Sysmex UF-1000i 全自動(dòng)尿液有形成分分析儀性能評(píng)價(jià)

羅燕萍，王成，蔡珠妹，莫紅梅，張秀明

（深圳市羅湖醫(yī)院集團(tuán)羅湖區(qū)人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣東 深圳）

0 引言

尿沉渣有形成分檢測(cè)對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病、腎臟疾病、感染性疾病及循環(huán)系統(tǒng)疾病的臨床診斷與鑒別診斷有重要價(jià)值[1-2]。Sysmex UF-10001 全自動(dòng)尿有形成分分析儀基于流式細(xì)胞計(jì)數(shù)原理分析尿樣中的有形成分白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞（RBC)、上皮細(xì)胞（EC)、管型（CAST)、細(xì)菌（BACT)，并可定量顯示；《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》要求，尿液有形成分分析儀在常規(guī)使用前，應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室對(duì)未加修改而使用的已確認(rèn)的檢驗(yàn)程序進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證。本實(shí)驗(yàn)室按照《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在體液學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明》對(duì)尿液有形成分分析儀性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Sysmex UF-1000i 全自動(dòng)尿液有形成分分析儀（儀器編號(hào)：LJ-A-04)及相關(guān)配套試劑、校準(zhǔn)品、UF CHECK 質(zhì)控液。

1.2 標(biāo)本來源

實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來源于深圳市羅湖區(qū)人民醫(yī)院住院和門診及健康體檢者的尿液標(biāo)本，2h 內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 批內(nèi)精密度

2.1.1 實(shí)驗(yàn)方案

按照CLSI EP5-A2 指南，收集高、中、低三個(gè)濃度水平的新鮮尿液分別用自動(dòng)進(jìn)樣模式連續(xù)測(cè)定11 次，剔除第1 次結(jié)果，取后10 次結(jié)果計(jì)算均值（χ2）、標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和變異系數(shù)（CV）。

2.1.2 判斷標(biāo)準(zhǔn)

所有參數(shù)批內(nèi)精密度的變異系數(shù)必須符合廠商聲明要求，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST≤40.0%,B ACT ≤20.0%。

2.2 批間精密度

2.2.1 實(shí)驗(yàn)方案

使用室內(nèi)質(zhì)控在控結(jié)果的CV%作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，至少使用兩個(gè)水平（包含正常和異常水平）的質(zhì)控品，在檢測(cè)當(dāng)天至少進(jìn)行一次室內(nèi)質(zhì)控，剔除失控?cái)?shù)據(jù)（失控結(jié)果已得到糾正）后按批號(hào)或者月份計(jì)算在控?cái)?shù)據(jù)的CV%（至少20 次數(shù)據(jù)）。

2.2.2 判定標(biāo)準(zhǔn)

應(yīng)符合Sysmex UF-1000i 說明書要求批間精密度，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST ≤40.0%,BA CT ≤20.0%。

2.3 攜帶污染率

2.3.1 實(shí)驗(yàn)方案

按照CLSI EP10-A3 指南，選擇RBC、WBC、BACT 濃度分別在（1000-5000）/μl、（1000-5000）/μl 和（5000-10000）/μl 的高值尿液樣本混合均勻后連續(xù)測(cè)定3 次，測(cè)定值分別為H1、H2、H3；再用低值樣本(無菌生理鹽水)連續(xù)測(cè)定3 次，測(cè)定值分別為L(zhǎng)1、L2、L3。按下列公式計(jì)算攜帶污染率[攜帶污染率%=（L1-L3）/（H3-L3）×100%]。

2.3.2 判斷標(biāo)準(zhǔn)

應(yīng)達(dá)到Sysmex UF-1000i 儀器說明書要求的攜帶污染率，RBC 和WBC 攜帶污染率≤0.10%，BACT 攜帶污染率≤0.05%。

2.4 線性范圍

2.4.1 實(shí)驗(yàn)方案

取富含紅細(xì)胞、白細(xì)胞、細(xì)菌和上皮細(xì)胞的尿液樣本（RBC：10000 個(gè)/μl、WBC：2000 個(gè)/μl、BACT：10000 個(gè)/μl）分別按1:2，1:4，1:16，1:64，1:256 的比例用鞘液進(jìn)行稀釋每個(gè)稀釋度測(cè)定3 次，取均值為檢測(cè)值，將檢測(cè)值與理論值作比較，進(jìn)行線性回歸相關(guān)分析，計(jì)算公式y(tǒng)=ax+b，驗(yàn)證可報(bào)告范圍。

