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    高遷移率蛋白1(HMGB1)在宮頸癌中表達(dá)及其意義

    2015-12-02 13:14劉變利郭霞
    現(xiàn)代儀器與醫(yī)療 2015年6期
    關(guān)鍵詞:免疫組織化學(xué)宮頸癌

    劉變利 郭霞

    [摘 要] 目的:探討高遷移率蛋白1(HMGB1)在宮頸癌中表達(dá)及其意義。方法:采用免疫組化法檢測(cè)HMGB1在宮頸癌組織及正常宮頸組織中表達(dá),并結(jié)合臨床、病理資料進(jìn)行分析。結(jié)果:HMGB1在正常宮頸組、宮頸癌組中強(qiáng)陽性表達(dá)率分別為0%、81.48%,兩組差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);淋巴轉(zhuǎn)移患者及無轉(zhuǎn)移患者HMGB1強(qiáng)陽性表達(dá)率分別為100%、75%,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 不同宮頸癌分期、分化程度、年齡組HMGB1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:HMGB1在宮頸癌組織中呈過表達(dá),并與淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

    [關(guān)鍵詞] 高遷移率蛋白1;宮頸癌;免疫組織化學(xué)

    中圖分類號(hào):R737.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):2095-5200(2015)06-086-03

    DOI:10.11876/mimt201506034

    [Abstract] Objective:To explore the expression of HMGB1 in cervical cancer and its significance. Method: To detect the expression of HMGB1 in cervical cancer and normal cervical tissue by immunohistochemistry. Results:The positive expression rate of HMGB1 in normal cervix was 0%, while the expression in cervical cancer was higher significantly (81.48%) (P<0.05). The positive-expression rate was much higher in lymphonode metastasis (100%) than that in non-metastasis group (75%) (P<0.05). The difference was not statistically significant between age, clinical stages and degree of differentiati. Conclusions:HMGB1 was over-expression in cervical cancer, and it was significantly related to the metastases to local lymph nodes.

    [Key words] HMGB1;cervical cancer;immunohistochemistry

    HMGB1(高遷移率蛋白1)是與染色體結(jié)合的非組蛋白成分之一,功能復(fù)雜,可參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞分化、遷移、增殖、凋亡及神經(jīng)生長等,并在肝癌、結(jié)腸癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中過表達(dá)[1-3]。研究發(fā)現(xiàn),HMGB1與腫瘤發(fā)生浸潤及淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[4-5]。本研究采用免疫組化檢測(cè)Ia-IIb宮頸鱗狀細(xì)胞浸潤癌與正常宮頸組織中HMGB1表達(dá),旨在探討其臨床意義。

    1 材料與方法

    1.1 一般資料

    選擇2012~2014年27例行廣泛子宮切除及盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)宮頸癌患者,年齡32~65歲,平均年齡(49.07±8.9)歲。所有患者術(shù)前均未經(jīng)放化療,術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)均為原發(fā)性宮頸鱗狀細(xì)胞癌。FIGO臨床分期:Ia期1例;Ib期7例;IIa期11例;IIb期8例。分化程度:低分化9例;中高分化18例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移:伴淋巴轉(zhuǎn)移7例;無淋巴轉(zhuǎn)移20例。同時(shí)選取5例因子宮肌瘤或子宮腺肌征行子宮全切術(shù),術(shù)后病檢回示為正常宮頸鱗狀上皮組織者作為對(duì)照。所有患者臨床資料完整,病理資料由病理科專業(yè)醫(yī)師指導(dǎo),實(shí)驗(yàn)標(biāo)本選取典型病灶,進(jìn)行石蠟連續(xù)切片觀察,切片厚度4μm。

    1.2 方法

    采用免疫組織化學(xué)SP法。鼠抗人HMGB1單克隆抗體為香港abcam公司產(chǎn)品,HMGB1,一抗工作濃度1︰200,二抗為福建邁新有限公司產(chǎn)品。按說明書操作,DAB顯色,蘇木精復(fù)染,脫水、透明和封固。以PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。HMGB1陽性主要表達(dá)于細(xì)胞漿,部分細(xì)胞核中也有一定程度表達(dá)。以胞漿內(nèi)出現(xiàn)淡黃色至棕黃色顆粒為標(biāo)準(zhǔn),依據(jù)棕色反應(yīng)陽性強(qiáng)度和面積綜合評(píng)定結(jié)果,對(duì)每張切片陽性細(xì)胞強(qiáng)度按無著色、淡黃色、棕黃色和棕褐色分別評(píng)為0、1、2、3分:陽性著色面積按無著色、著色面積小于1/3、1/3-2/3、≥2/3分別評(píng)為0、1、2、3分。根據(jù)兩項(xiàng)評(píng)分之和判斷結(jié)果。0~3分判斷為陰性或弱陽性,≥4分判斷為強(qiáng)陽性表達(dá)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,因總病例數(shù)小于40例,計(jì)數(shù)資料采用Fisher確切概率法進(jìn)行檢驗(yàn), P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    如圖1所示,HMGB1主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞漿。27例患者中強(qiáng)陽性22例,強(qiáng)陽性表達(dá)率為81.48%。而在正常宮頸組織內(nèi)表達(dá)為陰性或弱陽性,強(qiáng)陽性表達(dá)率為0%(見圖2)。對(duì)兩組平均積分行確切概率法分析,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    本實(shí)驗(yàn)中7例宮頸癌伴淋巴轉(zhuǎn)移患者,HMGB1均呈強(qiáng)陽性表達(dá),強(qiáng)陽性表達(dá)率為100%,而在淋巴轉(zhuǎn)移陰性宮頸癌患者中,強(qiáng)陽性表達(dá)率為75%,兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    11例年齡小于45歲宮頸癌患者中,7例表達(dá)為強(qiáng)陽性,強(qiáng)陽性率為63.64%,而在16例≥45歲病例中,15例表達(dá)為強(qiáng)陽性,強(qiáng)陽性百分率為93.75%,兩組間差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    3 討論

