化學(xué)發(fā)光免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附試驗在乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測中的效果評價

陳文強

淄博市周村區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，山東淄博 255300

病毒性乙型肝炎是一種常見的肝臟性疾病， 患者多表現(xiàn)為肝區(qū)疼痛，乏力和食欲不振等情況，部分患者會出現(xiàn)黃疸和肝功能受損等損傷，一旦發(fā)現(xiàn)不及時，則很容易導(dǎo)致患者出現(xiàn)肝硬化， 甚至導(dǎo)致肝癌問題的發(fā)生， 這種病情具有一定的傳染性， 會通過血液進行傳播，患者一旦被感染，如不能及時清除，則會導(dǎo)致患者出現(xiàn)免疫功能降低等情況， 甚至導(dǎo)致患者出現(xiàn)全身感染，誘發(fā)各種疾病，對患者的生命安全造成嚴(yán)重威脅[1]。進行血清學(xué)標(biāo)志物檢驗， 是臨床中對乙型肝炎病毒患者進行檢驗的主要方法， 在檢測工作的實際開展過程中， 其主要包括化學(xué)發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附實驗法。該研究則以該院2014 年8 月—2015 年8 月期間所接受的200 例乙型肝炎病毒患者展開相關(guān)研究分析如下，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

于該院乙型肝炎病毒患者中方便選取試驗對象，共選取200 例乙型肝炎病毒患者， 所有患者入院之后需要采集靜脈血， 采集之后分別采取化學(xué)發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附試驗方法， 每種方法檢測人數(shù)為100 例，實驗組患者年齡在22～56 歲；其中男性54 例，女性46 例。 而對照組患者年齡在21～57 歲；其中男性56 例，女性44 例。 兩組人員的一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。 該研究通過倫理委員會批準(zhǔn)，各項工作的開展均在患者簽署知情同意后進行實施。

納入標(biāo)準(zhǔn)： 患者均在經(jīng)過乙肝病毒生物芯片檢測確診為乙型肝炎病毒患者， 患者肝部組織存在不同程度病變。

排除標(biāo)準(zhǔn)： 患者具有精神病史和其他臟器功能損傷的可能性。

1.2 方法

在清晨采集患者空腹靜脈血，主要采集肘靜脈血，為3～5 mL，給予其離心機離心處理，時間為12～14 min，保證3 000 r/min，并將上清液進行分離，并將其放置在冰箱中，將冰箱的溫度調(diào)節(jié)到-20℃給予保存，并將發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附實驗方法進行應(yīng)用[2]。 對患者進行檢查， 其中發(fā)光免疫分析法需要將型號為博陽LICA 化學(xué)發(fā)光儀的免疫分析儀進行應(yīng)用， 而酶聯(lián)免疫吸附實驗方法則是手工方法，其對應(yīng)的檢測試劑均為配套試劑。 在對標(biāo)志物進行實際檢測時，需要根據(jù)試劑的說明書進行嚴(yán)格操作，并注意對檢測結(jié)果進行記錄[3]。

1.3 觀察指標(biāo)

對兩種檢測方法的檢測準(zhǔn)確率和血清標(biāo)志物陽性率進行觀察和分析。

1.4 統(tǒng)計方法

選用SPSS 20.0 統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料以（）表示，行t 檢驗；計數(shù)資料以頻數(shù)和百分比(%)表示，行χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測準(zhǔn)確率

采用發(fā)光免疫分析法進行檢測， 其準(zhǔn)確率達到96.00%，采用酶聯(lián)免疫吸附實驗方法進行檢測，其準(zhǔn)確率為84.00%，其組間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=8.000，P＜0.05），見表1。

表1 兩種檢測方法檢測準(zhǔn)確率分析比較

2.2 血清標(biāo)志物陽性率

發(fā)光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 檢測方面的陽性檢測率為77.00%和35.00%，高于酶聯(lián)免疫吸附實驗方法檢出率的60.00%和20.00%, 其數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=6.697、5.643，P＜0.05），但是發(fā)光免疫分析發(fā)在抗-HBs， 抗-HBe 和抗-HBc 方面的檢出率則為19.00%，24.00%和67.00%， 而酶聯(lián)免疫吸附法的檢出為18.00%，28.00%和66.00%， 兩種檢測方法差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 見表2。

