夏祥樂,蔡玉龍
(山東鼎安檢測(cè)技術(shù)有限公司,山東 濟(jì)南 250032)
最近幾年,環(huán)境污染問題已經(jīng)發(fā)展為世界三大主要危機(jī)之一,而環(huán)境污染中尤以重金屬污染最為惡劣。各種重金屬污染物的大量排放為人類的生存環(huán)境產(chǎn)生了極大的影響[1],而現(xiàn)今階段對(duì)環(huán)境介質(zhì)大量重金屬污染物的分布狀況特別是其毒性大小依然不是很清楚,因而沒有辦法確定環(huán)境介質(zhì)中的重金屬污染物對(duì)生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的的具體影響。傳統(tǒng)的重金屬毒性測(cè)試方法是基于單一毒性終點(diǎn)(如致死或抑制生物生長等)對(duì)污染物的環(huán)境效應(yīng)進(jìn)行評(píng)估。而單指標(biāo)毒性檢測(cè)方法很難較為準(zhǔn)確地反映出重金屬污染物對(duì)環(huán)境的全部影響。所以,發(fā)展多水平和多指標(biāo)的毒性測(cè)試方法對(duì)確定污染物毒性,評(píng)估其帶來的環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)具有極其重要的意義。
將二甲酚橙(Xylenol orange)配制成3.0×10-4mol/L的溶液;15%的KI溶液;0.52%的聚乙烯-134(PVA-134)溶液;準(zhǔn)備好5×10-4mol/L的氯化汞溶液;丙酮溶液、正己烷(1:1)混合溶劑、二甲基亞砜(DMSO)、氧化鋁和硅膠、多層硅膠柱以及弗羅里硅土萃取柱、濃硫酸實(shí)驗(yàn)所用試劑都為分析純,實(shí)驗(yàn)用水全部規(guī)定為二次蒸餾水,即純水。
重金屬的存在形態(tài)決定了重金屬的環(huán)境影響與產(chǎn)生的生物效應(yīng)大小[2]。學(xué)界采取Tessier法,即將環(huán)境介質(zhì)中金屬元素的形態(tài)使用連續(xù)提取法將提取物劃分為可轉(zhuǎn)換態(tài)、碳酸鹽結(jié)合態(tài)、有機(jī)物結(jié)合態(tài)、鐵猛水合氧化物結(jié)合態(tài)以及殘留的硅酸鹽結(jié)合態(tài)??赊D(zhuǎn)換態(tài)重金屬是依附在土壤、腐殖質(zhì)以及其它介質(zhì)中的重金屬,其對(duì)環(huán)境變化的感應(yīng)度較高、易于遷移變換、極易被植物所吸收,所以對(duì)生態(tài)鏈的運(yùn)行具有比較大的影響;碳酸鹽結(jié)合態(tài)具體指的是經(jīng)碳酸鹽沉淀結(jié)合的重金屬;土壤中存在各種有機(jī)質(zhì),即微生物,如動(dòng)植物尸體的殘留、腐殖質(zhì),以及礦物顆粒的包裹物等,這些有機(jī)質(zhì)自身擁有較大離合重金屬離子的能力,又可以以有機(jī)膜的形式依附在礦物顆粒表層,改變礦物顆粒的基本物理性質(zhì),一定程度上提高了吸附重金屬的能力,而有機(jī)結(jié)合態(tài)存在的重金屬與可轉(zhuǎn)換態(tài)和鐵猛氧化結(jié)合態(tài)相比,更難被釋放出來。高活性的鐵猛氧化物的表面積比較大,極易被吸附成沉淀陰離子與陽離子,在土壤pH值下降的時(shí)候,以鐵猛氧化結(jié)合態(tài)存在的重金屬就極易被釋放出來,具備較大的危害性。殘留的硅酸鹽結(jié)合態(tài)重金屬一般普遍存在原生礦物以及次生礦物的晶體中,主要來自土壤礦物質(zhì),物理性質(zhì)比較穩(wěn)定,在自然條件下很難被釋放處理,可以長期依附在土壤中,很難被植物所吸收,所以在整個(gè)生態(tài)系統(tǒng)中對(duì)食物鏈的影響最小。
