“醫(yī)聯(lián)體”新模式支持下的益氣溫陽方對慢性心力衰竭大鼠血漿血管緊張素II、醛固酮水平影響的實驗研究

趙志強 韓林延 苑光芬

【摘要】目的 “醫(yī)聯(lián)體”新模式支持下應(yīng)用益氣溫陽方干預(yù)慢性心力衰竭大鼠模型，測定大鼠血漿中血管緊張素II、醛固酮水平，探索此方對治療慢性心力衰竭可能的機制。方法 采用腹腔注射阿霉素復(fù)制CHF大鼠模型，隨機分為模型組、造模+低劑量益氣溫陽組、造模+高劑量益氣溫陽組、造模+福辛普利組、空白對照組。測定大鼠血漿AngⅡ、ALD的含量變化。結(jié)果 空白對照組比較，模型組大鼠血漿AngⅡ和ALD含量明顯升高（P<0.01）。與模型組比較，各治療組均能顯著降低AngⅡ和ALD含量（P<0.01）。結(jié)論 氣溫陽方通過調(diào)節(jié)CHF大鼠AngⅡ和ALD的分泌和釋放以達到抗CHF的作用。

【關(guān)鍵詞】益氣溫陽方;慢性心力衰竭;血漿血管緊張素II;醛固酮

益氣溫陽湯是以漢張仲景《金匱要略》中溫經(jīng)湯為基礎(chǔ)方加減化裁而來，經(jīng)趙志強醫(yī)生20余年廣泛應(yīng)用于慢性心力衰竭（CHF）在臨床取得較好療效，但其治療作用機制尚不十分明確，我科室2015年3月～2016年3月收治的心腎陽虛型CHF患者80例作為研究對象，證明其總有效率達到90%[1]。近年來越來越多的研究證實以血管緊張素Ⅱ （AngⅡ）和醛固酮 （ALD）為主導(dǎo)的神經(jīng)內(nèi)分泌激活是CHF發(fā)病的關(guān)鍵機制。AngⅡ和ALD水平可作為心衰嚴重程度以及療效判斷的重要指標[2]，隨著對中醫(yī)藥治療CHF的重視程度的提高，相關(guān)中藥治療CHF時AngⅡ和ALD水平變化影響的報道逐漸增多。本研究通過隨機、對照的動物實驗，應(yīng)用益氣溫陽方干預(yù)CHF大鼠模型，測定大鼠血漿中AngⅡ、ALD水平，探索此方治療CHF有效的可能機制。

1 材 料

1.1 實驗動物

SPF級SD大鼠50只，雌雄各半，體重250～300 g。購自于遼寧長生生物技術(shù)股份有限公司，動物合格證許可證號：SCXK（遼）2015-0001。

1.2 實驗藥品的配制與試劑

①實驗藥物采用北京康仁堂藥業(yè)有限公司的配方顆粒其基本方劑組成：吳茱萸，桂枝，當歸，黃芪等13味中藥，每付共含生藥127 g。

②福辛普利鈉：規(guī)格：10 mg/片，批號：20181201，批準文號：國藥準字H19980197 ，中美上海施貴寶制藥有限公司產(chǎn)品;③鹽酸阿霉素：規(guī)格：25 mg，批號：313A028，北京索萊寶科技有限公司產(chǎn)品;④AngII酶聯(lián)免疫試劑盒：規(guī)格，96T，批號：20190101A，美國R&D公司產(chǎn)品;⑤ALD酶聯(lián)免疫試劑盒：規(guī)格，96T，批號：20190101A，美國R&D公司產(chǎn)品。

2 方 法

2.1 實驗用藥制備

益氣溫陽方吳茱萸、黃芪、桂枝、當歸等11味中藥免煎顆粒制劑購自于北京康仁堂藥業(yè)有限公司，一付藥加蒸餾水60 ml研磨混勻后，繼續(xù)加蒸餾水定容至72.58 ml，配制為益氣溫陽方混懸液，4℃保存?zhèn)溆谩嶒灂r，配制原液即為益氣溫陽方高劑量組給藥制劑（相當于人臨床用藥2倍）;將原液用蒸餾水稀釋2倍后，即為益氣溫陽方低劑量組給藥制劑（相當于人臨床用藥等倍）。

