乳腺癌病理診斷中免疫組織化學(xué)檢測(cè)的效果分析

劉兆琳

【摘要】 目的 研究乳腺癌病理診斷中免疫組織化學(xué)（IHC）檢測(cè)的應(yīng)用價(jià)值。方法 100例乳腺癌患者作為研究對(duì)象， 按雌激素受體（ER）和孕激素受體（PR）情況分為陰性組和對(duì)照組， 各50例。對(duì)兩組患者采取免疫組織化學(xué)檢測(cè)。比較兩組腋窩淋巴轉(zhuǎn)移率及C-erbB-2情況。結(jié)果 陰性組患者腋窩淋巴轉(zhuǎn)移率為44.00%， 低于陽(yáng)性組的66.00%， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。陰性組患者C-erbB-2（+）占比高于陽(yáng)性組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 對(duì)乳腺癌患者采取免疫組織化學(xué)檢測(cè)具有顯著的應(yīng)用價(jià)值， 可較好的檢測(cè)乳腺癌患者的病情， 該方法值得在臨床上推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 免疫組織化學(xué)檢測(cè);乳腺癌;病理診斷

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.23.002

【Abstract】 Objective? ?To study the practical value of immunohistochemistry （IHC） in the pathological diagnosis of breast cancer. Methods? ?A total of 100 breast cancer patients were selected as the study subjects. According to estrogen receptor （ER） and progesterone receptor （PR） situation， the patients were divided into negative group （50 cases） and control group （50 cases）. Both groups received immunohistochemistry. The axillary lymph node metastasis rate and C-erbB-2 status were compared between the two groups. Results? ?The axillary lymph node metastasis rate of negative group was 44.00%， which was lower than that of the positive group 66.00%， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The proportion of C-erbB-2（+） in negative group was higher than that of positive group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion? Immunohistochemical detection has remarkable practical value in breast cancer patients， which can better detect the condition of breast cancer patients. This method is worthy of clinical promotion and application.

【Key words】 Immunohistochemistry; Breast cancer; Pathological diagnosis

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一， 其根據(jù)病情的發(fā)展可分為良性腫瘤與惡性腫瘤[1]。若該疾病未能采取及時(shí)有效的治療， 則會(huì)造成患者病情不斷惡化， 從而對(duì)患者身心健康以及生命構(gòu)成嚴(yán)重的威脅[2]。在相關(guān)研究中獲悉， 99%乳腺癌發(fā)生在女性人群中， 作為一種發(fā)生在乳腺上皮組織中的惡性腫瘤， 將對(duì)女性的健康和生活質(zhì)量甚至危害產(chǎn)生巨大影響， 因此， 對(duì)乳腺癌良好的臨床診斷有助于及時(shí)治療并改善預(yù)后[3]。根據(jù)國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）2018年的最新數(shù)據(jù)， 乳腺癌在全球女性癌癥中的流行率為24.2%， 在女性癌癥中排名第一， 其中52.9%發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家。在我國(guó)， 乳腺癌的發(fā)病率逐年增長(zhǎng)， 每年有30萬(wàn)多名婦女被診斷出患有乳腺癌。在東部沿海地區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)區(qū)， 乳腺癌的發(fā)病率明顯增加。我國(guó)的乳腺癌發(fā)病率從20歲開始逐漸增加， 從45～50歲達(dá)到達(dá)峰值。隨著新的治療策略和方法的普及， 全球乳腺癌的死亡率已逐漸下降。但是在我國(guó)， 特別是在廣大的農(nóng)村地區(qū)， 乳腺癌死亡率的降低情況不明顯。目前， 決定乳腺癌預(yù)后的重要因素取決于多種腫瘤指標(biāo)， 如腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等， 在乳腺癌患者的個(gè)性化治療過(guò)程中， 鑒別分子條件可以有效預(yù)測(cè)乳房癌患者的治療效果。因乳腺腫瘤可分為良性和惡性， 大多數(shù)患者采取常規(guī)HE切片可以清楚診斷出乳腺疾病， 但通常需要采取免疫組織化學(xué)學(xué)輔助檢測(cè)對(duì)乳腺癌進(jìn)行鑒別診斷， 如乳腺腺病與浸潤(rùn)性癌的診斷， 普通導(dǎo)管增生和非典型增生的鑒別， 導(dǎo)管小葉原位癌和浸潤(rùn)性癌的診斷等[4]。為此本次對(duì)乳腺癌病理診斷中免疫組織化學(xué)檢測(cè)的效果進(jìn)行研究分析， 其研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 將本院于2018年1月～2019年1月收治的100例乳腺癌患者作為本次研究對(duì)象， 按ER和PR情況分為陰性組和對(duì)照組， 各50例。對(duì)兩組患者采取免疫組織化學(xué)檢測(cè)， 觀察兩組患者的檢測(cè)效果。對(duì)照組患者年齡25～43歲， 平均年齡（31.67±10.24）歲;病程5 d～4個(gè)月， 平均病程（1.43±1.23）個(gè)月。陰性組年齡24～42歲， 平均年齡（31.78±9.67）歲;病程6 d～5個(gè)月，?平均病程（1.67±1.47）個(gè)月。兩組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性?；颊呒凹覍倬鶎?duì)本次研究目的知悉， 且自愿參加， 并簽署相關(guān)知情同意書。此次研究已通過(guò)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1. 2 鑒別診斷 ①乳腺鉬靶：廣泛用于乳腺癌的篩查， 對(duì)鈣化灶， 尤其是一些細(xì)小鈣化灶可能是極早期乳腺癌的表現(xiàn);②乳腺超聲：用于乳腺癌診斷及鑒別診斷， 能夠?qū)δ[塊的性質(zhì)做出判斷;③乳腺磁共振成像：乳腺磁共振成像對(duì)乳腺癌的分期評(píng)估， 對(duì)發(fā)現(xiàn)微小病灶、多中心、多病灶及評(píng)價(jià)病變范圍。

