• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    解毒護(hù)肝方對藥物性肝損傷大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信號通路的影響

    2019-09-04 09:25:33王茜王亞芬張一昕石鋮郭秋紅韓雪郝蕾
    中國中醫(yī)藥信息雜志 2019年8期
    關(guān)鍵詞:對乙酰氨基酚

    王茜 王亞芬 張一昕 石鋮 郭秋紅 韓雪 郝蕾

    摘要:目的? 觀察解毒護(hù)肝方對藥物性肝損傷大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信號通路的影響。方法? 采用對乙酰氨基酚灌胃制作大鼠肝損傷模型。將實(shí)驗(yàn)大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為正常組、模型組、陽性對照組和解毒護(hù)肝方高、中、低劑量組,各給藥組給予相應(yīng)藥液灌胃,正常組和模型組給予生理鹽水灌胃。生化分析儀檢測血清AST、ALT活性和總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)含量;RT-PCR和Western blot分別檢測肝組織JNK2基因和蛋白的表達(dá);酶標(biāo)儀檢測肝組織勻漿腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)含量;免疫組化染色觀察Toll樣受體3(TLR3)蛋白表達(dá)。結(jié)果? 與正常組比較,模型組大鼠ALT、AST、DBIL、TNF-α水平顯著升高(P<0.01),JNK2 mRNA和p-JNK2、TLR3蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01);與模型組比較,解毒護(hù)肝方中、低劑量組大鼠AST、ALT活性顯著降低(P<0.05,P<0.01),解毒護(hù)肝方低劑量組大鼠DBIL含量顯著降低(P<0.05),解毒護(hù)肝方高劑量組大鼠TNF-α含量顯著降低(P<0.01),解毒護(hù)肝方高、中劑量組大鼠JNK mRNA和TLR3蛋白表達(dá)均顯著下調(diào)(P<0.05,P<0.01),p-JNK2蛋白表達(dá)有降低趨勢,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論? 解毒護(hù)肝方對藥物性肝損傷大鼠有明顯的保護(hù)作用,以中、低劑量組效果最為明顯,其機(jī)制可能與調(diào)控TLR3/TNF-α/JNK2信號通路有關(guān)。

    關(guān)鍵詞:解毒護(hù)肝方;對乙酰氨基酚;藥物性肝損傷;JNK2;大鼠

    中圖分類號:R285.5??? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A??? 文章編號:1005-5304(2019)08-0060-06

    DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2019.08.013????? 開放科學(xué)(資源服務(wù))標(biāo)識碼(OSID):

    Abstract: Objective To observe the effects of Jiedu Hugan Prescription on TLR3/TNF-α/JNK2 signaling pathway of acetaminophen-induced hepatotoxicity rats. Methods Hepatotoxicity rat model was prepared by intragastric administration of acetaminophen. The rats were randomly divided into normal group, model group, positive control group, Jiedu Hugan Prescription high-, medium- and low-dosage groups. Each administration group was given relevant medicine infusions for gavage, normal group and model group were given normal saline for gavage. At the end of the experiment, the levels of AST, ALT, TBIL and DBIL were detected by biomedical analyzer. JNK2 gene and protein expression in liver tissue were detected by RT-PCR and Western blot. The contents of TNF-α and IL-6 in liver tissue homogenate were detected by enzyme microplate reader. The expression of Toll-like receptor 3 (TLR3) protein was observed by immunohistochemistry. Results Compared with the normal group, the levels of ALT, AST, DBIL and TNF-α in the model group significantly increased (P<0.01), and the expressions of JNK2 mRNA, p-JNK2, and TLR3 protein significantly increased (P<0.01). Compared with the model group, the activities of AST and ALT in Jiedu Hugan Prescription medium- and low-dosage groups significantly decreased (P<0.05, P<0.01); the content of DBIL level in Jiedu Hugan Prescription low-dosage group significantly decreased (P<0.05); the content of TNF-α in Jiedu Hugan Prescription high-dosage group significantly decreased (P<0.01). The expressions of JNK mRNA and TLR3 protein in Jiedu Hugan Prescription high- and medium-dosage groups were significantly down-regulated (P<0.05, P<0.01), and the expression of p-JNK2 protein decreased, without statistical significance (P>0.05). Conclusion Jiedu Hugan Prescription has obvious protective effects on rats with drug-induced hepatotoxicity, and the effects are most obvious in the medium- and low-dosage groups. The mechanism may be related to the regulation of TLR3/TNF-α/JNK2 signaling pathway.

    Keywords: Jiedu Hugan Prescription; acetaminophen; drug-induced hepatotoxicity; JNK2; rats