福辛普利鈉混懸液：稱取福辛普利鈉10 mg，加蒸餾水60 ml研磨混勻后，繼續(xù)加蒸餾水定容至72.58 ml，配制為福辛普利鈉混懸液，4℃保存?zhèn)溆谩嶒灂r，配制原液即為福辛普利鈉給藥制劑（相當于人臨床用藥2倍）。

2.2 造模方法

慢性心力衰竭大鼠模型的復(fù)制：鹽酸阿霉素腹腔注射15 mg/kg，分6次2周內(nèi)注射完畢。

2.3 實驗分組與給藥

將SPF級SD大鼠50只適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按體重以1：4比例分成2組：①空白對照組10只;②慢性心力衰竭造模組40只。動物單籠飼養(yǎng)，自由進食飲水。慢性心力衰竭造模組40只，腹腔注射鹽酸阿霉素腹腔注射15 mg/kg，分6次2周內(nèi)注射完?？瞻讓φ战M10只（Con），腹腔注射生理鹽水，給藥容積同鹽酸阿霉素;在第4次腹腔注射阿霉素后慢性心力衰竭造模組隨機分為4組，模型組（Adr）、造模+低劑量益氣溫陽組（AdrXm）、造模+高劑量益氣溫陽組（AdrXh）、造模+福辛普利組（AdrF）。給藥方法：將大鼠分組后， 繼續(xù)完成造模， 同時開始予治療用藥（即Con、Adr組予生理鹽水灌胃;AdrXm組予低劑量益氣溫陽方、AdrXh予高劑量益氣溫陽方、AdrF予福辛普利6mg/kg·d-1灌胃，連續(xù)給藥21 d）。給藥方案：設(shè)定低劑量組為等效劑量，高劑量組為等效劑量的2倍。每公斤大鼠每日給藥體積為10 ml/kg。

2.4 大鼠血漿AngⅡ、ALD含量的測定

采血前每只大鼠準備好2份試管，①AngⅡ測試管：加0.03 mol/L的EDTA·Na2、0.34 mol/L的8-羥基喹啉和0.32 mol/L的二巰醇各20 μl;②ALD測試管：加肝素抗凝。眼眶后靜脈叢取血約6 ml，分別滴入2個試管中，搖勻，離心（3000 r/min），分離血漿（試管①、②），置-20℃保存?zhèn)錂z，采用上述測試劑盒，按說明書進行測試，計算血管緊張素Ⅱ、醛固酮（ALD）水平。

2.5 統(tǒng)計學(xué)處理

計量資料采用均數(shù)±標準差（x±s）表示，全部結(jié)果均用SPSS 10.0 for Windows10 統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析處理。組間比較采用單因素方差分析。

3 結(jié) 果

與空白對照組相比較，模型組大鼠血漿AngII、ALD含量明顯升高 （P<0.01），證明模型組動物心衰級別較嚴重，CHF動物模型復(fù)制成功;與模型組比較，各治療組均可顯著降低AngII、ALD含量（P<0.01）;造模+福辛普利組、造模+高劑量益氣溫陽組動物與模型組比較，其血漿中AngII、ALD含量明顯降低（P<0.001）;造模+低劑量益氣溫陽組動物與模型組比較，其血漿中AngII、ALD含量顯著性降低（P<0.05），證明益氣溫陽方可減低CHF模型動物心衰程度，改善心衰癥狀。其詳細結(jié)果見表1。

4 討 論

現(xiàn)今中醫(yī)把CHF歸屬于“心悸、怔忡、咳喘、水腫、胸痹、積聚、虛勞”等范疇。該研究通過對CHF患者臨床證候?qū)W的研究發(fā)現(xiàn)，陽氣虧虛、血淤水停為其主要病機，以益氣溫陽主，活血利水為輔的有效治法，精心篩選了相應(yīng)藥物組成益氣溫陽方，經(jīng)臨床運用， 療效滿意。益氣溫陽湯是以漢張仲景《金匱要略》中溫經(jīng)湯為基礎(chǔ)方加減化裁而來，為歷代醫(yī)家治療婦科疾病的常用方劑，其具有溫中寓養(yǎng)、溫中寓通、氣血雙補之特點，與中醫(yī)心腎陽虛型“心水病”（心力衰竭）的治療大法極為契合，臨床應(yīng)用治療慢性心力衰竭屢收良效。應(yīng)用溫經(jīng)湯化裁而成的益氣溫陽方治療心力衰竭，目前國內(nèi)尚無報道。方中吳茱萸、桂枝，溫經(jīng)散寒，通利血脈，其中吳茱萸功擅散寒止痛，桂枝長于溫通血脈，共為君藥。黨參、黃芪、附子共為臣藥，益氣健脾，以資生化之源，陽生陰長，氣旺血充，助吳茱萸、桂枝以溫經(jīng)散寒。當歸、丹參活血祛瘀，養(yǎng)血調(diào)經(jīng);赤芍助諸藥活血散瘀;麥冬甘苦微寒，養(yǎng)陰清熱，并制吳茱萸、桂枝之溫燥;共為佐藥。甘草尚能調(diào)和諸藥，兼為使藥。諸藥合用，共奏益氣溫陽，調(diào)經(jīng)散寒之功。

