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    ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備冷沉淀凝血因子的質(zhì)量調(diào)查

    2020-06-17 06:33:06呂素梅
    關(guān)鍵詞:離心法凝血因子水浴

    周 靜 呂素梅

    (洛陽(yáng)市中心血站 洛陽(yáng) 471000)

    臨床輸血在進(jìn)行患者救治時(shí)最常用的治療措施,尤其是在對(duì)患者實(shí)施搶救的過(guò)程中發(fā)揮著十分重要作用[1]。冷沉淀是一種臨床應(yīng)用范圍越來(lái)越廣泛的一種血液制品,就是血漿經(jīng)過(guò)加工處理后得到的液體部分。冷沉淀和血漿相比,前者的濃度更高,輸血療效更好。因此,醫(yī)護(hù)人員需在輸血前對(duì)采集的合格血液采用科學(xué)高效的制備方法制備冷沉淀凝血因子,以便在輸血過(guò)程中保證輸血的有效性,不僅有助于提高患者手術(shù)成功率,而且能加速患者預(yù)后的恢復(fù)[2]。既往冷沉淀的制備主要采取離心法,而當(dāng)前使用ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備冷沉淀越來(lái)越廣泛被應(yīng)用,二者均能取得較好的制備效果,但是針對(duì)二者制備冷沉淀凝血因子的質(zhì)量以及制備效率對(duì)比的研究較少[3]?;诖?,本研究探討ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備冷沉淀凝血因子的質(zhì)量調(diào)查,現(xiàn)報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1 血漿來(lái)源

    制備冷沉淀的血漿全部來(lái)自本中心血站2018年5月~2019年5月采集的合格血液,全血400ml,均在10h內(nèi)采集,在4℃條件下進(jìn)行離心處理(4068g,10min),分離后制備成新鮮冰凍血漿,速凍成固態(tài),置入-20℃冷庫(kù),備用。

    1.2 儀器設(shè)備

    山東中保康醫(yī)療器具有限公司生產(chǎn)的ZBK-LCD-A1型冷沉淀凝血因子制備儀;美國(guó)Thermo公司生產(chǎn)的HERAEUS-6000i大容量低溫離心機(jī);美國(guó)CytoTherm公司生產(chǎn)的低溫水浴融化箱;Lmb全自動(dòng)全血成分分離機(jī)Sepamatic-SL(Ⅲ);日本希森美康公司生產(chǎn)的CA-500全自動(dòng)血凝儀。

    1.3 檢測(cè)試劑

    Ⅷ因子試劑盒(廠家日本希森美康公司,批號(hào)547632A);纖維蛋白原試劑盒(廠家日本希森美康公司,批號(hào)547271A)。

    1.4 方法

    1.4.1觀察組采用虹吸法制備冷沉淀

    每批次制備90袋新鮮冰凍血漿,每臺(tái)冷沉淀凝血因子制備儀可制備30袋冷沉淀,嚴(yán)格按照設(shè)備操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行制備操作。設(shè)定水浴溫度為4℃,冷沉淀凝血因子制備儀開(kāi)機(jī)達(dá)到設(shè)定溫度后開(kāi)始制備,將新鮮冰凍血漿袋與連接的轉(zhuǎn)移袋一同放到公共秤,稱重后將新鮮冰凍血漿袋放到水浴槽制備位中,將轉(zhuǎn)移袋放到其下方的下稱重盒中,電腦屏幕顯示該制備位稱重?cái)?shù)據(jù)。30個(gè)制備位全部放置血袋后,將血袋導(dǎo)管放置在蠕動(dòng)泵中并固定于該路管卡上,保持管卡以下導(dǎo)管足夠松弛,以免影響稱重。30袋新鮮冰凍血漿全部放置完畢后,單擊“制備”,制備開(kāi)始(其余60袋新鮮冰凍血漿按上述方法放置到另兩臺(tái)冷沉淀凝血因子制備儀中開(kāi)始制備),水浴槽中新鮮冰凍血漿邊融化邊借助蠕動(dòng)泵形成虹吸,當(dāng)新鮮冰凍血漿袋中的冷沉淀凝血因子到達(dá)到設(shè)定容量時(shí),夾管閥自動(dòng)夾閉導(dǎo)管,制備儀通過(guò)聲音報(bào)警和其頂部報(bào)警燈閃爍提示制備完成。工作人員提取血袋后在公共秤復(fù)核容量,利用制備儀自帶的熱合頭熱合管路,制備結(jié)束。

    1.4.2對(duì)照組采用離心法制備冷沉淀

    每批次制備70袋新鮮冰凍血漿,將新鮮冰凍血漿置于4℃低溫水浴融化箱中,約80min幾乎完全融化時(shí),配平離心,使用HERAEUS-6000i大容量低溫離心機(jī)進(jìn)行離心,離心后將血漿袋置于成分分離機(jī),選擇冷沉淀制備程序,分離機(jī)自動(dòng)完成血漿分離、稱重、熱合。

    1.4.3檢測(cè)方法

    取出兩組制備完成保存時(shí)間≥3d且呈冷凍狀態(tài)下的冷沉淀,置于37℃溫度下的解凍箱中解凍,析出融化后的血袋中呈淡黃色澄清液體。完全實(shí)現(xiàn)融化后將血袋混勻,將血袋中的冷沉淀擠進(jìn)與血袋連接的導(dǎo)管內(nèi),熱合后斷開(kāi)導(dǎo)管。于1h內(nèi)嚴(yán)格按照CA-500全自動(dòng)血凝儀的操作步驟以及試劑說(shuō)明書(shū)予以檢測(cè)。

