姜炭對(duì)大鼠纖溶系統(tǒng)影響的研究

嚴(yán)金娣

【摘? 要】目的：通過研究姜炭對(duì)纖溶系統(tǒng)影響，探討姜炭的止血機(jī)理;方法： 測(cè)定大鼠優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間，考察姜炭對(duì)大鼠對(duì)纖溶系統(tǒng)的影響;結(jié)果：姜炭提取物能顯著延長(zhǎng)優(yōu)球蛋白的溶解時(shí)間;結(jié)論：姜炭通過影響大鼠纖溶系統(tǒng)發(fā)揮止血的作用。

【關(guān)鍵詞】姜炭;止血;優(yōu)球蛋白

姜炭系由姜科植物姜[Zingiber Officinale Rosc. ]的干燥根莖，經(jīng)砂燙法炮制而得。味苦、澀，性溫;歸脾、肝經(jīng)，具有溫經(jīng)止血，溫中止痛的功效;常用于陽(yáng)虛失血、吐衄崩漏、脾胃虛寒、腹痛吐瀉[1]等的治療。臨床上姜炭多用于虛寒性出血的治療。目前，有少數(shù)研究報(bào)道姜炭能顯著縮短小鼠的出血時(shí)間[2-3]，但卻沒有明確的提出姜炭的止血機(jī)理。本實(shí)驗(yàn)以姜炭對(duì)優(yōu)球蛋白的溶解時(shí)間為指標(biāo)，探討姜炭對(duì)大鼠纖溶系統(tǒng)的影響，闡明姜炭的止血機(jī)理。

1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

1.1 藥材

干姜：購(gòu)于廣東省廣州市藥材公司中藥飲片廠。

姜炭：按《中國(guó)藥典》（2010年一部）附錄藥材炮制通則項(xiàng)下炒炭法炮制而得。

大黃：購(gòu)自大學(xué)城長(zhǎng)洲藥店。

1.2 儀器

離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）、電熱恒溫水浴鍋（江蘇金壇宏華儀器廠）。

1.3 試劑

3.8%枸櫞酸鈉（9 ：1）、1%醋酸溶液、25mmol·L-1? CaCl2溶液、硼砂緩沖液（pH= 9.0）等。

1.4 動(dòng)物

健康雄性SD大鼠（SPF級(jí)），重250±30 克， 購(gòu)于廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào)：SCXK（粵）2008-0002。

2 方法

2.1 供試藥品制備

干姜醇提液的制備：稱取干姜1000g，乙醇回流提取得到濃度為2g/mL的供試品溶液，灌胃劑量為1mL/100g。

姜炭醇提液的制備：稱取姜炭1000g，乙醇回流提取2次，得到濃度2g/mL的供試品溶液，灌胃劑量為1mL/100g。

大黃灌胃液的制備： 稱取大黃2500g，沸水煎煮2次濃縮得到一定濃度大黃液。

2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

購(gòu)買大鼠40只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，按體重均勻分為四個(gè)組，即空白組、模型組、干姜組和姜炭組，每組10只。灌胃給予寒涼藥大黃以造成大鼠脾胃虛寒動(dòng)物模型[4]：空白組每天用生理鹽水灌胃2次，連續(xù)10 天。模型組大鼠每晚灌大黃水煎液一次，連續(xù)10 天，并于第4、6、8日隔日從眼眶靜脈叢放血2ml，共3次。干姜/姜炭模型給藥組每晚灌大黃水煎液一次，連續(xù)10 天，并于第4、6、8日隔日從眼眶靜脈叢放血2ml，共3次，從第6天早上開始灌予干姜/姜炭醇提液，空白組灌服等劑量生理鹽水，連續(xù)5天。

2.3 優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間測(cè)定

造模成功后1h，大鼠眼內(nèi)眥球后靜脈叢取血加3.8%枸櫞酸鈉（9 ：1）抗凝后離心得貧血小板血漿（ platelet-poor plasma，PPP），取0.5mLPPP加入備有9mL 蒸餾水的錐形離心管中，再加入1%醋酸溶液0.1mL，充分混勻后冰箱內(nèi)靜置，優(yōu)球蛋白呈絮狀沉淀析出后離心取沉淀，于37℃的溫度下，加0.5mL pH=9.0硼砂緩沖液將優(yōu)球蛋白全部溶解， 再加25mmol·L-1? CaCl2溶液0.5mL混勻，管內(nèi)液體開始凝固（纖維蛋白凝塊形成）。待其凝固后，測(cè)定凝塊開始溶解到完全溶解的時(shí)間，即為優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間（ELT）[5]。

3 結(jié)果

4 討論

纖維蛋白溶解系統(tǒng)（簡(jiǎn)稱纖溶系統(tǒng)）的主要作用是清除止血后的血凝塊，即使不溶性的纖維蛋白多聚體分解、液化從新溶解，血管保持通暢。纖溶系統(tǒng)組成包括：纖溶酶原、纖溶酶、纖溶酶原激活物及纖溶抑制物[6-8]。

考察機(jī)體纖溶系統(tǒng)活性的指標(biāo)之一就有測(cè)定優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間。利用優(yōu)球蛋白與纖維蛋白和纖溶酶原的強(qiáng)親和力在酸性條件下一同沉淀下來(lái)，而沉淀中不含纖溶抑制物，排除纖溶抑制物對(duì)纖溶酶或纖溶酶原的抑制作用。測(cè)定優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間，可以考察藥物對(duì)纖溶系統(tǒng)的影響。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果（見表1）可以看出，姜炭能顯著的延長(zhǎng)大鼠優(yōu)球蛋白的溶解時(shí)間，說(shuō)明姜炭能夠降低大鼠纖溶系統(tǒng)活性，血凝塊溶解時(shí)間加長(zhǎng)，有利于止血。

參考文獻(xiàn)

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