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    微藻培養(yǎng)過(guò)程中生物污染及防治

    2020-02-18 00:19:13張新明
    養(yǎng)殖與飼料 2020年12期

    趙 璐 張新明

    日照職業(yè)技術(shù)學(xué)院海洋工程學(xué)院,山東日照276826

    微藻體積微小,但光合能力強(qiáng),脂質(zhì)含量高,是當(dāng)今最具開(kāi)發(fā)前途的能源之一[1]。微藻營(yíng)養(yǎng)豐富,在水產(chǎn)養(yǎng)殖、環(huán)境治理、食品行業(yè)、醫(yī)藥行業(yè)中具有非常重要的應(yīng)用價(jià)值,常見(jiàn)的有價(jià)值的藻類(lèi)如小球藻、螺旋藻、鹽藻、雨生紅球藻、等邊金藻、三角褐指藻等,不同的藻類(lèi)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)功用有所差異,在實(shí)際生產(chǎn)中通常需要進(jìn)行單一藻類(lèi)的規(guī)?;罅颗囵B(yǎng),在培養(yǎng)過(guò)程中若遭遇生物污染就會(huì)造成培養(yǎng)失敗,給生產(chǎn)帶來(lái)?yè)p失。本文綜述了微藻培養(yǎng)過(guò)程中常見(jiàn)的污染生物及控制方法,以期為相關(guān)人員提供有價(jià)值的參考。

    1 微藻培養(yǎng)過(guò)程中的生物污染種類(lèi)

    1.1 浮游動(dòng)物

    藻類(lèi)大規(guī)模養(yǎng)殖中容易受浮游動(dòng)物的影響(如輪蟲(chóng)和枝角類(lèi)動(dòng)物),這些浮游動(dòng)物會(huì)嚴(yán)重影響藻類(lèi)的生長(zhǎng),如果在培養(yǎng)過(guò)程中感染這些浮游動(dòng)物,培養(yǎng)的微藻在幾天之內(nèi)就會(huì)大量減少生物產(chǎn)量[2]。浮游動(dòng)物包括超微型浮游生物(<2 μm)、微型浮游動(dòng)物(2~20 μm)、小型浮游生物(20~200 μm),中型浮游生物(0.2~2 mm)和大型浮游生物(>2 mm)。在這些浮游生物當(dāng)中,纖毛蟲(chóng)[3]、輪蟲(chóng)[4]、枝角類(lèi)和橈足類(lèi)動(dòng)物[5]是微藻養(yǎng)殖中常見(jiàn)的侵染性物種。Li 等[6]用足量的杜氏鹽藻作為食物培養(yǎng)纖毛蟲(chóng),結(jié)果發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)2 d 之后,微藻的密度從2.7×104下降到1.2×104。Moreno-Garrido 等[7]發(fā)現(xiàn)捕食性纖毛蟲(chóng)可以使大量的杜氏鹽藻在2 d 之內(nèi)被食光,對(duì)經(jīng)濟(jì)造成嚴(yán)重?fù)p失。

    1.2 細(xì) 菌

    一些稱(chēng)為浮游植物溶菌細(xì)菌對(duì)微藻的生長(zhǎng)有潛在的影響。他們最初是在赤潮的消亡中發(fā)現(xiàn)的[8-11]。后來(lái)被證實(shí)其對(duì)微藻生長(zhǎng)有不良影響,對(duì)微藻大量培養(yǎng)有破壞作用[12]。這些菌株主要包括噬胞菌(Cytophaga sp.)、粘細(xì)菌(Myxobacter sp.)[13]、芽孢桿菌(Bacillus sp.)和假單胞菌(Pseudomonas sp.)[14]等。這些細(xì)菌通過(guò)直接的細(xì)胞接觸或者間接通過(guò)胞外復(fù)合物對(duì)微藻產(chǎn)生影響[15],以間接接觸為主。

    1.3 其他微藻

    在微藻規(guī)?;B(yǎng)殖中,其他微藻的交叉污染是不可避免的[16]。如果微藻培養(yǎng)體系不干凈,那么其他藻類(lèi)就會(huì)快速繁殖,并且其繁殖速度可能會(huì)超過(guò)要培養(yǎng)的藻株[17],在實(shí)際生產(chǎn)中,污染藻株生長(zhǎng)狀況超過(guò)要培養(yǎng)藻株的情況經(jīng)常發(fā)生。

    1.4 病 毒

    在微藻培養(yǎng)過(guò)程中,病毒性感染往往會(huì)導(dǎo)致微藻產(chǎn)量明顯降低,或者導(dǎo)致優(yōu)勢(shì)種發(fā)生改變[18]。病毒復(fù)制快、對(duì)宿主的感染率高,這些都是導(dǎo)致微藻的規(guī)?;B(yǎng)殖減產(chǎn)的重要原因。