    臨床上,對乙酰氨基酚(APAP)是應(yīng)用廣泛的解熱鎮(zhèn)痛藥,但其大劑量服用或聯(lián)合使用則會(huì)誘發(fā)藥物性肝損傷,嚴(yán)重者可導(dǎo)致肝衰竭甚至死亡。據(jù)美國食品藥品監(jiān)督管理局統(tǒng)計(jì),過量服用含APAP的藥品是導(dǎo)致患者肝衰竭最主要的因素[1]。JNK2為c-Jun氨基末端激酶(JNK)的亞型之一,幾乎在所有的細(xì)胞中均有表達(dá)。研究表明,JNK2基因敲除對腫瘤壞死因子(TNF)介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用,從而推測JNK2在APAP誘導(dǎo)的肝損傷中發(fā)揮重要作用[2-4]。中醫(yī)學(xué)根據(jù)藥物性肝損傷的臨床特點(diǎn),將其歸屬于“黃疸”“積聚”等范疇,而肝失疏泄、氣滯血瘀、脾失健運(yùn)、濕濁內(nèi)生為其主要的發(fā)病機(jī)制,疏肝健脾、活血祛瘀、解毒除濕為其有效治法?;谏鲜稣J(rèn)識,本課題組自擬解毒護(hù)肝方,該方由逍遙丸、茵陳蒿湯、小柴胡湯三方加減化裁而成,具有疏肝健脾、除濕解毒、活血祛瘀功效,臨床用于防治藥物性肝損傷具有一定的療效。為進(jìn)一步探討其作用機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)采用APAP灌胃制作大鼠肝損傷模型,觀察解毒護(hù)肝方對模型大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信號通路的影響。

    1? 材料與方法

    1.1? 動(dòng)物

    清潔級Wistar大鼠70只,雌雄各半,體質(zhì)量180~220 g,北京維通利華生物技術(shù)有限公司提供,動(dòng)物質(zhì)量合格證號11400700181914,動(dòng)物生產(chǎn)許可證號SCXK(京)2012-0001。飼養(yǎng)于河北省中藥配方顆粒工程技術(shù)研究中心動(dòng)物室(萬級潔凈屏障系統(tǒng)),溫度(23±2)℃,相對濕度60%~70%,12 h明暗交替,自由攝食飲水。

    1.2? 藥物

    解毒護(hù)肝方(柴胡10 g,醋香附15 g,白術(shù)10 g,炒白芍15 g,五味子10 g,黃芪15 g,茵陳15 g,黃芩10 g,丹參15 g,楮實(shí)子10 g,田基黃15 g,甘草10 g),飲片均為免煎顆粒,四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司。水飛薊賓膠囊(每粒含水飛薊賓35 mg,批號750709172),天津天士力圣特制藥有限公司;對乙酰氨基酚片(每片含APAP 0.5 g,批號016171002),石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司。

    1.3? 主要試劑與儀器

    AST測定試劑盒(批號AUZ3645)、ALT測定試劑盒(批號AUZ3689),貝克曼庫爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司;總膽紅素(TBIL)試劑盒(批號A005)、直接膽紅素(DBIL)試劑盒(批號A006),長春匯力生物技術(shù)有限公司;TNF-α(批號T15030357)、白細(xì)胞介素-6(IL-6,批號S01030358),武漢華美生物工程有限公司;Trizol(批號139603),Invitrogen公司;TIANScript cDNA第一鏈合成試劑盒(批號P5011)、SuperReal PreMix Plus(SYBR Green,批號Q5922),天根生化科技(北京)有限公司;JNK2兔多抗、p-JNK2(Tyr185)兔單抗,Cell Signaling Technology公司;β-actin小鼠單抗、辣根酶標(biāo)記山羊抗兔IgG(H+L)、Peroxidase-Conjugated Goat anti-Rabbit IgG(H+L)、辣根酶標(biāo)記山羊抗小鼠IgG(H+L)、Peroxidase-Conjugated Goat anti-Mouse IgG(H+L)、TLR3兔多抗(批號00009333)、二抗(Goat,批號K186817A),DAB(批號K186916P),北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。Humalyzer2000半自動(dòng)生化儀(德國豪邁),DP73數(shù)碼顯微鏡(日本Olympus),HMIAS-2000顯微圖像分析系統(tǒng)(武漢同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)),酶標(biāo)儀(BioTek,ELx800),熒光定量PCR儀ABI7500(Applied Biosystems),電泳儀(北京百晶生物技術(shù)有限公司),生物分光光度計(jì)(Eppendorf),電泳槽(美國BioRad),轉(zhuǎn)移脫色搖床(海門其林貝爾儀器制造公司),Tanon Gis電泳圖像分析系統(tǒng)(Tanon1600),Quantity one分析軟件(Bio Rad Technical Service Department)。

    1.4? 造模、分組和給藥

    大鼠每日灌胃APAP 1200 mg/kg藥液(40 ℃生理鹽水配制)1次,連續(xù)30 d,制作大鼠肝損傷模型[5-6]。將成模大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為模型組、陽性對照組和解毒護(hù)肝方高、中、低劑量組,每組12只,另取10只大鼠為正常組,雌雄各半。解毒護(hù)肝方高、中、低劑量組分別給予63、31.5、15.75 g原藥材/kg藥液灌胃,陽性對照組給予水飛薊賓(44 mg/kg)藥液灌胃,正常組和模型組給予等體積生理鹽水灌胃。給藥體積均為1 mL/100 g,每日1次,連續(xù)30 d。實(shí)驗(yàn)期間每7 d稱重1次,自由攝食飲水。

    1.5? 標(biāo)本制備

    實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,大鼠3.5%水合氯醛(1 mL/100 g)腹腔注射麻醉,腹主動(dòng)脈取血,全血分別置于清潔試管中,4000 r/min離心10 min,分離血清,分裝置于-80 ℃冰箱保存,待檢相關(guān)肝功能指標(biāo)。取血后迅速取固定部位肝組織3份,1份置于4%多聚甲醛液中固定,用于肝組織病理形態(tài)觀察,另2份置于凍存管,液氮凍存,-80 ℃冰箱保存,用于JNK2基因和蛋白的表達(dá)、肝勻漿上清液TNF-α和IL-6含量的測定。

