鄭雪瑩,張啟龍,陳會玲,裴 潔,韋海濤,宋彥軍,劉曉冬,谷傳慧,劉?,摚?慧,鄧柏林
(1.北京市動物疫病預(yù)防控制中心,北京 大興 102629 ; 2. 湖北省動物疫病預(yù)防控制中心,湖北 武漢 430070 ; 3.北京農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,北京 昌平 102206)
棘球蚴病(Echinococcosis),又稱包蟲病(Hydatidosis),是由棘球絳蟲幼蟲—棘球蚴寄生于人和動物體內(nèi)而引起的一種危害嚴重的人獸共患寄生蟲病。犬作為包蟲病的終末宿主,是該病最重要的傳染源。我國已有25個省(自治區(qū)、直轄市) 報告有棘球蚴病病例[1]。北京、上海、河北、廣東等地有輸入性病例和本地感染病例[2]。目前,我國囊型包蟲病的流行趨勢也在由西北部向東南部發(fā)展及由牧區(qū)向農(nóng)業(yè)區(qū)和城區(qū)蔓延[3]。
近年監(jiān)測顯示,動物包蟲病在北京屬于零星散發(fā)。但省市間動物調(diào)運行為頻繁,因拆遷導(dǎo)致流浪犬數(shù)量增多等情況的客觀存在,可能為該病在城市周邊發(fā)生提供新條件,對北京市依然存在較大潛在威脅。本試驗以北京某區(qū)同時存在養(yǎng)羊和養(yǎng)犬行為的養(yǎng)羊戶家中的犬為研究對象,采用橫斷面研究方法掌握犬細粒棘球絳蟲的感染情況,探尋某區(qū)犬感染細粒棘球絳蟲的相關(guān)風(fēng)險因素,為今后防控該病及制定相關(guān)政策提供技術(shù)支持。
1.1 研究類型與研究對象 采用橫斷面研究,研究對象為該區(qū)近1年內(nèi)存在同時養(yǎng)羊和養(yǎng)犬行為的養(yǎng)羊戶家中的犬。
1.2 抽樣策略 采用階段抽樣的策略。第1階段,某區(qū)共有涉及存在羊散養(yǎng)戶的村354個,按照預(yù)估流行率為6%進行采樣(置信水平95%,可接受誤差5%),需采樣的村為70個。第2階段對選定采樣村內(nèi)的犬,采取全群采樣的方法進行調(diào)查問卷的發(fā)放和犬糞便樣品的采集。
1.3 病例定義 陽性個體:對犬驅(qū)蟲后,犬糞便使用犬細粒棘球絳蟲抗原ELLSA試劑盒檢測結(jié)果為陽性的個體。
陽性農(nóng)戶:檢測到1例以上陽性個體的同時存在養(yǎng)羊和養(yǎng)犬行為的農(nóng)戶,定義為陽性農(nóng)戶。
陰性農(nóng)戶:未檢測到陽性個體的農(nóng)戶。
1.4 實驗室檢測 采用深圳市康百德生物科技公司生產(chǎn)的犬糞包蟲抗原檢測試劑盒。具體操作方法和判定結(jié)果按照說明書執(zhí)行。
1.5 樣品采集、保存和處理工作 使用一次性糞便采集裝置采集犬投喂驅(qū)蟲藥前后2次糞便樣品(第2次采集時間為犬驅(qū)蟲后12 h內(nèi))。采集的樣品存入-70~-80 ℃,凍存5~7 d,以滅活蟲卵,避免操作人員被感染和對周邊環(huán)境污染。
1.6 問卷調(diào)查 設(shè)計調(diào)查問卷《養(yǎng)羊戶犬包蟲病認知及感染情況調(diào)查表》,調(diào)查對象是養(yǎng)羊戶,問卷主要內(nèi)容為犬驅(qū)蟲相關(guān)問題,飼養(yǎng)方式、飼養(yǎng)習(xí)慣、接觸流浪犬只、糞便處理情況等內(nèi)容。
1.7 數(shù)據(jù)分析方法 運用SPSS 22.0 和 Epinfo 7.0 軟件進行統(tǒng)計學(xué)描述與分析。利用QGIS軟件繪制犬細粒棘球絳蟲感染的空間分布圖。
2.1 某區(qū)犬細粒棘球絳蟲個體流行率 共采集某區(qū)14個鄉(xiāng)鎮(zhèn)70個村243家養(yǎng)羊戶的516份樣品(同一只犬,采集驅(qū)蟲前驅(qū)蟲后的糞便樣品2份)。經(jīng)實驗室檢測,258份犬糞便樣品中檢出56份陽性,202份陰性。個體流行率為19.2%(95%CI:14.4%~24%)。
2.2 某區(qū)犬細粒棘球絳蟲感染陽性農(nóng)戶空間分布 因存在一戶養(yǎng)多條犬的情況,故共檢出50個陽性養(yǎng)羊戶。從空間分布上,陽性農(nóng)戶主要呈散在分布。見中插彩版圖1。
2.3 風(fēng)險因素分析
