苦參堿聯(lián)合化療藥物對(duì)人急性髓系白血病HL-60細(xì)胞增殖及侵襲力的影響

晁榮 胡曉燕 朱生東 鄧偉 王莉

摘要 目的：探究苦參堿聯(lián)合化療藥物對(duì)人急性髓系白血病HL-60細(xì)胞增殖及侵襲力的影響。方法：體外培養(yǎng)人急性髓系白血病HL-60細(xì)胞，苦參堿單藥組以1.0 g/L苦參堿干預(yù)，三氧化二砷單藥組以3 μmol/L三氧化二砷處理，聯(lián)合組以終濃度為1.0 g/L的苦參堿+3 μmol/L三氧化二砷處理，空白組以等量生理鹽水處理。MTT法檢測(cè)HL-60細(xì)胞增殖情況，ranswell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HL-60侵襲力，蛋白免疫印跡法檢測(cè)HL-60細(xì)胞MMPs蛋白表達(dá)情況。結(jié)果：苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組、聯(lián)合組24 h PIR分別為（18.54±2.54）%，（29.54±2.62）%，（41.45±3.72）%，48 h PIR分別為（27.46±2.55）%，（38.93±3.76）%，（45.64±3.54）%，3組內(nèi)HL-60的PIR均隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加而增加，其中聯(lián)合組24 h、48 h PIR均高于同時(shí)間點(diǎn)的苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）?？瞻捉M、苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組、聯(lián)合組侵襲細(xì)胞分別為（127.64±23.93）個(gè)、（94.24±15.23）個(gè)、（81.23±12.21）個(gè)、（75.13±10.69）個(gè)，相對(duì)侵襲指數(shù)分別為（100.00±0.00）%、（73.44±0.34）%、（62.47±0.15）%、（58.54±0.36）%;MMP-2蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為（0.91±0.05）、（0.39±0.04）、（0.23±0.04）、（0.14±0.03）;MMP-9蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為（0.62±0.05）、（0.31±0.05）、（0.27±0.04）、（0.16±0.02）。與空白組比較，苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組、聯(lián)合組侵襲細(xì)胞數(shù)量顯著減少，相對(duì)侵襲指數(shù)及細(xì)胞中MMP-2、MMP-9相對(duì)表達(dá)量降低，且聯(lián)合組均低于苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：苦參堿聯(lián)合三氧化二砷通過(guò)下調(diào)MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)有效抑制人急性髓系白血病HL-60細(xì)胞增殖及侵襲。

關(guān)鍵詞 人急性髓系白血病;HL-60細(xì)胞;凋亡;苦參堿;表達(dá);機(jī)制

Effects of Matrine Combined with Chemotherapeutic Drugs on Proliferation and Invasion of Human Acute Myeloid Leukemia HL-60 Cells

Chao Rong，Hu Xiaoyan，Zhu Shengdong，Deng Wei，Wang Li

Abstract Objective：To investigate the effects of matrine combined with chemotherapeutic drugs on the proliferation and invasion of human acute myeloid leukemia HL-60 cells.Methods：Human acute myeloid leukemia HL-60 cells were cultured in vitro.Matrine monotherapy group was treated with 1.0 g/L matrine，arsenic trioxide monotherapy group with 3 mmol/L arsenic trioxide，combination group with 1.0 g/L matrine+3 mmol/L arsenic trioxide，blank group with the same amount of saline.MTT assay was used to detect the proliferation of HL-60 cells，ranswell chamber assay was used to detect the invasion ability of HL-60 cells，and Western blotting was used to detect the expression of MMPs in HL-60 cells.Results：The 24-hour PIR of matrine group，arsenic trioxide group and combination group were（18.54±2.54）%，（29.54±2.62）%，（41.45±3.72）% and 48-hour PIR were（27.46±2.55）%，（38.93±3.76）%，（45.64±3.54）%.The PIR of HL-60 in the 3 groups increased with the increase of culture time.PIR of 24 h and 48 h in THE combination group was higher than that of matrine and arsenic trioxide at the same time point（P<0.05）.The number of invasive cells in the blank group，the matrine group，the arsenic trioxide group and the combination group were（127.64±23.93），（94.24±15.23），（81.23±12.21），（75.13±10.69），and the relative invasion index were（100.00±0.00），（73.44±0.34），（62.47±0.15），（58.54±0.36）%，respectively.The relative expressions of MMP-2 were （0.91±0.05），（0.39±0.04），（0.23±0.04），（0.14±0.03），and the MMP-9 protein were （0.62±0.05），（0.31±0.05），（0.27±0.04），（0.16±0.02），respectively.Compared with the blank group，the number of invasive cells in matrine monotherapy group，arsenic trioxide monotherapy group and combination group decreased significantly，the relative invasion index and the relative expression of MMP-2 and MMP-9 protein in cells decreased，and the combined group was lower than matrine monotherapy group and arsenic trioxide monotherapy group（P<0.05）.Conclusion：Matrine combined with arsenic trioxide can effectively inhibit the proliferation and invasion of human acute myeloid leukemia HL-60 cells，and its mechanism may be related to the down-regulation of MMP-2 and MMP-9 protein expression.

