高效液相色譜法HPLC在食品添加劑檢測中的應(yīng)用

傅旻昊

摘 ?要：隨著我國經(jīng)濟(jì)的高質(zhì)量發(fā)展，人們的生活水平也在不斷提高，尤其更加重視食品的安全問題。食品安全關(guān)系到人們的生產(chǎn)生活，而食品添加劑又是在食品制造中不可缺少的成分，它作用于食品上，對食品的光澤度、口感、保質(zhì)期限等都有一定的影響，那么食品添加劑的含量控制就成為了食品安全重要的檢測環(huán)節(jié)。高效液相色譜法（HPLC）就是目前在食品添加劑的檢測中較為常用和有效的一種方法，文章就其在食品添加劑中的應(yīng)用做了淺要分析，從而幫助人們更加了解HPLC。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法（HPLC）;食品添加劑;檢測

中圖分類號：TS207.3 ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? ? ? ? ? ? ?文章編號：2095-2945（2019）35-0167-02

Abstract： With the high-quality development of China's economy， people's living standards are also improving， especially in that they focus on the issue of food safety. Food safety is related to people's production and life， and food additive is an indispensable ingredient in food manufacturing. It acts on food and has a certain impact on the glossiness， taste and quality guarantee period of food. Then the content control of food additives has become an important detection link of food safety. High performance liquid chromatography （HPLC） is a commonly used and effective method in the detection of food additives. This paper makes a brief analysis on its application in food additives， so as to help people understand HPLC better.

Keywords： high performance liquid chromatography （HPLC）; food additive; detection

引言

食品安全直接影響著人們的日常生活，直接伴隨著人類發(fā)展、繁衍和創(chuàng)造生產(chǎn)成果的全過程，如何做好食品安全的保障是保證一個國家能否健康發(fā)展的重要基礎(chǔ)，同時這也是一項(xiàng)民生的安全問題，就必須要使用合理、高效的檢測方式，對食品制造加以控制和管理。食品添加劑在食品制造中具有一定的正面作用，但是，前提是要保證食品添加劑在食品中的含量、種類和有效比例在合格的標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，而檢測這一合格標(biāo)準(zhǔn)的方法就是目前常用的高效液相色譜法（HPLC），因?yàn)檫@種新型的技術(shù)具有操作簡單、效果性好的特點(diǎn)，所以被廣泛運(yùn)用于食品中添加劑的檢測。

1 HPLC法的原理和特點(diǎn)

高效液相色譜法（HPLC）是色譜分析法的一種，是在原有的分離技術(shù)上的一種加以改進(jìn)的新型技術(shù)手段，屬于分離分析的范疇，它的技術(shù)基礎(chǔ)是建立在經(jīng)典的氣相色譜和經(jīng)典的液相色譜之上的，以原有的色譜技術(shù)為基底，采集二者的優(yōu)勢，觀察在高壓條件下，溶質(zhì)的固定狀態(tài)和流動狀態(tài)相互交換、輪流切換的機(jī)制。利用分子之間的物理性質(zhì)，在高壓的推動作用下，借助不同的物質(zhì)之間的分子間隔、吸附能力等物理原理，從而有效的對其不同的流動狀態(tài)進(jìn)行色譜分離，最后再利用檢測器對分離的物質(zhì)采樣進(jìn)行分析。

高效液相色譜法與已知的其他傳統(tǒng)的檢測方法相比優(yōu)勢明顯，首先，高效液相色譜的檢測狀態(tài)是流動性的液體狀，相比于氣相色譜免去了溶質(zhì)的氣化過程，使得檢測在很大程度上實(shí)現(xiàn)了試用范圍廣、實(shí)現(xiàn)難度低的程度拓展;其次，這種方法需要配置各種硬件設(shè)施，但這些硬件設(shè)施都是自動化操作，且精確度極高、數(shù)據(jù)精準(zhǔn)，在檢測的過程中達(dá)到最高要求的效率和質(zhì)量，所獲得的檢測結(jié)果也能達(dá)到要求的準(zhǔn)確性，好的回收率和好的分離效果都是影響檢測結(jié)果的因素，這樣就能夠保證分離之后的分析結(jié)果具有高靈敏性和高精確性。

2 高效液相色譜儀簡述

高效液相色譜儀是高效液相色譜法（HPLC）的有效檢測儀器，它是運(yùn)用高效的液相色譜原理，用在分離高壓狀態(tài)下，通過化學(xué)反應(yīng)將高沸點(diǎn)、受熱不穩(wěn)定的高分子化合物，轉(zhuǎn)化為有機(jī)化合物，這其中的依據(jù)就是溶質(zhì)內(nèi)各分子之間的吸附力不同、分子大小和間隔不同，在高壓狀態(tài)下產(chǎn)生排斥阻礙作用后進(jìn)行的分離，最后再對分離結(jié)果加以高準(zhǔn)確度分析的設(shè)備。

它的型號有很多種，但主要的構(gòu)成部件和系統(tǒng)的構(gòu)成原理都相同，主要配件包括：溶質(zhì)槽、壓力表、高壓泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、收集器、記錄儀等，最后的記錄儀顯示的數(shù)據(jù)以圖譜的形式呈現(xiàn)出來，便于打印、記錄和分析。

在HPLC法的應(yīng)用中，利用高效液相色譜儀對檢測對象進(jìn)行檢測，根據(jù)檢測樣品色譜柱的變化，對照參比色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)，有效的檢測樣品中溶質(zhì)的濃度變化，并且最后以圖形、圖譜的形式表示檢測結(jié)果，通過對檢測圖譜的分析對樣品進(jìn)行定量和定性的分析，并在此基礎(chǔ)上，對樣品進(jìn)行改進(jìn)，以實(shí)現(xiàn)對食品成分的重新調(diào)配，再進(jìn)行精確的高效液相色譜檢測，以滿足食品添加劑在食品中的嚴(yán)格攝入標(biāo)準(zhǔn)。

