PPAR-γ 基因Pro12Ala 多態(tài)性與非酒精性脂肪性肝病易感性的Meta 分析

張少君，董小林

湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院健康體檢中心，湖北 十堰442000

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是常見的肝臟疾病之一，部分可發(fā)展為肝癌［1］。NAFLD 是代謝綜合征(metabolic syndrome，MS)的表現(xiàn)特征之一，往往與糖尿病、血脂異常、高胰島素血癥等MS 癥狀并存。雖然NAFLD 的病因尚不明確，環(huán)境、遺傳和生活方式等多種因素在其發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮一定作用［2］。

過氧化物酶增殖生物激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptor-γ，PPAR-γ)是核受體超家族成員之一，能調(diào)節(jié)體內(nèi)多個(gè)脂肪細(xì)胞特異性基因的轉(zhuǎn)錄，參與調(diào)控脂肪細(xì)胞分化、脂類代謝等過程［3-4］。PPAR-γ 基因多態(tài)性在肥胖、胰島素抵抗、2 型糖尿病的發(fā)生過程中起重要作用［5］。本文對(duì)8 個(gè)病例-對(duì)照研究［6-13］進(jìn)行Meta 分析，系統(tǒng)評(píng)價(jià)PPAR-γ 基因Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD 易感性的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 檢索方法 計(jì)算機(jī)檢索PubMed、Web of Science、萬方數(shù)據(jù)庫、中國知網(wǎng)(CNKI)、維普數(shù)據(jù)庫，檢索時(shí)間均為建庫至2014 年8 月30 日，無語種限制。研究對(duì)象為人類。英文以“peroxisome proliferator activated receptor-γ 或PPAR-γ 或peroxisome proliferator activated receptor gamma 或PPAR-gamma 和genetic polymorphism 或polymorphisms 或variant 和non-alcoholic fatty liver disease 或NAFLD”為搜索關(guān)鍵詞。中文以“過氧化物酶增殖生物激活受體、PPAR-γ、基因多態(tài)性、非酒精性脂肪性肝病、NAFLD”為搜索關(guān)鍵詞。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn):(1)NAFLD 診斷明確:超聲和/或CT 提示肝臟彌漫性脂肪改變;當(dāng)影像學(xué)檢查診斷不確定時(shí)進(jìn)行肝活檢。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均排除以飲酒(男性每日攝入＞30 g，女性每日攝入＞20 g)為病因的研究，排除病毒性、自身免疫性和藥物性或遺傳所致肝臟疾病，其他合并嚴(yán)重疾病如嚴(yán)重的心臟、肺部、腦或腎臟疾病也被排除;(2)研究是關(guān)于Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD 風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)系;(3)為病例-對(duì)照研究;(4)文獻(xiàn)中數(shù)據(jù)完整，或能直接或間接提供統(tǒng)計(jì)指標(biāo)OR值及95%CI。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn):(1)非病例-對(duì)照研究、病例報(bào)道、綜述等文獻(xiàn);(2)重復(fù)發(fā)表或信息不全的文獻(xiàn);(3)以酒精性脂肪肝或其他肝病作為對(duì)照組的研究。