Key Words Human acute myeloid leukemia; HL-60 cells; Apoptosis; Matrine; Expression; Mechanisms

中圖分類號(hào)：R284;R552文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.11.019

白血病是血液系統(tǒng)惡性腫瘤，與造血干細(xì)胞增殖失控、分化成熟受阻、正常程序凋亡失調(diào)等有關(guān)，目前化療仍是其主要治療手段，但由于化療不良反應(yīng)較大，治療效果不佳，因此急需尋求更為安全有效的治療方案[1-2]。近年來(lái)從傳統(tǒng)中草藥中開(kāi)發(fā)高效低毒的抗腫瘤活性成分已成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)[3]?？鄥A（苦參啶-15-酮）提取自豆科植物苦參（Sophora flavescens）的干燥根中，具有抗炎、抗病毒、強(qiáng)心、抗肝損傷、抗肝纖維化及抗腫瘤等多種生物活性，近年來(lái)有關(guān)苦參堿的抗腫瘤作用方面的研究日漸增多，但有關(guān)其抗腫瘤機(jī)制尚未完全闡明[4-5]。本研究體外培養(yǎng)人急性髓系白血病HL-60細(xì)胞，觀察苦參堿對(duì)細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡及侵襲的影響，并探討作用機(jī)制，為苦參堿在臨床應(yīng)用提供支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細(xì)胞株 人急性髓系白血病HL-60細(xì)胞，購(gòu)于中國(guó)醫(yī)學(xué)院科學(xué)院血液學(xué)研究所。

1.1.2 藥物 苦參堿注射液（陜西昂盛生物醫(yī)藥科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：110805-200306）;純度≥98%;注射用三氧化二砷（北京雙鷺?biāo)帢I(yè)有限公司產(chǎn)品，國(guó)藥準(zhǔn)字H20080665）。

1.1.3 試劑與儀器 RPMI-1640培養(yǎng)基及0.25%胰蛋白酶（美國(guó)HyClone公司）;二甲基亞砜、四甲基偶氮唑鹽（美國(guó)Sigma公司）;基質(zhì)金屬蛋白酶-2、9（MMP-2、MMP-9）多克隆抗體（英國(guó)Abcam公司）等。HERAcell 150i型CO2培養(yǎng)箱（美國(guó)Thermo Fisher公司）;MK3型全自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國(guó)Thermo Fisher公司）;LXJ-II型超低溫高速離心機(jī)（上海領(lǐng)成生物科技有限公司）;JY-ZY3型蛋白凝膠電泳轉(zhuǎn)印系統(tǒng)（美國(guó)Bio-Rad公司）;JYH27020型電泳儀、Gel doc 2000凝膠成像系統(tǒng)（美國(guó)Bio-Rad公司）等。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及分組

將HL-60細(xì)胞以含10%胎牛血清的1640培養(yǎng)基，置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（37 ℃，5%CO2飽和濕度），待細(xì)胞形態(tài)良好，且處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。實(shí)驗(yàn)分為空白組、苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組和聯(lián)合組。

1.2.2 干預(yù)方法

取生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期形態(tài)較好的HL-60細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×105個(gè)/mL，接種于96孔板，苦參堿單藥組以1.0 g/L苦參堿干預(yù)，三氧化二砷單藥組以3 μmol/L三氧化二砷處理，聯(lián)合組以終濃度為1.0 g/L的苦參堿+3 μmol/L三氧化二砷處理，空白組以等量生理鹽水處理。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

MTT法[6]檢測(cè)HL-60細(xì)胞增殖情況：空白組、苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組和聯(lián)合組HL-60細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)1.2.2方法干預(yù)24、48 h后，棄去每孔上清液，加20 μL 5 mg/mL MTT溶液檢測(cè)細(xì)胞增殖情況，采用酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔吸光光度值（A490 nm），計(jì)算各組HL-60增殖抑制率（PIR）=（空白組A490 nm-實(shí)驗(yàn)組A490 nm）/空白組A490 nm×100%。

Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)HL-60細(xì)胞侵襲力：參照相關(guān)文獻(xiàn)[7]檢測(cè)HL-60細(xì)胞侵襲力，HE染色后于光學(xué)倒置顯微鏡下觀察并拍照，計(jì)數(shù)侵襲細(xì)胞數(shù)量，相對(duì)侵襲指數(shù)=干預(yù)組侵襲細(xì)胞數(shù)/空白組侵襲細(xì)胞數(shù)×100%。

蛋白免疫印跡法（WB）[8]檢測(cè)HL-60細(xì)胞MMPs蛋白表達(dá)情況：空白組、苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組和聯(lián)合組經(jīng)不同藥物處理48 h后，收集細(xì)胞，提取細(xì)胞總蛋白，參照BCA試劑盒檢測(cè)蛋白濃度。經(jīng)10%分離膠及5%濃縮膠行SDS-PAGE，轉(zhuǎn)膜，孵育抗體，最后于暗室中以ELC發(fā)光試劑盒顯影，以GADPH為參照，采用Bio-Rad凝膠成像系統(tǒng)分析各組MMP-2/MMP-9蛋白相對(duì)表達(dá)量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 苦參堿聯(lián)合化療藥物對(duì)HL-60細(xì)胞增殖的影響

苦參堿、三氧化二砷及聯(lián)合用藥均可抑制HL-60細(xì)胞增殖，3組內(nèi)HL-60的PIR均隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加而增加，其中聯(lián)合組24 h、48 h PIR均高于同時(shí)間點(diǎn)的苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 苦參堿聯(lián)合化療藥物對(duì)HL-60細(xì)胞侵襲力的影響

與空白組比較，苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組、聯(lián)合組侵襲細(xì)胞數(shù)量顯著減少，相對(duì)侵襲指數(shù)降低，且聯(lián)合組侵襲細(xì)胞數(shù)量及相對(duì)侵襲指數(shù)顯著低于苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 苦參堿聯(lián)合化療藥物對(duì)HL-60細(xì)胞MMP-2/MMP-9蛋白表達(dá)比較

空白組、苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組、聯(lián)合組MMP-2蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為（0.91±0.05）、（0.39±0.04）、（0.23±0.04）、（0.14±0.03）;MMP-9蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為（0.62±0.05）、（0.31±0.05）、（0.27±0.04）、（0.16±0.02）。與空白組比較，苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組、聯(lián)合組MMP-2、MMP-9蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著降低，且聯(lián)合組MMP-2、MMP-9蛋白相對(duì)表達(dá)量低于苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)圖1。

圖1 蛋白免疫印跡（WB）法檢測(cè)苦參堿聯(lián)合化療藥物 對(duì)HL-60細(xì)胞MMP-2/MMP-9蛋白表達(dá)的影響 注：A：空白組;B：苦參堿單藥組;C：三氧化二砷單藥組;D：聯(lián)合組

3 討論

白血病是一種嚴(yán)重危害人類健康的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病機(jī)制與腫瘤細(xì)胞增殖失控、凋亡抵抗效應(yīng)相關(guān)，導(dǎo)致腫瘤形成[9-10]。三氧化二砷作為一種有毒性的藥物古代即用于治療多種疾病，我國(guó)于20世紀(jì)70年代用于急性早幼粒細(xì)胞白血病的治療，并已被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)作為急性早幼粒細(xì)胞白血病的一線治療藥物。三氧化二砷與其他藥物無(wú)交叉耐藥反應(yīng)，主要通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，廣泛用于淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤及骨髓增生異常綜合征等疾病的治療中，近年來(lái)也逐漸用于治療肝癌、膽囊癌、乳腺癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等惡性腫瘤;但應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)心臟毒性，肝臟毒性，胃腸道反應(yīng)等不良反應(yīng)大，因此探討更佳的治療方案，以降低三氧化二砷應(yīng)用劑量及其不良反應(yīng)是臨床目前研究的熱點(diǎn)[11]。

