不同微生物菌劑組合處理對(duì)芳樟生長(zhǎng)和精油積累的影響

黃秋良， 楊先吉， 羅佳佳， 劉酉琳， 袁宗勝， 張國(guó)防，①

(1. 福建農(nóng)林大學(xué)林學(xué)院， 福建 福州 350002； 2. 閩江學(xué)院海洋研究院， 福建 福州 350108)

芳樟醇(C10H18O)為無色液體，具有鈴蘭香氣，被大量用于香化工業(yè)、醫(yī)藥、國(guó)防、化工和香料等行業(yè)[1-2]。天然芳樟醇具有獨(dú)特的風(fēng)味和旋光特征，是化學(xué)合成的芳樟醇無法匹及的，天然芳樟醇的市場(chǎng)需求量較大、價(jià)格較高，為目前國(guó)際市場(chǎng)上非常緊缺的商品[2-3]。芳樟(Cinnamomumcamphoravar.linalooliferaFujita)是樟樹〔Cinnamomumcamphora(Linn.) Presl〕的一個(gè)生化變種，富含芳樟醇[4]。提高芳樟精油含量是發(fā)展高產(chǎn)量和高品質(zhì)芳樟油料林的重要基礎(chǔ)。

微生物菌劑又稱微生物菌肥，簡(jiǎn)稱菌肥，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育有利，其中的大量微生物可分解土壤中的有機(jī)物或無機(jī)元素，或者分泌細(xì)胞激動(dòng)素和生長(zhǎng)類激素等代謝產(chǎn)物，從而促進(jìn)植物生長(zhǎng)[5]；這些微生物還可通過分泌代謝物質(zhì)直接或間接影響宿主植物的代謝途徑，進(jìn)而影響宿主的生理特性和生長(zhǎng)發(fā)育[6-7]。另外，微生物菌劑還是新型農(nóng)業(yè)的理想肥料，既能提高作物的產(chǎn)量和品質(zhì)，又能節(jié)約化肥使用成本、減少環(huán)境污染、減輕病害[8-9]。目前，關(guān)于芳樟微生物菌劑的施肥試驗(yàn)主要集中在復(fù)合施肥方面[9-13]，但復(fù)合微生物菌劑的成分較復(fù)雜，無法準(zhǔn)確判斷單一微生物菌劑對(duì)芳樟生長(zhǎng)和精油含量的影響，并且，各微生物菌劑對(duì)芳樟生長(zhǎng)和精油含量影響的互作效應(yīng)也不清楚。有效解決上述問題就能明確利于芳樟生長(zhǎng)和精油高產(chǎn)的最佳微生物菌劑施用量，對(duì)于芳樟精油產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。

鑒于此，作者采用四元二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)(1/2實(shí)施)對(duì)不同水平褐球固氮菌(AzotobacterchroococumBeijerinck)、巨大芽孢桿菌(Bacillusmagateriumde Bary)、膠凍樣芽孢桿菌(B.mucilaginosusKrassilnikov)和枯草芽孢桿菌(B.subtilisCohn)組合處理下芳樟葉和枝的鮮質(zhì)量及其比值、精油含量及精油產(chǎn)量進(jìn)行了比較研究，以4種微生物菌劑的施用量為自變量(X)、精油產(chǎn)量為因變量(Y)進(jìn)行了回歸方程擬合分析和顯著性檢驗(yàn)，并對(duì)影響芳樟精油產(chǎn)量的微生物菌劑進(jìn)行了單因子效應(yīng)分析，以期確定適宜芳樟精油生產(chǎn)的最佳微生物菌劑組合方案，為合理開發(fā)和有效利用微生物菌劑提高芳樟精油產(chǎn)量提供參考資料。

1 試驗(yàn)地概況和研究方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)地設(shè)在福建農(nóng)林大學(xué)妙峰山苗圃地育苗大棚(自然光照)內(nèi)，具體地理坐標(biāo)為東經(jīng)118°08′～120°31′、北緯25°15′～26°29′，屬亞熱帶海洋性氣候，氣候溫和，雨量充沛。

