板藍(lán)根顆粒中有效成分的測定及藥理作用研究進(jìn)展

王建敏　李偉

[摘要] 板藍(lán)根顆粒由板藍(lán)根和大青葉兩種中藥材組成，主要含生物堿、有機(jī)酸、苷類、氨基酸、硫代葡萄糖苷及其代謝產(chǎn)物、金屬等成分，具有抗病原微生物、抗內(nèi)毒素、增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤、抗衰老、保護(hù)和預(yù)防金屬中毒等作用。通過測定板藍(lán)根顆粒中的有效成分，提升板藍(lán)根藥材品質(zhì)，確保該藥臨床使用的安全性。本文從板藍(lán)根顆粒的有效成分、測定方法及藥理作用、實際臨床應(yīng)用等方面進(jìn)行綜述，為板藍(lán)根顆粒今后的研究提供一定的借鑒。

[關(guān)鍵詞] 板藍(lán)根顆粒;有效成分;藥理作用

[中圖分類號] R284.1 ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1673-7210（2019）06（c）-0049-04

Determination of effective components in Banlangen Granules and research progress of pharmacological effects

WANG Jianmin ? LI Wei

Department of Pharmacy， the Fourth Hospital of Hebei Medical University， Hebei Province， Shijiazhuang ? 050011， China

[Abstract] Banlangen Granules are composed of two kinds of Chinese medicinal materials， which are Radix Isatidis and Folium Isatidis. They mainly contain alkaloids， organic acids， glycosides， amino acids， glucosinolates and their metabolites， metals and other ingredients. It has the effects of anti-pathogenic microorganisms， anti-endotoxin， improving immune function， anti-tumor， anti-aging， protection and prevention of metal poisoning， and so on. By measuring the effective components in Banlangen Granules， the quality of Radix Isatidis is improved to ensure the safety of this drug in clinical use. This paper reviews the effective components， determination methods， pharmacological effects and practical clinical application of Banlangen Granules， and provides some reference for the future research of Banlangen Granules.

[Key words] Banlangen Granules; Effective components; Pharmacological effects

板藍(lán)根顆粒是由板藍(lán)根和大青葉兩種中藥材組成的中藥成方制劑，具有清熱、解毒、涼血、利咽等功效，臨床廣泛用于預(yù)防流行性感冒發(fā)熱、流行性腮腺炎等病毒性感染，是預(yù)防及治療病毒性肝炎的傳統(tǒng)用藥，對帶狀皰疹、扁平疣等多種病毒性皮膚病有較好療效[1]。大青葉清熱解毒、涼血消斑，可用于抗病毒、抑菌、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗腫瘤、解熱、抗炎[2]。板藍(lán)根清熱解毒、涼血利咽，具有抗菌、抗病毒、抗內(nèi)毒素、增強(qiáng)免疫功能、抑制血小板聚集、解熱、抗癌作用[3]。現(xiàn)就板藍(lán)根顆粒的藥理作用及其有效成分的測定作一綜述。

1 板藍(lán)根顆粒的有效成分、測定方法及藥理作用

1.1 有效成分與測定方法

按照傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)的整體觀，中藥的有效成分往往涉及幾種、十幾種，甚至是幾十、上百種，中藥藥效不能依靠一個或幾個有效成分的量決定，而是藥品中多個藥效成分的綜合效應(yīng)，產(chǎn)品中活性成分越多，含量越高，中藥內(nèi)在有效成分之間的配比關(guān)系越好，藥效也可能越好。大青葉主要化學(xué)成分包括生物堿、有機(jī)酸、苷類、甾醇等幾種化合物。板藍(lán)根主要包括生物堿、多糖、氨基酸及硫代葡萄糖苷及其代謝產(chǎn)物。

