酸棗仁珍珠粉膠囊改善小鼠睡眠作用研究

杜顯龍 李 卓 孫雨薇 郭 婉

失眠是困擾老年人的常見臨床問題，我國老年人群體中存在睡眠障礙的患病率為47.2%，女性高于男性，隨著年齡的升高患病率逐步升高[1]?！渡褶r本草經》中記載：“補中益肝，堅筋骨，助陰氣，皆酸棗仁之功也。”明代李時珍《本草綱目》中記載，棗仁“熟用療膽虛不得眠，煩渴虛汗之癥；生用療膽熱好眠，皆足厥陰少陽藥也?！迸R床研究表明，食用酸棗仁有寧靜安神、養(yǎng)肝斂汗功效，同時也可以降血壓、降血脂，是失眠、神經衰弱人群的不二之選[2]。據(jù)《本草綱目》記載，珍珠具有鎮(zhèn)靜安神、養(yǎng)陰息風、明目消翳、解毒生肌等功效。有報道珍珠具有改善睡眠作用[3]。珍珠中含多種氨基酸、微量元素及?；撬醄4]，主要化學成分碳酸鈣水解后除易被機體吸收，利于牙齒、骨骼生長發(fā)育和保持血液電解質平衡，也有一定的安神作用。本品在酸棗仁和珍珠粉的基礎上還添加了茯苓提取物和遠志提取物。

本試驗以小鼠為研究對象，研究酸棗仁珍珠粉膠囊對正常小鼠改善睡眠功能的影響。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》[5]，對酸棗仁珍珠粉膠囊進行改善睡眠功能動物實驗。

1.材料與方法

1.1 樣品 酸棗仁珍珠粉膠囊由某公司提供。人體口服推薦量為每日2次，每次2粒，成人體重按60kg計算，折合劑量0.02g/(kg·bw)。酸棗仁珍珠粉膠囊含有酸棗仁提取物、珍珠粉、茯苓提取物、遠志提取物等。

1.2 動物 長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實驗動物科技服務部提供SPF級昆明種雌性小鼠120只。

1.3 實驗環(huán)境條件 實驗條件為屏障環(huán)境。溫度23～24℃，濕度52%～54%。

1.4 儀器與試劑 秒表、電子天平、生理鹽水、戊巴比妥鈉、巴比妥鈉。

1.5 方法

1.5.1 劑量設定：將實驗動物分為三個實驗組，分別為延長戊巴比妥鈉睡眠時間實驗(實驗Ⅰ組)、戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗和直接睡眠試驗(實驗Ⅱ組)、巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗(實驗Ⅲ組)，三組實驗組再根據(jù)動物體重隨機分為四個亞組，每組10只。設對照組及低[0.l0g/(kg·bw)]、中[0.20g/(kg·bw)]、高[0.60g/(kg·bw)]三組劑量(分別相當于人體推薦劑量的5倍、10倍、30倍)。試驗時，分別取l.00g、2.00g、6.00g酸棗仁珍珠粉膠囊內容物加蒸餾水至200ml，配成相應劑量受試液，供各劑量組灌胃。對照組給予等體積蒸餾水。每日灌胃1次，灌胃量0.2ml/(10g·bw)，連續(xù)30天。實驗期間動物自由攝食飲水。觀察動物每天的活動及生長情況。

1.5.2 直接睡眠實驗：參考《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》。

1.5.3 延長戊巴比妥鈉睡眠時間實驗：參考《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》。

1.5.4 戊巴比妥鈉閾下劑量催眠實驗：參考《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》。

1.5.5 巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗：參考《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》。

1.5.6 統(tǒng)計學方法 用SPSS 11.0軟件進行數(shù)據(jù)轉化和統(tǒng)計分析。先對數(shù)據(jù)進行方差齊性檢驗，若方差齊，采用單因素方差分析進行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異再用Dunnett法進行多個劑量組與一個對照組均數(shù)間的兩兩比較。若方差不齊，則對原始數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D換，滿足方差齊性檢驗后，用轉換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計；若變量轉換后仍未達到方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)總體比較有差異，則采用不要求方差齊性的Tamhane’sT2檢驗進行兩兩比較。

