Rubisco由于其緩慢的羧化速率被認(rèn)為是低效率的催化,并且通過光呼吸被O2競爭性抑制。為了減輕Rubisco造成的光合損失,大量的研究集中于整合C3作物葉綠體中的二氧化碳濃縮機(jī)制,以最大限度地提高固碳效率。再者一個(gè)可行的策略是對Rubisco本身進(jìn)行工程改造。工程改造Rubisco以增強(qiáng)光合作用的一大挑戰(zhàn)是葉綠體基因rbcL和核基因RbcS位置的轉(zhuǎn)換。
2020年7月6號,澳大利亞國立大學(xué)生物研究學(xué)院Spencer M.Whitney教授團(tuán)隊(duì)在The Plant Cell雜志上發(fā)表了題為“Modifying Plant Photosynthesis and Growth via Simultaneous Chloroplast Transformation of Rubisco Large and Small Subunits”的研究論文,該研究證明了清除煙草中的Rubisco小亞基核合成,在tobRrΔS底盤材料中可以通過葉綠體中轉(zhuǎn)化Rubisco大亞基和小亞基來實(shí)現(xiàn)在整個(gè)植物中的生產(chǎn)新型同質(zhì)Rubisco復(fù)合物,利用合成生物學(xué)來進(jìn)行光合研究。
作者開發(fā)一個(gè)RNAi-RbcS煙草(tobRrΔS)體系,通過葉綠體轉(zhuǎn)化rbcL-rbcS操縱子,用于植物生產(chǎn)同質(zhì)Rubisco。四種類型的編碼rbcS和5‘端基因間序列顯示,在使用rbcS編碼序列以及與rbcL匹配的5‘UTR序列的轉(zhuǎn)化品系中,Rubisco產(chǎn)量最高(50%的野生型)。此外,煙草中轉(zhuǎn)入不同的馬鈴薯(Solanum tuberosum)rbcL-rbcS操縱子【這些操縱子編碼三個(gè)葉肉小亞基(pS1、pS2、pS3)中的一個(gè)】,或者是編碼馬鈴薯毛狀體的pST-亞基。與轉(zhuǎn)入pS1、pS2或pST的品系相比,pS3-亞基對馬鈴薯Rubisco的生產(chǎn)造成了約15%的損害。然而,通過在Asn-55-His和Lys-57-Ser上的改造pS3亞基,其羧化率提高了13%,羧化效率(CE)提高了17%。含有馬鈴薯pST-亞基的Rubisco品系對煙草光合作用和生長的影響最大,使CE和CO2/O2特異性分別降低了40%和15%。
綜上,本研究將rbcS基因轉(zhuǎn)入到植物質(zhì)體中,此研究為在整個(gè)植物中引入新的同質(zhì)Rubisco復(fù)合物提供了一個(gè)有效的生物工程改造策略。