3 討論

在人們的生活方式得以發(fā)生改變的情況下， 乙型肝炎患者的發(fā)病率逐漸增高，患病人數(shù)越來越多，對患者的生活質(zhì)量和生命健康均造成了嚴(yán)重的不良影響，在這種情況下，就需要保證早發(fā)現(xiàn)早治療，從而保證治療有效性，實現(xiàn)對病情發(fā)展的有效控制。 乙型肝炎，為血源性傳播，會經(jīng)血液和母嬰進行，根據(jù)相關(guān)文獻研究數(shù)據(jù)結(jié)果顯示， 在乙肝病毒攜帶者的精液和陰道分泌物中，均能夠檢出HBsAg，這便為乙肝病毒的侵入提供了條件。 也就是說， 梅毒患者既是乙肝病毒的高危人群，也是易感人群。 就病毒性乙型肝炎來說，其是一種常見的肝臟性疾病，患者多表現(xiàn)為肝區(qū)疼痛，乏力和食欲不振等情況， 部分患者會出現(xiàn)黃疸和肝功能受損等損傷， 一旦發(fā)現(xiàn)不及時， 則很容易導(dǎo)致患者出現(xiàn)肝硬化，甚至導(dǎo)致肝癌問題的發(fā)生，這種病情具有一定的傳染性，會通過血液進行傳播，患者一旦被感染，如不能及時清除，則會導(dǎo)致患者出現(xiàn)免疫功能降低等情況，甚至導(dǎo)致患者出現(xiàn)全身心感染，誘發(fā)各種疾病，對患者的生命安全造成嚴(yán)重威脅。 進行血清學(xué)標(biāo)志物檢驗，是臨床中對乙型肝炎病毒患者進行檢驗的主要方法， 在檢測工作的實際開展過程中， 其主要包括化學(xué)發(fā)光免疫及分析法和酶聯(lián)免疫吸附實驗法[5]。 在將傳統(tǒng)診斷方法進行應(yīng)用時，其結(jié)果并不顯著，會對患者的治療造成延誤。 要想將治療率進行提高，保證治療方案合理性，實現(xiàn)對患者病情的有效控制，減輕患者痛苦，就成為了當(dāng)前臨床發(fā)展工作中的重要內(nèi)容。 在近些年的發(fā)展中，發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附法被廣泛應(yīng)用在對乙型病毒性肝炎進行診斷工作中，并且其應(yīng)用效果顯著。

表2 兩種檢測方法的血清標(biāo)志物陽性率檢測情況對比[n(%)]

酶聯(lián)免疫吸附法在進行檢測時， 其應(yīng)用原理需要從幾方面入手，首先，促進某種酶與抗原或抗體進行連接，促進其中酶標(biāo)抗體和抗原的形成，這時所產(chǎn)生的形成物主要包含兩種成分， 分別為酶活性和免疫活性[6]。其次，在固相載體表面抗體或是抗原完成結(jié)合時，其會促進免疫活性的有效保存。 酶聯(lián)免疫吸附法在進行應(yīng)用時，具有一定的臨床優(yōu)勢，不僅操作方法較為簡單，而且其成本較低， 但是在實際中其會受到各種因素的影響限制，導(dǎo)致其具有一定的特異性反應(yīng)，導(dǎo)致結(jié)果呈現(xiàn)出不穩(wěn)定性，就濃度過高的待檢產(chǎn)物來說，其會在鉤狀效應(yīng)的作用下， 導(dǎo)致假陰性結(jié)果的出現(xiàn)，甚至發(fā)生漏檢情況。 酶聯(lián)免疫吸附法的判斷結(jié)果，主要是依據(jù)酶顯色的顏色深淺實現(xiàn)判斷， 在酶與抗原和抗體的結(jié)合物濃度較低時，會表現(xiàn)出較小的吸光度值，并且容易導(dǎo)致假陰性現(xiàn)象的發(fā)生，與此同時，這種檢測方法的應(yīng)用存在一定的局限性， 很容易導(dǎo)致HBsAg 假陰性漏檢現(xiàn)象的發(fā)生[7]。

