子宮頸鱗狀上皮病變中β-catenin的表達(dá)及意義

孫玉寧　陳衛(wèi)花　張麗娜

【摘? 要】目的：探討β-catenin在子宮頸鱗狀上皮病變組織中的表達(dá)及病理診斷意義。方法：以正常子宮頸組織、低級別鱗狀上皮內(nèi)病變高級別鱗狀上皮內(nèi)病變及子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織作為研究對象，應(yīng)用免疫組化法檢測不同程度的子宮頸病變組織中β-catenin的表達(dá)。結(jié)果：在正常子宮頸組織、低級別上皮內(nèi)病變、高級別上皮內(nèi)病變、子宮頸鱗狀細(xì)胞癌各組中β-catenin異常表達(dá)陽性率分別為2/28（6.7%）、14/34（41.2%）、22/38（57.9%）、28/32（87.5%），表達(dá)水平隨宮頸鱗狀上皮病變進(jìn)展程度而升高（P<0.05），β-catenin表達(dá)陽性率在低級別上皮內(nèi)瘤變及正常子宮頸鱗狀上皮、子宮頸鱗狀細(xì)胞癌及高級別上皮內(nèi)病變差異均有顯著性（P<0.05）。結(jié)論：子宮頸病變程度不同的組織中，β-catenin表達(dá)陽性率差異有顯著性，提示β-catenin異常表達(dá)可能與子宮頸病變的進(jìn)展有關(guān)。β-catenin異常表達(dá)陽性率在低級別上皮內(nèi)瘤變、高級別上皮內(nèi)瘤變及正常宮頸鱗狀上皮差異有顯著性，提示β-catenin可能成為鑒別正常宮頸與鱗狀上皮病變的潛在指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】子宮頸鱗狀上皮病變;免疫組織化學(xué);β-catenin

【中圖分類號】R737.33?? ??????【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A????? 【文章編號】1004-7484（2019）06-0044-02

子宮頸鱗狀細(xì)胞癌是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一，是女性第二大致死性疾病，發(fā)病率呈年輕化趨勢。近年來研究表明：Wnt/β-catenin信號通路的異常活化在腫瘤發(fā)生及侵襲性過程中具有重要作用，β-catenin作為調(diào)控通路的核心分子，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[1-3]。由于β-catenin在子宮頸病變中的報(bào)道較少，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化法檢測其在子宮頸鱗狀上皮病變組織中的表達(dá)情況，探尋宮頸鱗狀上皮癌變的可能發(fā)生機(jī)制及其在病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1材料與方法

收集我院病理科2017年8月～2019年9月子宮頸組織樣本134例。其中正常子宮頸鱗狀上皮30例（包括不成熟化生7例，炎癥性修復(fù)8例），低級別上皮內(nèi)病變34例，高級別上皮內(nèi)病變38例，子宮頸浸潤性鱗狀細(xì)胞癌32例。全部病例均由兩位有經(jīng)驗(yàn)的病理醫(yī)師對切片進(jìn)行復(fù)核，診斷一致的病例納入研究樣本。

所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，免疫組化操作步驟嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行，用PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照，用已知陽性片作為陽性對照。采用鼠抗人β-catenin單克隆抗體，工作濃度分別為1：500和1：1000。EliVision試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自福州邁新公司。

著色結(jié)果方法判斷[4]：（1）根據(jù)染色強(qiáng)度評分：細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核無陽性著色為0分;淡黃色為1分;棕黃色為2分;棕褐色為3分。（2）按顯色比例評分：陽性細(xì)胞數(shù)比例0～5%為0分;6%～25%為1分;26%～50%為2分;>50%為3分。將兩項(xiàng)得分結(jié)果相乘：0～1分為陰性（-）;2～5分為弱陽性（+）;6～8分為陽性（++），9分為強(qiáng)陽性（+++），為了統(tǒng)計(jì)分析方便，我們將陰性和弱陽性歸為陰性組，而將中等陽性和強(qiáng)陽性歸為陽性組。

