蘇州某醫(yī)院皮膚性病門診患者4種常見(jiàn)性傳播疾病病原體感染狀況及原因分析*

吳敏娟，胥 萍，李 晉，陳 慧，朱曉燕，范婷婷，吳敏智

1.蘇州大學(xué)附屬傳染病醫(yī)院檢驗(yàn)中心，江蘇蘇州 215137；2.南京艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心，江蘇南京 211100；3.蘇州大學(xué)附屬傳染病醫(yī)院皮膚性病科，江蘇蘇州 215137

生殖器皰疹是由單純皰疹病毒(HSV)感染引起的泌尿生殖器及肛門部位以皰疹為主要皮損表現(xiàn)的一種性傳播疾病，少部分出現(xiàn)感染癥狀，表現(xiàn)為生殖器及其周圍皮膚黏膜水皰、結(jié)痂及潰瘍、紅斑、毛囊炎等，但大多數(shù)患者臨床癥狀不典型，容易被忽視。HSV有Ⅰ型及Ⅱ型兩種，生殖器皰疹主要為HSV-Ⅱ感染所致[1]。解脲脲原體(UU)、沙眼衣原體(CT)、淋病奈瑟菌(NG)也是性傳播疾病的主要病原體，這3種病原體與HSV-Ⅱ所致的泌尿生殖系統(tǒng)感染已成為我國(guó)各地區(qū)主要的性傳播疾病，其感染情況較為復(fù)雜，雖然病死率較低，但嚴(yán)重影響患者身心健康[2]。本研究通過(guò)對(duì)HSV-Ⅱ、UU、CT、NG的DNA進(jìn)行檢測(cè)，旨在了解本地區(qū)患者性傳播疾病的感染情況，為臨床防控和診療提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇蘇州大學(xué)附屬傳染病醫(yī)院皮膚性病科門診收治的424例就診者為研究對(duì)象。疑似HSV-Ⅱ感染者298例，其中男230例、女68例，平均年齡(38.10±12.30)歲；疑似UU、CT、NG感染者126例，其中男47例、女79例，平均年齡(34.19±11.08)歲。疑似HSV-Ⅱ感染者納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)有典型生殖器皰疹或高度可疑生殖器皰疹皮損，如局部皰疹或密集成群的小水皰等。(2)無(wú)典型生殖器皰疹皮損，但男性患者有尿痛、尿癢等不適感或有尿道口發(fā)紅、分泌物等癥狀；女性患者有陰道分泌物增多、宮頸糜爛等癥狀。(3)有非婚性接觸史或配偶有生殖器皰疹病史者。(4)疑似生殖器皰疹復(fù)發(fā)的患者。疑似UU、CT、NG感染者納入標(biāo)準(zhǔn)：男性患者有尿痛、尿道口溢液等泌尿道炎癥；女性患者宮頸有黏液膿性分泌物。本研究通過(guò)蘇州大學(xué)附屬傳染病醫(yī)院倫理委員會(huì)的審批，并與患者簽訂知情同意書。

1.2儀器與試劑 試劑盒購(gòu)于艾康生物技術(shù)有限公司，儀器為美國(guó)ABI StepOnePlus實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集 有典型或可疑生殖器皰疹癥狀者用無(wú)菌一次性吸管吸取皰疹內(nèi)液或用無(wú)菌棉拭子蘸取皰疹內(nèi)液或滲出液裝于無(wú)菌試管內(nèi)；非典型或無(wú)生殖器皰疹癥狀患者或疑似UU、CT、NG感染者，男性用無(wú)菌細(xì)小棉拭子伸入尿道口內(nèi)2～4 cm處，略捻拭子取出分泌物，裝于無(wú)菌試管內(nèi)；女性先用棉拭子清除宮頸口表面的分泌物，再用另一滅菌棉拭子伸入宮頸，通過(guò)上皮交界處，直到看不到拭子頭，輕輕旋轉(zhuǎn)10～20 s后取出，裝于無(wú)菌試管內(nèi)。以上標(biāo)本均及時(shí)送檢。

1.3.2檢測(cè)方法 采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(QRT-PCR)法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。標(biāo)本試管中加入1 mL無(wú)菌生理鹽水充分震蕩混勻，吸取液體轉(zhuǎn)至1.5 mL離心管中。12 000 r/min離心5 min，棄上清液，沉淀中加入50 μL核酸提取液后充分混勻，2 000 r/min離心10 s，100 ℃金屬浴裂解10 min，12 000 r/min離心10 min，取上清液4 μL加入PCR反應(yīng)管中，同時(shí)做陰陽(yáng)性對(duì)照各一管，置入全自動(dòng)PCR儀中進(jìn)行擴(kuò)增，分析數(shù)據(jù)。整個(gè)過(guò)程嚴(yán)格按操作說(shuō)明書進(jìn)行。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析。計(jì)數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1HSV-Ⅱ DNA的陽(yáng)性檢出率 298例疑似HSV-Ⅱ感染者中，HSV-Ⅱ DNA檢出陽(yáng)性131例，其中男98例，陽(yáng)性檢出率為42.61%(98/230)；女33例，陽(yáng)性檢出率為48.53%(33/68)；不同性別間陽(yáng)性檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.75，P>0.05)。