    隨著分子生物學(xué)及基因工程發(fā)展,從蛋白水平研究宮頸癌腫瘤生物學(xué)行為越來越引起人們重視。HMGB1是一種非組蛋白染色體結(jié)合蛋白,廣泛分布于心、肝、腎等組織中[6]。既往實(shí)驗(yàn)表明,HMGB1及其受體表達(dá)水平與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、浸潤及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[7-8],HMGB1可通過抑制巨噬細(xì)胞增殖或促進(jìn)其凋亡,降低巨噬細(xì)胞數(shù)目,減弱其在抗腫瘤轉(zhuǎn)移中作用,抑制機(jī)體抗腫瘤免疫機(jī)制有效發(fā)揮[9]。Guo等[10]應(yīng)用免疫組化法研究胃癌組織中HMGB1表達(dá),結(jié)果顯示,76例胃癌組織標(biāo)本中,HMGB1主要表達(dá)于胞核,多數(shù)呈強(qiáng)陽性表達(dá),與正常組相比具有顯著性差異,其中低分化組強(qiáng)陽性表達(dá)率明顯高于高分化組,而在患者年齡、手術(shù)分期、性別、淋巴轉(zhuǎn)移等方面,兩組表達(dá)無明顯差異。龐曉奡等[11]通過研究正常宮頸、宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌組織中HMGB1表達(dá)水平,發(fā)現(xiàn)宮頸癌中HMGB1表達(dá)水平明顯上調(diào),并與FIGO分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)。Xue等[12]

    李妍等[13]發(fā)現(xiàn),宮頸癌患者中HMGB1表達(dá)水平與淋巴轉(zhuǎn)移狀態(tài)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、手術(shù)分期、復(fù)發(fā)等密切相關(guān),可作為評(píng)價(jià)預(yù)后及復(fù)發(fā)重要指標(biāo)之一,并可通過聯(lián)合應(yīng)用SCCA、CYFRA21-1等提高診斷敏感性及特異性,本實(shí)驗(yàn)中亦發(fā)現(xiàn)宮頸癌伴淋巴轉(zhuǎn)移患者中HMGB1強(qiáng)陽性表達(dá)率明顯高于非淋巴轉(zhuǎn)移組,進(jìn)一步提示HMGB1可能與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移有關(guān),可作為患者預(yù)后及生存率重要指標(biāo),也是評(píng)估患者術(shù)后是否予以后續(xù)放化療治療依據(jù)??笻MGB1表達(dá)亦有望成為抑制腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移方法之一。但本研究結(jié)果顯示HMGB1表達(dá)水平與患者年齡、臨床分期無明顯相關(guān)性,低分化及中高分化組宮頸癌組織中HMGB1強(qiáng)陽性表達(dá)率分別為88.89%及77.78%,雖然兩組間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但低分化組HMGB1過表達(dá)率較中高分化組有所增加。

    本實(shí)驗(yàn)證實(shí)HMGB1在宮頸癌組織中呈過表達(dá),并與淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)??笻MGB1表達(dá)亦有望成為抑制腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移方法之一。

    參 考 文 獻(xiàn)

    [1] 聶邦旭,舒鈞,浦波,等.高遷移率蛋白1研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2010,16(9):1303 -1306.

    [2] Tang D,Kang R,Zeh HJ,et al. High-mobility group box 1 and cancer [J]. Biochim Bio Phys Acta,2010,1799( 9):131-140.

    [3] Evankovich J,Cho S W,Zhang R,et al. High mobility group box1 release from hepatocytes during ischemia and reperfusion injury ismediated by decreased histone deacetylase activity [J]. Biol Chem,2010,285( 51) : 39888-398897.

    [4] Susa Y,Masuda Y,Imaizumi H,et al.Neutralization of receptor for advanced glycation end-products and high mobility group box-1 attenuates septic diaphragm dysfunction in rats with peritonitis[J].Crit Care Med, 2009,37(9):2619-2624.

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    [11] 龐曉奡,張瑤,魏恒,等.高遷移率族蛋白1在宮頸癌中表達(dá)及作用[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2014,43(12):1075-1077,1083.

    [12] Xue L D,Xiu G S,Xiao L Z,et al.Clinical value of serum HMGB 1evels in early detection of recurrent squamous cell carcinoma of uterine cervix: comparison with serum SCCA, CYFRA21-1 and CEA levels [J].Croat Med,2009,50 (5):455-465.

    [13] 李妍,郝權(quán).高遷移率族蛋白1和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞與宮頸癌淋巴管密度相關(guān)性研究[J].中國腫瘤臨床,2014,41(4):222-226.

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