1.2 材料

選取永安種苗中心苗圃內(nèi)長(zhǎng)勢(shì)均勻的芳樟195號(hào)無性系1年生扦插苗(平均苗高25.22 cm，平均地徑3.03 mm)作為研究對(duì)象。供試微生物菌劑包括褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌，均來自滄州旺發(fā)生物技術(shù)研究所。以苗圃地旁的黃心土為盆栽土，土壤的有機(jī)質(zhì)、全氮、全磷和全鉀含量分別為0.02、0.13、0.41和47.96 g·kg-1，水解氮、速效磷和速效鉀含量分別為15.10、8.89和35.14 mg·kg-1；將質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)0.6% KMnO4溶液均勻噴灑到盆栽土中，用塑料薄膜密封后曝曬8 d，待用。

1.3 研究方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用四元二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)(1/2實(shí)施)[14]進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。使用上口徑38.5 cm、下口徑30.0 cm、高30.0 cm的栽培盆栽種芳樟植株，每盆的盆栽土為5.5 kg。供試4種微生物菌劑的每盆施用量均設(shè)置2×109、3×109、4×109、5×109和6×109CFU 5個(gè)水平，共23個(gè)處理組，依次編號(hào)T1至T23，以無菌水作為空白對(duì)照。每個(gè)處理組的微生物菌劑組合詳見表1。每盆栽種1株芳樟植株，每組各10盆，并設(shè)置3個(gè)生物學(xué)重復(fù)。

表1 微生物菌劑的四元二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)(1/2實(shí)施)

Table 1 Quadratic regression orthogonal rotational combination design with four factors (1/2 implementation) of microbial agents

處理組Treatmentgroup在5.5 kg盆栽土中的施用量/CFU1)Application amount in 5.5 kg potting soil1)X1X2X3X4處理組Treatment group在5.5 kg盆栽土中的施用量/CFU1)Application amount in 5.5 kg potting soil1)X1X2X3X4CK0000T124×1096×1094×1094×109T15×1095×1095×1095×109T134×1094×1092×1094×109T25×1095×1093×1093×109T144×1094×1096×1094×109T35×1093×1095×1093×109T154×1094×1094×1092×109T45×1093×1093×1095×109T164×1094×1094×1096×109T53×1095×1095×1093×109T174×1094×1094×1094×109T63×1095×1093×1095×109T184×1094×1094×1094×109T73×1093×1095×1095×109T194×1094×1094×1094×109T83×1093×1093×1093×109T204×1094×1094×1094×109T92×1094×1094×1094×109T214×1094×1094×1094×109T106×1094×1094×1094×109T224×1094×1094×1094×109T114×1092×1094×1094×109T234×1094×1094×1094×109

1)X1： 褐球固氮菌AzotobacterchroococumBeijerinck；X2： 巨大芽孢桿菌Bacillusmagateriumde Bary；X3： 膠凍樣芽孢桿菌B.mucilaginosusKrassilnikov；X4： 枯草芽孢桿菌B.subtilisCohn.

1.3.2 接種方法 將4種微生物菌劑分別用無菌水稀釋成1×108CFU·mL-1菌懸液，于2015年10月5日，采用一次性灌根接種法按照上述實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案施用。實(shí)驗(yàn)期間，每周澆水1～2次，采取日常管理確保植株正常生長(zhǎng)。于2016年6月6日結(jié)束實(shí)驗(yàn)。

1.3.3 葉和枝鮮質(zhì)量測(cè)定 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，分別收集各組全部地上部分，將葉和枝分開，擦凈后，采用電子天平(精度0.01 g)稱量葉和枝的鮮質(zhì)量，將葉和枝分別裝入自封袋中置于4 ℃冰箱中保存、備用，根據(jù)稱量結(jié)果計(jì)算葉鮮質(zhì)量與枝鮮質(zhì)量的比值。

