同型半胱氨酸、脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2水平與頸動脈粥樣硬化、狹窄程度的相關(guān)性研究

宋海濤　李銳鋒　劉翠嫻　潘成明　胡森安

【摘要】 目的：探討血清同型半胱氨酸（Hcy）、脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2）水平與頸動脈粥樣硬化、狹窄程度的相關(guān)性。方法：選擇在本院就診的114例B超檢查患不同程度頸動脈粥樣硬化患者作為研究組，測量頸動脈血管的內(nèi)徑、內(nèi)膜、內(nèi)-中膜厚度（IMT），并判斷狹窄程度，采用北美癥狀性頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)研究（NASCET）測量狹窄程度，并以遠端頸內(nèi)動脈作為狹窄率的參照，分為輕度狹窄、中度狹窄與重度狹窄。另選擇本院同期體檢健康者50例作為對照組。分別檢測所有研究對象血清Hcy和Lp-PLA2水平。結(jié)果：研究組Hcy和Lp-PLA2水平均顯著高于對照組（P<0.01）;當血清Hcy為17.25 mol/L時預測頸動脈粥樣硬化價值最高，靈敏度與特異度分別為82.6%、63.4%;當Lp-PLA2為284.9 g/L時預測頸動脈粥樣硬化價值最高，靈敏度與特異度分別為92.5%、71.9%;與輕度狹窄患者比較，中度狹窄和重度狹窄患者Hcy和Lp-PLA2水平均顯著升高（P<0.01）;與中度狹窄患者比較，重度狹窄患者Hcy和Lp-PLA2水平均顯著升高（P<0.01）;Hcy和Lp-PLA2與頸動脈狹窄程度均呈正相關(guān)（r=0.44、0.61，P<0.01）。結(jié)論：Hcy和Lp-PLA2水平與頸動脈粥樣硬化關(guān)系密切，且可作為判斷頸動脈狹窄程度指標。

【關(guān)鍵詞】 同型半胱氨酸 脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2 頸動脈粥樣硬化 狹窄程度

Study on the Relationship between the Levels of Homocysteine and Lipoprotein-related Phospholipase A2 and the Degree of Carotid Atherosclerosis and Stenosis/SONG Haitao， LI Ruifeng， LIU Cuixian， PAN Chengming， HU Senan. //Medical Innovation of China， 2020， 17（09）： -121

[Abstract] Objective： To investigate the relationship between serum homocysteine （Hcy） and lipoprotein- related phospholipase A2 （Lp-PLA2） levels and the degree of carotid atherosclerosis and stenosis. Method： A total of 114 patients with different degrees of carotid atherosclerosis who were examined by B-ultrasound in our hospital were selected as the study group， the internal diameter， intima-media thickness （IMT） and stenosis degree of carotid artery were measured. North American Symptomatic （NASCET） was used to measure the degree of stenosis， and the distal internal carotid artery was used as a reference for stenosis rate. The patients with mild stenosis， moderate stenosis and severe stenosis were divided into mild stenosis group， moderate stenosis group and severe stenosis group. In addition， 50 healthy patients were selected as the control group. The serum Hcy and Lp-PLA2 of all objects were detected respectively. Result： The levels of Hcy and Lp-PLA2 in the study group were significantly higher than those in the control group （P<0.01）. When serum Hcy was 17.25 mol/L， the value of predicting carotid atherosclerosis was the highest， the sensitivity and specificity were 82.6% and 63.4%， respectively. When Lp-PLA2 was 284.9 g/L， the value of predicting carotid atherosclerosis was the highest， the sensitivity and specificity were 92.5% and 71.9% ， respectively. The levels of Hcy and Lp-PLA2 in moderate stenosis and severe stenosis patients were significantly higher than those in mild stenosis patients （P<0.01）， and the levels of Hcy and Lp-PLA2 in severe stenosis patients were significantly higher than those in moderate stenosis patients （P<0.01）. There were positive correlation between Hcy and Lp-PLA2 and the degree of carotid artery stenosis （r=0.44， 0.61， P<0.01）. Conclusion： The levels of Hcy and Lp-PLA2 are closely related to carotid atherosclerosis and can be used as indicators to judge the degree of carotid stenosis.