    2 控制生物污染的主要方法

    科學(xué)家做了大量的工作來(lái)研究控制生物污染物的方法。一些學(xué)者嘗試用過(guò)濾藻液的方法或者是加入藥物來(lái)阻斷生物污染,還有一些人試圖改變微藻養(yǎng)殖的環(huán)境來(lái)控制生物污染[19]。

    2.1 過(guò)濾法

    由于微藻較小,過(guò)濾被認(rèn)為是在微藻的大規(guī)模養(yǎng)殖中除去微生物的最有效的方式,例如可以有效去除輪蟲(chóng)和橈足類(lèi)動(dòng)物,在微藻制備過(guò)程和藻液回收過(guò)程中,常用尼龍網(wǎng)進(jìn)行過(guò)濾,以除去這些體型較大的浮游動(dòng)物[20]。成年輪蟲(chóng)因?yàn)槠潴w型較大,可以通過(guò)該尼龍網(wǎng)過(guò)濾的方式去除,但是輪蟲(chóng)卵以及體型較小的個(gè)體則不能通過(guò)這種方式完全去除。所以,要連續(xù)過(guò)濾幾天才能從根本上除去污染生物。

    2.2 化學(xué)防治法

    化學(xué)藥劑可有效控制生物污染,但有可能對(duì)微藻生長(zhǎng)產(chǎn)生影響。通過(guò)添加化學(xué)物抑制或殺滅污染生物的研究較多。在螺旋藻培養(yǎng)液中加入10 mg/L的硫酸鈣可以抑制輪蟲(chóng)的繁殖[21]。Moreno-Garrido等[6]報(bào)道,在杜氏藻(Dunaliella salina)培養(yǎng)過(guò)程中,奎寧對(duì)纖毛蟲(chóng)污染有明顯的殺滅作用,而對(duì)細(xì)胞本身影響不大。

    2.3 改變培養(yǎng)條件

    由于浮游動(dòng)物對(duì)環(huán)境因素的響應(yīng)不同,可以將環(huán)境因素調(diào)到一個(gè)合適的水平,以降浮游動(dòng)物的繁殖。限制浮游動(dòng)物對(duì)微藻的捕食活動(dòng),同時(shí)保證在該條件下微藻能快速地增長(zhǎng),這樣就能實(shí)現(xiàn)微藻的高速培養(yǎng)。有機(jī)體正常的生命活動(dòng)需要適宜的pH值,可以調(diào)節(jié)微藻養(yǎng)殖環(huán)境的pH 值,這樣既能保證微藻快速地繁殖,同時(shí)又能殺死或者抑制浮游動(dòng)物的污染。Becher[22]建議將微藻培養(yǎng)液的pH 瞬間降低至3.0,并持續(xù)1~2 h 就可以阻止輪蟲(chóng)的污染。在杜氏鹽藻的培養(yǎng)池中,當(dāng)鹽濃度降低至20%以下時(shí),變形蟲(chóng)和纖毛蟲(chóng)將很難再對(duì)微藻造成污染[23]。

    2.4 充CO2 法

    浮游動(dòng)物和單細(xì)胞的藻類(lèi)營(yíng)養(yǎng)方式不同,因此對(duì)氧氣的需求也不同。單細(xì)胞藻類(lèi)一般是自養(yǎng)型植物,能吸收光能和二氧化碳進(jìn)行光合作用,而浮游動(dòng)物多為異養(yǎng)型動(dòng)物,只進(jìn)行呼吸作用,吸入氧氣,釋放二氧化碳。在微藻的培養(yǎng)池中,充入大量的二氧化碳,水中就會(huì)嚴(yán)重缺氧。這樣就有利于微藻的生長(zhǎng),從而抑制浮游動(dòng)物的繁殖。但是,大量地充入二氧化碳會(huì)降低培養(yǎng)液的pH 值,對(duì)藻的生長(zhǎng)繁殖也會(huì)產(chǎn)生影響。

    2.5 篩絹過(guò)濾法

    單細(xì)胞藻類(lèi)體型較小,一般在幾到十幾微米之間。如小球藻(C.vulgaris)直徑一般在5~10 μm,微擬球藻在3~5 μm。所以,通常采用網(wǎng)孔小于60 μm的篩絹過(guò)濾,并連續(xù)過(guò)濾2~3 d,很多大型的原生動(dòng)物,例如草履蟲(chóng)(Paramoecium,180~280 μm)、大變形蟲(chóng)(Amoeba proteusPallas, 200~600 μm)等除盡。

    在微藻規(guī)模化培養(yǎng)過(guò)程中,為防止生物污染源的侵染和污染,可以靈活采用過(guò)濾法、化學(xué)法、改變培養(yǎng)環(huán)境的方法,只有對(duì)生物污染源與微藻之間相互作用的機(jī)制很了解,防治生物污染的方法才能被更好地應(yīng)用[24]。

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