1.3.4 精油提取 采用密閉循環(huán)式水蒸氣蒸餾冷凝法[15]分別提取葉和枝的精油，并分別計(jì)算葉和枝的精油含量[4]，根據(jù)公式“精油產(chǎn)量=葉精油含量×葉鮮質(zhì)量+枝精油含量×枝鮮質(zhì)量”計(jì)算精油產(chǎn)量。

1.4 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析

采用EXCEL 2017軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析；以4種微生物菌劑的施用量為自變量(X)、精油產(chǎn)量為因變量(Y)進(jìn)行回歸方程擬合分析，并采用DPS 7.05軟件對(duì)獲得的回歸方程進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，對(duì)影響芳樟精油產(chǎn)量的微生物菌劑進(jìn)行單因子效應(yīng)分析。

2 結(jié)果和分析

2.1 不同微生物菌劑組合處理對(duì)芳樟生長(zhǎng)的影響

不同微生物菌劑組合處理對(duì)芳樟葉和枝的鮮質(zhì)量及其比值的影響見表2。由表2可以看出：與CK組(對(duì)照組，未施用微生物菌劑)相比，23個(gè)處理組的葉和枝鮮質(zhì)量及其比值均不同程度升高。供試處理組的葉鮮質(zhì)量為23.02～62.50 g，較CK組升高了38.34%～275.60%；枝鮮質(zhì)量為8.93～26.71 g，較CK組升高了10.66%～230.98%；葉鮮質(zhì)量與枝鮮質(zhì)量的比值為1.96～3.04，較CK組升高了3.16%～60.00%。除T6組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為3×109、5×109、3×109和5×109CFU)和T9組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為2×109、4×109、4×109和4×109CFU)外，其余21個(gè)處理組的葉鮮質(zhì)量均顯著(P<0.05)高于CK組；除T4組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為5×109、3×109、3×109和5×109CFU)、T5組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為3×109、5×109、5×109和3×109CFU)、T6組、T13組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為4×109、4×109、2×109和4×109CFU)和T16組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為4×109、4×109、4×109和6×109CFU)外，其余18個(gè)處理組的枝鮮質(zhì)量均顯著高于CK組；T1組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為5×109、5×109、5×109和5×109CFU)、T2組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為5×109、5×109、3×109和3×109CFU)、T3組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為5×109、3×109、5×109和3×109CFU)、T4組、T5組、T6組、T7組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為3×109、3×109、5×109和5×109CFU)、T10組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為6×109、4×109、4×109和4×109CFU)、T13組、T14組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為4×109、4×109、6×109和4×109CFU)、T16組和T23組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為4×109、4×109、4×109和4×109CFU)的葉鮮質(zhì)量與枝鮮質(zhì)量的比值顯著高于CK組。