發(fā)光免疫分析法，是一種新型的檢測方法，主要應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光和免疫測定促進結(jié)合，在實際應(yīng)用中，其會對電化學(xué)發(fā)生作用，會在電極表面引發(fā)化學(xué)反應(yīng)，進而將其進行利用，完成免疫檢測，這是發(fā)光免疫分析法的主要應(yīng)用原理。 發(fā)光免疫分析法的應(yīng)用靈敏度較高，僅需要較短的檢測時間，并且應(yīng)用范圍相對較廣，對應(yīng)的檢測準(zhǔn)確率較高， 因此， 在臨床發(fā)展中得以廣泛認(rèn)可。HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，和抗-HBc 是臨床對病毒性乙型肝炎進行診斷的主要物質(zhì)[8]。

采用發(fā)光免疫分析法進行檢測， 其準(zhǔn)確率達到96.00%，采用酶聯(lián)免疫吸附實驗方法進行檢測，其準(zhǔn)確率為84.00%， 發(fā)光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 檢測方面的檢測值高于酶聯(lián)免疫吸附實驗方法， 其數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但是在抗-HBs，抗-HBe和抗-HBc 方面的檢測值，兩種檢測方法差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。這與Ceejay L 等人[9]的研究結(jié)果相同，其選取50 例乙型肝炎患者進行研究，探究發(fā)光免疫分析法的監(jiān)測準(zhǔn)確性，其檢測準(zhǔn)確率達到94.00%。 而叢青洲[7]則進行了不同方法和實驗室間血清HBsAg、HBeAg 及HBV-DNA 檢測結(jié)果的比較分析， 共選取60 例乙型肝炎患者，其方法分別為發(fā)光免疫法和酶聯(lián)免疫吸附法，結(jié)果表示，各項化學(xué)檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。而該研究結(jié)果則顯示， 發(fā)光免疫分析法在HBsAg 和HBeAg 檢測方面的檢測值高于酶聯(lián)免疫吸附實驗方法， 導(dǎo)致這種情況發(fā)生的原因可能是因為樣本數(shù)大小不同，進而對結(jié)果造成差異性影響。

開展病毒性乙型肝炎的情況分析， 這是一種較為常見的肝臟類型性疾病， 患者會因此病表現(xiàn)出肝區(qū)疼痛現(xiàn)象，并且伴隨著相應(yīng)的食欲不振，部分病情較為嚴(yán)重的患者會出現(xiàn)肝功能受損問題。 此類疾病若發(fā)現(xiàn)的不及時，會使得病情惡化導(dǎo)致患者肝硬化，甚至病變成為肝癌嚴(yán)重的威脅了患者的生命健康安全， 同時此類疾病的傳染性相對較高，因此患者若是被感染，必須進行其自身的病毒的即使清除， 杜絕患者全身心感染問題的出現(xiàn)，同時也避免了各項誘發(fā)性疾病的產(chǎn)生，盡可能的降低疾病對于患者的生命健康的威脅。 在檢測工作開展的實際進程中， 主要應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫以及分析法進行實驗[9]。 當(dāng)下ELISA 在臨床治療開展進程中的運用， 在初期檢測乙肝病毒血清藥理的主要運行方式之一，這一操作方法相對較為簡單，并且實驗結(jié)果的勘察具有較強的明確性和標(biāo)志性， 但是在檢驗工作的開展進程中， 需要進行因抗體產(chǎn)生而形成的檢測誤差的有效排查， 盡可能的降低抗體產(chǎn)生對于實驗結(jié)果的產(chǎn)生的不良影響性。

綜上所述，對乙型肝炎病毒標(biāo)志物進行檢測，發(fā)光免疫分析法和酶聯(lián)免疫吸附實驗法的準(zhǔn)確率均相對較高，但是發(fā)光免疫分析法更為顯著。