2.2不同年齡組間HSV-Ⅱ感染情況分析 將298例疑似HSV-Ⅱ感染患者分為<20歲組，20～<40歲組，40～<60歲組，≥60歲組。4組陽(yáng)性檢出率分別為28.57%(2/7)、43.02%(77/179)、47.37%(45/95)、41.18%(7/17)，組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1.239，P>0.05)。

2.3UU、CT、NG DNA的陽(yáng)性檢出率 126例疑似UU、CT、NG感染者分別進(jìn)行DNA檢測(cè)，檢出UU陽(yáng)性65例(51.59%)，CT陽(yáng)性9例(7.14%)和NG陽(yáng)性10例(7.94%)。不同性別的UU陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而不同性別的NG和CT陽(yáng)性檢出率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 不同性別UU、CT、NG檢出情況比較[n(%)]

2.4不同年齡組間UU、CT、NG感染情況分析 結(jié)果顯示，<20歲組UU+CT+NG共檢出5例，陽(yáng)性檢出率為71.43%(5/7)；20～<40歲組UU+CT+NG共檢出66例，陽(yáng)性檢出率為75.00%(66/88)；40～<60歲組UU+CT+NG共檢出8例，陽(yáng)性檢出率為32.00%(8/25)；≥60歲組UU+CT+NG共檢出5例，陽(yáng)性檢出率為83.33%(5/6)；4組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.09，P<0.001)。進(jìn)一步兩兩比較，20～<40歲組陽(yáng)性檢出率高于40～<60歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.93，P<0.001)；20～<40歲組陽(yáng)性檢出率低于≥60歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.235，P<0.05)。

3 討 論

HSV是一類雙鏈DNA病毒，其基因組長(zhǎng)約152 kb，共261個(gè)堿基對(duì)。HSV-Ⅱ主要經(jīng)直接密切接觸和性接觸傳播引起腰以下部位感染，在全球多個(gè)國(guó)家高度流行，且在我國(guó)的流行情況也較為嚴(yán)重，每年新發(fā)病例預(yù)計(jì)為2 000萬(wàn)，患病率也在逐年增加[3]。更為重要的是，由于HSV感染者的免疫功能受到破壞以及病變區(qū)域的潰瘍，增加了人類免疫缺陷病毒(HIV)的感染概率和危險(xiǎn)性[4]。由于只有10%～20%的生殖器皰疹患者具有典型臨床表現(xiàn)，絕大多數(shù)表現(xiàn)為紅斑、糜爛、淺表小潰瘍或無(wú)癥狀，給臨床診斷帶來(lái)較大困難，因此實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)于生殖器皰疹的診斷就顯得尤為重要，這對(duì)病程監(jiān)控、指導(dǎo)治療、方案療效確定及預(yù)測(cè)疾病進(jìn)程等方面具有重要的意義。

UU可黏附于泌尿生殖道表皮細(xì)胞的表層，會(huì)造成一定的細(xì)胞損傷，進(jìn)而引發(fā)多種疾病，如改變男性精子濃度、活力、形態(tài)和精液酸堿度[5]，最終導(dǎo)致男性不育，而在女性中，UU與多種婦科炎癥如宮頸炎、盆腔炎、輸卵管炎等相關(guān)，且嚴(yán)重程度和感染的菌量密切相關(guān)[6]。另有報(bào)道顯示，UU可能攜帶有中性粒細(xì)胞趨化因子釋放所需的蛋白酶，UU感染能使母體羊水中糖蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶-9活性增加，從而使胎膜提前破裂，這可能是UU感染致胎膜早破和早產(chǎn)的相關(guān)致病因素[7]。CT是一種嚴(yán)格真核細(xì)胞內(nèi)寄生、具有獨(dú)特發(fā)育周期的微生物。CT感染生殖道的上皮細(xì)胞后，可以誘導(dǎo)組織損傷，患者未能得到及時(shí)的診斷和治療會(huì)導(dǎo)致持續(xù)的傳播并引起相關(guān)并發(fā)癥，如盆腔炎、異位妊娠、輸卵管不育及附睪炎[8]。FRIKH等[9]報(bào)道，男性不育者中，CT感染的患者所占比例較高，且與精子活力的改變相關(guān)。NG屬于人體寄生菌，人類為NG唯一宿主，NG感染導(dǎo)致的淋病如果未得到及時(shí)、有效的治療，也會(huì)導(dǎo)致女性發(fā)生子宮炎、輸卵管炎癥和男性發(fā)生睪丸、附睪炎等，從而繼發(fā)不孕不育或異位妊娠[10-11]。