處理組Treatmentgroup在5.5 kg盆栽土中的施用量/CFU2)Application amount in 5.5 kg potting soil2)X1X2X3X4葉鮮質(zhì)量/gLeaf fresh mass枝鮮質(zhì)量/gBranch fresh mass葉鮮質(zhì)量與枝鮮質(zhì)量的比值Ratio of leaf fresh mass tobranch fresh massCK000016.64±1.66l8.07±1.03l1.90±0.03iT15×1095×1095×1095×10936.18±3.76cdefg13.65±0.47fghij2.65±0.19bcT25×1095×1093×1093×10941.97±3.58bc17.07±0.38defg2.46±0.11cdT35×1093×1095×1093×10962.50±3.29a26.71±2.05a2.34±0.02defT45×1093×1093×1095×10928.46±1.79fghijk9.35±1.09kl3.04±0.04aT53×1095×1095×1093×10925.25±2.69ijk11.27±0.59ijkl2.24±0.04defghT63×1095×1093×1095×10923.02±1.14kl8.93±1.03kl2.58±0.10bcT73×1093×1095×1095×10937.31±1.33cdef15.26±0.54defgh2.44±0.08cdeT83×1093×1093×1093×10948.92±2.14b22.77±1.31b2.15±0.03fghiT92×1094×1094×1094×10924.44±2.17jkl12.23±0.87hijk2.00±0.03hiT106×1094×1094×1094×10940.75±1.99cd18.22±1.89de2.24±0.09defghT114×1092×1094×1094×10934.01±1.61cdefghi17.31±0.87def1.96±0.07iT124×1096×1094×1094×10927.85±1.61ghijk13.24±0.99ghij2.10±0.07fghiT134×1094×1092×1094×10927.65±3.86hijk10.50±1.01jkl2.63±0.04bcT144×1094×1096×1094×10960.18±3.83a21.84±1.61bc2.76±0.04bT154×1094×1094×1092×10929.20±3.97fghijk13.84±0.97fghij2.11±0.09fghiT164×1094×1094×1096×10925.02±4.19ijk10.94±1.01ijkl2.29±0.10defgT174×1094×1094×1094×10938.65±3.58cde17.85±1.30de2.16±0.05fghiT184×1094×1094×1094×10932.32±1.43defghij15.16±1.32defgh2.13±0.11fghiT194×1094×1094×1094×10930.86±0.96efghijk14.65±1.64efghi2.10±0.03fghiT204×1094×1094×1094×10928.05±3.30ghijk12.70±0.76hijk2.21±0.05efghiT214×1094×1094×1094×10939.46±2.18cde18.63±0.82cd2.12±0.02fghiT224×1094×1094×1094×10929.69±2.31fghijk13.83±1.38fghij2.15±0.02fghiT234×1094×1094×1094×10936.85±1.62cdefg15.22±1.18defgh2.42±0.09cde

1)同列中不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)Different lowercases in the same column indicate the significant (P<0.05) difference.

2)X1： 褐球固氮菌AzotobacterchroococumBeijerinck；X2： 巨大芽孢桿菌Bacillusmagateriumde Bary；X3： 膠凍樣芽孢桿菌B.mucilaginosusKrassilnikov；X4： 枯草芽孢桿菌B.subtilisCohn.

2.2 不同微生物菌劑組合處理對(duì)芳樟精油積累的影響

不同微生物菌劑組合處理對(duì)芳樟葉和枝的精油含量及精油產(chǎn)量的影響見表3。由表3可以看出：與CK組(對(duì)照組，未施用微生物菌劑)相比，23個(gè)處理組的葉精油含量和精油產(chǎn)量均不同程度升高；除T2組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為5×109、5×109、3×109和3×109CFU)、T4組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為5×109、3×109、3×109和5×109CFU)、T7組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為3×109、3×109、5×109和5×109CFU)和T9組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為2×109、4×109、4×109和4×109CFU)外，其余19個(gè)處理組的枝精油含量也均不同程度升高。供試處理組的葉精油含量為1.63%～2.37%，較CK組升高了1.24%～47.20%；精油產(chǎn)量為0.44～1.56 g，較CK組升高了51.72%～437.93%。除T10組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為6×109、4×109、4×109和4×109CFU)外，其余22個(gè)處理組的葉精油含量均顯著高于CK組；除T2組、T4組、T7組、T9組、T10組和T13組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為4×109、4×109、2×109和4×109CFU)外，其余17個(gè)處理組的枝精油含量均顯著高于CK組；除T6組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為3×109、5×109、3×109和5×109CFU)外，其余22個(gè)處理組的精油產(chǎn)量均顯著高于CK組。

1)同列中不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)Different lowercases in the same column indicate the significant (P<0.05) difference.

2)X1： 褐球固氮菌AzotobacterchroococumBeijerinck；X2： 巨大芽孢桿菌Bacillusmagateriumde Bary；X3： 膠凍樣芽孢桿菌B.mucilaginosusKrassilnikov；X4： 枯草芽孢桿菌B.subtilisCohn.

