• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    小兒化毒散治療上呼吸道感染的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對接研究

    2021-02-18 09:56:04寇培培任雪雯王玉天古文倩肖飛
    世界中醫(yī)藥 2021年23期
    關(guān)鍵詞:上呼吸道感染分子對接網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

    寇培培 任雪雯 王玉天 古文倩 肖飛

    摘要 目的:探討小兒化毒散治療上呼吸道感染的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)機(jī)制。方法:從中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(TCMSP)篩選小兒化毒散中的主要化學(xué)成分并收集潛在作用靶點(diǎn);從GeneCards數(shù)據(jù)庫、OMIM數(shù)據(jù)庫及TTD數(shù)據(jù)庫篩選人的上呼吸道感染疾病靶點(diǎn);利用在線程序繪制韋恩圖并獲得小兒化毒散與上呼吸道感染的共同靶點(diǎn),應(yīng)用Cytoscape軟件構(gòu)建“中藥-重要活性成分-疾病靶點(diǎn)”作用網(wǎng)絡(luò)圖;運(yùn)用STRING平臺構(gòu)建蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò);使用DAVID平臺進(jìn)行基因本體(GO)富集分析和京都基因和基因組百科全書(KEGG)通路分析;應(yīng)用分子對接將化合物-靶點(diǎn)可視化處理。結(jié)果:小兒化毒散共篩選出131個有效化合物和相應(yīng)靶點(diǎn)107個,上呼吸道感染篩選出7 339個相關(guān)疾病靶點(diǎn),并得到92個共同作用靶點(diǎn),富集分析篩選后得到30個GO條目和46條KEGG信號通路,分子對接得到3個關(guān)鍵化合物和1個靶點(diǎn)。結(jié)論:小兒化毒散治療上呼吸道感染可能通過其關(guān)鍵成分槲皮素、黃芩素和異鼠李素作用于IL6、HIF1A等13個關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白,調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、控制缺氧機(jī)制進(jìn)而發(fā)揮治療上呼吸道感染的治療效果。

    關(guān)鍵詞 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);小兒化毒散;上呼吸道感染;分子對接

    Network Pharmacology and Molecular Docking Study on UpperRespiratory Tract Infection Treated by Xiaoer Huadu Powder

    KOU Peipei1,REN Xuewen2,WANG Yutian2,GU Wenqian3,XIAO Fei3

    (1 Shijiazhuang Xinxing Pharmacy Chain Co.,Ltd.,Shijiazhuang 050000,China; 2 Dongfang Hospital,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100078,China; 3 Jianmin Group Children′s Drug Research Institute,Wuhan 430052,China)

    Abstract Objective:To explore the network pharmacology mechanism of Xiaoer Huadu Powder in the treatment of upper respiratory tract infection.Methods:We screened the main chemical components of Xiaoer Huadu Powder from TCMSP database and collect potential targets; screened human upper respiratory tract infection disease targets from GeneCards database,OMIM database and TTD database; used online programs to drawy Venny diagrams and obtain pediatrics.The common target of Xiaoer Huadu Powder and upper respiratory tract infection,Cytoscape software were used to construct a network diagram of “Chinese medicine-important active ingredients-disease targets”; the STRING platform was used to construct the protein-protein interaction(PPI) network diagram display; the DAVID platform was used for GO function enrichment.We set analysis and KEGG pathway analysis; application of molecular docking to visualize compound-target.Results:A total of 131 effective compounds and 107 corresponding targets were screened out from Xiaoer Huadu Powder,7 339 related disease targets were screened out from upper respiratory tract infection,and 92 common targets were obtained.30 go entries and 46 KEGG signaling pathways were obtained after enrichment analysis.A total of 3 key compounds and one target were obtained by molecular docking.Conclusion:Xiaoer Huadu Powder in the treatment of upper respiratory tract infection may exert its therapeutic effect on upper respiratory tract infection through its key components quercetin,baicalein and isorhamnetin acting on IL6、HIF1A target proteins,regulating inflammatory response,control hypoxia mechanism.

    Keywords Network pharmacology; Xiaoer Huadu Powder; Upper respiratory tract infection; Molecular docking

    中圖分類號:R285文獻(xiàn)標(biāo)識碼:Adoi:10.3969/j.issn.1673-7202.2021.23.016

    上呼吸道感染是由各種病毒和/(或)細(xì)菌感染而導(dǎo)致的主要侵犯鼻、咽或喉部急性炎癥的總稱。常見病原體為病毒,僅少量由細(xì)菌引起。全年皆可發(fā)病,冬春季節(jié)多見,可通過直接接觸或者飛沫等傳播。主要臨床癥狀表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱、食欲不振、盜汗[1-2]。臨床上僅小兒的發(fā)病率為10%~20%[3],該病不僅發(fā)病率較高,發(fā)病急驟,還易反復(fù)發(fā)作,纏綿難愈。若治療不當(dāng)或不及時,極易引發(fā)心肌炎、風(fēng)濕病等,甚至威脅患者的生命安全[4]。中醫(yī)認(rèn)為,上呼吸道感染屬于“上感”“感冒”等范疇,先天不足或后天臟腑虛弱,衛(wèi)外不固,每逢季節(jié)交替易受外邪侵襲。外邪入體從口鼻、皮毛入體,導(dǎo)致肺氣宣發(fā)肅降失調(diào),痰濁內(nèi)生,主要表現(xiàn)為鼻塞、流涕、咳嗽、發(fā)熱等臨床癥狀[5]。