1. 3 納入標(biāo)準(zhǔn) 所有患者均符合本次研究標(biāo)準(zhǔn)， 早期乳腺癌的癥狀多不明顯， 乳房腫塊、乳房皮膚異常、乳頭溢液或乳暈異常等為主。

1. 4 排除標(biāo)準(zhǔn) 排除患者嚴(yán)重器官功能性障礙疾病以及患有精神類疾病的患者。

1. 5 方法 兩組患者均采取免疫組織化學(xué)檢測(cè)， 使用4%中性甲醛溶液將標(biāo)本予以固定， 防止組織細(xì)胞的死后變化， 以保持其固有形態(tài)， 使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)等各種抗原成份轉(zhuǎn)變成不溶性物質(zhì)， 以保持其原有的結(jié)構(gòu)。之后進(jìn)行脫水、包埋、切片以及HE染色處理。采取萊卡自動(dòng)免疫染色機(jī)對(duì)免疫組織化學(xué)予以染色處理， 采用北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司所生產(chǎn)的ER、PR以及表皮生長(zhǎng)因子受體-2（HER-2）抗體。

1. 6 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 比較兩組患者的腋窩淋巴轉(zhuǎn)移率和C-erbB-2情況。陽(yáng)性免疫染色的標(biāo)準(zhǔn)是在腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中有棕黃色顆粒。ER和PR陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)是核染色率>1%。

1. 7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 （ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2 檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組患者的腋窩淋巴轉(zhuǎn)移率比較 陰性組患者腋窩淋巴轉(zhuǎn)移率為44.00%， 低于陽(yáng)性組的66.00%， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 兩組患者C-erbB-2情況比較 陰性組患者C-erbB-2（+）占比高于陽(yáng)性組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

乳腺癌是在各種致癌因子的作用下出現(xiàn)增殖失控的現(xiàn)象。在疾病的早期階段經(jīng)常表現(xiàn)出諸如乳房腫塊、乳頭溢液和腋窩淋巴結(jié)腫大等癥狀。在后期癌細(xì)胞可能會(huì)遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)移， 并可能發(fā)生多器官損傷， 直接威脅到患者的生命。乳腺癌屬臨床常見病， 近年來(lái)， 該疾病的發(fā)病率顯示出增長(zhǎng)的趨勢(shì)， 并且已經(jīng)成為社會(huì)上的主要公共衛(wèi)生問(wèn)題[5]。盡管原位乳腺癌沒(méi)有致命危險(xiǎn)， 但是乳腺癌細(xì)胞會(huì)失去其正常的細(xì)胞特性， 從而導(dǎo)致細(xì)胞脫落和轉(zhuǎn)移， 進(jìn)而威脅到患者的生命安全[6]?，F(xiàn)今， 乳腺癌的病因尚不清楚， 但是有一些研究中發(fā)現(xiàn)， 乳腺癌的發(fā)病率具有一定的規(guī)律， 一般有乳腺癌高危因素的人群更容易患乳腺癌疾病， 其中包含了家族史、晚育以及絕經(jīng)遲等。乳腺癌患者在早期臨床癥狀和體征均缺乏特異性， 因此不容易引起患者的注意， 大多數(shù)患者通過(guò)體檢或乳腺癌篩查得知患病， 因此會(huì)影響患者及時(shí)治療， 威脅患者的健康。因此對(duì)乳腺癌予以早期診斷和有效的治療即為重要[7]。