2.3 芳樟精油產(chǎn)量與微生物菌劑施用量的回歸方程擬合分析及顯著性檢驗(yàn)

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)芳樟精油產(chǎn)量(Y)與各微生物菌劑施用量(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌施用量分別為X1、X2、X3和X4)進(jìn)行回歸方程擬合分析，獲得的回歸方程為Y=0.686+0.064X1-0.116X2+0.200X3-0.122X4+0.002X12+0.036X22+0.106X32-0.032X42+0.024X1X2+0.116X1X3-0.086X1X4。

上述回歸方程的顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見表4。由表4可以看出：在α值為0.05水平上，F(xiàn)值為6.748 8，P值為0.001 8，說明供試4種微生物菌劑的施用量與芳樟精油產(chǎn)量存在顯著的回歸關(guān)系。

表4 芳樟精油產(chǎn)量與微生物菌劑施用量回歸方程的顯著性檢驗(yàn)

Table 4 Significance test of regression equation of essential oil yield ofCinnamomumcamphoravar.linalooliferaFujita with application amount of microbial agents

1)X1： 褐球固氮菌AzotobacterchroococumBeijerinck；X2： 巨大芽孢桿菌Bacillusmagateriumde Bary；X3： 膠凍樣芽孢桿菌B.mucilaginosusKrassilnikov；X4： 枯草芽孢桿菌B.subtilisCohn.

由表4還可以看出：巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌施用量對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的一次效應(yīng)的P值分別為0.021 3、0.000 7和0.016 4，說明巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌施用量對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的一次效應(yīng)分別達(dá)到顯著、極顯著和顯著水平；而褐球固氮菌施用量對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的一次效應(yīng)的P值為0.167 5，說明褐球固氮菌施用量對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的一次效應(yīng)未達(dá)到顯著水平。褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌施用量對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的二次效應(yīng)的P值分別為0.961 6、0.393 5、0.022 4和0.446 5，說明只有膠凍樣芽孢桿菌施用量對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的二次效應(yīng)達(dá)到顯著水平，其余3種微生物菌劑施用量對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的二次效應(yīng)均未達(dá)到顯著水平。4種微生物菌劑施用量對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的互作效應(yīng)的P值均大于0.05，說明供試4種微生物菌劑對(duì)芳樟精油產(chǎn)量影響的互作效應(yīng)均未達(dá)到顯著水平。

根據(jù)上述回歸方程，芳樟精油的最高產(chǎn)量可達(dá)1.72 g，與之對(duì)應(yīng)的褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為2×109、2×109、6×109和2×109CFU。

對(duì)影響芳樟精油產(chǎn)量的微生物菌劑進(jìn)行單因子效應(yīng)分析，結(jié)果見圖1。由圖1可以看出：芳樟精油產(chǎn)量(Y)與褐球固氮菌施用量(X1)和膠凍樣芽孢桿菌施用量(X3)呈正相關(guān)，獲得的回歸方程分別為Y=0.686+0.064X1+0.002X12和Y=0.686+0.200X3+0.106X32，其與巨大芽孢桿菌施用量(X2)和枯草芽孢桿菌施用量(X4)呈負(fù)相關(guān)，獲得的回歸方程分別為Y=0.686-0.116X2+0.036X22和Y=0.686-0.122X4-0.032X42，說明隨著褐球固氮菌施用量和膠凍樣芽孢桿菌施用量的增加，芳樟精油產(chǎn)量越來越高；而隨著巨大芽孢桿菌施用量和枯草芽孢桿菌施用量的增加，芳樟精油產(chǎn)量越來越低。

圖1 影響芳樟精油產(chǎn)量的微生物菌劑的單因子效應(yīng)分析

Fig. 1 Single factor effect analysis on microbial agents affecting essential oil yield ofC.camphoravar.linalooliferaFujita