    臨床上,西藥常以抗病毒抗炎治療為主,雖然能夠有效控制患者臨床癥狀,但是隨著病原菌變異及耐藥菌株的出現(xiàn),長期反復(fù)應(yīng)用抗病毒、抗生素藥物的成人用藥后效果不明顯,且對小兒的生長發(fā)育及身心健康直接造成不良影響。因小兒體質(zhì)特殊,臟腑嬌嫩,免疫系統(tǒng)發(fā)育不夠完全,應(yīng)用西藥抗病毒抗生素治療,恐其藥效峻猛,傷及本源,故臨床可采用功效相似但較為和緩的小兒化毒散治療。小兒化毒散取自明·翁仲仁撰的《痘疹金鏡錄》其中的“賽金化毒散”,現(xiàn)已收錄于《中華人民共和國藥典》(2010版)[6]。本方共人工牛黃、珍珠、雄黃、大黃、黃連、冰片、天花粉、川貝母、乳香(制)、沒藥(制)、赤芍、甘草12味藥[7]。具有清熱解毒,活血消腫的療效。本用于治療熱毒內(nèi)蘊(yùn)、毒邪未盡所致的瘡瘍潰爛、口瘡腫痛、大便秘結(jié)等[6-10]。現(xiàn)臨床將其廣泛應(yīng)用于小兒呼吸道疾病和皮膚病,如上呼吸道感染[11]、黃水瘡(天皰瘡、滴膿瘡)[12],水痘[13]、新生兒臍炎[14]、化膿性扁桃體炎[15-17]、皰疹性咽峽炎[18]、流行性腮腺炎[19]等治療。但其作用機(jī)制尚未有詳細(xì)報(bào)道,本研究應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探究小兒化毒散治療上呼吸道感染的作用機(jī)制,以期為后續(xù)試驗(yàn)研究提供理論基礎(chǔ),現(xiàn)將結(jié)果匯報(bào)如下。

    1 資料與方法

    1.1 小兒化毒散活性成分的篩選

    從中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(TCMSP)(http://tcmspw.com/tcmsp.php)[20]中藥數(shù)據(jù)庫、SymMap(http://www.symmap.org/)數(shù)據(jù)庫、ETCM(http://www.tcmip.cn/ETCM/index.php/Home/Index/)數(shù)據(jù)庫檢索出小兒化毒散的中藥主要化學(xué)成分。藥物在體內(nèi)需要經(jīng)過吸收、分布、代謝及排泄過程到達(dá)靶器官發(fā)揮藥效,因此,以口服生物利用度(Oral Bioavailability,OB)[21]類藥性(Drug Likeness,DL)[22]作為篩選條件對各中藥化學(xué)成分進(jìn)行篩選,將其設(shè)定為OB≥30%,DL≥0.18,篩選出小兒化毒散的主要活性成分。

    1.2 活性成分潛在靶點(diǎn)收集與篩選

    通過TCMSP收集主要活性成分的潛在蛋白靶點(diǎn),將篩選得到的靶蛋白英文名輸入到UniProt數(shù)據(jù)庫中(http://www.uniprot.org/),篩選出物種為“Homo Sapiens”的靶點(diǎn),得到成分靶點(diǎn)基因,并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化命名。

    1.3 上呼吸道感染相關(guān)靶點(diǎn)的獲取及篩選

    以“Upper Respiratory Tract Infection”為檢索關(guān)鍵詞在GeneCards數(shù)據(jù)庫(https://www.genecards.org/)、OMIM數(shù)據(jù)庫(https://omim.org/)、TTD數(shù)據(jù)庫(http://db.idrblab.net/ttd/)、DisGeNET數(shù)據(jù)庫(https://www.disgenet.org/)以及CTD數(shù)據(jù)庫(http://ctdbase.org/)收集與上呼吸道感染相關(guān)的靶點(diǎn),去重后得到疾病候選靶點(diǎn)基因。

    1.4 小兒化毒散主要活性成分與上呼吸道感染共同靶點(diǎn)的獲取

    利用Venny 2.1在線程序(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html)將小兒化毒散中的活性成分潛在靶點(diǎn)與上呼吸道感染相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行匹配,繪制韋恩圖并獲得小兒化毒散與上呼吸道感染的共同作用靶點(diǎn),并利用Cytoscape 3.7.2軟件(http://www.cytoscape.org/)構(gòu)建“中藥-重要活性成分-疾病靶點(diǎn)”作用網(wǎng)絡(luò)圖。

    1.5 核心靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

    將共同靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫(https://string-db.org/)[23],設(shè)定物種為“Homo Sapiens”,設(shè)定最低要求互動分?jǐn)?shù)為中度信度0.400,其他參數(shù)保持默認(rèn)值,得到蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(Protein-Protein Interaction,PPI)網(wǎng)絡(luò)圖以及相關(guān)信息,將其中條目Node1,Node2和Combined Score數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2軟件,借助“Network Analyzer”功能對網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?,獲取相關(guān)拓?fù)鋮?shù),以大于節(jié)點(diǎn)連接度(Degree)的2倍中位數(shù)作為篩選依據(jù)獲得關(guān)鍵靶點(diǎn)。

    1.6 GO功能富集分析和KEGG通路富集分析

    將關(guān)鍵靶點(diǎn)導(dǎo)入至DAVID平臺(https://david.ncifcrf.gov/)進(jìn)行基因本體(GO)富集分析和京都基因和基因組百科全書(KEGG)通路富集分析,其中設(shè)置閾值P<0.1,最小計(jì)數(shù)為1,富集因子>1.0,并對P值取負(fù)對數(shù),-logP值越大表明富集程度越大。GO富集生物學(xué)過程(Biological Process,BP)、細(xì)胞組分(Cellular Component,CC)及分子功能(Molecular Function,MF)。并將最后的結(jié)果進(jìn)行可視化展示。

    1.7 分子對接驗(yàn)證

    在PubChem數(shù)據(jù)庫中下載5個主要化合物的2D結(jié)構(gòu),利用Chem3D進(jìn)行優(yōu)化。并在PDB數(shù)據(jù)庫中檢索并下載3個互作靶點(diǎn)蛋白3D圖,利用PyMOL 2.4.0軟件對靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行除水、去除原配體。最后運(yùn)用AutoDock的可視化軟件進(jìn)行分子對接。

    2 結(jié)果

    2.1 小兒化毒散的主要化學(xué)成分及作用靶點(diǎn)