    1.6? 指標(biāo)檢測

    1.6.1? 一般觀察

    給藥后觀察大鼠精神狀態(tài)、行為活動(dòng)、飲食情況、二便情況和皮膚毛色。

    1.6.2? 生化指標(biāo)檢測

    應(yīng)用半自動(dòng)生化分析儀檢測血清AST、ALT、TBIL、DBIL含量;應(yīng)用酶標(biāo)儀檢測肝勻漿TNF-α和IL-6的含量。上述操作均按試劑盒說明書進(jìn)行。

    1.6.3? 病理形態(tài)觀察

    取4%多聚甲醛溶液固定肝組織,常規(guī)脫水、包埋、切片、HE染色,鏡下觀察。

    1.6.4? RT-PCR檢測肝組織JNK2基因的表達(dá)

    用Trizol提取組織樣本中總RNA。取5 μL RNA,1%瓊脂糖凝膠電泳,以檢測RNA的完整性。引物序列由Primer5.0軟件設(shè)計(jì)。β-actin上游引物5'-CCT CCTGAACTTGAGGCAGTTTA-3',下游引物5'-CTCT GGGGCTGTCAGTCTTG-3';JNK2上游引物5'-GACA GTAAAAGCGATGGC-3',下游引物5'-TTGGTTCTG AAAAGGACG-3'。擴(kuò)增片段均為638 bp。用TIANScript RT KIT進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,實(shí)驗(yàn)操作按產(chǎn)品說明書進(jìn)行。用熒光定量PCR儀,采用2-ΔΔCt法進(jìn)行數(shù)據(jù)相對定量分析,ΔΔCt=(待測組目的基因平均Ct值-待測組內(nèi)參基因平均Ct值)÷(對照組目的基因平均Ct值-對照組內(nèi)參基因平均Ct值)。

    1.6.5? Western blot檢測肝組織JNK2蛋白的表達(dá)

    取約100 mg組織加液氮研磨成粉末,加入1 mL裂解液(裂解液中含有臨時(shí)加入的10 μL蛋白酶抑制劑混合物),研磨,直至成為液體,轉(zhuǎn)至EP管,冰上靜置10 min,4 ℃、12 000 r/min離心10 min。根據(jù)蛋白定量結(jié)果,加入相應(yīng)體積總蛋白樣品與5×蛋白質(zhì)凝膠電泳上樣緩沖液,混合,95 ℃變性10 min,將樣品加至凝膠孔中,進(jìn)行凝膠電泳。凝膠電泳結(jié)束后,將凝膠上分離到的蛋白條帶轉(zhuǎn)印至PVDF膜,然后分別用非標(biāo)記一抗及辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗對其進(jìn)行孵育、檢測。取上清液,加入等體積2×SDS上樣緩沖液,100 ℃中煮沸5 min。進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳,每孔上樣等量總蛋白。利用水浴式電印跡法將蛋白轉(zhuǎn)移至膜上。室溫振蕩封閉膜1 h,將一抗用封閉液稀釋1000倍;將封閉后的膜直接放入一抗工作液中,4 ℃反應(yīng)過夜,將反應(yīng)膜放入平皿中,用1×TBST洗滌3次,每次10 min,洗凈未結(jié)合的一抗。將二抗用1×TBST稀釋3000倍;將洗滌后的一抗反應(yīng)膜放入二抗工作液中(室溫、避光緩慢搖動(dòng))作用60 min。用1×TBST洗滌3次,每次10 min,洗去游離二抗。按1∶1(V/V)混合ECL試劑盒中2種液體,再將混合液均勻鋪在PVDF膜表面,室溫作用4 min。抖掉膜上液體,將其放入鋪有保鮮膜的曝光盒,曝光并洗片,最后采用Tanon1600對膠片進(jìn)行掃描,用Tanon Gis軟件分析,系統(tǒng)自動(dòng)生成灰度值。

    1.6.6? 免疫組化檢測肝組織Toll樣受體3蛋白的表達(dá)

    采用免疫組化方法觀察,每組取6只大鼠,每例測5個(gè)視野。由計(jì)算機(jī)算出所測陽性反應(yīng)物相對含量的積分光密度(IOD)和平均光密度(MOD)。

    1.7? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS13.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以—x±s表示,采用方差分析,方差齊用LSD法檢驗(yàn),方差不齊用DunnettT3檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2? 結(jié)果

    2.1? 一般狀況

    正常組大鼠毛發(fā)滑順、有光澤,精神狀態(tài)良好,行動(dòng)靈活,二便正常;模型組大鼠體質(zhì)量減輕,毛發(fā)無光澤,精神狀態(tài)欠佳,喜臥;各給藥組大鼠毛發(fā)光澤度、精神狀態(tài)、體質(zhì)量及行動(dòng)靈活性均有改善。

    2.2? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠血清肝功能指標(biāo)的影響

    與正常組比較,模型組大鼠ALT、AST、DBIL水平顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與模型組比較,陽性對照組和解毒護(hù)肝方中、低劑量組大鼠ALT、AST活性顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01),解毒護(hù)肝方低劑量組大鼠DBIL含量顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與解毒護(hù)肝方高劑量組比較,解毒護(hù)肝方中劑量組大鼠ALT、AST活性顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,P<0.01)。結(jié)果見表1。

