素耐量試驗(yàn)可顯著降低血糖水平和HOMAIR[13]。GLUT4是肌肉及脂肪細(xì)胞主要的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)載體，而p38MAPK和PGC-1是與GLUT4表達(dá)相關(guān)的信號蛋白[14]。腹腔注射M1145能促進(jìn)p38MAPK和PGC-1表達(dá)，從而促進(jìn)GLUT4表達(dá)及增加葡萄糖吸收[15]。Gu[3]等發(fā)現(xiàn)，75g OGTT試驗(yàn)后正常受試者血清Spexin水平逐漸下降，30min、60min及90min濃度水平均低于試驗(yàn)前，且在90min降至最低，隨后開始恢復(fù)，至180min恢復(fù)至空腹水平，且Spexin水平與受試者血糖水平呈負(fù)相關(guān)。本研究入選的均為初次診斷的T2D患者，應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)饅頭餐進(jìn)行患者胰島功能評估，結(jié)果與國外文獻(xiàn)類似。T2D患者血清Spexin水平在進(jìn)食饅頭后開始逐漸下降，同時伴隨血糖的升高，Spexin水平60min降至最低值，120min稍有回升，至180min恢復(fù)至與饅頭前水平相似；整個試驗(yàn)過程中，Spexin水平與血糖水平呈負(fù)相關(guān)。這些研究結(jié)果提示，血清Spexin在T2D的糖代謝通路中可能存在不容小覷的作用，更有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)去驗(yàn)證。

Spexin是一種潛在的、自然的多肽，有關(guān)Spexin的基礎(chǔ)及臨床研究才剛剛開始，仍然存在許多問題有待解決，但是，綜合既往的研究和本研究的結(jié)果，Spexin或可作為一種潛在的參與體重以及血糖調(diào)節(jié)的新型肽類激素藥物治療肥胖及糖尿病，有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，為肥胖與糖尿病的治療提供新的思路。