易先國(guó)
(信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院,河南信陽(yáng) 464000)
在飼養(yǎng)牲畜時(shí),高蛋白飼料對(duì)生長(zhǎng)很重要,其中豆粕常被用來(lái)增加飼料中的蛋白質(zhì)含量,但價(jià)格較昂貴。來(lái)自谷物制造過(guò)程的副產(chǎn)品營(yíng)養(yǎng)豐富,價(jià)格較低,目前已被用作飼料原料。大麥?zhǔn)轻劸乒I(yè)中常使用的谷物,其副產(chǎn)品(DDGS)含有大量蛋白質(zhì)(Suzuki 等,2011)。犢牛瘤胃發(fā)育及其功能改善,尤其是瘤胃上皮細(xì)胞,在營(yíng)養(yǎng)傳遞、吸收和代謝中起關(guān)鍵作用,對(duì)犢牛健康和后續(xù)生長(zhǎng)性能具有重要影響(Martens 等,2012)。Tsuruoka等(2017)研究發(fā)現(xiàn),日糧添加濃縮大麥DDGS 可以提高日本黑牛瘤胃丁酸、丙酸和戊酸濃度和血漿β- 羥丁酸濃度。丁酸和丙酸作為瘤胃上皮的能量來(lái)源,對(duì)上皮細(xì)胞發(fā)育影響最大。丁酸通過(guò)瘤胃壁時(shí)產(chǎn)生β- 羥丁酸,血漿β- 羥丁酸是評(píng)估瘤胃上皮代謝活動(dòng)的一個(gè)重要指標(biāo)。Gotoh(2003)在日本黑馬和小母牛的生長(zhǎng)期發(fā)現(xiàn),IIB型肌纖維(快收縮糖酵解型)和IIA 型肌纖維(快收縮氧化糖酵解型)的數(shù)量減少,而I 型(慢收縮氧化型)肌纖維的數(shù)量則相反。生長(zhǎng)發(fā)育與肌肉發(fā)育密切相關(guān),而肌肉發(fā)育與糖酵解和氧化性肌肉代謝有關(guān)。因此,本研究旨在探討濃縮大麥DDGS 對(duì)犢牛生長(zhǎng)速度、瘤胃發(fā)酵、血液代謝物及肌纖維數(shù)量的影響。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與處理 試驗(yàn)將24 頭體重一致的肉牛隨機(jī)分為4 組,對(duì)照組飼喂玉米- 豆粕型日糧,處理1 組在干草日糧中添加5% 濃縮大麥DDGS,處理2 組飼喂高水平豆粕,處理3 組在干草日糧中添加15% 濃縮大麥DDGS,對(duì)照組、處理1 組、處理2 組和處理3 組營(yíng)養(yǎng)水平維持一致。試驗(yàn)從3月齡開(kāi)始到9月齡結(jié)束,所有犢牛均飼喂配方飼料(真可消化氮77.6%、粗蛋白質(zhì)19.8%),配方飼料和干草分開(kāi)飼喂。采食量按體重比例飼喂,從初始體重的2.1% 降至最終體重的1.4%。所有犢牛在5 個(gè)月大時(shí)被閹割,處理組犢牛飼喂混有干草的濃縮大麥DDGS。濃縮大麥DDGS、干草及豆粕和玉米混合物化學(xué)成分分析見(jiàn)表1。
1.2 采食量及瘤胃發(fā)酵性能分析 每天記錄肉牛全價(jià)料、濃縮料的飼喂量,根據(jù)配方占比及營(yíng)養(yǎng)成分分析每天的養(yǎng)分?jǐn)z入量。用瘤胃瘺管收集早晨飼后4 h 的瘤胃液,用4 層紗布過(guò)濾瘤胃液,除去飼料顆粒,4℃下1200×g 離心10 min。為了去除蛋白質(zhì),在上清液中以5% 的比例加入高氯酸溶液,然后將所得流體樣品保存在-20℃,參考Hosoda 等(2005)的研究方法,用氣相色譜法分析瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸含量及組成。
表1 各種原料化學(xué)成分分析 %