1.1.1 生物堿類 ?多成分多靶點抗病毒是板藍(lán)根對抗流感病毒的主要作用機(jī)制，主要活性成分有生物堿（表告依春）、腺苷、糖類等。生物堿是板藍(lán)根抗病毒作用的關(guān)鍵成分，主要包括吲哚類生物堿、喹唑酮類生物堿、喹啉類生物堿。曹波等[4]應(yīng)用高效液相色譜法，采用Agilent 5 TC-C18色譜柱，選擇甲醇-水作為流動相，289 nm波長，75%乙醇回流提取方式，結(jié)果顯示靛藍(lán)與靛玉紅的含量低于腺苷和表告依春的含量，其中靛玉紅的含量為最低。四種有效成分均能達(dá)到基線分離，為板藍(lán)根藥材的質(zhì)量控制提供一定依據(jù)。但高效液相色譜法各成分相互干擾嚴(yán)重，操作繁瑣、靈敏度低。超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法簡便快速，靈敏度和質(zhì)量精度高，穩(wěn)定性強(qiáng)，是中藥及有效成分定性定量分析的有效方法[5]。周燕萍等[6]應(yīng)用超高效液相串聯(lián)質(zhì)譜法定量分析尿苷、腺苷、表告依春、靛玉紅，結(jié)果顯示各離子通道峰形良好，干擾少，為全面控制十味板藍(lán)根顆粒提供了可靠而簡單的方法。

1.1.2 有機(jī)酸類化合物 ?有機(jī)酸有較強(qiáng)的抗菌作用，可改善機(jī)體微環(huán)境，增強(qiáng)機(jī)體的免疫作用，臨床常用于抗炎解熱。李培啟[7]應(yīng)用簡單快速的高效毛細(xì)管電泳法，測定三家公司的兩批板藍(lán)根顆粒中的有機(jī)酸，甲醇溶解板藍(lán)根顆粒，甲醇復(fù)溶定容后檢測，pH 9.1，硼砂25 mmol/L，15%乙腈，藍(lán)根藥材中水楊酸、丁香酸、苯甲酸和鄰氨基苯甲酸分離效果和遷移時間好，檢測限和回收率均符合要求，板藍(lán)根顆粒中有機(jī)酸含量在不同廠家不同批號中差別較大，可用于控制板藍(lán)根顆粒中抗內(nèi)毒素有機(jī)酸的質(zhì)量。莊會榮等[8]應(yīng)用電導(dǎo)檢測法，NaOH淋洗液20 mmol/L，流速為0.8 mL/min，15 min洗脫，檢測板藍(lán)根顆粒中的丁二酸、富馬酸和苯甲酸含量，丁二酸、富馬酸和苯甲酸分離良好，重復(fù)性好，線性范圍寬于毛細(xì)管電泳法和高效液相色譜法。

1.1.3 多糖類 ?板藍(lán)根多糖具有免疫調(diào)節(jié)功能，能提高抗氧化酶活性，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的釋放，增強(qiáng)宿主的體液免疫和細(xì)胞免疫功能，改善腸道微環(huán)境，抑制部分病毒和細(xì)菌，抗腫瘤，保肝、降血脂[9-10]。張利沙等[11]應(yīng)用硫酸-苯酚法測定多糖含量，檢測波長490 nm，1 mL 5%苯酚溶液，5 mL硫酸，3批制劑中多糖的含量基本一致，與采用毛細(xì)管電泳法測得的3批復(fù)方南板藍(lán)根顆粒相比，單糖的組成和含量基本一致，為該制劑的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的完善提供參考依據(jù)。

1.1.4 氨基酸 ?中藥中的氨基酸是治療疾病或滋補(bǔ)營養(yǎng)的主要成分，通過對中藥中氨基酸成分的分析檢測，可監(jiān)控中藥制劑中的有效成分。任國萍等[12]選取21批次板藍(lán)根藥材，應(yīng)用2，4-二硝基氟苯柱前衍生法及微波水解-柱前衍生法，選擇Inertsil ODS-3色譜柱，流動相A和B分別為乙酸鈉緩沖液和乙腈，檢測波長為360 nm，柱溫為27℃，測定10種游離氨基酸和水解氨基酸的含量，再通過計算兩者之間的差值算出結(jié)合氨基酸的含量。10種氨基酸的峰面積分值RSD均<2%，表明穩(wěn)定性和精密度良好。結(jié)果顯示，板藍(lán)根藥材中，氨酸和脯氨酸含量在游離氨基酸中含量最高，精氨酸、脯氨酸、谷氨酸、組氨酸在水解基酸中含量最高，精氨酸、谷氨酸、組氨酸、天冬氨酸在結(jié)合氨基酸中含量最高，脯氨酸含量最低。