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，當(dāng)P<0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。計(jì)數(shù)資料計(jì)算陽性率，樣本率之間的比較采用卡方檢驗(yàn)。

2結(jié)果

β-catenin蛋白染色陽性呈棕黃色或棕褐色，定位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核（圖1），在正常宮頸鱗狀上皮、低級別上皮內(nèi)病變、高級別上皮內(nèi)病變及宮頸鱗狀細(xì)胞癌的異常表達(dá)陽性率分別為6.7%、50.0%、57.9%、83.4%。其中在正常宮頸鱗狀上皮和低級別上皮內(nèi)病變之間、高級別上皮內(nèi)病變與子宮頸鱗癌之間，β-catenin蛋白陽性表達(dá)率比較，差異有均統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;在低級別上皮內(nèi)病變及高級別上皮內(nèi)病變差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

3討論

大多數(shù)宮頸鱗狀細(xì)胞癌是由癌前病變-子宮頸上皮內(nèi)病變逐步發(fā)展形成的，早期診治可以有效避免病變的進(jìn)展和轉(zhuǎn)化。對有些正常的鱗狀上皮變化，尤其是炎癥后修復(fù)、不成熟化生因受觀察者主觀因素的影響，容易造成過診斷。因此，尋找用于宮頸癌前病變輔助診斷的指標(biāo)十分重要。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)β-catenin蛋白異常表達(dá)在正常宮頸鱗狀上皮及低級別上皮內(nèi)病變、高級別上皮內(nèi)病變中有顯著差異性（P<0.05），提示β-catenin在子宮頸鱗狀上皮病變中可能作為潛在的免疫組化標(biāo)志物，輔助子宮頸癌前病變的診斷，尤其能夠幫助識別各種容易與鱗狀上皮病變混淆的正常鱗狀上皮，以防造成對正常宮頸的過度診治。但本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)β-catenin蛋白異常表達(dá)陽性率在低級別上皮內(nèi)病變及高級別上皮內(nèi)病變無顯著性差異（P>0.05），因此在子宮頸鱗狀上皮檢測β-catenin蛋白不能協(xié)助鱗狀上皮內(nèi)病變的正確病理分級。

目前研究表明β-catenin異常表達(dá)和多種腫瘤密切相關(guān)，本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，從正常宮頸鱗狀上皮、鱗狀上皮病變到子宮頸鱗狀細(xì)胞癌，β-catenin異常表達(dá)陽性細(xì)胞逐漸增多，差異具有顯著性（P<0.05），提示β-catenin可能參與了宮頸鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展全過程，并且隨著β-catenin異常表達(dá)增多，病變程度逐漸升高。但由于本實(shí)驗(yàn)的局限性，不能對宮頸鱗狀上皮癌變的機(jī)制進(jìn)一步闡明。

綜上所述，在宮頸鱗狀上皮病變中研究β-catenin蛋白異常表達(dá)情況可能對宮頸癌前病變的診斷起輔助作用，尤其是鑒別不典型的正常鱗狀上皮及上皮內(nèi)病變。β-catenin蛋白異常表達(dá)可能參與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展，深入研究β-catenin蛋白在宮頸鱗狀上皮癌變的發(fā)生機(jī)制可能給宮頸麟狀細(xì)胞癌的治療提供新的靶點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]LiS，Su Y，LiL.The expression of β-catenin in different subtypes of breast cancer and its cincal singnificance[J].Tumor Biol，2014，35（8）：7693-7674.

[2]Wang J，ChenJ，JiangY，et al.Wnt/beta-catenin modulates chroninc tobocco smok exposure induced-acquisition of pulmonary cancer stemcell properties and dially trisulfide intervention[J].Toxicol Lett，2018，291（1）：70-76.

[3]Shang S，Hua F，Hu Z W，The regulation of beta- catenin activity and function in cancer：therapeutc opportunities[J].On cotarget，2017，8（20）：33972-33989

[4]周小慶，金丹.子宮頸癌組織中RACK1和β-catenin的表達(dá)及臨床意義.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志[J]. Clin Exp Pathol 2019，Jan;35（1）.