1.3 血液代謝指標(biāo)及肌纖維組成 分別于試驗(yàn)第3、6 和9 個(gè)月結(jié)束當(dāng)天用肝素鈉管收集頸靜脈的血液樣本,樣品立即以1500×g 4℃離心10 min,血漿保存于-80℃待分析。采用試劑盒法分析血液代謝產(chǎn)物含量(β- 羥丁酸、葡萄糖、膽固醇、尿素氮和非酯化脂肪酸)。犢牛的肌纖維類(lèi)型百分比分布是根據(jù)每個(gè)組織中約300 個(gè)肌纖維中每種肌纖維類(lèi)型的數(shù)量計(jì)算出來(lái)的,其中肌肉纖維的大小是通過(guò)隨機(jī)選擇的50 根纖維中每一種類(lèi)型的最大寬度(垂直于長(zhǎng)度軸)的直徑來(lái)確定的。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 試驗(yàn)主因素變量的數(shù)據(jù)采用SAS 軟件單因素方差模型進(jìn)行分析,采用Duncan’s 法進(jìn)行多重比較,P< 0.05 表示差異顯著,0.05 ≤P<0.10 表示具有顯著差異的趨勢(shì)。
2.1 對(duì)采食量及生長(zhǎng)速度的影響 由表2 可知,試驗(yàn)3 組干物質(zhì)、濃縮料、全價(jià)料、飼料原料的攝入量均表現(xiàn)為最高。
由表3 可知,處理3 組較對(duì)照組顯著提高肉牛的末重和平均日增重(P<0.05),同時(shí)處理1 組較對(duì)照組有提高肉牛平均日增重的趨勢(shì)(P=0.08)。
表2 采食量及養(yǎng)分?jǐn)z入量
表3 濃縮大麥DDGS 對(duì)肉牛生長(zhǎng)性能的影響
2.2 對(duì)瘤胃揮發(fā)性脂肪酸的影響 由表4 可知,處理1 組較對(duì)照組有提高6月齡肉牛乙酸鹽濃度的趨勢(shì)(P=0.07),同時(shí)處理3 組6月齡肉牛丁酸、戊酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量較對(duì)照組有提高趨勢(shì)(P=0.06,0.09,0.09)。處理 3 組較對(duì)照組顯著提高了9月齡肉牛乙酸比例(P<0.05),而處理2 組較對(duì)照組有提高乙酸比例的趨勢(shì)(P=0.09)。處理1 組較對(duì)照組有降低6月齡肉牛丙酸比例的趨勢(shì)(P=0.06)。
表4 濃縮大麥DDGS 對(duì)肉牛瘤胃揮發(fā)性脂肪酸含量的影響
2.3 對(duì)血漿代謝指標(biāo)的影響 由表5 可知,處理1 組和處理3 組較對(duì)照組顯著提高了6月齡肉牛β- 羥丁酸的含量(P<0.05)。處理2 組較對(duì)照組顯著降低了3月齡肉牛血漿尿素氮含量(P<0.05),而處理3 組提高了9月齡肉牛血漿尿素氮含量(P=0.09)。對(duì)照組與各處理組對(duì)血漿葡萄糖、膽固醇、非酯化脂肪酸含量的影響均無(wú)顯著差異(P> 0.05)。
2.4 對(duì)肌纖維類(lèi)型及直徑的影響 由表6 可知,濃縮大麥DDGS 組較對(duì)照組顯著降低了9月齡肉牛Ⅰ型肌纖維比例(P<0.05),而處理1 組較對(duì)照組有提高6月齡肉牛ⅡB 型肌纖維比例的趨勢(shì)(P=0.09),但處理1 組較對(duì)照組顯著提高了9月齡肉牛ⅡB 型肌纖維比例(P<0.05)。對(duì)照組和處理2 組9月齡肉牛Ⅰ型肌纖維比例顯著高于6月齡(P< 0.05),而處理 3 組 9月齡肉牛Ⅱ A 型肌纖維比例顯著高于6月齡(P<0.05),而對(duì)照組、處理1 組和處理2 組9月齡肉牛ⅡB 型肌纖維比例顯著低于6月齡(P<0.05)。
表5 濃縮大麥DDGS 對(duì)肉牛血漿代謝指標(biāo)的影響
表6 濃縮大麥DDGS 對(duì)肉牛肌纖維類(lèi)型及直徑的影響