2.4.2 判斷標(biāo)準(zhǔn)

a 值（斜率）在1±0.05 范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r ≥0.975。

2.5 準(zhǔn)確度驗(yàn)證

2.5.1 實(shí)驗(yàn)方案

使用Sysmex UF-1000i 全自動(dòng)尿有形成分分析儀UF CHECK 高值質(zhì)控液按照說明書要求混勻后連續(xù)進(jìn)行5 次測(cè)定，計(jì)算平均值（χ2），與靶值相比較，計(jì)算其偏差值。

2.5.2 判斷標(biāo)準(zhǔn)

各參數(shù)偏差值要求在質(zhì)控說明書靶值范圍內(nèi)，見表3。

表3 UF CHECK 質(zhì)控液靶值

2.6 生物參考區(qū)間

2.6.1 實(shí)驗(yàn)方案

Sysmex UF-1000i 國(guó)內(nèi)目前沒有參考區(qū)間，本室對(duì)Sysmex 公司提供的日本的參考區(qū)間依據(jù)WS/T 402-2012《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》中相關(guān)要求進(jìn)行驗(yàn)證；選擇符合生物參考區(qū)間本室納入標(biāo)準(zhǔn)的健康體檢者尿液標(biāo)本40 份，男女各20 例，年齡20-60 歲，連續(xù)上機(jī)進(jìn)行測(cè)定，對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。參考區(qū)間范圍見表4。

表4 UF-1000i 報(bào)告參數(shù)的參考區(qū)間

2.6.2 判定標(biāo)準(zhǔn)

符合率R 值計(jì)算：R=落在參考區(qū)間例數(shù)/實(shí)驗(yàn)例數(shù)，要求R ≥90%為驗(yàn)證通過。

2.7 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器間比對(duì)試驗(yàn)

2.7.1 實(shí)驗(yàn)方案

選擇10 份新鮮尿液樣本，包括正常與異常樣本，與參加SNCS（Sysmex nework communication system）全球室內(nèi)質(zhì)控比對(duì)且成績(jī)良好的UF-1000i 全自動(dòng)尿液有形成分分析儀（儀器編號(hào)為MJ-A-10）進(jìn)行儀器間比對(duì)實(shí)驗(yàn)，每個(gè)樣本測(cè)定3次取其均值，計(jì)算兩臺(tái)儀器之間的偏差百分比。

2.7.2 判定標(biāo)準(zhǔn)

符合Sysmex UF-1000i 比對(duì)偏差要求的結(jié)果應(yīng)≥80%，RBC ≤10.0%,WBC ≤10.0%,EC ≤30.0%,CAST ≤40.0%,BA CT ≤20.0%。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 批內(nèi)精密度

3.1.1 批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

見表6。

表6 批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1.2 結(jié)論

各檢測(cè)項(xiàng)目的CV%均小于廠商聲明要求，驗(yàn)證通過。

3.2 批間精密度

3.2.1 批間精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

見表7、表8。

3.2.2 結(jié)論

各檢測(cè)項(xiàng)目低值和高值的批間精密度均符合Sysmex UF-1000i 說明書要求，驗(yàn)證通過。

3.3 攜帶污染率

3.3.1 攜帶污染率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

見表9。

3.3.2 結(jié)論

RBC、WBC、BACT 攜帶污染率均小于Sysmex UF-1000i儀器說明書要求標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證通過。

表7 高值批間精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表8 低值批間精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表9 RBC、BACT 攜帶污染率數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

表10 線性范圍實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表11 準(zhǔn)確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

3.4 線性范圍

3.4.1 線性范圍實(shí)驗(yàn)結(jié)果

見表10。

3.4.2 結(jié)論

RBC、WBC、BACT、EC 和CAST 的a 值（斜率）均在1±0.05范圍內(nèi)，R2均≥0.975，驗(yàn)證通過。

3.5 準(zhǔn)確度驗(yàn)證

3.5.1 準(zhǔn)確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

見表11。

3.5.2 結(jié)論

各參數(shù)偏差值要求均在質(zhì)控說明書靶值偏差范圍內(nèi)，準(zhǔn)確度驗(yàn)證通過。

3.6 生物參考區(qū)間驗(yàn)證

3.6.1 生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

見表12、表13。

3.6.2 結(jié)論

男性、女性各項(xiàng)目參考區(qū)間符合率R 值計(jì)算均≥90%，驗(yàn)證通過。

3.7 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器間比對(duì)