2.結果與分析

2.1 樣品對小鼠體重的影響 由表1～表3可以看出，酸棗仁珍珠粉膠囊各劑量組與對照組比較，實驗期間體重均無顯著性差異(P>0.05)；動物生長良好，未見明顯異常反應。

表1 Ⅰ組小鼠體重

表2 Ⅱ組小鼠體重

表3 Ⅲ組小鼠體重

2.2 直接睡眠實驗 由表4可見，酸棗仁珍珠粉膠囊各劑量組與對照組經口灌胃后小鼠均不出現(xiàn)睡眠現(xiàn)象。

表4 小鼠直接睡眠實驗的影響

2.3 延長戊巴比妥鈉誘導的小鼠睡眠時間試驗 由表5可見，酸棗仁珍珠粉膠囊各劑量組對戊巴比妥鈉誘導小鼠睡眠時間有延長趨勢，中、高劑量組與對照組比較差異有顯著性(P<0.05或P<0.01)。

表5 對戊巴比妥鈉誘導小鼠睡眠時間的影響

2.4 戊巴比妥鈉閾下劑量催眠試驗 由表6可見，酸棗仁珍珠粉膠囊高劑量組小鼠睡眠發(fā)生率與對照組比較，差異有顯著性(P<0.01)。

表6 對閾下劑量戊巴比妥鈉誘導小鼠睡眠發(fā)生率的影響

2.5 巴比妥鈉睡眠潛伏期實驗 由表7可見酸棗仁珍珠粉膠囊各劑量組巴比妥鈉睡眠潛伏期與對照組比較，差異無顯著性(P>0.05)。

表7 對巴比妥鈉睡眠潛伏期的影響

3.討論

本研究以0.l0g/(kg·bw)、0.20g/(kg·bw)、0.60g/(kg·bw)劑量的酸棗仁珍珠粉膠囊給小鼠灌胃30天，劑量組小鼠體重與對照組比較，差異無顯著性(P>0.05)。對受試動物無直接睡眠作用。0.20g/(kg·bw)、0.60g/(kg·bw)劑量能延長閾劑量戊巴比妥鈉誘導的小鼠睡眠時間，0.60g/(kg·bw)劑量能增加閾下劑量戊巴比妥鈉誘導的小鼠睡眠發(fā)生率，與對照組比較差異有顯著性(P<0.05或P<0.0l)，對巴比妥鈉睡眠潛伏期無明顯影響。因此認為酸棗仁珍珠粉膠囊具有改善睡眠作用。

目前可以改善睡眠狀況的原料有酸棗仁、林蛙油、珍珠粉、茯苓、遠志、五味子等。張榮標[6]等人的研究探討了復方酸棗仁茯苓口服液改善小鼠睡眠作用。韓俊偉[7]等人的研究探討了酸棗仁復方制劑改善睡眠功能。梁東[8]等人的研究探討了酸棗仁林蛙油復方膠囊改善睡眠功能。王麗云[9]等人的研究探討了超細珍珠粉對小鼠改善睡眠。酸棗仁為藥食同源的保健食品原料，酸棗仁中所含的酸棗仁總皂苷等具有改善血液微循環(huán)、鎮(zhèn)靜催眠以及抗驚厥作用，鎮(zhèn)靜催眠效果較好[10]。珍珠作為一種名貴的中藥材,在我國的應用已有幾千年的歷史，珍珠性寒，味甘、咸，具有安神定驚、明目清翳、解毒生肌之功效，主治驚悸失眠、驚風癲癇、目生云翳、瘡瘍不斂等癥[11]。茯苓用于水腫尿少，痰飲眩悸，脾虛食少，便溏泄瀉，心神不安，驚悸失眠。遠志安神益智、解郁，治驚悸，健忘，夢遺，失眠，咳嗽多痰，癰疽瘡腫。實驗證明酸棗仁珍珠粉膠囊具有改善睡眠功效，可以成為研究改善睡眠保健食品的一個方向。