3 討論和結(jié)論

芳樟精油的形成、積累和轉(zhuǎn)化過程非常復(fù)雜，受到遺傳和環(huán)境因子的綜合影響[4，16-18]。通常情況下，芳樟無性系的精油含量穩(wěn)定且變異較小[19]，但不同栽培方式可影響芳樟的生長(zhǎng)和精油合成[20]，從而影響芳樟精油的含量。于靜波等[21]發(fā)現(xiàn)，不同氮、磷、鉀施肥處理能夠影響1年生芳樟的葉精油含量及精油主要成分芳樟醇的含量；曾進(jìn)等[22]發(fā)現(xiàn)，不同肥料(化肥)對(duì)芳樟各項(xiàng)生長(zhǎng)和抗性生理指標(biāo)的影響各異；袁宗勝等[13]發(fā)現(xiàn)，芳樟內(nèi)生菌可促進(jìn)其植株生長(zhǎng)，提高其體內(nèi)保護(hù)酶活性，從而改善植株對(duì)不良環(huán)境條件的反應(yīng)。

研究發(fā)現(xiàn)，微生物對(duì)植物精油的影響主要有3個(gè)方面：1)微生物龐大的菌絲網(wǎng)絡(luò)增加了植物根系的吸收面積[23]，其代謝分泌物提高了土壤中難溶且不易被植物吸收的礦質(zhì)元素的活性，有利于植物根系對(duì)礦質(zhì)元素的吸收，進(jìn)而促進(jìn)植物生長(zhǎng)[11，24]；2)微生物直接或間接影響植物代謝關(guān)鍵組織的合成和蛋白質(zhì)催化反應(yīng)，致使植物次生代謝產(chǎn)物發(fā)生改變[25]，利于精油成分積累[26-27]；3)微生物能夠產(chǎn)生與宿主相同的次生代謝產(chǎn)物，從而影響宿主的次生代謝產(chǎn)物含量[28]。褐球固氮菌可將空氣中的氣態(tài)氮轉(zhuǎn)化成能夠被植物直接利用的氨態(tài)氮[29]；膠凍樣芽孢桿菌具有解鉀、解磷和固氮等多種作用，可提高植物的產(chǎn)量和品質(zhì)[30]；巨大芽孢桿菌是一種植物根系促生細(xì)菌，可降解土壤中不能被植物利用的磷和鉀[31-32]；枯草芽孢桿菌既能夠抑制植物病原菌，又能夠促進(jìn)植物生長(zhǎng)[33-34]。本研究結(jié)果表明：在上述4種微生物菌劑的組合處理下，芳樟的葉和枝鮮質(zhì)量及其比值、精油含量及精油產(chǎn)量總體上均較對(duì)照組(未施用微生物菌劑)升高，說明供試4種微生物菌劑組合處理不但有利于芳樟生長(zhǎng)，而且能夠促進(jìn)其精油積累。

統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明：T3組(褐球固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌在5.5 kg盆栽土中的施用量分別為5×109、3×109、5×109和3×109CFU)的芳樟精油產(chǎn)量最高(1.56 g)，其葉和枝的鮮質(zhì)量也最高，總體上顯著高于其余各組，并且，其精油產(chǎn)量最接近根據(jù)回歸方程計(jì)算的精油最高產(chǎn)量(1.72 g)，據(jù)此認(rèn)為T3組為供試的最優(yōu)處理組。

然而，關(guān)于微生物菌劑影響芳樟精油積累和合成的代謝途徑尚不清楚，可在施用微生物菌劑時(shí)對(duì)其進(jìn)行熒光標(biāo)記或分子標(biāo)記，從而檢測(cè)微生物菌劑對(duì)芳樟的生活史及代謝過程的影響途徑，并驗(yàn)證各微生物菌劑的功能。同時(shí)，還可通過共生培養(yǎng)芳樟及促進(jìn)其精油積累的內(nèi)生細(xì)菌和內(nèi)生真菌獲得更優(yōu)良的高精油產(chǎn)量的芳樟品種[35]。