1.3 資料提取 由2 位研究者獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)資料提取，內(nèi)容包括:作者、發(fā)表年份、國家、種族、年齡、性別、診斷方法、病例組和對(duì)照組總數(shù)及各基因型分布情況、及對(duì)照組H-W 平衡檢驗(yàn)值(P 值)。在資料提取過程中，如有爭(zhēng)議，通過討論協(xié)商解決。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用RevMan 5.2 對(duì)納入研究進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)(采用Q 檢驗(yàn)和I2統(tǒng)計(jì)量)，當(dāng)各研究間無異質(zhì)性時(shí)(P ＞0.1 或I2＜50%)，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行合并分析，如存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性時(shí)(P ＜0.1 或I2＞50%)，則采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析。合并效應(yīng)量選用比值比(OR)及其95%CI。分別計(jì)算顯性遺傳模型(Pro/Ala + Ala/Ala vs Pro/Pro)、隱性遺傳模型(Ala/Ala vs Pro/Ala + Pro/Pro)、共顯性遺傳模型(Pro/Ala vs Pro/Pro 及Ala/Ala vs Pro/Pro)的OR 值，然后基于種族進(jìn)行分層分析。敏感性分析為依次排除單個(gè)文獻(xiàn)后重新進(jìn)行Meta 分析，估計(jì)研究結(jié)果的穩(wěn)定性。應(yīng)用Stata 12.0 軟件進(jìn)行Begg、Egger 分析對(duì)發(fā)表偏移進(jìn)行分析(P ＜0.05 認(rèn)為存在發(fā)表偏倚)。利用χ2檢驗(yàn)對(duì)每項(xiàng)研究中對(duì)照組的基因型分布進(jìn)行H-W遺傳平衡檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果 根據(jù)檢索策略，初篩出20 篇相關(guān)文獻(xiàn)，根據(jù)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)，排除12 篇文獻(xiàn)，最終共有8 篇［6-13］文獻(xiàn)納入本研究，包含1 697 例NAFLD 患者和2 427 名對(duì)照者。其中有5 篇［6-7，10，12-13］研究涉及亞洲人群，3 篇［8-9，11］涉及白種人群。除2 篇研究［6，10］外，其余研究均符合H-W 平衡。各個(gè)納入研究的基本特征如表1 所示。

2.2 Meta 分析結(jié)果 研究結(jié)果顯示PPAR-γ 基因Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD 風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［顯性模型(OR =0. 93，95%CI:0. 63 ～1. 38，P =0.72);Pro/Ala vs Pro/Pro (OR=0.91，95%CI:0.64 ～1.30，P=0.61);Ala/Ala vs Pro/Pro (OR =1.52，95%CI:0.39 ～5.93，P =0.54);隱性模型(OR =11.54，95%CI:0.45 ～5.22，P =0.49)］(見圖1)。在對(duì)亞洲人和白種人種族分析也得出相同結(jié)果(見表2、圖2)。2.3 敏感性分析 首先，剔除不符合H-W 平衡的文獻(xiàn)［6，10］后，各遺傳模型合并效應(yīng)量無明顯改變(見表2);依次單獨(dú)剔除其他1 篇文獻(xiàn)后，各遺傳模型合并效應(yīng)量仍無明顯改變。

2.4 異質(zhì)性檢驗(yàn) 在4 種遺傳模型中，總體人群比較發(fā)現(xiàn)研究間都存在異質(zhì)性［顯性模型:I2=76%，P =0.0001;Pro/Ala vs Pro/Pro:I2= 70%，P = 0. 001;Ala/Ala vs Pro/Pro:I2=72%，P =0.006;隱性模型:I2=66%，P=0.020］?；诜N族進(jìn)行亞組分析時(shí)，在白種人群中研究間仍存在異質(zhì)性，而在亞洲人群中，在純合子比較模型和隱性模型中，研究間異質(zhì)性消失［Ala/Ala vs Pro/Pro:I2=0，P =0. 340;隱性模型:I2=0，P=0.370］(見表2)。

2.5 發(fā)表偏倚分析 Begg 漏斗圖結(jié)果顯示未見發(fā)表偏倚(見圖3)。Egger 回歸法量化檢測(cè)也未見發(fā)表偏倚，Egger 回歸法結(jié)果顯示:顯性模型:P=0.972，Pro/Ala vs Pro/Pro:P =0. 822;Ala/Ala vs Pro/Pro:P =0.716;隱性模型:P=0.688。

3 討論

近年來，基因多態(tài)性與NAFLD 易感性之間的關(guān)系已引起廣泛關(guān)注，如PNPLA3、TNF-α、APOE、adiponectin 和PPAR-γ 等。然而除了PNPLA3 和TNF-α 基因多態(tài)性與NAFLD 風(fēng)險(xiǎn)性已被大量證實(shí)［14-16］外，其余基因多態(tài)性是否與NAFLD 發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)仍存在爭(zhēng)議。研究表明PPAR-γ 可通過調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞因子的表達(dá)來改善胰島素敏感性，減少TNF-α、瘦素和抵抗素生成，促進(jìn)脂聯(lián)素的表達(dá)［17］。PPAR-γ 多態(tài)性影響脂肪細(xì)胞因子的表達(dá)。