    1.4.4質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

    參考中華人民共和國(guó)GB18469-2012《全血及成分血質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》中標(biāo)準(zhǔn):200ml新鮮冰凍血漿制備的冷沉淀Ⅷ因子含量≥80IU、纖維蛋白原≥150mg。

    1.5 評(píng)價(jià)指標(biāo)

    (1)冷沉淀凝血因子的質(zhì)量比較:對(duì)兩組虹吸法以及離心法下制備的冷沉淀進(jìn)行抽檢,比較其冷沉淀凝血因子的質(zhì)量。(2)制備效率比較:比較離心法和虹吸法制備冷沉的工作效率(簡(jiǎn)稱“效率”),制備每袋冷沉淀所有的時(shí)間=(每批次人工數(shù)×每批次所用時(shí)間)/每批次制備的總袋數(shù),時(shí)間用min計(jì)算,用“時(shí)間min/袋·人次”表示,每人每制備一袋冷沉淀所用時(shí)間越少,效率越高。

    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    2 結(jié)果

    2.1 冷沉淀凝血因子的質(zhì)量比較

    觀察組纖維蛋白原、Ⅷ因子含量均較對(duì)照組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

    組別Ⅷ因子(IU/袋)纖維蛋白原(mg/袋)對(duì)照組(n=48)101.68±5.78167.42±5.12觀察組(n=48)123.34±6.02205.42±5.98t17.98133.442P0.0000.000

    2.2 制備效率比較

    用冷沉淀凝血因子制備儀采用虹吸法制備冷沉淀,制備數(shù)量增加,制備時(shí)間縮短,效率明顯高于離心制備冷沉淀,見(jiàn)表2。

    表2 兩種冷沉淀制備方法效率比較

    制備方式袋數(shù)人員時(shí)間(min)效率(時(shí)間min/袋·人次)虹吸法9021202.67離心法7021404

    3 討論

    冷沉淀是把合格的新鮮冰凍血漿放在1℃~6℃的溫度下,待加熱到37℃,血漿中完全融化后,于1h內(nèi)分離出沉淀下來(lái)的不溶解白色沉淀物。冷沉淀具備高濃度、高純度、低容量等優(yōu)勢(shì),被廣泛應(yīng)用于凝血功能障礙或創(chuàng)傷性出血的臨床治療中[4]。

    冷沉淀中最為主要的有效成分為Ⅷ因子以及纖維蛋白原等,均是穩(wěn)定性較差的凝血因子。其中的Ⅷ因子穩(wěn)定性極差,其體外的半衰期在12~24h范圍內(nèi)。冷沉淀中的Ⅷ因子含有量與制備時(shí)間的長(zhǎng)度呈負(fù)相關(guān),制備時(shí)間越長(zhǎng),含量越低而下降。當(dāng)在2℃~6℃的制備溫度下,Ⅷ因子能夠獲取最高的回收率,當(dāng)溫度超過(guò)8℃時(shí)可出現(xiàn)自我融解。制備時(shí)的溫度、制備所耗費(fèi)的時(shí)間以及制備鎖選擇的方案都影響對(duì)冷沉淀質(zhì)量,因此要采取合適的制備方案來(lái)控制融化溫度,縮短制備時(shí)長(zhǎng),以此來(lái)提升冷沉淀凝血因子質(zhì)量[5]。本研究中,觀察組Ⅷ因子含量、纖維蛋白原含量均高于對(duì)照組,且平均制備時(shí)間短于對(duì)照組,表明ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備冷沉淀凝血因子的質(zhì)量更高,制備效率更好。分析其原因主要是運(yùn)用離心法制備冷沉淀,新鮮的冰凍血漿要在4℃的冰箱中緩慢融化至一定程度后方可進(jìn)行離心處理,離心過(guò)程中溫度會(huì)上升,且制備過(guò)程也要在室溫下完成,會(huì)造成Ⅷ因子以及纖維蛋白原的衰減[6~7]。而采用ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀利用虹吸法制備冷沉淀,都是在一個(gè)密閉性較高的低溫的制備環(huán)境中,冷沉淀的制備幾乎不受外界環(huán)境的影響;同時(shí)通過(guò)特有的微電腦控制系統(tǒng),可將水浴溫度穩(wěn)定且精準(zhǔn)維持在4℃~6℃,此時(shí)制備的冷沉淀中Ⅷ因子以及纖維蛋白原衰減最少[8~9]。水浴槽中新鮮冰凍血漿邊融化邊借助蠕動(dòng)泵形成虹吸,當(dāng)新鮮冰凍血漿袋中的冷沉淀凝血因子到達(dá)到設(shè)定容量時(shí),夾管閥自動(dòng)夾閉導(dǎo)管,制備儀通過(guò)聲音報(bào)警和其頂部報(bào)警燈閃爍提示制備完成,精準(zhǔn)控制冷沉淀容量在40~50mL,有效避免冷沉淀容量出現(xiàn)偏差。整個(gè)制備的過(guò)程能夠做到自動(dòng)化控制,最大程度上降低人為因素的影響,大大提高了工作效率[10]。

    綜上所述,采用ZBK-LCD-A1型冷沉淀制備儀制備的冷沉淀凝血因子的質(zhì)量更高,每袋冷沉淀的制備用時(shí)更短,制備效率更好。

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