    本研究共檢索出小兒化毒散中中藥活性成分,其中雄黃及珍珠主要成分為微量元素砷、鈣、鋅、鐵等,故不在此討論。其余10味中藥,根據(jù)口服生物利用度及類藥性共篩選出229種候選藥效成分,其中人工牛黃5種,大黃16種,黃連14種,冰片5種,天花粉2種,川貝母13種,乳香8種,沒藥45種,赤芍29種,甘草92種。去重后共得131項(xiàng)候選成分,這里僅羅列部分成分。見表1。

    2.2 小兒化毒散藥效成分靶點(diǎn)預(yù)測及篩選

    在TCMSP數(shù)據(jù)庫中篩查藥效成分靶蛋白,將篩選得到的靶蛋白英文名輸入到UniProt數(shù)據(jù)庫中,進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化命名,最終得到藥效成分靶點(diǎn)基因973個,篩去重復(fù)最后共得藥效成分靶點(diǎn)基因107個。

    2.3 上呼吸道感染的疾病靶點(diǎn)的收集

    分別在GeneCards、OMIM、TTD、DisGeNET以及CTD數(shù)據(jù)庫中檢索獲得上呼吸道感染基因靶點(diǎn),其中從GeneCards數(shù)據(jù)庫共獲得7 208個上呼吸道感染的基因靶點(diǎn),TTD數(shù)據(jù)庫共獲得6個基因靶點(diǎn),OMIM數(shù)據(jù)庫共獲得181個基因靶點(diǎn),余數(shù)據(jù)庫未見相應(yīng)疾病靶點(diǎn),最后進(jìn)行去重,共得到7 339個上呼吸道感染相關(guān)疾病靶點(diǎn)。

    2.4 中藥-疾病共同靶點(diǎn)的篩選

    將小兒化毒散活性成分潛在靶點(diǎn)與上呼吸道感染相關(guān)靶點(diǎn)進(jìn)行匹配,獲得小兒化毒散與上呼吸道感染的共同靶點(diǎn)92個。見表2。并繪制韋恩圖。見圖1。利用Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建“中藥-重要活性成分-疾病靶點(diǎn)”作用網(wǎng)絡(luò)圖。見圖2。

    2.5 核心靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建及關(guān)鍵蛋白的篩選

    將92個共同靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫,得到蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)圖。見圖3。PPI網(wǎng)絡(luò)包括92個節(jié)點(diǎn)、257條邊、平均節(jié)點(diǎn)度為18.2、平均局部聚類系數(shù)為0.586。用Cytoscape 3.7.2軟件對網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?。見圖4。獲取相關(guān)拓?fù)鋮?shù),以節(jié)點(diǎn)連接度(Degree)的2倍中位數(shù)作為依據(jù)對靶點(diǎn)和藥物成分進(jìn)行篩選,獲得關(guān)鍵靶點(diǎn)13個,分別為IL6、HIF1A、VEGFA、MYC、ESR1、CASP3、EGFR、PPARG、CCND1、FOS、ERBB2、CASP8、CYCS,并可視化處理。見圖5。關(guān)鍵藥效成分共15種,并按照Degree值排序。見表3。其中槲皮素、黃芩素、異鼠李素、β谷甾醇等成分較為突出。

    2.6 GO富集分析及靶點(diǎn)通路分析

    關(guān)鍵靶點(diǎn)主要分布于細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核質(zhì)、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜等,通過轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、酶結(jié)合、相同的蛋白質(zhì)結(jié)合、蛋白質(zhì)異二聚體活性、序列特異性DNA結(jié)合、蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)合等方式,參與上皮細(xì)胞增殖的正調(diào)控、對雌二醇的反應(yīng)、對藥物有反應(yīng)、RNA聚合酶Ⅱ啟動子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控、對寒冷的反應(yīng)等生物進(jìn)程。見圖6。KEGG通路富集分析發(fā)現(xiàn),13個關(guān)鍵靶點(diǎn)顯著富集在46條通路上。見圖7。除去癌癥通路,HIF-1、Legionellosis、Viral myocarditis、Herpes simplex infection和TNF信號通路等與上呼吸道感染關(guān)系密切。

    2.7 分子對接

    IL6,HIF1A,VEGFA的蛋白晶體結(jié)構(gòu)選擇的標(biāo)準(zhǔn)為最終選擇的晶體結(jié)構(gòu)分別為5FUC、3HQU和5T89。將槲皮素、黃芩素、異鼠李素、β-谷甾醇、豆甾醇5個藥物活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)HIF1A、IL6、VEGFA逐一進(jìn)行對接,通過aotodock進(jìn)行對接,結(jié)合自由能越低(顏色越深),預(yù)測結(jié)合模式越好[24]。見表4。本研究運(yùn)用PyMOL 2.4.0軟件和AutoDock的可視化軟件進(jìn)行對接并將其對接結(jié)果繪制為3D示意圖。見圖8。除結(jié)合能外,分子對接的氫鍵也是分子對接的柔性程度的重要指標(biāo)(黃色虛線)。綜上所述,小兒化毒散治療上呼吸道感染方面,槲皮素、黃芩素、異鼠李素可能為關(guān)鍵的活性成分,反向驗(yàn)證了HIF1A可能為其關(guān)鍵作用靶點(diǎn)。