1987年,歐共體標(biāo)準(zhǔn)局在Tessier法的基礎(chǔ)上提出BCR三步提取法。和傳統(tǒng)的Tessier法相比,BCR連續(xù)分級(jí)提取法把Tessier法中的可轉(zhuǎn)換態(tài)和碳酸鹽結(jié)合態(tài)兩項(xiàng)并合成一項(xiàng),成為乙酸可提取物,其余各形態(tài)的分類則保持不變。
本文采取BCR連續(xù)提取法,對(duì)建筑物兩側(cè)大氣顆粒物、路面灰塵以及路邊土壤污染物中的重金屬形態(tài)進(jìn)行了提取。
使用500ml的丙酮溶液將正己烷(1:1)混合溶劑提取出來。
利用銅片將其脫硫,回流速度基本控制在每小時(shí)5次~6次,連續(xù)提取48小時(shí)。
將提取液等分成三份,一份通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后,在高純氮?dú)猸h(huán)境下,利用二甲基亞砜(DMSO)進(jìn)行溶液置換后,在零下18℃的環(huán)境下保存,以備后續(xù)生物實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行[3]。另一份提取液通過氮吹濃縮以后,利用正己烷溶液完成置換,基于提取樣品中有機(jī)物的含量與特性的不同,使用長為30 cm、內(nèi)徑為5 mm的層析柱專用實(shí)驗(yàn)管,里面以氧化鋁和硅膠作為基本填充物。第三份提取液,借助氮吹濃縮后,使用正己烷完成置換,并通過濃硫酸將其酸化,然后利用多層硅膠柱以及弗羅里硅土萃取柱完成凈化,經(jīng)濃縮凈化后,以待檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)過程中每個(gè)濃度的測(cè)試樣品都需要設(shè)置一個(gè)空白對(duì)照組,向空白試樣中加入500μl3%的NaCl溶液,其它測(cè)試管中依次加入500μl不同濃度的毒物。
實(shí)驗(yàn)開始時(shí),用移液槍精準(zhǔn)確吸入并依次向每個(gè)測(cè)試管中加入50μl的工作溶液,將其完全混合均勻。依照溶液的添加順序,30min計(jì)時(shí)以后,根據(jù)順序?qū)⒏鱾€(gè)測(cè)試管放入毒性測(cè)試儀中檢測(cè)其毒性大小。
測(cè)試樣品組和對(duì)照組的測(cè)試結(jié)果具體見下表。
表1 兩組測(cè)試結(jié)果
根據(jù)測(cè)試結(jié)果,針對(duì)一些毒性較弱的重金屬,如鈮對(duì)照組的反應(yīng)并不強(qiáng)烈,即對(duì)毒性的敏感度較低,而測(cè)試樣品組對(duì)重金屬毒性的檢測(cè)反應(yīng)比較強(qiáng),對(duì)于鈮的檢測(cè)結(jié)果較為精準(zhǔn),因?yàn)殁壴谌A或六階時(shí)會(huì)產(chǎn)生微弱毒性,因而說明其對(duì)重金屬毒性的檢測(cè)相對(duì)精準(zhǔn)。
本文對(duì)環(huán)境介質(zhì)中重金屬污染物的毒性測(cè)試進(jìn)行分析,根據(jù)重金屬污染物的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì),利用化學(xué)檢測(cè),對(duì)其毒性進(jìn)行檢測(cè),實(shí)現(xiàn)本文設(shè)計(jì)。希望本文的研究能夠?yàn)榄h(huán)境介質(zhì)中重金屬污染物的毒性測(cè)試的方法提供理論依據(jù)。