3.7.1 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器間比對(duì)結(jié)果

見表13。

3.7.2 結(jié)論

各項(xiàng)目比對(duì)偏差均符合要求，儀器間比對(duì)驗(yàn)證通過。

表12 男性生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

表13 女性生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

表13 儀器間比對(duì)偏差（%）結(jié)果

4 討論

隨著科技的不斷進(jìn)步，人們健康意識(shí)日趨增強(qiáng)，尿液檢測(cè)量大幅提升，尿有形成分人工顯微鏡檢查凸顯不足，自動(dòng)化尿有形成分分析儀應(yīng)運(yùn)而生。目前，國(guó)內(nèi)、外已較普遍使用能對(duì)尿有形成分進(jìn)行自動(dòng)化分析的儀器，迄今為止，這些設(shè)備主要原理為流式細(xì)胞術(shù)和顯微鏡數(shù)據(jù)成像技術(shù)，均可直接檢測(cè)不離心新鮮尿液標(biāo)本，快速定量計(jì)算尿中各種有形成分，其結(jié)果重復(fù)性與人工鏡檢結(jié)果比較有顯著提高，同時(shí)能與實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)接口，便于檢索和結(jié)果報(bào)告；大大提升了尿液檢測(cè)效率。Sysmex UF-1000i 全自動(dòng)尿液有形成分分析儀的核心技術(shù)是以半導(dǎo)體激光作為激發(fā)光源，用核酸熒光染料對(duì)尿中各有形成分進(jìn)行染色，以流式細(xì)胞術(shù)作為有形成分計(jì)數(shù)和分類手段，并以強(qiáng)大計(jì)算機(jī)軟件系統(tǒng)作為有形成分分析平臺(tái)，創(chuàng)立尿有形成分分析自動(dòng)化的新方法[3]。

精密度是指在一定的測(cè)試條件下進(jìn)行多次測(cè)定時(shí)，所得測(cè)定結(jié)果之間的符合程度，表示測(cè)量結(jié)果中隨機(jī)誤差的大小，是儀器性能評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)[4]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果的批內(nèi)精密度和批間精密度均符合廠家聲明要求，說明儀器的重復(fù)性好，這是進(jìn)行其他性能評(píng)價(jià)的前提。攜帶污染率是評(píng)價(jià)儀器測(cè)定兩個(gè)樣本間干擾的程度[5]，本實(shí)驗(yàn)的RBC、WBC 和BACT 的攜帶污染率結(jié)果為0.01%、0.02%、0.01%，由于儀器說明書對(duì)EC和CAST 攜帶污染率未作明確要求，但結(jié)果顯示其攜帶污染率結(jié)果均為0，說明前一高值樣本并未對(duì)后一低值樣本的檢測(cè)結(jié)果造成影響。本研究對(duì)RBC、WBC、EC、CAST、BACT 的線性范圍進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示a 值（斜率）均在1±0.05 范圍內(nèi)，r2均≥0.975，表明其有良好的線性范圍。因高濃度樣本較難收集，WBC、EC、BACT 的上限標(biāo)本比廠家聲明要求低，故證實(shí)的線性范圍比儀器廠商聲稱的低。對(duì)于超過線性的標(biāo)本，可按要求用鞘液稀釋后進(jìn)行測(cè)定，將測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)得出最終測(cè)定值。但張崇唯等[6]研究表明，在臨床診治過程中稀釋后的高值標(biāo)本其檢測(cè)意義不大，因此無需進(jìn)行稀釋，可直接報(bào)告。由于衛(wèi)生部臨檢中心至今仍沒有有尿有形成分室間質(zhì)評(píng)質(zhì)控品，目前對(duì)于準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)仍未有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)[7]，本實(shí)驗(yàn)用UF CHECK 高值質(zhì)控液按照說明書要求混勻后連續(xù)進(jìn)行5 次測(cè)定，均值與靶值相比較，計(jì)算其偏差值；結(jié)果顯示各參數(shù)偏差值要求均在質(zhì)控說明書靶值偏差范圍內(nèi)，說明其準(zhǔn)確度高[8]。另外，還對(duì)儀器廠家提供的生物參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果表明其生物參考區(qū)間適用于本實(shí)驗(yàn)室。同一型號(hào)不同儀器間檢測(cè)結(jié)果會(huì)存在一定的差異，其可比性對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量和臨床診斷治療至關(guān)重要,《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》和CNAS-CL02-A002《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在體液學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明》[9-12]對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的可比性有明確的要求，本室對(duì)兩臺(tái)UF-1000i 檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，結(jié)果顯示符合率均≥80%，表明檢測(cè)結(jié)果一致性好，可比性強(qiáng)，其結(jié)果可互認(rèn)。

綜上所述，Sysmex UF-1000i 全自動(dòng)尿液有形成分分析儀的主要定量參數(shù)白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞（RBC)、上皮細(xì)胞（EC)、管型（CAST)、細(xì)菌（BACT)的批內(nèi)精密度、批間精密度、攜帶污染率、線性范圍、準(zhǔn)確度、生物參考區(qū)間、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)儀器間比對(duì)等指標(biāo)均符合廠商聲明要求，可應(yīng)用于臨床。