[Key words] Homocysteine Lipoprotein-associated phospholipase A2 Carotid atherosclerosis Degree of stenosis

First-authors address： Gaoming District Peoples Hospital of Foshan City， Foshan 528500， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.09.029

動脈粥樣硬化是心腦血管疾病發(fā)生發(fā)展的主要病理基礎(chǔ)，頸動脈作為全身動脈系統(tǒng)的一部分，因其位置表淺，易于檢測，故可作為窗口反映全身動脈粥樣硬化情況。頸動脈粥樣硬化的本質(zhì)是一種彌漫性炎性疾病，與環(huán)境、患者的自身因素等有關(guān)[1]。同型半胱氨酸（Hcy）為一種含硫氨基酸，代謝可生成超氧化物，促進氧自由基的生成與釋放，從而加重炎癥反應，對血管內(nèi)皮細胞造成損傷[2]。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2）作為一種新型炎癥標志物，它參與粥樣斑塊形成、進展和最終破裂的過程，是獨立的心腦血管疾病風險預測指標[3-4]。本研究探討血漿Hcy、Lp-PLA2水平與頸動脈粥樣硬化、狹窄程度的相關(guān)性，旨在為心腦血管病防控提供診療循證依據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年1月-2019年1月在本院進行B超檢查存在不同程度頸動脈粥樣硬化患者114例為研究對象（研究組）。納入標準：缺氧、頭暈、目眩等臨床表現(xiàn)，思維能力明顯下降;頸部神經(jīng)反射陽性并活動部分受限;超敏C反應蛋白檢測結(jié)果陽性;有頸動脈粥樣硬化的旁證，如血脂代謝異常（血清膽固醇含量增高、甘油三酯升高等）;血液流變學提示血黏度增高，經(jīng)彩色超聲多普勒影像學檢查顯示動脈血管管腔狹窄達75%或以上，頸部血管超聲提示血流動力學改變、血管軟或硬斑塊;年齡30～80歲;未進行任何血管重塑治療及相關(guān)藥物治療。排除標準：已經(jīng)或正在準備使用介入法治療;重塑血管治療;頸動脈粥樣硬化伴隨嚴重心、腦、肝腎疾病;不能理解或無法執(zhí)行正常醫(yī)囑;病歷資料不全或失聯(lián)。另選擇本院同期體檢健康者50例作為對照組。此次研究方法經(jīng)醫(yī)院道德倫理委員會討論認定符合道德倫理標準要求，所有病例資料齊全，本研究方法、目的、預期結(jié)果以及潛在風險均充分告知患者本人或其家屬，并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 采用日立ALOKA-10彩色超聲儀測定頸動脈狹窄程度。采用日立7100全自動生化分析儀，免疫比濁法測定Lp-PLA2，參考值≤175 g/L，試劑為南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。采用酶循環(huán)法測定Hcy，參考值≤15 mol/L，試劑為邁克生物股份有限公司生產(chǎn)試劑盒，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.2.2 觀察指標及判定標準 經(jīng)本院超聲科檢測頸動脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）來確定是否有動脈粥樣硬化及斑塊形成大?。篒MT在1.0～1.2 mm為內(nèi)膜增厚，>1.2 mm為斑塊形成。頸動脈粥樣硬化斑塊的判定標準：管腔內(nèi)-中膜局部隆起增厚，向管腔內(nèi)突出，CIMT>1.2 mm，頸動脈斑塊的積分用Crouse法計算并判定斑塊大小及狹窄程度[5]。超聲下根據(jù)形態(tài)和回聲特點，斑塊分為低回聲脂質(zhì)性軟斑、中等回聲富含膠原組織的纖維性扁平斑塊、強回聲伴聲影的鈣化性硬斑塊、回聲強弱不等的潰瘍性混合型斑塊，以上四種統(tǒng)歸為研究組。同時測量頸動脈血管的內(nèi)徑、內(nèi)膜、內(nèi)-中膜厚度（IMT），并判斷狹窄程度，采用北美癥狀性頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)研究（NASCET）測量狹窄程度，并以遠端頸內(nèi)動脈作為狹窄率的參照，分為輕度狹窄、中度狹窄、重度狹窄。狹窄率=（1-狹窄處管腔內(nèi)徑/狹窄處遠端正常管腔內(nèi)徑）×100%。血管狹窄判定標準：管腔狹窄率0～29%為輕度狹窄，管腔狹窄率30%～69%為中度狹窄，管腔狹窄率70%～99%為重度狹窄。