    3 討論

    本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法構(gòu)建了小兒化毒散的“藥物-活性成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)。其中,在活性化合物中,按照大于等于Degree值2倍中位數(shù)篩選過后,有效成分中槲皮素、黃芩素、異鼠李素、β谷甾醇等成分作用較為突出。槲皮素是一種黃酮類物質(zhì),現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn),其具有明顯的抗氧化、抗炎、抗腫瘤和血管保護(hù)等多種藥理活性[25]。細(xì)胞半數(shù)毒性濃度試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),槲皮素能明顯抑制人巨細(xì)胞病毒感染引起的細(xì)胞病變效應(yīng),且安全性較好[26]。黃芩素是中藥黃芩中含量最高的黃酮類成分,也是黃芩發(fā)揮功效的主要活性成分,具有清除自由基、抗炎、抗腫瘤、保護(hù)心腦血管等作用[27]。王力彬[28]研究發(fā)現(xiàn),黃芩素對小鼠急性肺炎具有明顯的抑制作用。且黃芩素可呈劑量依賴性抑制H1N1病毒mRNA中后期合成[29]。黃芩素和利巴韋林體外抗H1N1的細(xì)胞半數(shù)毒性濃度試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),黃芩素較利巴韋林具有更強(qiáng)的抗病毒作用[30]。異鼠李素是一種已知黃酮類化合物,在抗炎、抗腫瘤和抗病毒等方面具有較好的作用[31-32]。研究發(fā)現(xiàn),β-谷甾醇在抗氧化、抗高血脂、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等方面表現(xiàn)出良好的藥理作用[33]。應(yīng)用β-谷甾醇可抑制肺組織病理學(xué)中的氣道炎癥[34]??梢?,小兒化毒散在治療上呼吸道感染時,不僅兼具抗病毒、抗炎作用,在安全性方面也有突出優(yōu)勢,在針對小兒反復(fù)上呼吸道感染疾病時,或可比利巴韋林、抗生素更安全,具備可持續(xù)發(fā)展前景。

    本研究將小兒化毒散主要活性成分調(diào)控的靶點(diǎn)與上呼吸道感染疾病的靶點(diǎn)取交集,得到92個交集靶點(diǎn),并通過拓?fù)浞治?,選取Degree值二倍中位數(shù)篩選得到關(guān)鍵作用靶點(diǎn)13個,其中白細(xì)胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、缺氧誘導(dǎo)因子1α多肽(Hypoxia-Inducible Factor 1-Alpha,HIF1A)、血管內(nèi)皮生長因子A(Vascular Endothelial Growth Factor A,VEGFA)與該疾病關(guān)系較為密切。IL-6為重要的炎癥指標(biāo)和介質(zhì),有研究表明,IL-6可對血管內(nèi)皮細(xì)胞及炎癥細(xì)胞產(chǎn)生直接的激活和毒性作用,可通過加速和放大炎癥反應(yīng)的速度和程度,對組織器官造成損害[35]。臨床上通過測定血清IL-6的水平,對于早期評價上呼吸道感染嚴(yán)重程度具有重要意義[36]。研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α對炎癥細(xì)胞的表達(dá)有重要影響[37-38]。在抑制HIF-1α表達(dá)后,IL-6及TNF-α的活性明顯減低,炎癥反應(yīng)明顯下降[39]。VEGFA作為一種細(xì)胞生長因子,由血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生,通過特異性與血管上皮結(jié)合促使血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)血管生成、增加微血管通透性[40],促使炎癥介質(zhì)滲出。因此結(jié)合以上分析,推測小兒化毒散或可通過抑制炎癥反應(yīng)等途徑發(fā)揮治療上呼吸道感染作用。

    對以上13個關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能和KEGG通路富集分析,其中GO功能分析結(jié)果主要涉及參與上皮細(xì)胞增殖的正調(diào)控、對雌二醇的反應(yīng)、對藥物有反應(yīng)、RNA聚合酶Ⅱ啟動子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控等生物進(jìn)程。KEGG富集分析結(jié)果顯示,HIF-1信號通路與上呼吸道感染疾病關(guān)系較為密切。HIF-1是缺氧機(jī)制的重要因子,可以調(diào)控葡萄糖代謝、細(xì)胞增殖和血管形成,在病毒感染中有重要作用[41]。在呼吸道疾病中,氣道重塑導(dǎo)致氣道結(jié)構(gòu)的進(jìn)行性改變,使患者對藥物敏感度下降,療效不佳。有研究表明,通過抑制HIF-1,可以減輕氣道重塑[42],降低炎癥反應(yīng),增加患者對藥物的敏感度,從而改善患者的癥狀和預(yù)后。因此,結(jié)合本研究中關(guān)鍵靶點(diǎn)以及重要活性成分,推測小兒化毒散治療上呼吸道感染可能通過調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、調(diào)控缺氧機(jī)制進(jìn)而發(fā)揮治療上呼吸道感染的治療效果。

    小兒化毒散以牛黃、大黃清熱解毒為君。黃連、川貝母清熱散結(jié)解毒,珍珠可以清熱解毒、生肌斂瘡,雄黃燥濕祛痰殺蟲,天花粉排膿,共為臣藥。赤芍涼血活,乳香、沒藥活血止痛,冰片清熱止痛,內(nèi)清外透,共為佐藥。甘草清熱解毒,調(diào)和諸藥,而為佐使藥。諸藥合用,共奏清熱解毒,活血?dú)⑾x之功,對于上呼吸道感染治療尤為適宜。

    4 結(jié)語

    綜上所述,本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法對小兒化毒散治療上呼吸道感染的主要作用成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)、作用機(jī)制等進(jìn)行了初步探討,并運(yùn)用分子對接的方法初步驗(yàn)證該結(jié)果。結(jié)果顯示,小兒化毒散治療上呼吸道感染可能通過其關(guān)鍵成分槲皮素、黃芩素、異鼠李素通過HIF-1等信號通路作用于IL6、HIF1A及VEGFA等關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白,調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、調(diào)控缺氧機(jī)制進(jìn)而發(fā)揮治療上呼吸道感染的治療效果,并通過分子對接驗(yàn)證槲皮素、黃芩素、異鼠李素為關(guān)鍵化合物,HIF1A為關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白。本研究雖在分子對接層面初步驗(yàn)證網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果,但為臨床研究更加嚴(yán)謹(jǐn),后續(xù)會通過進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究來驗(yàn)證本研究結(jié)果,以期為上呼吸道感染的治療提供新的方法。

    參考文獻(xiàn)

    [1]計(jì)程遠(yuǎn),鄭麗娜,葉遠(yuǎn)征,等.反復(fù)呼吸道感染患兒血清維生素A水平與免疫功能的關(guān)系[J].中國婦幼保健,2021,36(23):5433-5435.