1.1.5 硫代葡萄糖苷及其代謝產(chǎn)物 ?硫代葡萄糖苷及其代謝產(chǎn)物包括表告依春、告依春、黑芥子苷等。毛豐等[13]選擇尿苷和表告依春作為板藍(lán)根顆粒的指標(biāo)成分，應(yīng)用LC-MS/MS法測定大鼠血清中尿苷和表告依春的濃度，研究大鼠服用板藍(lán)根顆粒后的藥物動力學(xué)特征。大鼠透析血清作為基質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，尿苷和表告依春的測定未受到其他內(nèi)源性物質(zhì)的干擾，線性關(guān)系良好，準(zhǔn)確度與精密度高，RSD均低于15%，在有關(guān)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，穩(wěn)定性測試良好。藥動學(xué)參數(shù)計算結(jié)果表明，板藍(lán)根顆粒中表告依春消除率高于單體給藥，吸收低于單體給藥，可能由于制劑中的其他成分影響了表告依春在大鼠體內(nèi)的藥物動力學(xué)行為。

2 藥理作用

2.1 抗病原微生物作用

細(xì)菌、病毒等病原體是感染性疾病的病因，板藍(lán)根作用迅速而持久，具有光譜的抗炎、抗病毒、解熱和提高免疫力等作用，在臨床上用途較廣，用于治療多種急性感染性疾病。程淼等[14]建立流感病毒肺適應(yīng)株感染的肺炎小鼠模型，實驗組給予板藍(lán)根顆粒3.0825 g/（kg·d），每次給藥0.1 mL/10 g，每日灌胃1次，對照組及模型組給予同等劑量的氯化鈉溶液，感染后3、5、7 d，模型組腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素（IL）-6、γ干擾素（IFN-γ）明顯高于對照組，感染后5 d，板藍(lán)根組TNF-α、IL-6明顯低于模型組，IFN-γ明顯高于模型組。光鏡下肺組織HE染色病理結(jié)果顯示，感染后第3、5、7天，板藍(lán)根組病變改善明顯優(yōu)于模型組，且第7天病變程度優(yōu)于第5天。氣管掃描電鏡觀察氣管表面結(jié)果顯示，在感染后第3、5、7天，板藍(lán)根組病變程度明顯優(yōu)于模型組。板藍(lán)根可能抑制炎癥因子的釋放，減輕炎性反應(yīng)病理損傷，促進(jìn)肺組織炎性病變的修復(fù)。

2.2 抗內(nèi)毒素

抗內(nèi)毒素作用是板藍(lán)根和大青葉的一個重要屬性。常曉波[15]將腹制備腔巨噬細(xì)胞小鼠均用LPS刺激，分成對照組和試驗組，對照組未做任何處理，試驗組加藍(lán)根處理細(xì)胞1 h，24 h后，試驗組TNF-α、IL-6的含量明顯低于對照組，抑制率分別為63.67%和74.12%，提示板藍(lán)根可抑制炎性因子的釋放，抗內(nèi)毒素作用明顯。

2.3 抗腫瘤作用

板藍(lán)根所含化學(xué)成分靛玉紅已被證實具有提高免疫及抗腫瘤的作用。周蓉蓉等[16]以乳腺癌MCF-7細(xì)胞為模型，應(yīng)用MTT法、細(xì)胞劃痕實驗、Transwell細(xì)胞侵襲實驗、細(xì)胞黏附實驗檢測癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲、黏附能力，RT-PCR檢測細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶和波形蛋白在各組中的表達(dá)，其結(jié)果顯示，槐耳板藍(lán)根雙向發(fā)酵提取物通過抑制MMP-9和Viementin的基因表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞生長，減弱腫瘤細(xì)胞的侵襲力。動物實驗表明，板藍(lán)根多糖具有抗感染、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等多種生物活性，能增強(qiáng)荷瘤小鼠抗腫瘤免疫反應(yīng)，延長荷瘤小鼠的生存時間[17]。