1.2.3 實驗室檢測 所有納入對象均在B超檢查后臨床治療前，采血測定血液學指標并記錄：使用促凝管采集清晨空腹血液3 m L，待標本凝集后以3 000 r/min離心10 min，檢測血清Hcy、Lp-PLA2水平，所有檢測在2 h內(nèi)完成。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 20.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，統(tǒng)計主要數(shù)據(jù)經(jīng)檢驗符合近似正態(tài)分布，計量資料用（x±s）表示，兩組比較采用t檢驗，多組間比較采用F檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 研究組114例，男60例，女54例;年齡34～75歲，平均（39.50±4.64）歲：頸動脈狹窄程度：輕度狹窄32例，中度狹窄45例，重度狹窄37例。對照組50例，男30例，女20例;年齡33～78歲，平均（38.10±4.35）歲。兩組年齡、性別比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組Hcy與LP-PLA2水平比較 研究組Hcy和Lp-PLA2水平均顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.01），見表1。

2.3 ROC曲線評價Hcy和Lp-PLA2對頸動脈粥樣硬化的預測價值 Hcy預測頸動脈粥樣硬化的ROC曲線下面積為0.615，當血清Hcy為17.25 mol/L時，預測價值最高，靈敏度與特異度分別為82.6%、63.4%。Lp-PLA2預測頸動脈粥樣硬化的ROC曲線下面積為0.778，當Lp-PLA2為284.9 g/L時，預測價值最高，靈敏度與特異度分別為92.5%、71.9%。見圖1。

2.4 不同程度頸動脈狹窄患者Hcy與LP-PLA2水平比較 與輕度狹窄患者比較，中度狹窄和重度狹窄患者Hcy和Lp-PLA2水平均顯著升高（P<0.01）;與中度狹窄患者比較，重度狹窄患者Hcy和Lp-PLA2水平均顯著升高（P<0.01）。見表2。

2.5 Hcy和Lp-PLA2與不同程度頸動脈狹窄的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)分析顯示，Hcy和Lp-PLA2水平與頸動脈狹窄程度均呈正相關(guān)（r=0.44、0.61，P<0.01）。

3 討論

動脈粥樣硬化的主要原因是血脂異常，而血管內(nèi)皮細胞炎癥反應是發(fā)病的重要機制之一[6]。頸動脈作為頭部的主要供血通道，頸動脈斑塊一旦發(fā)生脫落，就會變成血栓，堵塞腦動脈。有研究表明，頸動脈狹窄和粥樣硬化是造成腦梗死的主要原因[7]。因此客觀、準確地評估頸動脈粥樣硬化及狹窄程度，可指導臨床制定科學有效的治療方案，預防腦梗死的發(fā)生。