    [2]辜斌.布地奈德聯(lián)合復(fù)方異丙托溴銨治療呼吸道感染患者發(fā)熱、咳嗽及咽癢癥狀的效果[J].臨床合理用藥雜志,2020,13(35):48-49.

    [3]麥建益,陳絲潔,周念瑩.中藥聯(lián)合推拿與西醫(yī)常規(guī)治療在小兒反復(fù)呼吸道感染中的效果比較[J].中醫(yī)臨床研究,2020,12(26):24-26.

    [4]孔飛,袁斌.袁斌從伏邪論治反復(fù)呼吸道感染經(jīng)驗(yàn)[J].山東中醫(yī)雜志,2020,39(12):1328-1331.

    [5]劉慧,梁冬,余靖一,等.補(bǔ)脾益肺固本湯對上呼吸道感染患者免疫球蛋白含量變化的影響[J/OL].中華中醫(yī)藥學(xué)刊:1-11[2021-12-14].http://kns.cnki.net/kcms/detail/21.1546.r.20211009.2029.049.html.

    [6]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].南京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:478.

    [7]肖飛,趙厚睿,向希雄,等.小兒化毒散臨床應(yīng)用探討[J].世界中醫(yī)藥,2015,10(11):1806-1807.

    [8]張茵.小兒化毒散治療小兒便秘92例療效觀察[J].中國醫(yī)藥指南,2020,18(1):176.

    [9]鄭植彬,陳慶梅,趙厚睿.小兒化毒散治療小兒便秘98例的療效觀察[J].世界中醫(yī)藥,2017,12(6):1314-1316.

    [10]王嫻.觀察小兒化毒散治療小兒口腔潰瘍的臨床療效[J].中外女性健康研究,2018,26(20):102,191.

    [11]李錦開.現(xiàn)代中成藥手冊[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,2001:96.

    [12]譚新華,陸德銘.中醫(yī)外科學(xué)[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社,1999:682.

    [13]張濱紅,孫竹蘭.家庭醫(yī)生實(shí)用手冊[M].哈爾濱:黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社,2006:39.

    [14]汪受傳,韓新民.兒科疾病中醫(yī)治療全書[M].廣州:廣東科技出版社,2000:112.

    [15]王紅.中西醫(yī)結(jié)合治療小兒急性扁桃體炎隨機(jī)對照試驗(yàn)的Meta分析[D].成都:成都中醫(yī)藥大學(xué),2020.

    [16]劉娥,姚如永.小兒化毒散治療兒童急性化膿性扁桃體炎臨床分析[J].泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2015,36(10):1114-1115.

    [17]丁冬勝,鄒敏書,聶國明.小兒化毒散治療小兒急性化膿性扁桃體炎臨床療效觀察[J].華南國防醫(yī)學(xué)雜志,2015,29(1):66-67.

    [18]李華浚,姚歡銀.小兒化毒散聯(lián)合甘草鋅治療皰疹性咽峽炎的臨床研究[J].世界中醫(yī)藥,2016,11(12):2705-2706,2710.

    [19]王月鳳.小兒化毒散聯(lián)合利巴韋林泡騰顆粒治療兒童流行性腮腺炎的療效分析[J].中國醫(yī)藥指南,2020,18(9):198-199.

    [20]Ru J,Li P,Wang J,et al.TCMSP:a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines[J].J Cheminform,2014,6:13.

    [21]Xu X,Zhang W,Huang C,et al.A novel chemometric method for the prediction of human oral bioavailability[J].Int J Mol Sci,2012,13(6):6964-6982.

    [22]Tao W,Xu X,Wang X,et al.Network pharmacology-based prediction of the active ingredients and potential targets of Chinese herbal Radix Curcumae formula for application to cardiovascular disease[J].J Ethnopharmacol,2013,145(1):1-10.

    [23]Szklarczyk D,Gable AL,Lyon D,et al.STRING v11:protein-protein association networks with increased coverage,supporting functional discovery in genome-wide experimental datasets[J].Nucleic Acids Res,2019,47(D1):D607-D613.

    [24]Chae S,Kang KA,Chang WY,et al.Effect of compound K,a metabolite of ginseng saponin,combined with gamma-ray radiation in human lung cancer cells in vitro and in vivo[J].J Agric Food Chem,2009,57(13):5777-5782.

    [25]黎敏,楊武斌,米本中,等.槲皮素抗癌作用機(jī)制相關(guān)研究報(bào)道[J].中藥藥理與臨床,2018,34(2):129-132,24.

    [26]李丹,李力,張柳紅.魚腥草有效成分抗巨細(xì)胞病毒的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國婦幼保健,2010,25(36):5463-5465.

    [27]史敏,孫琳,李倩,等.黃芩素在衰老相關(guān)疾病中的作用及機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國美容醫(yī)學(xué),2021,30(4):176-180.

    [28]王力彬.兒茶—黃芩配伍體內(nèi)效應(yīng)物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2018.

    [29]蘇真真,竇潔,徐志鵬,等.黃芩素抑制流感病毒A/FM1/1/47(H1N1)的一個新機(jī)理:干擾病毒中后期mRNA的合成[J].中國天然藥物,2012,10(6):415-420.

    [30]陳冉,王婷婷,李開鈴,等.免疫調(diào)節(jié)抗病毒中藥的特性與應(yīng)用[J].中草藥,2020,51(6):1412-1426.

    [31]閆姍,王曉坤,楊林燕,等.異鼠李素的抗炎作用研究進(jìn)展[J].甘肅科技,2020,36(13):115-118.

    [32]馬悅,閆姍,南曉東,等.異鼠李素的心血管藥理作用研究進(jìn)展[J].甘肅科技,2020,36(19):158-160.

    [33]劉威良,姬昱,黃艾祥.β-谷甾醇的研究及開發(fā)進(jìn)展[J].農(nóng)產(chǎn)品加工,2019,18(1):77-79,82.

    [34]Mahajan SG,Mehta AA.Suppression of ovalbumin-induced Th2-driven airway inflammation by β-sitosterol in a guinea pig model of asthma[J].Eur J Pharmacol,2011,650(1):458-464.