    2.3? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠肝組織病理形態(tài)的影響

    正常組大鼠肝細(xì)胞排列整齊,圍繞中央靜脈放射狀排列,細(xì)胞核形態(tài)正常,胞漿均勻,無變性及壞死;模型組大鼠肝細(xì)胞排列紊亂,細(xì)胞呈現(xiàn)廣泛水腫變性,散在少量點(diǎn)狀壞死;解毒護(hù)肝方高、中、低劑量組較模型組大鼠細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂有不同程度的改善,局部細(xì)胞水腫變性,未觀察到點(diǎn)狀壞死,以中、低劑量組改善尤為明顯。結(jié)果見圖1。

    2.4? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠肝組織腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6含量的影響

    與正常組比較,模型組大鼠肝組織TNF-α含量顯著升高(P<0.01);與模型組比較,陽性對照組和解毒護(hù)肝方高劑量組大鼠肝組織TNF-α含量顯著降低(P<0.05,P<0.01);各給藥組大鼠肝組織IL-6含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)果見表2。

    2.5? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠肝組織JNK2基因和蛋白表達(dá)的影響

    與正常組比較,模型組大鼠肝組織JNK2 mRNA和p-JNK2蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01);與模型組比較,解毒護(hù)肝方各劑量組大鼠肝組織JNK2 mRNA表達(dá)顯著降低(P<0.01),p-JNK2蛋白表達(dá)有降低趨勢,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與陽性對照組比較,解毒護(hù)肝方中、低劑量組大鼠肝組織JNK2 mRNA和p-JNK2蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05,P<0.01)。結(jié)果見表3、圖2。

    2.6? 解毒護(hù)肝方對模型大鼠肝組織Toll樣受體3蛋白表達(dá)的影響

    與正常組比較,模型組大鼠肝組織TLR3蛋白IOD、MOD值均顯著升高(P<0.01);與模型組比較,陽性對照組和解毒護(hù)肝方高、中劑量組大鼠肝組織TLR3蛋白IOD、MOD值均顯著降低(P<0.01);與解毒護(hù)肝方低劑量組比較,陽性對照組和解毒護(hù)肝方高、中劑量組大鼠肝組織TLR3蛋白IOD、MOD值均顯著降低(P<0.05,P<0.01)。結(jié)果見表4、圖3。

    3? 討論

    臨床上常用ALT和AST作為反映肝細(xì)胞損傷程度的生化指標(biāo)。正常情況下,二者在血清中含量很低,但當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷時(shí),細(xì)胞發(fā)生變性及壞死,細(xì)胞膜通透性增加或發(fā)生崩解,ALT、AST釋放入血,血中ALT、AST活性升高。

    DBIL能溶于水,可通過腎臟隨尿液排出體外。在發(fā)生廣泛的肝損傷或直接抑制膽汁轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白時(shí)會(huì)使TBIL含量升高。當(dāng)發(fā)生紅細(xì)胞破壞過多或肝細(xì)胞對膽紅素出現(xiàn)轉(zhuǎn)運(yùn)、結(jié)合、排泄缺陷以及膽管阻塞時(shí),亦可導(dǎo)致膽紅素代謝障礙。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,模型組大鼠肝組織ALT、AST、DBIL水平顯著升高,提示肝損傷模型建立成功;與模型組比較,陽性對照組和解毒護(hù)肝方中、低劑量組均能顯著降低大鼠肝組織ALT、AST活性,解毒護(hù)肝方低劑量組又能顯著降低大鼠肝組織DBIL含量;各給藥組均能不同程度降低大鼠肝組織TBIL含量,但各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。提示各給藥組對損傷的肝細(xì)胞均有不同程度的改善作用,尤以解毒護(hù)肝方中、低劑量組效果為佳。

    有研究顯示,炎癥因子參與了APAP所致肝損傷的發(fā)生、發(fā)展過程。主要由APAP代謝產(chǎn)物N-乙酰-對-苯醌亞胺與肝臟中蛋白酶結(jié)合形成毒性物質(zhì),刺激肝Kupffer細(xì)胞產(chǎn)生并釋放TNF-α、IL-6等炎癥因子,其中TNF-α主要參與調(diào)控炎癥發(fā)生和細(xì)胞凋亡,被認(rèn)為是炎癥反應(yīng)過程中出現(xiàn)最早的炎癥介質(zhì)[7-8]。而JNK2在TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中及APAP所致的肝損傷中發(fā)揮重要作用[9]。有研究顯示,JNK2基因缺失的肝細(xì)胞比野生細(xì)胞或JNK1基因缺失肝細(xì)胞更耐TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,且對APAP引起的肝損傷表現(xiàn)出部分的保護(hù)作用[10-12]。也有研究發(fā)現(xiàn),TLR3基因敲除小鼠也能免疫APAP所致的肝損傷,TLR3能增強(qiáng)TNF-α的表達(dá)及磷酸化JNK在APAP傷肝臟中的表達(dá)[13]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,各組大鼠肝組織IL-6水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),模型組大鼠肝組織TNF-α含量、JNK2基因和蛋白表達(dá)及TLR3的表達(dá)顯著升高,解毒護(hù)肝方各劑量組均能不同程度的降低肝組織TNF-α含量,下調(diào)肝組織JNK2基因和蛋白表達(dá),減少肝組織TLR3的陽性表達(dá),其中解毒護(hù)肝方高劑量組能顯著降低肝組織TNF-α含量,解毒護(hù)肝方高、中劑量組均能顯著降低TLR3的陽性表達(dá),解毒護(hù)肝方各劑量組均能顯著降低JNK2的基因表達(dá),而對p-JNK2蛋白表達(dá)僅有降低趨勢,差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可能是由于本實(shí)驗(yàn)中APAP所致肝損傷對JNK2的影響尚處在轉(zhuǎn)錄階段,從而未產(chǎn)生明顯蛋白水平的變化,后續(xù)擬增加造模劑量和延長給藥時(shí)間繼續(xù)探討其對JNK2蛋白水平的影響。

