葡萄糖氧化酶和復(fù)合預(yù)混合飼料對育成生長期藍狐血清生化指標的影響研究

鐘偉，劉可園，趙蒙，3，丁美宏，胡文平，孫偉麗，蔡亞娜，李光玉※

（1.中國農(nóng)業(yè)科學院特產(chǎn)研究所，長春 130112；2.山東亞康藥業(yè)股份有限公司，山東 濰坊 261000；3.山東省樂陵市人民政府，山東 樂陵 253600）

在毛皮動物養(yǎng)殖生產(chǎn)中，尤其在生長期，一定要添加復(fù)合預(yù)混合飼料或具有調(diào)節(jié)腸道并增強免疫性能的飼料添加劑來調(diào)節(jié)機體代謝，增強機體的抗氧化和免疫性能，從而提高動物的生長性能。葡萄糖氧化酶（Glucose oxidase，GOD）為一種需氧脫氫酶，在動物胃腸道內(nèi)以葡萄糖為底物，通過酶解反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖酸和少量過氧化氫，它可以改善動物腸道健康和消化能力，提高飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收率，促進動物的生長。GOD 的抗氧化作用可以有效清除腸道上的自由基，加速肝臟內(nèi)的氧化還原反應(yīng)，提高肝臟對毒性成分的代謝，在畜禽養(yǎng)殖生產(chǎn)中應(yīng)用前景廣闊[1-2]。毛皮動物專用預(yù)混合飼料是以氨基酸、維生素、礦物質(zhì)、益生菌、酶制劑及抗氧化劑等成分按照一定比例配制而成的飼料添加劑，其成分參與機體的重要代謝過程，具有促進動物生長發(fā)育、改善毛皮品質(zhì)的作用[3]。本試驗研究了在飼糧中添加復(fù)合預(yù)混合飼料、GOD及復(fù)合預(yù)混合飼料+GOD 對育成生長期藍狐血清蛋白代謝指標、免疫指標、抗氧化指標的影響，以期為復(fù)合預(yù)混合飼料和GOD在毛皮動物生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1%復(fù)合預(yù)混合飼料，由維生素、礦物質(zhì)及微量元素、氨基酸、復(fù)合酶制劑、益生菌制劑及抗氧化劑等配制而成；葡萄糖氧化酶，主要成分為葡萄糖氧化酶、甘草提取物、牛磺酸、維生素C、酵母提取物（YC）等，活力≥100 U/g，水分≤10%（山東亞康藥業(yè)股份有限公司）。

1.2 試驗動物、試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗在中國農(nóng)業(yè)科學院特產(chǎn)研究所毛皮動物實驗基地完成。試驗采用單因素隨機設(shè)計，選取40 只87日齡健康雄性公狐，隨機分成4 組。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗I組在基礎(chǔ)日糧（未額外添加維生素和微量元素）中添加1%復(fù)合預(yù)混合飼料，試驗II 組在基礎(chǔ)日糧中添加0.1%葡萄糖氧化酶，試驗III 組在基礎(chǔ)日糧（未額外添加維生素和微量元素）中添加1%復(fù)合預(yù)混合飼料+0.1%葡萄糖氧化酶。每組10 只藍狐，每個重復(fù)1 只，飼喂育成生長期狐全價配合飼料，和水飼喂，料與水比例為1∶4。試驗動物單籠飼養(yǎng)。試驗時間2018年7月27日～9月18日，每日 08：00 和 15：00 各飼喂1 次，自由飲水。

1.3 試驗日糧

基礎(chǔ)日糧組成、營養(yǎng)水平具體見表1。

1.4 血清樣本采集及生化指標測定

飼養(yǎng)試驗結(jié)束，每組隨機選取8只健康藍狐，稱重后后肢靜脈采血5 mL，置于促凝采血管中，4 ℃4 000 r/min離心8 min，分離血清，20 ℃保存?zhèn)溆?。血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）使用全自動生化分析儀測定；血清中總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）使用紫外分光光度計測定；血清中免疫球蛋白（Ig）A、G、M使用全自動酶標儀、采用酶聯(lián)免疫吸附法測定；球蛋白（GLOB）含量為總蛋白含量與白蛋白含量的差值。

1.5 測定指標及方法

測定基礎(chǔ)飼糧中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、鈣、磷的含量。干物質(zhì)含量采用105 ℃烘干法測定，參照GB/T 6435-2006；粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測定，參照GB/T6432-1994；粗脂肪含量采用索氏抽提法測定，參照GB/T 6433-1994；粗灰分含量采用550 ℃灼燒法測定，參照GB/T 6438-1992；鈣含量采用乙二胺四乙酸（EDTA）絡(luò)合滴定法測定，參照GB/T 6436-1992；磷含量采用釩鉬酸銨比色法測定，參照GB/T6437-1992。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of the basic diets(air-dry basis)

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)使用Excel 2003 進行整理，采用SAS V8軟件中GLM 程序進行統(tǒng)計分析，多重比較采用鄧肯氏法進行，其中P＜0.01 表示差異極顯著，P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05 表示差異不顯著，結(jié)果均以平均值±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同添加劑對育成生長期藍狐血清蛋白代謝指標的影響

由表2可知，不同添加劑對育成生長期藍狐血清TP 和 GLOB 有極顯著影響（P＜0.01），試驗 III 組血清TP 和GLOB 含量極顯著高于對照組和試驗I 組（P＜0.01），但與試驗 II 組差異不顯著（P＞ 0.05）；試驗II 組血清TP 含量顯著高于對照組和試驗I 組（P＜0.05）；試驗II 組血清GLOB 含量顯著高于對照組（P＜0.05），但與試驗 I 組差異不顯著（P＞ 0.05）；試驗I 組血清TP 和GLOB 含量與對照組差異不顯著（P＞0.05）。不同添加劑對生長期藍狐血清ALB 含量無顯著影響（P＞ 0.05）。