3 高效液相色譜法的應(yīng)用

在我們的日常生活中，很多食品的外包裝上都會寫著一些食品添加劑的名稱，食品添加劑在食品中占有一席之地，它的種類有很多，比如人工合成色素，它可以提升食品在視覺上的色澤度，通過改善食品的外觀樣貌，使食品看起來更可口、更能刺激人們的食欲，比如防腐劑，它可以延長食品的保質(zhì)期限，在一定程度上減少食品的腐壞、變質(zhì)問題，從而使得人們在忙碌的生活和工作中節(jié)約一部分準(zhǔn)備食品的時間。

3.1 HPLC檢測防腐劑

防腐劑的重要作用就是通過抑制有害微生物和細(xì)菌的生長來達(dá)到延長食品保存期限的目的，常見的防腐劑如山梨酸等都是人工合成的，必須嚴(yán)格加以檢測和控制。

檢測方法舉例：對面包中的防腐劑進(jìn)行檢測。用到的主要試劑有：水、氨化甲醇、20%甲醇和80%甲醇，將提取液經(jīng)過色譜柱進(jìn)行分離，再對分離液進(jìn)行甲醇-乙酸銨溶液的梯度洗脫，最后用220nm波長的HPLC進(jìn)行檢測。

檢測結(jié)果分析：有效地分離了山梨酸、脫氫乙酸、苯甲酸及富馬酸二甲酯等防腐劑，分離結(jié)果較為清晰，最低回收率高達(dá)85%，檢測結(jié)果變異系數(shù)較小。

HPLC法的優(yōu)勢就在于它檢測的時間短、速度快、準(zhǔn)確性高，且操作簡單、步驟簡單，節(jié)約了檢測時間，避免了食品和食品添加劑在檢測過程中的質(zhì)變影響，用最便捷、快速的方式得到最準(zhǔn)確的結(jié)果。

3.2 HPLC檢測甜味劑

一般來說，這些甜味劑對于人們的身體并沒有什么營養(yǎng)價(jià)值，只是為了增加食品的口感，人工合成的糖精是最為常見的甜味添加劑，且其成本低，過量使用時會導(dǎo)致食用者出現(xiàn)血小板減少的病癥。

檢測方法舉例：對果凍中的甜味劑進(jìn)行檢測。HPLC法再結(jié)合紫外線檢測是基于氣、液相色譜技術(shù)，二者聯(lián)合運(yùn)用，對其中的糖精鈉、環(huán)已胺基磺酸鈉、乙?；前彼徕c等進(jìn)行定量檢測。

檢測結(jié)果分析：分離結(jié)果較為清晰，最低回收率高達(dá)93.18%，檢測結(jié)果偏差較小。

與傳統(tǒng)的檢測方法相比，這種方法仍然具有HPLC法的快速性和準(zhǔn)確性。

3.3 HPLC檢測食用色素

食用色素通過對食品的外觀加以改善，從顏色、亮度上增加食品的誘惑力，但使用不當(dāng)仍然會對人們的生命健康構(gòu)成危害。

檢測方法舉例：對飲料中的食用色素進(jìn)行檢測。將甲醇、乙酸銨、甲酸、氨水、檸檬酸、合成著色劑等試劑經(jīng)過濾膜加以過濾，采用HPLC的進(jìn)樣器，將提取的試劑經(jīng)過色譜柱進(jìn)行色素分離，再對分離液進(jìn)行乙酸銨溶液及甲醇的梯度洗脫。其中，洗脫的時間保持一定，甲醇的濃度先緩慢上升再快速上升，從而有效分離色素。

檢測結(jié)果分析：同時將飲料中的胭脂紅、日落黃、檸檬黃、亮藍(lán)等幾種色素成功分離，并達(dá)到了準(zhǔn)確地檢測精度。

實(shí)踐證明，該檢測方法所耗費(fèi)的時間短、檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度高。HPLC法可以同時對這些允許在食品中添加的水溶性人工合成色素進(jìn)行準(zhǔn)確分離，然后分別計(jì)算每一種的含量和所占比例，從而對這些色素加以分量、分性、分類分析。

4 結(jié)束語

當(dāng)前市場經(jīng)濟(jì)的主導(dǎo)作用日漸凸顯，其主體地位也在逐步穩(wěn)固，經(jīng)濟(jì)效益的誘使下，食品、民生問題則不能得到切實(shí)的保證，頻頻爆出的“黑心”食品問題，比如“蘇丹紅”問題、“老鼠肉”事件等，都是不尊重人民的生活和生命的“黑心”行為，食品檢測就是當(dāng)前最大的局限問題。

高效液相色譜法作為當(dāng)前的一種現(xiàn)代的檢測方法，在檢測食品中添加劑的應(yīng)用中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，HPLC在近十幾年里發(fā)展迅速，其操作簡單、靈敏度高，被廣泛的運(yùn)用于食品添加劑的檢測環(huán)節(jié)中，因?yàn)檫@種檢測方法在目前是最具有優(yōu)勢的檢測手段，其檢測結(jié)果的高精確度就是它的價(jià)值所在。

綜上所述，隨著科技的發(fā)展和人們對生活水平要求的提高，人類生產(chǎn)生活都是HPLC需要進(jìn)軍的領(lǐng)域，涉及食品檢測、化學(xué)成分檢測、醫(yī)療檢測、商業(yè)檢測等各類民生生活。高效液相色譜法也要積極探索、不斷創(chuàng)新，以便能夠更廣泛、更精確、更實(shí)用的投入到更多涉及民生發(fā)展的領(lǐng)域當(dāng)中去。

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