    [35]鐘宏,史勇,李觀強(qiáng).TNF-α和IL-6在重癥急性胰腺炎患者血清中的變化及臨床意義[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2012,9(19):157-158.

    [36]黃紅華,丁凱宏,班副植,等.血清降鈣素原、超敏C反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素6檢測對急性上呼吸道感染患兒的臨床意義[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(14):1906-1908.

    [37]Fan MH,Klein RD,Steinstraesser L,et al.An essential role for lipopolysaccharide-binding protein in pulmonary innate immune responses[J].Shock,2002,18(3):248-254.

    [38]Peyssonaux C,Johnson RS.An unexpected role for hypoxic response:oxygenation and inflammation[J].Cell Cycle,2004,3(2):168-171.

    [39]韓朋,朱召芹,張萬菊,等.H1N1病毒感染小鼠模型中HIF-1α對炎癥因子表達(dá)影響的作用研究[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志,2018,38(7):494-499.

    [40]Michinaga S.The Endothelin ET(B) Receptor Antagonist BQ788 Protects against Brain Edema after Fluid Percussion Injury by Decreasing Vascular Endothelial Growth Factor-A Expression in Mice[J].Yakugaku Zasshi,2017,137(10):1241-1246.

    [41]李瓊毅,馮若飛,喬自林,等.缺氧誘導(dǎo)因子-1在病毒感染中的作用[J].微生物學(xué)雜志,2014,34(1):88-91.

    [42]文穎,郭永艷,霍如婕,等.缺氧和HIF-1影響氣道重塑的研究進(jìn)展[J].臨床肺科雜志,2021,26(10):1586-1590.

    (2021-08-18收稿 責(zé)任編輯:魏慶雙)