    綜上,本研究結(jié)果表明,解毒護(hù)肝方各劑量組均有一定的護(hù)肝作用,其機(jī)制主要通過抑制TLR3的表達(dá),從而抑制促炎因子TNF-α的產(chǎn)生,下調(diào)JNK2基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)護(hù)肝作用。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,解毒護(hù)肝方中、低劑量組能顯著降低血清肝功能指標(biāo),而解毒護(hù)肝方高劑量組對肝組織TNF-α含量、JNK2基因表達(dá)有很好的調(diào)節(jié)作用,解毒護(hù)肝方高、中劑量組對TLR3的表達(dá)有較好的調(diào)節(jié)作用,結(jié)合肝組織病理形態(tài)學(xué)變化,解毒護(hù)肝方高劑量組肝臟病理變化較中、低劑量組嚴(yán)重。本實(shí)驗(yàn)中解毒護(hù)肝方低劑量為臨床等效劑量,中劑量為等效劑量的2倍,高劑量為等效劑量的4倍,筆者認(rèn)為,基于臨床合理安全用藥的原則,雖然高劑量組對早期炎癥因子和基因水平均有較好的調(diào)節(jié)作用,但由于劑量較大也加重了肝臟的負(fù)擔(dān),故在中、低劑量也有一定療效的情況下,選擇相對較低的劑量治療疾病更符合臨床安全用藥的需求。

    參考文獻(xiàn):

    [1] JAESCHKE H. Acetaminophen:dose-dependent drug hepatotoxicity and acute liver failure in patients[J]. Digestive Diseases,2015, 33(4):464-471.

    [2] CUBERO F J, ZOUBEK M E, HU W, et al. Combined activities of JNK1 and JNK2 in hepatocytes protect against toxic liver injury[J]. Gastroenterology,2016,150(4):968-981.

    [3] SEKI E, BRENNER D A, KARIN M, et al. C57BL/6 substrains of genetically engineered mice and wild-type controls can lead to confounding results as it did in studies of JNK2 in acetaminophen and concanavalin a liver injury[J]. Chem Res Toxicol,2011,24(6):794-796.

    [4] MOHAMMED B, MIDHUN C, CHAKRABORTY M, et al. Protective role of c-Jun N-terminal kinase 2 in acetaminophen induced liver injury[J]. Biochem Biophys Res Commun,2008,374(1):6-10.

    [5] 張蕾,詹俊,伍百賀,等.TNF-α在對乙酰氨基酚所致大鼠藥物性肝損傷中的作用[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2014,23(10):1181-1183.

    [6] 王雁,湯納平,富欣,等.對乙酰氨基酚誘導(dǎo)的急性肝損傷大鼠血漿miR-122表達(dá)的變化[J].中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志,2013,27(5):854- 859.

    [7] 張蕾,詹俊,伍百賀,等.TNF-α在對乙酰氨基酚所致大鼠藥物性肝損傷中的作用[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2014,23(10):1181-1183.

    [8] KNOCKAERT L, DESCATOIRE V, VADROT N, et al. Mitochondrial CYP2E1 is sufficient to mediate oxidative stress and cytotoxicity induced by ethanol and acetaminophen[J]. Toxicol in Vitro, 2011,25(2):475-484.

    [9] JAVELAUD D, BESANCON F. NF-κB activation results in rapid inactivation of JNK in TNF-α-treated Ewing sarcoma cells: a mechanism for the anti-apoptotic effect of NF-κB[J]. Oncogene, 2001,20(32):4365-4372.

    [10] WAGNER E F, NEBREDA A R. Signal integration by JNK and p38 MAPK pathways in cancer development[J]. Nat Rev Cancer,2009,9(8):537-549.

    [11] KODAMA Y, TAURA K, MIURA K, et al. Antiapoptotic effect of c-Jun N-terminal Kinase-1 through Mcl-1 stabilization in TNF-induced hepatocyte apoptosis[J]. Gastroenterology,2009,136(4):1423-1434.

    [12] GUNAWAN B K, LIU Z X, HAN D, et al. c-Jun n-terminal kinase plays a major role in murine acetaminophen hepatotoxicity[J]. Gastroenterology,2006,131(1):165-178.

    [13] CAVASSANI K A, MOREIRA A P, HABIEL D, et al. Toll like receptor 3 plays a critical role in the progression and severity of acetaminophen-induced hepatotoxicity[J]. PLoS One,2013,8(6):e65899.