苦參是豆科植物苦參的干燥根，別名為苦骨、牛參等，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品。在梁代陶弘景的《本草經(jīng)集注》中對(duì)苦參的原植物形態(tài)和分布進(jìn)行了初步描述。明代李時(shí)珍在《本草綱目》曰：苦以味名，參以功名。苦參性寒味苦，歸心、肝、胃、大腸和膀胱經(jīng);屬于清熱燥濕藥，具有清熱燥濕，殺蟲，利尿的功效;用于便血，熱痢，濕疹，濕瘡，黃疸尿閉，陰腫陰癢，赤白帶下等病癥的治療[12-13]?？鄥⒂行С煞挚鄥A具有廣泛藥理活性，研究報(bào)道，其抗腫瘤作用顯著，可有效抑制腫瘤血管新生、抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化凋亡等[14-16];苦參堿可通過(guò)顯著下調(diào)肝癌細(xì)胞表皮生長(zhǎng)因子受體表達(dá)而發(fā)揮抗腫瘤作用;通過(guò)下調(diào)B細(xì)胞淋巴瘤-2（Bcl-2）蛋白表達(dá)，上調(diào)Fas/FasL及Bcl-2相關(guān)X（Bax）蛋白表達(dá)，同時(shí)還可通過(guò)活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、8（Caspase3、Caspase8）達(dá)到抑制骨肉瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)其凋亡。細(xì)胞無(wú)限增殖是惡性腫瘤細(xì)胞的重要生長(zhǎng)特性之一，因此有效抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)是重要的抗腫瘤機(jī)制，也是抗腫瘤藥物篩選的重要指標(biāo)和途徑。本研究中選取1.0 g/L的苦參堿聯(lián)合3 μmol/L三氧化二砷干預(yù)HL-60細(xì)胞，并與苦參堿、三氧化二砷單獨(dú)用藥進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，3組內(nèi)HL-60的PIR均隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加而增加，其中聯(lián)合組24 h、48 h PIR均高于同時(shí)間點(diǎn)的苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組。提示苦參堿聯(lián)合三氧化二砷對(duì)HL-60細(xì)胞增殖的抑制作用更強(qiáng)，優(yōu)于單獨(dú)用藥。

腫瘤細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，與腫瘤細(xì)胞及宿主微環(huán)境間的相互作用密切相關(guān)[17-18]。MMPs是參與細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜降解的蛋白水解酶，MMP-2及MMP-9是MMPs家族中唯一可以降解Ⅳ型膠原的明膠酶類，MMP-2與MMPs結(jié)構(gòu)上具有較大同源性，在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移過(guò)程中起關(guān)鍵作用，MMP-2的過(guò)度表達(dá)在多種腫瘤組織中均可檢測(cè)出來(lái)，MMP-9可通過(guò)破壞基質(zhì)降解平衡，促使癌細(xì)胞穿越組織學(xué)屏障，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲其鄰近周圍組織及向遠(yuǎn)處正常組織轉(zhuǎn)移[19-20]。周劍等[21]研究顯示，苦參堿通過(guò)降低COX-2的蛋白和mRNA表達(dá)來(lái)抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的增殖和侵襲。李金州等[22]的一項(xiàng)關(guān)于結(jié)腸癌體外實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，苦參堿可抑制結(jié)腸癌SW480和SW480/M5細(xì)胞的增殖和遷移侵襲力，可能與抑制AKT/GSK3β/β-catenin信號(hào)通路有關(guān)。本研究結(jié)果中，與空白組比較，苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組、聯(lián)合組侵襲細(xì)胞數(shù)量顯著減少，相對(duì)侵襲指數(shù)降低，且聯(lián)合組侵襲細(xì)胞數(shù)量及相對(duì)侵襲指數(shù)顯著低于苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組。WB檢測(cè)可見(jiàn)，與空白組比較，苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組、聯(lián)合組MMP-2、MMP-9蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著降低，且聯(lián)合組MMP-2、MMP-9蛋白相對(duì)表達(dá)量低于苦參堿單藥組、三氧化二砷單藥組。表明苦參堿聯(lián)合三氧化二砷可有效抑制HL-60細(xì)胞發(fā)生侵襲，可能與下調(diào)MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)。

綜上所述，苦參堿聯(lián)合三氧化二砷可有效抑制人急性髓系白血病HL-60細(xì)胞增殖及侵襲，其作用機(jī)制與顯著下調(diào)MMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)，但有關(guān)其最佳應(yīng)用劑量及其他促HL-60凋亡作用機(jī)制仍需進(jìn)一步系統(tǒng)研究。

參考文獻(xiàn)

[1]林鵬，姚海英，周伯良，等.IDA聯(lián)合Ara-C治療初發(fā)急性髓系白血病對(duì)血清sICAM-1、sVCAM-1以及淋巴細(xì)胞亞群的影響[J].貴州醫(yī)藥，2018，42（5）：533-536.