    猜你喜歡
    上呼吸道感染分子對接網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)
    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法分析中藥臨床治療胸痹的作用機(jī)制
    從網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)角度研究白芍治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用
    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的沙棘總黃酮治療心肌缺血的作用機(jī)制研究
    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析丹參山楂組分配伍抗動脈粥樣硬化的作用機(jī)制研究
    基于計(jì)算機(jī)輔助水解的中藥大豆寡肽的ETA拮抗活性預(yù)測
    靈芝三萜化合物的抗腫瘤靶點(diǎn)預(yù)測與活性驗(yàn)證
    兒科上呼吸道感染的處方用藥研究
    計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)在分子對接中的應(yīng)用
    反復(fù)上呼吸道感染患兒耐甲氧西林葡萄球菌的檢測
    亞急性甲狀腺炎誤診臨床分析
    亚洲精品成人av观看孕妇| 99国产精品免费福利视频| 村上凉子中文字幕在线| 视频区欧美日本亚洲| 成人免费观看视频高清| 久久99一区二区三区| 久久99一区二区三区| 夜夜爽天天搞| 欧美精品一区二区免费开放| 国产单亲对白刺激| 国产亚洲欧美精品永久| 国产激情久久老熟女| 搡老乐熟女国产| 桃色一区二区三区在线观看| av网站在线播放免费| 成人18禁在线播放| av国产精品久久久久影院| 亚洲专区字幕在线| 村上凉子中文字幕在线| 久久人妻熟女aⅴ| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产成人免费无遮挡视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 午夜a级毛片| 男女床上黄色一级片免费看| 丝袜美腿诱惑在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 久9热在线精品视频| 亚洲成国产人片在线观看| 高清在线国产一区| 91九色精品人成在线观看| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲全国av大片| 国产精品影院久久| 久久亚洲精品不卡| 免费观看人在逋| 99riav亚洲国产免费| 精品熟女少妇八av免费久了| 搡老乐熟女国产| 黄色怎么调成土黄色| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲全国av大片| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 免费看a级黄色片| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久中文字幕人妻熟女| 性色av乱码一区二区三区2| 国产在线观看jvid| bbb黄色大片| a级毛片在线看网站| 日韩欧美三级三区| 午夜两性在线视频| 超色免费av| 在线观看午夜福利视频| 99riav亚洲国产免费| 两性夫妻黄色片| 1024视频免费在线观看| 国产高清videossex| 黑人猛操日本美女一级片| 多毛熟女@视频| 1024视频免费在线观看| 午夜免费激情av| 欧美激情高清一区二区三区| 久久久久久久午夜电影 | 他把我摸到了高潮在线观看| 一区福利在线观看| 国产野战对白在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 激情视频va一区二区三区| 在线观看免费视频日本深夜| 真人做人爱边吃奶动态| 免费av中文字幕在线| 午夜免费激情av| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲国产精品sss在线观看 | 超色免费av| 午夜福利在线免费观看网站| 欧美午夜高清在线| 日韩精品青青久久久久久| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 欧美久久黑人一区二区| 美女国产高潮福利片在线看| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美成人性av电影在线观看| 午夜老司机福利片| 丁香六月欧美| 国产成人欧美| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 美女大奶头视频| 午夜福利一区二区在线看| 露出奶头的视频| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 成人亚洲精品av一区二区 | 不卡av一区二区三区| 久久香蕉精品热| 亚洲国产精品999在线| 母亲3免费完整高清在线观看| bbb黄色大片| netflix在线观看网站| 成人av一区二区三区在线看| 在线免费观看的www视频| 午夜亚洲福利在线播放| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 性欧美人与动物交配| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产又爽黄色视频| 亚洲片人在线观看| 日韩av在线大香蕉| 淫妇啪啪啪对白视频| 少妇粗大呻吟视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 操美女的视频在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 日韩欧美一区视频在线观看| 真人一进一出gif抽搐免费| 可以在线观看毛片的网站| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 嫩草影院精品99| 久久性视频一级片| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产高清videossex| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久天堂一区二区三区四区| 日韩高清综合在线| 国产人伦9x9x在线观看| ponron亚洲| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 1024视频免费在线观看| 午夜免费鲁丝| 999久久久国产精品视频| 久久久久久大精品| 免费不卡黄色视频| 岛国在线观看网站| 亚洲第一青青草原| 国产成人av教育| 男男h啪啪无遮挡| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 精品久久久久久久毛片微露脸| 免费在线观看亚洲国产| 老司机亚洲免费影院| 精品一区二区三卡| 亚洲人成电影观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 婷婷精品国产亚洲av在线| 五月开心婷婷网| aaaaa片日本免费| av电影中文网址| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国产精品久久视频播放| 久久人妻av系列| 久久精品91蜜桃| 精品乱码久久久久久99久播| 人人妻人人澡人人看| 成人精品一区二区免费| 亚洲欧美日韩无卡精品| 麻豆av在线久日| 国产人伦9x9x在线观看| av天堂在线播放| 国产精品av久久久久免费| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产亚洲欧美98| 亚洲avbb在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 久久久国产精品麻豆| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产精品1区2区在线观看.| 欧美黑人欧美精品刺激| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 18禁观看日本| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲在线自拍视频| 亚洲专区中文字幕在线| 男女之事视频高清在线观看| 久久热在线av| 亚洲少妇的诱惑av| 1024视频免费在线观看| 黑人操中国人逼视频| 国产av一区二区精品久久| 国产欧美日韩一区二区精品| 午夜福利影视在线免费观看| 亚洲久久久国产精品| 免费不卡黄色视频| 免费在线观看影片大全网站| 人成视频在线观看免费观看| 久久久久久久久中文| 一区二区日韩欧美中文字幕| x7x7x7水蜜桃| 亚洲专区国产一区二区| 成在线人永久免费视频| 亚洲在线自拍视频| 欧美在线黄色| 夜夜夜夜夜久久久久| 免费日韩欧美在线观看| 岛国视频午夜一区免费看| 国产麻豆69| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 精品国产美女av久久久久小说| 18禁美女被吸乳视频| 高清在线国产一区| 不卡av一区二区三区| 欧美一区二区精品小视频在线| 一区福利在线观看| 九色亚洲精品在线播放| 91字幕亚洲| 看黄色毛片网站| 老熟妇仑乱视频hdxx| 91精品三级在线观看| 一进一出抽搐动态| 热re99久久国产66热| 神马国产精品三级电影在线观看 | 99热只有精品国产| 久久精品人人爽人人爽视色| 嫁个100分男人电影在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产视频一区二区在线看| 成在线人永久免费视频| 欧美最黄视频在线播放免费 | 精品无人区乱码1区二区| 亚洲专区国产一区二区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 黄色毛片三级朝国网站| 欧美黑人欧美精品刺激| 高清在线国产一区| 99re在线观看精品视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 51午夜福利影视在线观看| 我的亚洲天堂| 男女下面进入的视频免费午夜 | 天堂√8在线中文| 精品熟女少妇八av免费久了| 人人澡人人妻人| 色老头精品视频在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 大陆偷拍与自拍| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产精品一区二区免费欧美| 一级黄色大片毛片| avwww免费| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 免费在线观看亚洲国产| 色综合婷婷激情| 日韩欧美国产一区二区入口| 久久香蕉国产精品| 久久午夜亚洲精品久久| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| av欧美777| 久久久久久久精品吃奶| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产午夜精品久久久久久| 视频在线观看一区二区三区| 老司机福利观看| 美女国产高潮福利片在线看| 欧美激情 高清一区二区三区| 免费在线观看黄色视频的| 成人精品一区二区免费| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 午夜福利在线免费观看网站| 成人亚洲精品av一区二区 | 18禁国产床啪视频网站| 久久久久九九精品影院| av网站在线播放免费| 国产精品一区二区精品视频观看| 精品人妻在线不人妻| 69av精品久久久久久| 夫妻午夜视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 岛国视频午夜一区免费看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 丝袜美足系列| 久久人人精品亚洲av| 亚洲一区二区三区欧美精品| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲七黄色美女视频| 久久久国产成人免费| 我的亚洲天堂| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 中文亚洲av片在线观看爽| 婷婷精品国产亚洲av在线| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美日本中文国产一区发布| av在线天堂中文字幕 | 亚洲色图综合在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 