2.4 免疫調(diào)節(jié)作用

板藍(lán)根提取物中的化學(xué)成分具有較強(qiáng)的免疫活性。板藍(lán)根多糖是中藥板藍(lán)根的有效成分之一，可調(diào)節(jié)Th細(xì)胞的活化和相關(guān)細(xì)胞因子分泌，降低IL-12、IL-4和IFN-γ表達(dá)，且表達(dá)水平與多糖的使用量呈正相關(guān)，因此可通過對Th細(xì)胞的干預(yù)減少活動性結(jié)核分枝桿菌，控制結(jié)核病程[18]。

2.5 抗衰老作用

農(nóng)石生等[19]采用系統(tǒng)的分離方法，從板藍(lán)根中提取黃酮、多糖、多酚及生物堿四種成分，能夠提供活潑的氫質(zhì)子，對超氧陰離子和羥自由基有良好的清除能力，預(yù)防脂質(zhì)過氧化的啟動，阻止氧化過程中鏈鎖反應(yīng)的傳播，阻斷或減緩脂質(zhì)過氧化的進(jìn)行，發(fā)揮抗氧化的作用，未來可將其應(yīng)用在抗衰老、抗高血脂的藥物研究中。

2.6 保護(hù)和預(yù)防金屬中毒

樊永恒等[20]應(yīng)用醋酸鉛誘導(dǎo)雄性小鼠，制備鼠鉛中毒模型，板藍(lán)根多糖治療組分別給予50、100、200 mg/kg等不同濃度的板藍(lán)根多糖，結(jié)果顯示，鉛模型組小鼠體重顯著降低，對照組和板藍(lán)根多糖組日均采食量多于模型組，板藍(lán)根多糖組日均采食量隨板藍(lán)根劑量的增加而明顯增加，自給藥第3周開始，體重顯著增加，模型組小鼠除腎臟指數(shù)顯著降低于對照組，50 mg/kg板藍(lán)根多糖治療組睪丸指數(shù)與100 mg/kg板藍(lán)根多糖治療組肝臟指數(shù)均顯著低于模型組，100 mg/kg板藍(lán)根多糖治療組的腎臟指數(shù)則顯著增加，提示板藍(lán)根多糖對醋酸鉛誘發(fā)的小鼠生長發(fā)育遲緩具有一定的保護(hù)作用。

3 板藍(lán)根的實際臨床應(yīng)用

3.1 呼吸系統(tǒng)疾病

板藍(lán)根作為傳統(tǒng)的抗病毒中藥，在具有疏散之性的同時，兼有寒涼清熱的作用。板藍(lán)根顆粒藥效顯著，臨床上常用于普通感冒、咽喉腫爛及流行性感冒、支氣管肺炎等治療。劉洋等[21]應(yīng)用板藍(lán)根聯(lián)合阿奇霉素治療小兒支原體肺炎，增加藥物的藥學(xué)特性，提高抗菌劑清熱解毒作用，患兒的癥狀明顯改善，治療有效率明顯提高，調(diào)節(jié)機(jī)體炎癥因子水平，減輕炎性反應(yīng)，血清TNF-α、IL-6及IL-8水平下降明顯，且不良反應(yīng)少。石家貴[22]應(yīng)用野菊花、板藍(lán)根、半枝蓮超聲霧化治療慢性咽炎，具有易吸收、刺激小、療效協(xié)同等功效，治療的總有效率高達(dá)93.3%，安全性好。儲開東[23]應(yīng)用磷酸奧司他韋顆粒聯(lián)合復(fù)方板藍(lán)根治療流感樣患兒，患兒的退熱時間、咳嗽消失時間、咽痛消失時間明顯縮短，總有效率提高，不良反應(yīng)少。

3.2 傳染性疾病

《本草綱目》記載： 板藍(lán)根主治“熱病發(fā)斑，熱毒下痢，喉痹、丹毒”等。板藍(lán)根顆粒具有清熱解毒、涼血利咽之功效。腮腺炎病毒除了侵犯腮腺，還能侵犯神經(jīng)系統(tǒng)及各組腺體組織，目前暫無特殊的抗病毒治療方法。王小紅[24]應(yīng)用板藍(lán)根顆粒聯(lián)合利巴韋林注射液治療兒童流行性腮腺炎，患兒的總有效率明顯提高，退熱時間、腮腫消退時間、住院時間明顯縮短，不良反應(yīng)發(fā)生率未見明顯提高。