Hcy與頸動脈狹窄程度的關(guān)聯(lián)性：Hcy是一種含硫氨基酸，為蛋氨酸和半胱氨酸代謝過程中產(chǎn)生的重要中間產(chǎn)物。研究顯示，Hcy可下調(diào)三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運體A1（ABCA1）、三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運體G1（ABCG1）及卵磷脂膽固醇轉(zhuǎn)移酶（LCAT）表達，影響膽固醇的逆轉(zhuǎn)運，導致脂質(zhì)聚集增加，進而加重動脈粥樣硬化病變[8]。同時，Hcy也可誘發(fā)內(nèi)皮細胞損傷，并刺激血小板結(jié)合血管內(nèi)膜，增強機體的凝血功能，誘發(fā)動脈血管炎癥反應，最終導致動脈粥樣硬化[9]。高Hcy水平是動脈粥樣硬化的獨立危險因素[10]，原因可能是高Hcy水平誘導血管平滑肌細胞增殖、影響機體甲基化等促使動脈粥樣硬化形成[11]。Hcy水平與心腦血管疾病密切相關(guān)，Wong等[12]報道顯示，Hcy每上升5 mol/L，腦卒中發(fā)生風險增加59%，缺血性心臟病發(fā)病風險增加30%。本研究結(jié)果顯示，Hcy在頸動脈粥樣硬化患者血清中顯著升高（P<0.01），當Hcy為17.25 mol/L

時，預測頸動脈粥樣硬化價值最高，靈敏度與特異度分別為82.6%、63.4%，且隨著頸動脈狹窄程度增加而顯著升高（r=0.44，P<0.01），表明Hcy在頸動脈斑塊形成及發(fā)展中起重要作用，與文獻[10-12]結(jié)果相近。

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與頸動脈狹窄程度的關(guān)系：Lp-PLA2是一種非Ca2+依賴性的絲氨酸酯酶，屬于磷脂酶A2超家族中的成員，主要由單核細胞、肥大細胞、巨噬細胞及T淋巴細胞分泌。體內(nèi)70%～80%的LP-PLA2在血漿中通過載脂蛋白B與低密度脂蛋白結(jié)合，在水解低密度脂蛋白的過程中，可以生成氧化型游離脂肪酸和溶血卵磷脂兩種致炎物質(zhì)，促進動脈粥樣硬化形成[13]。Dallit等[14]研究發(fā)現(xiàn)，對癥狀性頸動脈狹窄患者行頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)，病理檢查發(fā)現(xiàn)斑塊內(nèi)Lp-PLA2和溶血卵磷脂水平均增高，且與斑塊大小成正相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，Lp-PLA2在頸動脈粥樣硬化患者血清中顯著升高（P<0.01），當Lp-PLA2為284.9 g/L

時，預測頸動脈粥樣硬化價值最高，靈敏度與特異度分別為92.5%、71.9%，并且隨著狹窄程度增加而顯著升高（r=0.61，P<0.01）。表明Lp-PLA2參與了頸動脈粥樣硬化的過程并隨著其代謝濃度的升高而加重了頸動脈狹窄的進程，結(jié)論與陸強彬等[15]研究結(jié)果相近。Yong等[16]研究發(fā)現(xiàn)，Lp-PLA2是頸動脈斑塊形成及其易損性的獨立危險因素。雖然Lp-PLA2是近年來發(fā)現(xiàn)的一種炎癥因子，也是動脈粥樣硬化發(fā)生的危險因子和預測因子[17-18]，但其活性受藥物影響較大，研究顯示他汀類降脂藥可降低其活性[19-20]。因此動脈粥樣硬化患者一定要了解用藥情況，防止血清Lp-PLA2水平假性偏低而導致誤判。

綜上所述，血清Hcy和Lp-PLA2水平與頸動脈粥樣硬化關(guān)系密切，且與頸動脈狹窄程度呈正相關(guān)，可作為判斷頸動脈粥樣硬化及狹窄程度的指標。

參考文獻

[1]董翔，常庚，陶定波，等.血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9水平及其基因多態(tài)性與頸動脈斑塊易損性的相關(guān)[J].中國老年學雜志，2016，36（6）：1344-1346.

[2] Zhong C，Lv L，Liu C，et al.High homocysteine and blood pressure related to poor outcome of acute ischemia stoke in Chinese population[J].PLoS One，2014，9（9）：e107498.

[3] Thompson A，Gao P，Orfei L，et al.Lipoprotein-associated phospholipase A2 and risk of coronary disease，stroke，and mortality：collaborative analysis of 32 prospective studies[J].Lancet，2010，375（9725）：1536-1544.