免疫組織化學(xué)是組織化學(xué)的一個(gè)分支， 其是一種通過(guò)標(biāo)記特異性抗體或抗原檢測(cè)被檢測(cè)組織中抗原或抗體分布的技術(shù)， 其具有高靈敏度、特異性和簡(jiǎn)便性[8]。結(jié)合形態(tài)和功能代謝、定性、定位和定量， 細(xì)胞水平和超微結(jié)構(gòu)， 基因水平和蛋白質(zhì)水平進(jìn)行檢測(cè)。近年來(lái)， 技術(shù)已經(jīng)成熟。隨著抗原修復(fù)技術(shù)的建立和更靈敏的檢測(cè)系統(tǒng)， 自動(dòng)免疫染色系統(tǒng)， 尤其是現(xiàn)成試劑盒抗體的商業(yè)化， 免疫組織化學(xué)越來(lái)越多的用于病理診斷。免疫組織化學(xué)常用于各種類型腫瘤的病理診斷。與常規(guī)技術(shù)相比， 免疫組織化學(xué)技術(shù)可以在診斷過(guò)程中觀察組織切片中抗原的數(shù)量和分布， 并對(duì)其進(jìn)行定位、定性和定量研究。該技術(shù)中使用的標(biāo)本主要分為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本。石蠟切片是制作組織標(biāo)本最常用的方法， 這種方法可以保留組織形態(tài)， 便于長(zhǎng)期保存和染色控制觀察， 并且可以修復(fù)切片的組織。此外， 相關(guān)作者[9]指出， 使用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)患者無(wú)害， 因此容易被患者接受， 并且診斷高度協(xié)調(diào)， 其研究中免疫組織化學(xué)技術(shù)確診的觀察組患者陽(yáng)性率高達(dá)83.33%， 明顯高于對(duì)照組， 各項(xiàng)相關(guān)指標(biāo)的得分和滿意度均高于對(duì)照組， 說(shuō)明其在腫瘤病理診斷中的應(yīng)用可以提高病理診斷的陽(yáng)性率。免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)患者的身心無(wú)負(fù)面影響， 檢查依從性和滿意度很高。結(jié)論與既往的研究基本一致。

在相關(guān)作者[10]的研究中， 在所選擇的免疫組織化學(xué)檢測(cè)指標(biāo)中， CK5 / 6和CK34 βE12屬于細(xì)胞角蛋白， 可以反映細(xì)胞組成和生物學(xué)活性， 并且在癌組織中通常具有較強(qiáng)的陽(yáng)性表達(dá)。上皮生長(zhǎng)因子受體（ECFR）、HER-2屬于酪胺酸激酶受體， 參與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。當(dāng)發(fā)生癌癥時(shí)， 人體EGFR和HER-2趨向于顯示高表達(dá)水平， 這可能影響腫瘤細(xì)胞的增殖， 對(duì)血管再生、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有促進(jìn)作用， 并且還可有效抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡; P16和P63參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)， 這在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的增殖和分裂中起負(fù)作用， 并且可以影響腫瘤細(xì)胞， 抑制復(fù)制可以參與各種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。Ki67屬于新型細(xì)胞增殖核抗原， 通常在增殖細(xì)胞中表現(xiàn)出高表達(dá)水平， 參與腫瘤細(xì)胞的增殖并促進(jìn)有絲分裂的腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。PTEN基因是具有磷酸酶活性的腫瘤抑制基因， 其在腫瘤中具有很高的缺失和突變可能性， 一旦TEN基因在人體內(nèi)的表達(dá)缺失或突變， 就表明人體內(nèi)出現(xiàn)了新的信號(hào)， 引導(dǎo)途徑意味著人體組織可能會(huì)癌變。