3.3 消化系統(tǒng)疾病

《本草綱目》記載，板藍(lán)根主治“……火熱口瘡，熱毒下痢……”。現(xiàn)代藥理表明，板藍(lán)根可抑制革蘭陽性菌、革蘭陰性菌、大腸埃希菌生長，增強(qiáng)免疫力。吳輝等[25]采用板藍(lán)根免煎顆粒灌腸聯(lián)合美沙拉嗪治療潰瘍性結(jié)腸炎，IL-6、IL-8、Baron內(nèi)鏡評分及疼痛VAS評分明顯改善，炎性反應(yīng)被迅速控制，疼痛減輕，藥物不良反應(yīng)減少，治療時間縮短，患者的治療有效率明顯提高。

3.4 眼科疾病

板藍(lán)根滴眼液是一種局部中藥抗病毒制劑，具有抗菌、抗病毒、增強(qiáng)免疫功能及清熱解毒之功效，減少眼表抗生素的應(yīng)用。張軍[26]應(yīng)用板藍(lán)根注射液聯(lián)合聚肌胞注射液治療單皰病毒性角膜炎，對照組患眼滴阿昔洛韋滴眼液，口服阿昔洛韋片，結(jié)果顯示，治療組總有效率高于對照組，治療組眼部刺激癥狀及角膜水腫消失時間、潰瘍愈合時間短于對照組，表明板藍(lán)根注射液聯(lián)合聚肌胞注射液治療單皰病毒性角膜炎，可增強(qiáng)療效，縮短病程，提高治愈率。

3.5 婦科疾病

張瓊麗[27]將90例頭瘤病毒感染者隨機(jī)分成A、B、C三組，三組均外用殼聚糖抗菌膜，在此基礎(chǔ)上A組同時內(nèi)服板藍(lán)根顆粒，B組采用物理治療，C組采用期待治療方法，結(jié)果顯示，在第2、3次隨訪，A組轉(zhuǎn)陰率、雜交捕獲二代（HC2）改善率、不良反應(yīng)發(fā)生率明顯優(yōu)于B組和C組，表明殼聚糖抗菌膜聯(lián)合板藍(lán)根顆粒可有效控制乳頭瘤病毒感染，防止炎癥反復(fù)發(fā)生，增加機(jī)體免疫力，效果顯著。

3.6 皮膚科疾病

復(fù)方板藍(lán)根沖劑清熱解毒、活血化瘀、補(bǔ)血生新，阻斷病毒DNA合成，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，抗病毒能力強(qiáng)。許衛(wèi)華[28]應(yīng)用復(fù)方板藍(lán)根沖劑與治疣膠囊治療扁平疣，CD4+降低，CD8+升高，CD4+/CD8+升高，免疫功能明顯好轉(zhuǎn)，明顯縮短了療程，提高了臨床效果，降低了復(fù)發(fā)率。

4 小結(jié)與展望

板藍(lán)根清熱解毒、涼血利咽，具有抗病原微生物、抗內(nèi)毒素、提升機(jī)體免疫功能、抑制血小板聚集、抗癌、抗炎、解毒等藥理作用，臨床應(yīng)用廣泛，相關(guān)制劑也很多，但目前多集中在臨床呼吸系統(tǒng)疾病、消化系統(tǒng)疾病、口腔科疾病及皮膚科疾病等。隨著化學(xué)檢測方法的成熟，通過多種化學(xué)鑒別方法分離板藍(lán)根顆粒不同的化學(xué)組分，深入研究板藍(lán)根化學(xué)成分和生物活性，確定了板藍(lán)根顆粒中起特定藥效作用的組分，其降血脂、增強(qiáng)免疫、抗腫瘤功能等藥理作用有待進(jìn)一步開發(fā)與研究，為今后臨床中西醫(yī)結(jié)合治療高血脂、腫瘤等提供廣闊的應(yīng)用前景。

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