腦梗死患者血漿晚期糖基化終產(chǎn)物、一氧化氮水平與頸動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系研究

翟 云，楊 柳，任薇薇，吳金萍

腦梗死是指多種原因引起局部腦組織缺血、缺氧，腦細(xì)胞出現(xiàn)壞死，神經(jīng)功能受損的神經(jīng)科疾病，好發(fā)于中老年人，發(fā)病基礎(chǔ)為動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis， AS)，而AS發(fā)生與血管內(nèi)皮損傷及炎癥反應(yīng)等密切相關(guān)[1]。晚期糖基化終產(chǎn)物(advanced glycation end products， AGEs)是非酶糖基化反應(yīng)的終末產(chǎn)物，可通過在細(xì)胞外基質(zhì)沉積、免疫炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激反應(yīng)等損傷血管[2]。一氧化氮(nitric oxide， NO)是參與血管功能調(diào)節(jié)的氣體信號(hào)分子，可平衡血管舒縮、炎癥反應(yīng)，是內(nèi)皮功能評(píng)估的重要指標(biāo)之一[3]。目前，國內(nèi)關(guān)于腦梗死患者AGEs、NO水平與AS發(fā)生關(guān)系的研究較少，而頸動(dòng)脈是反映AS的窗口，所以本研究通過檢測腦梗死患者血漿AGEs、NO水平及頸動(dòng)脈粥樣硬化(carotid atherosclerosis， CAS)程度，分析腦梗死患者血漿AGEs、NO水平與CAS的關(guān)系，初步探討血漿AGEs、NO水平在CAS發(fā)展及腦梗死程度中的作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月—2019年1月西安工會(huì)醫(yī)院收治的符合納入及排除標(biāo)準(zhǔn)的112例腦梗死作為腦梗死組；另選取同期來該院體檢，且性別和年齡與腦梗死組匹配的健康體檢者50例作為對(duì)照組。腦梗死組男61例，女51例；年齡52～80(64.83±7.93)歲。體質(zhì)量指數(shù)(body mass index, BMI)21.21～29.78(25.32±2.62)kg/m2。對(duì)照組男28例，女22例；年齡51～78(63.10±7.23)歲；BMI 20.58～29.41(25.01±2.85)kg/m2。兩組性別、年齡及BMI比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院卒中評(píng)定量表(NIH stroke scale, NIHSS)[4]評(píng)分評(píng)價(jià)病情程度，腦梗死112例中輕度44例(NIHSS 0～15分)，中度38例(NIHSS 15～30分)，重度30例(NIHSS 30～45分)。輕度男23例，女21例；年齡53～76(64.50±7.62)歲；BMI 21.21～28.56(25.41±2.67)kg/m2。中度男22例，女16例；年齡52～80(64.76±8.02)歲；BMI 20.96～29.78(25.22±2.43)kg/m2。重度男16例，女14例；年齡55～78(65.37±7.58)歲；BMI 22.39～29.35(25.33±2.61)kg/m2。不同病情程度腦梗死患者性別、年齡及BMI比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。超聲檢查結(jié)果顯示腦梗死112例中粥樣斑塊形成76例，非粥樣斑塊形成36例。粥樣斑塊形成男40例，女36例；年齡52～76(64.25±7.36)歲；BMI 21.21～29.78(25.46±2.42)kg/m2。非粥樣斑塊形成男21例，女15例；年齡55～78(65.03±8.12)歲；BMI 21.35～29.54(25.20±2.81)kg/m2。粥樣斑塊形成與非粥樣斑塊形成腦梗死患者性別、年齡及BMI比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意執(zhí)行。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合腦梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，并經(jīng)影像學(xué)檢查證實(shí)診斷；②年齡<80周歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病者；②近期有手術(shù)史、心肌梗死史及創(chuàng)傷史者；③合并惡性腫瘤者。

1.3檢查方法

1.3.1血漿AGEs及NO水平檢測：采集所有受試者空腹靜脈血3～5 ml，并進(jìn)行抗凝處理，3000 r/min離心10 min，收集上清液，待檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測血漿AGEs水平，試劑盒購自上海一研生物科技有限公司。采用硝酸還原酶法檢測血漿NO水平，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.3.2超聲檢查：患者取仰臥位，肩下用枕頭墊高使頸部維持仰伸狀態(tài)，頭部偏向檢查對(duì)側(cè)，采用彩色多普勒超聲診斷儀(日本ALOCKA公司)進(jìn)行經(jīng)頸動(dòng)脈超聲檢查，雙側(cè)均查，探頭頻率7～10 MHz，測量頸總動(dòng)脈分叉處內(nèi)中膜厚度(intima-medium thickness， IMT)。頸總動(dòng)脈分叉處IMT≥1.2 mm視為粥樣斑塊形成[6]。