    (收稿日期:2019-01-18)

    (修回日期:2019-03-21;編輯:華強(qiáng))

    猜你喜歡
    對乙酰氨基酚
    對乙酰氨基酚vs布洛芬,退熱止痛誰更強(qiáng)
    藥物與人(2023年1期)2024-01-15 03:32:15
    對乙酰氨基酚你真的了解嗎
    北化大生物合成對乙酰氨基酚
    山西化工(2021年5期)2021-01-25 15:00:58
    紫外光譜結(jié)合向量扣減方法快速測定感冒藥物中對乙酰氨基酚和鹽酸偽麻黃堿
    吃感冒藥進(jìn)了ICU 全因做錯(cuò)一件事
    保健與生活(2020年4期)2020-03-02 02:27:36
    蓑衣蓮?fù)蛩狨σ阴0被诱T導(dǎo)小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用
    吃感冒藥是否暗藏風(fēng)險(xiǎn)
    吃感冒藥是否暗藏風(fēng)險(xiǎn)
    妊娠期間使用對乙酰氨基酚會(huì)增大兒童發(fā)生哮喘的風(fēng)險(xiǎn)
    復(fù)方氨酚烷胺膠囊中對乙酰氨基酚的溶出度測定方法探討
    黄色欧美视频在线观看| 国产在视频线精品| 成年女人永久免费观看视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 久久精品夜色国产| 国产精品精品国产色婷婷| 国产精品国产三级专区第一集| 欧美高清成人免费视频www| 国产精品熟女久久久久浪| 美女黄网站色视频| 日本免费在线观看一区| 我的女老师完整版在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲不卡免费看| 岛国在线免费视频观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 特级一级黄色大片| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产精品久久视频播放| 久久6这里有精品| 亚洲伊人久久精品综合 | 免费观看在线日韩| 国产乱人视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 网址你懂的国产日韩在线| 国产精品永久免费网站| 最近手机中文字幕大全| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 日韩欧美三级三区| 亚洲国产高清在线一区二区三| 欧美成人午夜免费资源| 成人漫画全彩无遮挡| 在线观看一区二区三区| 大香蕉久久网| 真实男女啪啪啪动态图| 久久久久网色| 变态另类丝袜制服| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产精品99久久久久久久久| 老司机福利观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲伊人久久精品综合 | 色噜噜av男人的天堂激情| 在线天堂最新版资源| 青春草视频在线免费观看| 亚洲人与动物交配视频| 综合色av麻豆| 欧美又色又爽又黄视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲天堂国产精品一区在线| 麻豆成人午夜福利视频| 国产视频首页在线观看| 中文欧美无线码| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 成年av动漫网址| 日本一二三区视频观看| 淫秽高清视频在线观看| 一级毛片电影观看 | 男女下面进入的视频免费午夜| 免费观看在线日韩| 中文资源天堂在线| 国产精品永久免费网站| 国产人妻一区二区三区在| 嫩草影院新地址| 亚州av有码| 午夜福利高清视频| 免费av观看视频| 国产精品一二三区在线看| 天天躁日日操中文字幕| 日韩精品有码人妻一区| 免费观看在线日韩| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产精品伦人一区二区| 日韩欧美精品免费久久| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲国产精品sss在线观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 三级国产精品片| 丰满少妇做爰视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 日韩一本色道免费dvd| 三级经典国产精品| 青春草视频在线免费观看| 18禁动态无遮挡网站| 午夜精品在线福利| 搡老妇女老女人老熟妇| 色综合亚洲欧美另类图片| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产午夜精品论理片| 丝袜喷水一区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 国产探花极品一区二区| 亚洲在线自拍视频| 国产精品一二三区在线看| 午夜福利视频1000在线观看| 日本免费a在线| 精品一区二区免费观看| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 少妇高潮的动态图| 久久这里有精品视频免费| 九九爱精品视频在线观看| 国产成人aa在线观看| 精品久久久久久久末码| 成年女人永久免费观看视频| 日韩精品有码人妻一区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 特大巨黑吊av在线直播| 1024手机看黄色片| 69av精品久久久久久| 亚洲av福利一区| 久久久午夜欧美精品| 人体艺术视频欧美日本| 日韩成人伦理影院| 一级爰片在线观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 99国产精品一区二区蜜桃av| 一级毛片电影观看 | 久久6这里有精品| 欧美性猛交黑人性爽| 亚洲伊人久久精品综合 | 丰满乱子伦码专区| 欧美bdsm另类| 国产亚洲5aaaaa淫片| 国产熟女欧美一区二区| 国产探花极品一区二区| 午夜视频国产福利| 国产高清三级在线| 特大巨黑吊av在线直播| 99热6这里只有精品| 午夜免费激情av| 卡戴珊不雅视频在线播放| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲国产精品成人综合色| 我的女老师完整版在线观看| 国产毛片a区久久久久| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美又色又爽又黄视频| 国产精品一及| 亚洲av免费在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲内射少妇av| 色哟哟·www| 青春草亚洲视频在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 国产在线一区二区三区精 | 日日啪夜夜撸| 亚洲怡红院男人天堂| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 日本欧美国产在线视频| 成人亚洲精品av一区二区| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产三级在线视频| 国产精品三级大全| 嫩草影院入口| 午夜a级毛片| 久久热精品热| 特级一级黄色大片| 91久久精品电影网| 亚洲电影在线观看av| 夫妻性生交免费视频一级片| 天天一区二区日本电影三级| 少妇的逼水好多| av专区在线播放| 亚洲精品一区蜜桃| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲欧美日韩高清专用| 性色avwww在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 超碰av人人做人人爽久久| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲国产精品专区欧美| 中文欧美无线码| 国产亚洲5aaaaa淫片| 久久久亚洲精品成人影院| 成人毛片60女人毛片免费| 