[4]戚志強，周紅，王圣龍，等.血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與急性腦梗死患者臨床的相關(guān)性研究[J].中華老年心腦血管病雜志，2018，20（2）：196-197.

[5] Crouse J R 3rd，Grobbee D E，OLeary D H，et al.Carotic intima-mediathickness in low-risk individuals with asymptomatic atherosclerosis：baseline data from the METEOR study[J].Curr Med Res Opin，2007，23（3）：641-648.

[6] Steyers I C，Miller J.Endothelial dysfunction in chronic inflammatory diseases[J].Int J Mol Sci，2014，15（7）：11324-11349.

[7]任全剛，崔春燕，劉岳峰.腦梗死患者頸動脈彩超診斷頸動脈粥樣硬化的臨床價值分析[J].北京醫(yī)學，2015，3（7）：716-717.

[8]代佩，高奮，高宏偉，等.同型半胱氨酸通過氧化物酶增殖物激活α-肝臟X核受體α通路導致動脈粥樣硬化的機制研究[J]山西醫(yī)科大學學報，2019，6（6）695-701.

[9] Ueda N，Saton S，Kuroiwa Y.Multiple cerebral infarction and cardiomyopath with pheochromocytoma[J].Neurologgist，2011，17（1）：34-37.

[10] Mccully K S.Homocysteine and the pathogenesis of atherosclerosis [J].

Expert Rev Clin Pharmacol，2015，8（2）：211-219.

[11]易帆，曾召瓊，李萍，等.同型半胱氨酸在冠心病發(fā)病機制中的研究進展[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2019，40（11）1365-1368.

[12] Wong M C，Zhang D X，Wang H H.Rapid emergence of atherosclerosis in Asia：a systematic review of coronary atherosclerotic hert disease epidemiology and implications for prevention and control strategies[J].Curr Opin Lipidol，2015，26（4）：257-269.

[13] Bonnefont-Rousselot D.Lp-PLA2，a biomarker of vascular inflammation and vulnerability of atherosclerosis plaques[J].Ann Pharm Fr，2016，74（3）：190-197.

[14] Dallit M，Joerg H，Daniele V，et al.Enhanced expression of Lp-PLA2 and lysophosphatidylcholine in symptomatic carotid atherosclerotic plaques[J].Stroke，2008，39（5）：1448-1455.

[15]陸強彬，陸夢茹，朱祖福，等.脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2、脂蛋白（a）與腦梗死進展及頭頸部血管狹窄的相關(guān)性[J].中國動脈硬化雜志，2018，26（12）：1270-1272，1290.

[16] Yong Y，Xue T，Zhu J，et al.Serum lipoprotein-associated phospholipase A2 predicts the formation of carotid artery plaque and its vulnerability in anterior circulation cerebral infarction[J].Clin Neurol Neurosurg，2017，160：40-45.

[17] Ait-Oufella H，Mallat Z，Tedgui A.Lp-PLA2 and sPLA2：cardiovascular biomarkers[J].Med Sci（Paris），2014，30（5）：526-531.

[18] Fitzpatrick A L，Irizarry M C，Cushman M，et al.Lipoprotein-associated phospholipase A2 and risk of dementia in the Cardiovascular Health Study[J].Atherosclerosis，2014，235（2）：384-391.

[19] Alkuraishy H M，Al-Gareeb A I，Waheed H J.Lipoprotein-associated phospholipase A2 is linked with poor cardio-metabolic profile in patients with ischemic stroke：a study of effects of statins[J].Neurosci Rural Pract，2018，9（4）：496-503.

[20] Zheng D，Cai A，Xu R，et al.Effects and potential mechanism of atorvastain treatment treatment on Lp-PLA2 in rats with dyslipidemia[J].Arch Med Sci，2018，14（3）：629-634.

（收稿日期：2019-10-14） （本文編輯：程旭然）

通信作者：宋海濤