乳腺癌通?？赏ㄟ^(guò)血液或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移， 在對(duì)其乳腺組織內(nèi)分泌治療評(píng)估過(guò)程中測(cè)量患者激素受體水平是不可缺少的重要指標(biāo)， 可以完全了解疾病的階段和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況。免疫組織化學(xué)檢測(cè)是一種可以結(jié)合乳腺癌功能和形態(tài)變化的新檢測(cè)方法。免疫組織化學(xué)檢測(cè)的特點(diǎn)主要是定位準(zhǔn)確、靈敏度高， 其是一種結(jié)合乳腺癌功能和形態(tài)學(xué)改變的研究方法， 在臨床病理診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。免疫組織化學(xué)檢測(cè)作為診斷技術(shù)的主要手段之一， 可以確定腫瘤的發(fā)病位置， 檢測(cè)相關(guān)蛋白， 確定腫瘤分期并指導(dǎo)治療。在相關(guān)學(xué)者[11]的相關(guān)研究中得知， 免疫組織化學(xué)檢測(cè)具有靈敏度高、定位準(zhǔn)確的特點(diǎn)， 其為乳腺癌的功能和形態(tài)學(xué)改變相結(jié)合提供了一種新方法， 在病理診斷中具有重要作用。在臨床診斷技術(shù)中， 免疫組織化學(xué)檢測(cè)可以確定腫瘤起源， 相關(guān)蛋白檢測(cè)可以確定腫瘤分期和在指導(dǎo)治療中發(fā)揮作用。臨床研究表明， ER和PR水平高的患者生存期長(zhǎng)， 預(yù)后好。C-erbB-2是一種癌基因蛋白， 其陽(yáng)性是癌細(xì)胞， 其陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤的分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有關(guān)， 在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預(yù)后中具有重要意義。CerbB-2也指乳腺癌臥床治療的指標(biāo)之一， CerbB-2陽(yáng)性乳腺癌患者對(duì)CMF和含蒽環(huán)類的化療方案不敏感， 其高表達(dá)乳腺癌對(duì)他莫昔芬等內(nèi)分泌療法不敏感。因此， 該基因的過(guò)度擴(kuò)增和表達(dá)與腫瘤的分級(jí)及其分化程度存在密切的關(guān)聯(lián)。

ER和PR的表達(dá)可為乳腺癌的內(nèi)分泌治療予以可靠的依據(jù)， 并可評(píng)估腫瘤的性質(zhì)和預(yù)后[12]。根據(jù)本次研究結(jié)果得知， 兩組患者通過(guò)檢測(cè)后， 陰性組患者腋窩淋巴轉(zhuǎn)移率為44.00%， 陽(yáng)性組患者腋窩淋巴轉(zhuǎn)移率為66.00%;陰性組患者的腋窩淋巴轉(zhuǎn)移率顯著低于陽(yáng)性組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。陰性組患者C-erbB-2（+）占比高于陽(yáng)性組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。因此， 免疫組織化學(xué)檢測(cè)方法在乳腺癌病理診斷中的應(yīng)用對(duì)提高診斷率、擴(kuò)大臨床診治水平具有重要的應(yīng)用價(jià)值。根據(jù)賈榮[13]的相關(guān)研究得知， ER和PR陽(yáng)性患者的預(yù)后要優(yōu)于陰性患者， 并且生存時(shí)間更長(zhǎng)。同時(shí)， C-erbB-2與ER和PR狀態(tài)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。ER和PR陽(yáng)性患者的腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為31.58%， 明顯高于ER和PR陰性患者的腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率。

在翟俊等[14]的研究中得知， 在細(xì)胞表面生長(zhǎng)因子受體家族中， C-erbB-2基因編碼的蛋白質(zhì)是重要的成員， 其以185 KDa的穿膜蛋白為分子量， 該基因的過(guò)度擴(kuò)增和表達(dá)與其密切相關(guān)， 因此與腫瘤的等級(jí)和分化程度密切相關(guān)。如果乳腺癌患者的C-erbB-2完整膜陽(yáng)性， 考慮使用Herceptin分子靶向藥物治療以確?；颊哌_(dá)到一定的效果。在相關(guān)學(xué)者[15]的研究中， 陽(yáng)性組的C-erbB-2陽(yáng)性率和陰性率與陽(yáng)性組比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。陰性組的腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率明顯低于陽(yáng)性組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。因此可以證實(shí)免疫組織化學(xué)對(duì)乳腺癌的病理診斷具有非常重要的作用和意義。在相關(guān)學(xué)者[16]的研究中得知， A組患者的C-erbB-2陽(yáng)性率較低， PR和ER陽(yáng)性的患者預(yù)后較好。A組腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的發(fā)生率低于B組， 說(shuō)明PR和ER的水平越高發(fā)生轉(zhuǎn)移的可能性就越小， 因此PR和ER的含量越高患者的預(yù)后越好。

綜上所述， 對(duì)乳腺癌患者采取免疫組織化學(xué)檢測(cè)具有顯著的應(yīng)用價(jià)值， 可較好的檢測(cè)乳腺癌患者的病情， 該方法值得在臨床上推廣應(yīng)用。

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[收稿日期：2020-06-17]