1.4觀察指標(biāo) 比較腦梗死組和對(duì)照組、不同病情程度腦梗死患者血漿AGEs、NO水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT，粥樣斑塊形成與非粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs和NO水平，并采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析對(duì)血漿AGEs、NO水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT與腦梗死病情程度關(guān)系以及血漿AGEs、NO水平與腦梗死患者粥樣斑塊形成關(guān)系進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1腦梗死組和對(duì)照組血漿AGEs、NO水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT比較 腦梗死組血漿AGEs水平及頸總動(dòng)脈分叉處IMT高于對(duì)照組，血漿NO水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1 腦梗死患者和健康體檢者血漿AGEs、NO水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT比較

注：AGEs為晚期糖基化終產(chǎn)物，NO為一氧化氮，IMT為內(nèi)中膜厚度

2.2不同病情程度腦梗死患者血漿AGEs、NO水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT比較 不同病情程度腦梗死患者間血漿AGEs、NO水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT總體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。輕度腦梗死患者血漿AGEs水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT低于中度和重度腦梗死患者，血漿NO水平高于中度和重度腦梗死患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(輕度vs中度：q=3.563、P=0.001，q=4.777、P<0.001，q=2.466,P=0.016；輕度vs重度：q=7.569、P<0.001，q=10.444、P<0.001，q=5.081、P<0.001)；中度腦梗死患者血漿AGEs水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT低于重度腦梗死患者，血漿NO水平高于重度腦梗死患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=4.316、P<0.001，q=5.855、P<0.001，q=2.117、P=0.038)。見表2。

表2 不同病情程度腦梗死患者血漿AGEs、NO水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT比較

注：AGEs為晚期糖基化終產(chǎn)物，NO為一氧化氮，IMT為內(nèi)中膜厚度；與輕度比較，aP<0.05，bP<0.01；與中度比較，cP<0.05，dP<0.01

2.3血漿AGEs、NO水平和頸總動(dòng)脈分叉處IMT與腦梗死病情程度關(guān)系 Spearman等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示，血漿AGEs水平與腦梗死病情程度呈正相關(guān)(r=0.616，P<0.001)，血漿NO水平與腦梗死病情程度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.667，P<0.001)，頸總動(dòng)脈分叉處IMT與腦梗死病情程度呈正相關(guān)(r=0.401，P=0.008)，見圖1～圖3。

圖1 血漿晚期糖基化終產(chǎn)物與腦梗死病情程度Spearman等級(jí)相關(guān)分析

圖2 血漿一氧化氮與腦梗死病情程度Spearman等級(jí)相關(guān)分析

圖3 頸總動(dòng)脈分叉處內(nèi)中膜厚度與腦梗死病情程度Spearman等級(jí)相關(guān)分析

2.4粥樣斑塊形成與非粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs和NO水平比較 粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs水平高于非粥樣斑塊形成腦梗死患者，血漿NO水平低于非粥樣斑塊形成腦梗死患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表3。

表3 粥樣斑塊形成與非粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs和NO水平比較

注：AGEs為晚期糖基化終產(chǎn)物，NO為一氧化氮

2.5血漿AGEs、NO水平與腦梗死患者粥樣斑塊形成關(guān)系 Spearman等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示，血漿AGEs水平與腦梗死粥樣斑塊形成呈正相關(guān)(r=0.695，P<0.001)，血漿NO水平與腦梗死粥樣斑塊形成呈負(fù)相關(guān)(r=-0.697，P<0.001)，見圖4和圖5。