無(wú)論濃縮大麥DDGS 添加量是多少,15% 濃縮大麥DDGS 組最終體重均顯著增大,采食濃縮大麥DDGS 的犢牛生長(zhǎng)速度提高。同時(shí)無(wú)論豆粕或玉米飼喂量多少,對(duì)犢牛生長(zhǎng)均無(wú)影響。在本研究中,由于每個(gè)籠子關(guān)了3 只犢牛,我們無(wú)法統(tǒng)計(jì)每頭牛的采食量。因此,我們沒(méi)有對(duì)飼料攝入量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,但對(duì)照組、5% 濃縮大麥DDGS組、高豆粕組和15% 濃縮大麥DDGS 組的平均每千克體重粗蛋白質(zhì)、非纖維碳水化合物和總可消化養(yǎng)分?jǐn)z入量分別為粗蛋白質(zhì)0.43、0.42、0.47、0.45,非纖維碳水化合物 1.07、1.06、1.10、1.07,總可消化養(yǎng)分 1.70、1.67、1.78、1.69。雖然高大豆組總可消化養(yǎng)分?jǐn)z入量在數(shù)值上較高,但對(duì)照組與高大豆組的日增重差異不顯著。另一方面,5%濃縮大麥DDGS 組的粗蛋白質(zhì)、非纖維碳水化合物和總可消化養(yǎng)分?jǐn)z入量較低,但其日增重高于對(duì)照組,這些結(jié)果表明,飼喂?jié)饪s大麥DDGS 可以促進(jìn)犢牛生長(zhǎng)的原因除了營(yíng)養(yǎng)攝入外還有其他原因。
本研究中,15% 濃縮大麥DDGS 組6月齡犢牛瘤胃中丁酸和戊酸濃度較高,血漿β- 羥丁酸濃度明顯高于對(duì)照組。對(duì)照組和5% 濃縮大麥DDGS 組瘤胃中丁酸和戊酸濃度無(wú)顯著差異,但5% 濃縮大麥DDGS 組6月齡時(shí)血漿β- 羥丁酸濃度明顯高于對(duì)照組。固體飼料的攝入對(duì)犢牛從前胃動(dòng)物向反芻動(dòng)物過(guò)渡至關(guān)重要(Coverdale等,2004)。瘤胃早期發(fā)育與晚期發(fā)育相比提高了飼料利用率,可能有利于真胃健康(Berends 等,2012)。因此,濃縮大麥DDGS 對(duì)斷奶后瘤胃發(fā)育可能是一種有利的飼料原料,其提高了斷奶至6個(gè)月后瘤胃的早期發(fā)育。Tsuruoka 等(2017)認(rèn)為,濃縮大麥DDGS 比豆粕含有更多的乳酸和甘油,在瘤胃中注入乳酸可以增加丙酸和丁酸的濃度,同時(shí)添加甘油還可以增加瘤胃中總揮發(fā)性脂肪酸、丙酸和丁酸含量(Wang 等,2009)。因此,作者認(rèn)為,與豆粕相比,濃縮大麥DDGS 中乳酸和甘油含量越高,瘤胃中丙酸和丁酸的生成能力越強(qiáng)。但由于飼喂少量濃縮大麥DDGS 會(huì)增加血漿β- 羥丁酸濃度,因此,濃縮大麥DDGS 可能含有其他增加丁酸鹽產(chǎn)量的成分。
肌纖維可根據(jù)其收縮特性進(jìn)行分類(lèi),這種分類(lèi)導(dǎo)致3 種主要的肌纖維類(lèi)型,也可以根據(jù)其主要代謝特征來(lái)區(qū)分,如I 型及纖維(慢收縮氧化型),IIB 型肌纖維(快收縮糖酵解型)和IIA 型肌纖維(快收縮氧化糖酵解型)(Gotoh,2003)。紅色慢收縮肌纖維含有大量線(xiàn)粒體,并以氧化代謝為主要能量來(lái)源,而白色快收縮肌纖維含有更多的糖原,主要利用糖酵解代謝(Schiaffino 和Reggiani,2011)。β- 羥丁酸可以通過(guò)線(xiàn)粒體內(nèi)膜的氧化磷酸化轉(zhuǎn)化為大量的能量。在本研究中,濃縮大麥DDGS 組6 個(gè)月時(shí)I 型肌纖維直徑明顯大于對(duì)照組,這一結(jié)果與血漿β- 羥丁酸濃度一致。但I(xiàn)IB 型肌纖維直徑在對(duì)照組和處理組之間無(wú)顯著差異,這表明日糧添加濃縮大麥DDGS 可能引起氧化性肌纖維肥大,因?yàn)樵黾恿擞g犢牛血漿β- 羥丁酸濃度,而I 型肌纖維的較高尺寸一直維持到9月齡,但此時(shí)血漿β- 羥丁酸濃度無(wú)明顯差異。
綜上所述,日糧添加濃縮大麥DDGS 可激活斷奶后肉牛瘤胃上皮的代謝,且添加水平越高,對(duì)犢牛的生長(zhǎng)越有促進(jìn)作用。但濃縮大麥DDGS 會(huì)引起氧化性肌肉肥大,導(dǎo)致血漿β- 羥丁酸濃度升高,I 型肌纖維在6月齡時(shí)隨血漿β- 羥丁酸含量增加而發(fā)育加強(qiáng),而骨骼肌在9月齡時(shí)氧化性肌纖維較少。