国产免费福利视频在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| 看十八女毛片水多多多| 九草在线视频观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产成人a区在线观看| 老女人水多毛片| 国产av一区在线观看免费| 亚洲久久久久久中文字幕| 欧美成人精品欧美一级黄| 日本黄色片子视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲精品一区蜜桃| 午夜激情欧美在线| 99久久精品国产国产毛片| 亚洲五月天丁香| 亚洲国产成人一精品久久久| 联通29元200g的流量卡| 久久久久久久久久久丰满| 99久久精品一区二区三区| 国产精品一区二区在线观看99 | 国产人妻一区二区三区在| 久久久国产成人免费| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 99久国产av精品国产电影| 日韩亚洲欧美综合| 男人和女人高潮做爰伦理| 啦啦啦韩国在线观看视频| 在线a可以看的网站| 欧美日本视频| 秋霞伦理黄片| 国产成人午夜福利电影在线观看| av专区在线播放| av专区在线播放| kizo精华| 中文资源天堂在线| 特级一级黄色大片| www.av在线官网国产| .国产精品久久| 最近中文字幕2019免费版| 国产熟女欧美一区二区| 人妻夜夜爽99麻豆av| 中文字幕av成人在线电影| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲av中文av极速乱| a级毛片免费高清观看在线播放| 能在线免费观看的黄片| 99热这里只有精品一区| 亚洲精品456在线播放app| 日本三级黄在线观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 欧美高清成人免费视频www| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 欧美不卡视频在线免费观看| 最近中文字幕2019免费版| 全区人妻精品视频| 九九在线视频观看精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 国产一区有黄有色的免费视频 | 久久久色成人| 伊人久久精品亚洲午夜| www.av在线官网国产| 欧美区成人在线视频| 欧美精品一区二区大全| 久久热精品热| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 久久久久久伊人网av| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 我要搜黄色片| 好男人视频免费观看在线| 久久久久网色| 亚洲国产成人一精品久久久| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产又色又爽无遮挡免| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲经典国产精华液单| 国产精品久久久久久久电影| 日韩av在线免费看完整版不卡| 欧美性猛交黑人性爽| 两个人视频免费观看高清| 99久久精品国产国产毛片| 国产精品一二三区在线看| 午夜久久久久精精品| av在线亚洲专区| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 毛片女人毛片| 麻豆av噜噜一区二区三区| 内地一区二区视频在线| 国产伦精品一区二区三区四那| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 午夜精品在线福利| 亚洲av不卡在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产淫语在线视频| 国产亚洲精品av在线| 久久精品国产亚洲av涩爱| 精华霜和精华液先用哪个| 国产视频首页在线观看| 观看美女的网站| 久久久久九九精品影院| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 免费看日本二区| 国产又黄又爽又无遮挡在线| av专区在线播放| 大香蕉久久网| av在线蜜桃| 嘟嘟电影网在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 一个人看视频在线观看www免费| 日本免费在线观看一区| 国产精品福利在线免费观看| 日本午夜av视频| 久久久久久久久大av| 乱人视频在线观看| 亚洲va在线va天堂va国产| 韩国av在线不卡| 亚洲不卡免费看| 人人妻人人看人人澡| 国产老妇女一区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 久久久久久久久中文| 免费看光身美女| 一区二区三区高清视频在线| 在线观看一区二区三区| 久久久久久久午夜电影| 久久韩国三级中文字幕| 免费黄色在线免费观看| 九九爱精品视频在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| 最近中文字幕2019免费版| 99在线人妻在线中文字幕| 一区二区三区乱码不卡18| 免费黄网站久久成人精品| 男的添女的下面高潮视频| 日本av手机在线免费观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 亚洲三级黄色毛片| 99视频精品全部免费 在线| 蜜臀久久99精品久久宅男| 成年女人永久免费观看视频| 日本欧美国产在线视频| 国产av一区在线观看免费| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| eeuss影院久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 七月丁香在线播放| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 高清av免费在线| 青青草视频在线视频观看| 亚洲精品456在线播放app| 国产精品1区2区在线观看.| 中文天堂在线官网| www日本黄色视频网| 黑人高潮一二区| 日韩欧美三级三区| 欧美性感艳星| 午夜福利在线观看吧| 简卡轻食公司| 国产精品永久免费网站| 国产又色又爽无遮挡免| h日本视频在线播放| 男人舔奶头视频| 99热网站在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 99热6这里只有精品| 99久久精品一区二区三区| 日韩精品青青久久久久久| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产精品久久视频播放| 国产av一区在线观看免费| .国产精品久久| 国产精品av视频在线免费观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 日本一本二区三区精品| 91狼人影院| 亚洲欧洲国产日韩| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 直男gayav资源| 九草在线视频观看| 91av网一区二区| 嫩草影院精品99| 水蜜桃什么品种好| 亚洲三级黄色毛片| 午夜日本视频在线| 国产在视频线精品| 欧美变态另类bdsm刘玥| 成人国产麻豆网| 少妇熟女欧美另类| 天堂中文最新版在线下载 | 国产黄片视频在线免费观看| 青春草视频在线免费观看| 91久久精品电影网| 麻豆国产97在线/欧美| 人妻少妇偷人精品九色| 内射极品少妇av片p| 中文天堂在线官网| 欧美性猛交黑人性爽| 欧美xxxx性猛交bbbb| 午夜激情欧美在线| 欧美最新免费一区二区三区| 22中文网久久字幕| 久久人人爽人人爽人人片va| 午夜福利视频1000在线观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| av播播在线观看一区| 一区二区三区四区激情视频| 国产精品一二三区在线看| 欧美最新免费一区二区三区| 欧美日韩在线观看h| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 一区二区三区四区激情视频| 欧美丝袜亚洲另类| 国产成人精品一,二区| 