2.3.1 單因素分析 針對養(yǎng)羊戶主共發(fā)放調(diào)查問卷250份,收回243份,回收有效率為97.2%。單因素分析發(fā)現(xiàn),是否對羊包蟲病進行了免疫、羊是否和犬接觸、是否給犬投喂驅(qū)蟲藥、犬飼養(yǎng)方式、犬是否可以接觸到羊飼料和是否給犬喂食生的動物內(nèi)臟6個變量具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)果見表1。
表1 某區(qū)犬細粒棘球絳蟲感染風(fēng)險因素單因素分析結(jié)果Table 1 Results of single factor analysis of risk factors of Echinococcus granulosus infection in a certain area
2.3.2 多因素分析 通過Logistic回歸對以上6個有統(tǒng)計學(xué)意義因素進行分析,發(fā)現(xiàn)犬飼養(yǎng)過程中放養(yǎng)、給犬喂生食內(nèi)臟以及給羊進行包蟲病免疫這3個風(fēng)險因素具有統(tǒng)計學(xué)意義。Logistic回歸模型是Y=-5.523+3.794X1+1.776X2-2.038X3。相關(guān)參數(shù)見表2。經(jīng)Hosmer-Lemeshow 檢驗,P=0.984。
表2 某區(qū)養(yǎng)羊戶犬細粒棘球絳蟲感染風(fēng)險因素多因素分析結(jié)果Table 2 Results of multi-factor analysis of risk factors of Echinococcus granulosus infection in a certain area
用SPSS軟件繪制受試者工作特征曲線(ROC曲線)檢驗?zāi)P蜏蚀_性,結(jié)果見中插彩版圖2,ROC曲線下面積為0.924(漸進95% CI 0.874~0.974,P<0.000),表明該模型預(yù)測概率較好。
2.4 犬只飼養(yǎng)狀態(tài)及感染情況 調(diào)查發(fā)現(xiàn)32.1%的犬處于放養(yǎng)狀態(tài)(部分時間放養(yǎng)和完全放養(yǎng)),其中檢測為細粒棘球絳蟲感染陽性占44.87%。放養(yǎng)的犬中74.36%未采取過驅(qū)蟲治療,剩下采取驅(qū)蟲治療的犬均為半年以上才驅(qū)蟲1次??蛇M入犬主房屋的犬中有35.29%檢測為犬細粒棘球絳蟲感染陽性。
焦偉等人發(fā)現(xiàn)ELISA法檢測犬細粒棘球絳蟲易與泡狀帶絳蟲發(fā)生交叉反應(yīng)[4],陳潔、陳家旭等的研究認為,糞抗原ELISA檢測法的敏感性受感染犬荷蟲影響較大[5-6]。故本次試驗可能存在交叉反應(yīng),出現(xiàn)假陽性結(jié)果。我們選取了部分樣品用PCR方法檢測,也發(fā)現(xiàn)存在假陽性結(jié)果,但因大規(guī)模采樣時檢測的方法是ELISA檢測法,故本次試驗選擇了該方法。
因犬并無明顯臨床表現(xiàn),僅通過實驗室檢測手段發(fā)現(xiàn)陽性,不利于平時發(fā)現(xiàn)感染犬只。棘球蚴被犬吞食后,從感染至發(fā)育成熟排出蟲卵和孕節(jié)片約需43~45 d,大多數(shù)成蟲壽命約5~6個月[7]。若監(jiān)測時犬還未向外排出蟲卵或孕節(jié)片,將不能在糞便中檢測到。本次檢測的犬糞便樣品是對犬投喂吡喹酮進行驅(qū)蟲后采集,驅(qū)蟲使得犬提前排蟲,感染率較平時監(jiān)測結(jié)果有所增加,更有利于掌握真實情況。
感染風(fēng)險因素分析表明,給犬喂食生的動物內(nèi)臟和將犬放養(yǎng)或部分放養(yǎng)是感染風(fēng)險因素,是采取防控措施的關(guān)鍵點,如已經(jīng)消除棘球蚴病危害的塞浦路斯、新西蘭和塔斯馬尼亞,就是使用犬登記和數(shù)量控制、犬定期驅(qū)蟲和避免犬生食動物內(nèi)臟等方法獲得了成功[8-10]。
不拴養(yǎng)犬的感染率顯著高于拴養(yǎng)犬[11]。犬與人和羊接觸密切,又未采取任何驅(qū)蟲治療和預(yù)防措施,存在造成人感染包蟲病的可能,因此做好犬只的驅(qū)蟲工作才能保障人類的健康。