91国产中文字幕| 五月开心婷婷网| 午夜免费激情av| 大码成人一级视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 身体一侧抽搐| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久热爱精品视频在线9| 欧美在线黄色| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 中国美女看黄片| 国产成人欧美在线观看| 美国免费a级毛片| 88av欧美| 亚洲一区高清亚洲精品| 不卡av一区二区三区| a级片在线免费高清观看视频| 美女 人体艺术 gogo| 高清欧美精品videossex| 男人舔女人下体高潮全视频| 成人黄色视频免费在线看| 国产精品久久久久成人av| 在线观看一区二区三区| 一进一出抽搐动态| 国产精品99久久99久久久不卡| 99精品欧美一区二区三区四区| 精品久久久久久电影网| 亚洲色图av天堂| 精品国产美女av久久久久小说| av片东京热男人的天堂| 少妇 在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 在线av久久热| 97人妻天天添夜夜摸| 久久精品影院6| 一区在线观看完整版| 丁香六月欧美| 国产一区在线观看成人免费| 色精品久久人妻99蜜桃| 9色porny在线观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 90打野战视频偷拍视频| 一进一出抽搐动态| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 精品一区二区三区av网在线观看| 免费在线观看完整版高清| 成人影院久久| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 丰满的人妻完整版| 久久人妻av系列| 免费av毛片视频| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产高清激情床上av| 99久久综合精品五月天人人| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产精品 欧美亚洲| 国产一区在线观看成人免费| www.精华液| 一区福利在线观看| 日本三级黄在线观看| avwww免费| 亚洲avbb在线观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久影院123| 久热这里只有精品99| av网站在线播放免费| 美女午夜性视频免费| 国产亚洲欧美98| 乱人伦中国视频| 99精品久久久久人妻精品| 国产高清视频在线播放一区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产精品免费视频内射| 亚洲激情在线av| 香蕉国产在线看| 在线国产一区二区在线| 男女下面进入的视频免费午夜 | 一级毛片高清免费大全| 亚洲少妇的诱惑av| 麻豆av在线久日| 在线国产一区二区在线| 国产亚洲精品第一综合不卡| 一夜夜www| 可以在线观看毛片的网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 18美女黄网站色大片免费观看| 午夜日韩欧美国产| av天堂在线播放| 超色免费av| 一本综合久久免费| 日韩精品免费视频一区二区三区| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 久久精品国产亚洲av高清一级| 成人永久免费在线观看视频| 日韩av在线大香蕉| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚洲五月婷婷丁香| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产麻豆69| 国产三级在线视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 一进一出好大好爽视频| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 成人亚洲精品一区在线观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 性色av乱码一区二区三区2| 国产精品久久久久成人av| 国产成人精品久久二区二区91| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 久久久久国内视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 无遮挡黄片免费观看| 精品日产1卡2卡| 男女下面进入的视频免费午夜 | 在线观看免费日韩欧美大片| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 精品国产一区二区久久| 最好的美女福利视频网| 亚洲avbb在线观看| 99热只有精品国产| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 日韩国内少妇激情av| 满18在线观看网站| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 日本免费一区二区三区高清不卡 | 韩国av一区二区三区四区| 一夜夜www| 国产精品99久久99久久久不卡| 高清毛片免费观看视频网站 | a在线观看视频网站| 亚洲一区二区三区色噜噜 | 不卡一级毛片| 精品久久久久久电影网| 欧美在线黄色| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 丝袜美足系列| 69av精品久久久久久| 国产视频一区二区在线看| 麻豆国产av国片精品| 男人舔女人的私密视频| 久久久国产成人精品二区 | 脱女人内裤的视频| 久久中文字幕一级| 一二三四在线观看免费中文在| 欧美精品一区二区免费开放| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产亚洲欧美精品永久| 宅男免费午夜| 中文字幕高清在线视频| 91大片在线观看| av免费在线观看网站| 精品国产乱码久久久久久男人| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产主播在线观看一区二区| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲 国产 在线| 麻豆国产av国片精品| 久久精品91蜜桃| 女警被强在线播放| 啦啦啦免费观看视频1| 国产人伦9x9x在线观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 午夜成年电影在线免费观看| 天堂√8在线中文| 91九色精品人成在线观看| 精品福利永久在线观看| 动漫黄色视频在线观看| 操美女的视频在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产精品av久久久久免费| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 午夜免费激情av| 97碰自拍视频| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲第一青青草原| 一区二区三区国产精品乱码| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 少妇的丰满在线观看| 久久天堂一区二区三区四区| 中文字幕高清在线视频| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 午夜免费激情av| 日韩欧美国产一区二区入口| 午夜成年电影在线免费观看| 在线天堂中文资源库| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| a级毛片在线看网站| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 精品欧美一区二区三区在线| 男女床上黄色一级片免费看| 精品国产国语对白av| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产真人三级小视频在线观看| 久久影院123| 午夜福利在线免费观看网站| 一二三四在线观看免费中文在| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 午夜影院日韩av| 高清在线国产一区| 淫秽高清视频在线观看| av免费在线观看网站| 久99久视频精品免费| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 黑人猛操日本美女一级片| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 免费观看精品视频网站| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产99白浆流出| 在线av久久热| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 搡老熟女国产l中国老女人| 啪啪无遮挡十八禁网站| 大型黄色视频在线免费观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 18禁国产床啪视频网站| 国产熟女xx| 中国美女看黄片| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 亚洲精品国产一区二区精华液| 99在线人妻在线中文字幕| 757午夜福利合集在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 一级a爱片免费观看的视频| 丰满迷人的少妇在线观看| 久久中文字幕一级| 动漫黄色视频在线观看| www国产在线视频色| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 一本大道久久a久久精品| 中文欧美无线码| 国产三级在线视频| 9色porny在线观看| 男女之事视频高清在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av | 国产精品一区二区三区四区久久 | av网站在线播放免费| 亚洲,欧美精品.| 久久影院123| av有码第一页| 91九色精品人成在线观看| 国产免费现黄频在线看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 国产熟女午夜一区二区三区| 美女大奶头视频| 久久青草综合色| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产高清视频在线播放一区| 国产成人啪精品午夜网站| 91成年电影在线观看| 国产亚洲av高清不卡| 十分钟在线观看高清视频www| 深夜精品福利| 岛国在线观看网站| 国产国语露脸激情在线看| 国产高清激情床上av| 精品卡一卡二卡四卡免费| 高清毛片免费观看视频网站 | 无人区码免费观看不卡| 国产精品国产av在线观看| 精品高清国产在线一区| 十八禁人妻一区二区| 男女午夜视频在线观看| 9色porny在线观看| 在线看a的网站| 少妇粗大呻吟视频| 久久伊人香网站| 久久中文字幕人妻熟女| 999精品在线视频| 国产激情久久老熟女| 亚洲av电影在线进入| 日韩中文字幕欧美一区二区| 91麻豆av在线| 久久久久久大精品| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产精品亚洲av一区麻豆| 天堂动漫精品| 欧美日韩精品网址| 精品国产一区二区久久| 在线免费观看的www视频| 757午夜福利合集在线观看| 无人区码免费观看不卡| 99热只有精品国产| 色老头精品视频在线观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 在线免费观看的www视频| 亚洲国产精品合色在线| 国产极品粉嫩免费观看在线| 18禁国产床啪视频网站| 欧美精品啪啪一区二区三区| 午夜老司机福利片| 亚洲av美国av| 精品福利观看| 性少妇av在线| 国产一区二区三区综合在线观看| 九色亚洲精品在线播放| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产一区二区在线av高清观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 少妇的丰满在线观看| 色综合站精品国产| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲男人的天堂狠狠| 久久久精品欧美日韩精品| 麻豆久久精品国产亚洲av | videosex国产| 亚洲熟女毛片儿| 亚洲avbb在线观看| 久久中文字幕人妻熟女|