表2 葡萄糖氧化酶和復(fù)合預(yù)混合飼料對育成生長期藍狐血清蛋白代謝指標的影響Table 2 Effect of glucose oxidase and compound premix on serum protein metabolism indices of blue fox during the growth period （g/L）

2.2 不同添加劑對育成生長期藍狐血清免疫指標的影響

由表3可知，不同添加劑對育成生長期藍狐血清免疫球蛋白A 含量有極顯著影響（P＜0.01），試驗II組和III 組極顯著高于對照組和試驗I 組（P＜0.01），但試驗II 組與試驗III 組間差異不顯著（P＞0.05），試驗I 組與對照組間差異不顯著（P＞0.05）。不同添加劑對試驗組與對照組及試驗組血清IgM 和IgG 含量均無顯著影響（P＞ 0.05）。

表3 葡萄糖氧化酶和復(fù)合預(yù)混合飼料對育成生長期藍狐血清免疫指標的影響Table 3 Effects of glucose oxidase and compound premix on serum immune indices of blue fox during the growth period

2.3 不同添加劑對育成生長期藍狐血清抗氧化指標的影響

由表4可知，不同添加劑對育成生長期藍狐血清T-AOC 和 GSH-Px 含量有極顯著影響（P＜0.01），試驗III 組血清T-AOC 極顯著高于對照組（P＜0.01），顯著高于試驗 I 和 II 組（P＜0.05），但試驗 I、II 組與對照組間差異不顯著（P＞0.05），試驗I 和II 組間差異不顯著（P＞0.05）。各試驗組血清GSH-Px 含量極顯著高于對照組（P＜0.01），但試驗組間差異不顯著（P＞0.05）。不同添加劑對育成生長期藍狐血清SOD和 MDA 含量無顯著影響（P＞ 0.05）。

表4 葡萄糖氧化酶和復(fù)合預(yù)混合飼料對育成生長期藍狐血清抗氧化指標的影響Table 4 Effects of glucose oxidase and compound premix on serum antioxidant indices of blue fox during the growth period

3 討論

葡萄糖氧化酶具有改善動物腸道健康和消化能力、提高飼料營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收、促進動物生長的作用。復(fù)合預(yù)混合飼料主要成分包括氨基酸、維生素和礦物質(zhì)、酶制劑、益生菌制劑及抗氧化劑等，其中，氨基酸、維生素和礦物質(zhì)是動物生長發(fā)育所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，參與機體免疫與抗氧化等多種重要生理反應(yīng)。

血清生化指標在很大程度上能反映機體的生理變化情況。血清總蛋白、白蛋白的含量在一定程度上反映了機體蛋白質(zhì)的吸收和代謝狀況，白蛋白的升高說明肝臟合成蛋白質(zhì)的能力加強，球蛋白和免疫球蛋白抗體的升高是動物機體免疫力增強的表現(xiàn)[4]。本試驗結(jié)果顯示，試驗 II 組和 III 組血清 TP、GLOB 和 IgA 的含量顯著高于對照組和試驗Ⅰ組，說明日糧中添加0.1%GOD和0.1%GOD+1%預(yù)混合飼料能夠促進機體對蛋白質(zhì)的吸收與代謝，并有提高機體免疫性能的趨勢，這與穆淑琴等[3]在仔豬上的研究結(jié)果基本一致。

湯海鷗等[5]報道，葡萄糖氧化酶（GOD）具有抗氧化作用，可以清除腸道上的自由基，加速肝臟內(nèi)的氧化還原反應(yīng)，提高肝臟對毒性成分的代謝速度。毛皮動物專用預(yù)混合飼料中含有一定比例的抗氧化劑，能防止維生素（如VE）等易氧化成分發(fā)生氧化反應(yīng)。宋海彬等[6]發(fā)現(xiàn)，日糧中添加GOD能不同程度地提高肉雞血清中SOD活性，降低血清丙二醛（MDA）含量，具有一定的抗氧化和抗應(yīng)激作用。穆淑琴等[3]研究表明，添加GOD 對于增強仔豬機體的抗氧化能力、降低氧化產(chǎn)物的生成都有一定作用。SOD 和 GSH-Px 在生物抗氧化方面具有重要作用，SOD是體內(nèi)清除氧自由基等不可或缺的清除劑，具有防止細胞和組織受到氧化損傷的作用[7-8]。MDA 是機體內(nèi)氧自由基氧化脂肪酸生成的產(chǎn)物，MDA 的產(chǎn)生還會加劇細胞膜和線粒體呼吸鏈的損傷，因此常用作衡量機體抗氧化能力的指標[9]。本試驗結(jié)果顯示，各試驗組的血清T-AOC 和GSH-Px 均顯著高于對照組，其中0.1%GOD+1%復(fù)合預(yù)混合飼料組血清T-AOC 和GSH-Px 含量相對較高，可能由于預(yù)混合飼料中含有的抗氧化劑和GOD 發(fā)揮了累加效應(yīng)，增強了生長期藍狐機體的抗氧化性能，但對血清中SOD活性和丙二醛（MDA）含量未產(chǎn)生顯著影響，與上述文獻報道不盡相同，可能與不同物種機體代謝差異有關(guān)，具體機制還有待進一步研究。

4 結(jié)論

在基礎(chǔ)飼糧（未額外添加維生素和微量元素）中添加0.1%GOD+1%復(fù)合預(yù)混合飼料，更有利于育成生長期藍狐機體對蛋白質(zhì)的吸收與代謝，能夠提高機體的抗氧化性能，增強機體的抵抗力。