目前已有多篇Meta 分析系統(tǒng)評(píng)價(jià)了PPAR-γ 基因Pro12Ala 多態(tài)性與多種疾病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，如腫瘤［18］、炎癥性腸?。?9］等。本研究對(duì)PPAR-γ 基因Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD 風(fēng)險(xiǎn)性的關(guān)系進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)，共包含8 個(gè)病例-對(duì)照研究(4 124 例)。研究結(jié)果提示Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD 的風(fēng)險(xiǎn)性無關(guān)，為避免不同種族引起的異質(zhì)性，我們將納入的研究分成亞洲人和白種人2 個(gè)亞組進(jìn)行分析，然而在不同人群中也未發(fā)現(xiàn)PPAR-γ 基因Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD風(fēng)險(xiǎn)性有關(guān)。產(chǎn)生上述結(jié)果可能原因?yàn)?(1)Pro12Ala多態(tài)性與NAFLD 的風(fēng)險(xiǎn)性之間可能確實(shí)關(guān)系不大;(2)可能與其他基因存在交互關(guān)系;(3)基因-環(huán)境等因素的影響;(4)人群的種族背景、年齡、性別及行為方式不同。

表1 納入病例-對(duì)照研究的基本特征Tab 1 Characteristics of studies included in the Meta-analysis

表2 各遺傳模型Meta 分析主要結(jié)果Tab 2 Summary of ORs for the Pro12Ala polymorphism of PPAR-γ gene and the susceptibility of NAFLD

圖1 PPAR-γ 基因Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD 風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性的Meta 分析(顯性模型)Fig 1 Meta-analysis of the association between Pro12Ala polymorphism of PPAR-γ gene and susceptibility of NAFLD (dominant model)

圖2 基于人群亞組PPAR-γ 基因Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD 風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性的Meta 分析(顯性模型)Fig 2 Meta-analysis of the association between Pro12Ala polymorphism of PPAR-γ gene and susceptibility of NAFLD in different subgroups (dominant model)

圖3 Begg'漏斗圖分析(顯性模型)Fig 3 Begg's funnel plot for publication bias (dominant model)

在總?cè)巳褐校? 種遺傳模型經(jīng)異質(zhì)性檢驗(yàn)均存在異質(zhì)性，我們通過敏感性分析和亞組分析尋找異質(zhì)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在白種人群中研究間仍存在異質(zhì)性，而在亞洲人群中，在純合子比較模型和隱性模型中，研究間異質(zhì)性消失，提示針對(duì)不同人群的研究可能會(huì)導(dǎo)致異質(zhì)性。另外，H-W 遺傳平衡是遺傳學(xué)研究中的基本定律，我們對(duì)納入的文獻(xiàn)進(jìn)行H-W 平衡檢驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有2 項(xiàng)研究不符合H-W 平衡，而剔除該研究后，結(jié)果無明顯改變。我們采用Begg 漏斗圖和Egger 檢驗(yàn)分別定性和定量評(píng)估發(fā)表偏倚，發(fā)現(xiàn)4 個(gè)遺傳模型均無顯著的發(fā)表偏倚，以上結(jié)果提示本研究結(jié)論較可靠。

與其他Meta 分析一樣，本研究也存在一定的局限性:(1)納入文獻(xiàn)較少，且納入的文獻(xiàn)為英文和中文，可能還有其他語種的文獻(xiàn)未納入;(2)納入的文獻(xiàn)不包括未公開發(fā)表的文獻(xiàn)，可能存在選擇偏倚;(3)本研究未進(jìn)行年齡、性別、飲食等因素的分層分析;(4)診斷NAFLD 方法的差異可能會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。

總之，本Meta 分析提示在亞洲人群和白種人群中Pro12Ala 多態(tài)性與NAFLD 的風(fēng)險(xiǎn)性均無相關(guān)性。由于研究涉及地域廣且文獻(xiàn)較少，仍需更多大樣本研究結(jié)果證實(shí)。

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