本研究通過(guò)對(duì)疑似HSV-Ⅱ感染者的HSV-Ⅱ DNA檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)298例疑似感染者HSV-Ⅱ DNA檢出陽(yáng)性131例，陽(yáng)性檢出率為43.96%，與?？诘貐^(qū)[12](47.33%)和臺(tái)州地區(qū)[13](45.30%)相近，均有較高的感染率。在就診患者中，男230例，女68例，男性就診者的數(shù)量遠(yuǎn)多于女性，這可能是因?yàn)槟信车澜Y(jié)構(gòu)不同，女性位于陰道內(nèi)和宮頸的皰疹不易察覺(jué)，不適感也沒(méi)有男性明顯[14]。因此，臨床上女性如果有反復(fù)的陰道或?qū)m頸炎癥者應(yīng)考慮有HSV-Ⅱ感染的可能性而及時(shí)進(jìn)行檢查。

本研究126例疑似UU、CT、NG感染者中，UU、CT、NG的陽(yáng)性檢出率分別為51.59%、7.14%、7.94%，與河南永城地區(qū)[15](UU為55.25%，CT為7.52%，NG為5.45%)比較接近；與北京地區(qū)[16](UU為53.68%，CT為7.20%，NG為2.18%)相比，UU和CT陽(yáng)性檢出率稍低，而NG感染率高于北京地區(qū)；與廣東佛山地區(qū)[17](UU為38.59%，CT為16.94%，NG為26.35%)和新疆石河子地區(qū)[18](UU為31.75%，CT為21.31%，NG為36.35%)相比，UU陽(yáng)性檢出率高于佛山和石河子地區(qū)，而CT和NG感染率較低。由此可見(jiàn)，UU、CT、NG感染率地區(qū)差異較大，可能與不同地區(qū)人群分布、經(jīng)濟(jì)水平、教育情況、醫(yī)療條件不同有一定關(guān)系。已有報(bào)道，UU可在性成熟女性生殖道中處于正常攜帶狀態(tài)[19]，與NG和CT相比，UU感染率最高[20]。UU代謝產(chǎn)生的尿素酶、IgA蛋白酶、磷脂酶A和C及多帶抗原蛋白可引起細(xì)胞膜的損傷和組織的破壞，其中尿素酶可分解尿素產(chǎn)生氨，引起pH值改變，不僅有利于一些細(xì)菌的定植，對(duì)細(xì)胞也有毒害作用，IgA蛋白酶能破壞泌尿生殖道黏膜，損害免疫系統(tǒng)[21]。

本研究結(jié)果顯示，20～<40歲組就診人數(shù)最多，可能是由于這個(gè)年齡段的人群處于性活躍期并對(duì)自身健康防護(hù)意識(shí)較強(qiáng)，反之≥60歲年齡組患者就診人數(shù)較少但陽(yáng)性檢出率卻較高。由此可見(jiàn)，老年人的防病治病意識(shí)較弱，且隨著年齡的增長(zhǎng)，免疫功能下降，病原體感染的風(fēng)險(xiǎn)增加。因此，加強(qiáng)老年人的防病意識(shí)，宣傳性傳播疾病的科普知識(shí)也具有一定必要性。

由于QRT-PCR法檢測(cè)病原體在檢出時(shí)間上優(yōu)于培養(yǎng)法且對(duì)活菌無(wú)嚴(yán)格要求，因此本研究亦采用的是QRT-PCR法。但大部分標(biāo)本未能同步進(jìn)行培養(yǎng)而不能進(jìn)一步了解這些病原體藥敏情況等相關(guān)信息，無(wú)法指導(dǎo)抗菌藥物的使用，值得引起今后重視和改進(jìn)。

綜上所述，蘇州大學(xué)附屬傳染病醫(yī)院皮膚性病門診患者HSV-Ⅱ、UU、CT、NG陽(yáng)性檢出率總體較高，應(yīng)引起重視。性傳播疾病病原體的檢測(cè)不僅對(duì)臨床癥狀明顯的患者具有重要意義，同時(shí)，對(duì)臨床癥狀不明顯的患者和復(fù)發(fā)患者亦可做到早診斷、早治療，并為性傳播疾病的流行病學(xué)研究提供可靠依據(jù)。