[2]齊興菊，吳昌學(xué).康復(fù)新液治療兒童急性淋巴細(xì)胞白血病化療性口腔潰瘍的臨床療效[J].貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，42（10）：1176-1178，1195.

[3]朱文赫，陳麗紅，許娜，等.雙氫青蒿素誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721凋亡及其分子機(jī)制研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2018，53（3）：187-192.

[4]張明發(fā)，沈雅琴.苦參堿類生物堿的毒性研究進(jìn)展[J].藥物評(píng)價(jià)研究，2018，41（4）：682-691.

[5]王珂欣，高麗，周玉枝，等.苦參堿抗肝癌細(xì)胞增殖的1H-NMR代謝組學(xué)研究[J].中草藥，2017，48（20）：4275-4283.

[6]高平章，韓旭花，白賽賽，等.漢黃芩素抑制PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路影響急性白血病HL-60細(xì)胞增殖[J].泉州師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2017，35（6）：1-5.

[7]馮品，姚青林，王曉光，等.三氧化二砷通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)人白血病HL-60細(xì)胞凋亡[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2017，17（24）：4621-4625.

[8]魏婧昕，丁蘭，劉揚(yáng)，等.Rabdosin B對(duì)急性早幼粒白血病細(xì)胞HL-60分化的誘導(dǎo)作用[J].中草藥，2018，49（11）：2591-2600.

[9]Farge T，Saland E，de Toni F，et al.Chemotherapy-Resistant Human Acute Myeloid Leukemia Cells Are Not Enriched for Leukemic Stem Cells but Require Oxidative Metabolism[J].Cancer Discov，2017，7（7）：716-735.

[10]Brenner AK，Nepstad I，Bruserud .Mesenchymal Stem Cells Support Survival and Proliferation of Primary Human Acute Myeloid Leukemia Cells through Heterogeneous Molecular Mechanisms[J].Front Immunol，2017，8：106.

[11]葉永斌，許曉軍，陳艷紅，等.三氧化二砷聯(lián)合阿克拉霉素對(duì)急性髓系白血病KG-1a細(xì)胞的協(xié)同殺傷效應(yīng)[J].中華腫瘤雜志，2017，39（4）：256-262.

[12]張明發(fā)，沈雅琴.苦參堿類生物堿的鎮(zhèn)痛作用研究進(jìn)展[J].藥物評(píng)價(jià)研究，2018，41（5）：904-911.

[13]盧迎宏，王丹，井海云.苦參堿對(duì)oxLDL誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞炎癥反應(yīng)及增殖凋亡的影響及分子機(jī)制研究[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志，2018，34（4）：537-543.

[14]劉晶晶，牟艷玲.苦參堿抗腫瘤作用機(jī)制的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥房，2017，28（19）：2707-2711.

[15]王珂欣，高麗，周玉枝，等.苦參堿抗肝癌細(xì)胞增殖的1H-NMR代謝組學(xué)研究[J].中草藥，2017，48（20）：4275-4283.

[16]李國(guó)慧，劉瑞花，李貴霞，等.苦參堿抑制人骨肉瘤細(xì)胞MG63增殖的實(shí)驗(yàn)研究[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，35（2）：162-165.

[17]Díaz-Valdivia N I，Calderón C C，Díaz J E，et al.Anti-neoplastic drugs increase caveolin-1-dependent migration，invasion and metastasis of cancer cells：[J].Oncotarget，2017，8（67）：111943-111965.

[18]Kwak T，Drews-Elger K，Ergonul A，et al.Targeting of RAGE-ligand signaling impairs breast cancer cell invasion and metastasis[J].Oncogene，2017，36（11）：1559-1572.

[19]Shen KH，Hung JH，Chang CW，et al.Solasodine inhibits invasion of human lung cancer cell through downregulation of miR-21 and MMPs expression[J].Chem Biol Interact，2017，268：129-135.

[20]Zou S，Yang J，Guo J，et al.RAD18 promotes the migration and invasion of esophageal squamous cell cancer via the JNK-MMPs pathway[J].Cancer Lett，2018，417：65-74.

[21]周劍，曹愛(ài)玲，舒誠(chéng)榮.苦參堿對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞增殖和侵襲的抑制作用研究[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2017，32（7）：1184-1187.

（2019-09-05收稿 責(zé)任編輯：楊覺(jué)雄）

基金項(xiàng)目：甘肅省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2018-0405-JCC-0846）作者信息：晁榮（1987.03—），女，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：兒童血液腫瘤，E-mail：442935042@qq.com