圖4 血漿晚期糖基化終產(chǎn)物與腦梗死粥樣斑塊形成Spearman等級(jí)相關(guān)分析

圖5 血漿一氧化氮與腦梗死粥樣斑塊形成Spearman等級(jí)相關(guān)分析

3 討論

AGEs是指無酶條件下，脂肪、核酸、蛋白質(zhì)羰基與還原糖醛糖經(jīng)一系列反應(yīng)產(chǎn)生的穩(wěn)定化合物，AGEs與其相應(yīng)受體作用后，可介導(dǎo)多種病理過程[7]。有研究顯示，腦梗死患者AGEs水平明顯升高，且AGEs水平升高是腦梗死患者短期預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素[8]。NO屬于一種舒血管因子，由內(nèi)皮細(xì)胞分泌，能通過使鳥苷酸環(huán)化酶激活，抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖，起到舒張血管作用；另外，NO還可通過抑制內(nèi)皮細(xì)胞與中性粒細(xì)胞作用、抑制血小板凝集，阻止血栓形成[9]。有研究顯示，腦梗死患者NO水平明顯低于健康者，認(rèn)為NO水平異常與腦梗死發(fā)生可能存在一定關(guān)系[10]。本研究結(jié)果顯示，腦梗死組血漿AGEs水平高于對(duì)照組，血漿NO水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同病情程度腦梗死患者間血漿AGEs和NO水平總體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。輕度腦梗死患者血漿AGEs水平低于中度和重度腦梗死患者，血漿NO水平高于中度和重度腦梗死患者；中度腦梗死患者血漿AGEs水平低于重度腦梗死患者，血漿NO水平高于重度腦梗死患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示血漿AGEs和NO水平可能與腦梗死發(fā)生和發(fā)展相關(guān)。Spearman等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示，血漿AGEs水平與腦梗死病情程度呈正相關(guān)，血漿NO水平與腦梗死病情程度呈負(fù)相關(guān)。進(jìn)一步證實(shí)血漿AGEs和NO參與腦梗死發(fā)生、發(fā)展。

IMT是早期AS監(jiān)測的常用指標(biāo)，對(duì)于心腦血管事件發(fā)生的預(yù)測具有重要價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，腦梗死組頸總動(dòng)脈分叉處IMT高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；不同病情程度腦梗死患者間頸總動(dòng)脈分叉處IMT總體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；輕度腦梗死患者頸總動(dòng)脈分叉處IMT低于中度和重度腦梗死患者，中度腦梗死患者頸總動(dòng)脈分叉處IMT低于重度腦梗死患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與既往大多數(shù)研究結(jié)果一致[11-12]。

CAS是腦梗死發(fā)病基礎(chǔ)，超過70%的腦梗死患者由CAS引起，若能早期檢測并發(fā)現(xiàn)CAS，有助于腦梗死的預(yù)防及治療[13]。本研究超聲檢查結(jié)果顯示腦梗死112例中粥樣斑塊形成76例，非粥樣斑塊形成36例，粥樣斑塊形成腦梗死患者血漿AGEs水平高于非粥樣斑塊形成腦梗死患者，血漿NO水平低于非粥樣斑塊形成腦梗死患者。提示血漿AGEs和NO水平可能與粥樣斑塊形成、AS進(jìn)展有關(guān)。Spearman等級(jí)相關(guān)分析結(jié)果顯示，血漿AGEs水平與腦梗死粥樣斑塊形成呈正相關(guān)，血漿NO水平與腦梗死粥樣斑塊形成呈負(fù)相關(guān)。提示血漿AGEs水平可促進(jìn)AS進(jìn)展，而血漿NO水平與其作用相反，能延緩AS進(jìn)展。分析AGEs促進(jìn)AS的可能原因：①AGEs在血管基底膜細(xì)胞外基質(zhì)積聚，并形成交聯(lián)，促進(jìn)微血管及大血管并發(fā)癥發(fā)生；②AGEs通過修飾脂質(zhì)，減少NO合成，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，削弱血管反應(yīng)性；③AGEs通過與相應(yīng)受體結(jié)合，增加內(nèi)皮素1表達(dá)，減少依前列醇表達(dá)，使內(nèi)皮細(xì)胞平衡受到破壞，并可激活免疫炎癥反應(yīng)，促使AS發(fā)生[14-15]。分析NO延緩AS進(jìn)展的可能原因：①NO作為內(nèi)源性血管舒張劑，能對(duì)血管緊張度及局部血流量進(jìn)行調(diào)節(jié)，使血管維持穩(wěn)態(tài)；②NO具有抗血栓作用，能影響血小板聚集功能，促進(jìn)已聚集血小板解體，減少纖溶酶原激活劑抑制物1等促血栓因子產(chǎn)生；③NO可通過抑制NF-κB激活及轉(zhuǎn)移，降低血管壁炎癥反應(yīng)；④NO具有清除自由基、抗氧化及血管重塑作用，對(duì)血管內(nèi)皮功能具有保護(hù)作用[16-19]。

總之，血漿AGEs水平升高、NO水平降低與腦梗死的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，其機(jī)制可能是通過血漿AGEs水平升高、NO水平降低促進(jìn)CAS進(jìn)展而實(shí)現(xiàn)。血漿AGEs、NO水平檢測可了解CAS進(jìn)展情況，且對(duì)評(píng)估腦梗死患者病情程度具有重要意義。