關(guān)于心衰的病理機制，1992年P(guān)acker提出解釋心力衰竭進展的神經(jīng)內(nèi)分泌假說，其對病理生理的觀點中主要包括兩大因素，即心室重構(gòu)和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞因子系統(tǒng)的激活，其中最主要的為交感神經(jīng)系統(tǒng)（SNS）及腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng) （RAAS）的激活[3]。RAAS中稱為最為重要的活性激素的AngII是在體內(nèi)參與多種重要功能，CHF時其水平升高已被廣泛認同。AngII具有較強的血管收縮作用，能夠維持重要臟器血供和血壓，增加回心血量，使心排血量增多。但持久、過度的AngII升高，會促使CHF向不良方向發(fā)展[4]。在細胞水平，AngII促進血管平滑肌細胞（VSMC）生長和組織肥厚，促進心肌間質(zhì)纖維化[5]。在器官組織水平，可引起血管平滑肌收縮，使阻力增加，心室前后負荷增加，引起心肌肥厚及心室重構(gòu)。此外，AngII促進腎上腺皮質(zhì)球狀帶細胞合成和分泌ALD，血漿中ALD濃度升高，導(dǎo)致鈉水潴留，血容量擴張，前負荷增加，造成體循環(huán)及肺淤血。高ALD血癥可減少交感神經(jīng)末梢對去甲腎上腺素（NE）的再攝取，增強NE活性，引發(fā)心律失常與冠脈痙攣，在心室重構(gòu)，成纖維細胞增生，以及膠原沉積中也起重要作用。有研究報道，人的心肌細胞有ALD受體，ALD通過其受體可使心肌細胞壞死[6]，但其具體機制尚不清楚。

本研究表明，采用鹽酸阿霉素腹腔注射復(fù)制的CHF大鼠模型血漿AngII和ALD的含量升高，提示模型復(fù)制成功。經(jīng)藥物治療后，各治療組可有效降低大鼠血漿AngII和ALD的含量，進一步表明各治療組可抑制AngII和ALD的過度分泌和釋放，使其外周血管擴張，增強心肌收縮力，減輕心臟前后負荷，改善心臟縮舒功能，最終達到改善心力衰竭癥狀的目的，但對其益氣溫陽方的作用機制仍需進一步探討與研究。相信隨著研究模式的不斷開發(fā)與大規(guī)模臨床研究，心衰的中醫(yī)藥治療必將迎來嶄新的歷程。

參考文獻

[1] 趙志強.益氣溫陽湯用于心腎陽虛型慢性心力衰竭患者治療中的療效觀察[J].臨床醫(yī)藥文獻電子雜志，2016，3（41）：8243-8244.

[2] 潘 靜.慢性心力衰竭的藥物治療進展[D].重慶醫(yī)科大學(xué)，2018.

[3] 陳良華，劉同寶.心力衰竭的病理生理機制及治療模式[J].山東醫(yī)藥，2005（13）：67-68.

[4] 韓額爾德木圖，馬月宏，王海燕，孟永梅.慢性心衰的病理生理及發(fā)病機制研究進展[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2016，14（12）：1349-1352.

[5] 孫衛(wèi)東，尹魯驊，王伯松.心力衰竭診療進展及循證醫(yī)學(xué)[M].天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，2007：38-41.

[6] 戴閨柱.醛固酮受體拮抗劑與心力衰竭[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)刊，2001，3（4）：16.