22中文网久久字幕| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 亚洲成人久久爱视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 日本与韩国留学比较| 日日干狠狠操夜夜爽| 天堂网av新在线| 国产成人91sexporn| 国产麻豆成人av免费视频| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美色视频一区免费| 国产欧美日韩精品一区二区| 久久国产乱子免费精品| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 黄片wwwwww| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产午夜精品论理片| 久久欧美精品欧美久久欧美| 久久久久久久久大av| 亚洲综合精品二区| www.av在线官网国产| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 一本一本综合久久| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲高清免费不卡视频| 麻豆成人av视频| 成人三级黄色视频| 99热网站在线观看| 久久久久九九精品影院| 欧美成人免费av一区二区三区| 尾随美女入室| 欧美日本亚洲视频在线播放| 精品一区二区免费观看| 热99re8久久精品国产| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 日本wwww免费看| 在线免费观看不下载黄p国产| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 欧美最新免费一区二区三区| 日韩欧美三级三区| 美女高潮的动态| 夫妻性生交免费视频一级片| 成人特级av手机在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 日本黄色片子视频| av免费在线看不卡| 久久人人爽人人片av| 国产精品不卡视频一区二区| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 网址你懂的国产日韩在线| 婷婷六月久久综合丁香| 欧美成人a在线观看| 色尼玛亚洲综合影院| 久久亚洲国产成人精品v| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 亚洲av男天堂| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲国产高清在线一区二区三| 观看免费一级毛片| 中文字幕av在线有码专区| 一个人看的www免费观看视频| 永久网站在线| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 欧美一区二区国产精品久久精品| 亚洲五月天丁香| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 久久久色成人| 禁无遮挡网站| 男人狂女人下面高潮的视频| 干丝袜人妻中文字幕| 禁无遮挡网站| 秋霞伦理黄片| 亚洲乱码一区二区免费版| 色噜噜av男人的天堂激情| 99国产精品一区二区蜜桃av| 在线免费观看不下载黄p国产| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久人人爽人人片av| 看片在线看免费视频| 国产午夜精品论理片| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 久久久午夜欧美精品| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 欧美一级a爱片免费观看看| 三级经典国产精品| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 老师上课跳d突然被开到最大视频| 精品久久久噜噜| 国产精品不卡视频一区二区| 人人妻人人看人人澡| 特级一级黄色大片| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 欧美三级亚洲精品| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 国产亚洲最大av| 国产免费视频播放在线视频 | 国产亚洲精品av在线| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 一级二级三级毛片免费看| 99热6这里只有精品| 亚洲国产成人一精品久久久| 老司机影院毛片| 最近最新中文字幕免费大全7| 人妻系列 视频| 国产又色又爽无遮挡免| 热99在线观看视频| 国产乱来视频区| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 日韩av不卡免费在线播放| 两个人视频免费观看高清| 最近手机中文字幕大全| 国产大屁股一区二区在线视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 午夜福利网站1000一区二区三区| 99热网站在线观看| 两个人视频免费观看高清| videos熟女内射| av在线蜜桃| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产视频首页在线观看| 国产亚洲一区二区精品| 真实男女啪啪啪动态图| 日本五十路高清| 成人午夜高清在线视频| 99久国产av精品| 亚洲在线自拍视频| 国产av在哪里看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产视频内射| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 亚洲av免费在线观看| 国产精品一区www在线观看| 色综合色国产| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美97在线视频| 亚洲精品日韩av片在线观看| 美女cb高潮喷水在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 日日啪夜夜撸| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 精品人妻熟女av久视频| 成人鲁丝片一二三区免费| 内射极品少妇av片p| 亚洲自拍偷在线| 精品欧美国产一区二区三| 国产淫语在线视频| 在线a可以看的网站| 91狼人影院| 亚洲欧美精品专区久久| 一个人观看的视频www高清免费观看| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产人妻一区二区三区在| 中文字幕亚洲精品专区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产成人精品久久久久久| 久久99热这里只频精品6学生 | 日韩欧美三级三区| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产在视频线在精品| 日韩欧美在线乱码| 日韩欧美精品v在线| 国产黄片视频在线免费观看| 免费看av在线观看网站| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产黄色小视频在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲av成人精品一二三区| av免费在线看不卡| 国产亚洲一区二区精品| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 在线观看66精品国产| 亚洲欧美精品专区久久| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 黄色日韩在线| 99九九线精品视频在线观看视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲av中文av极速乱| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 精品午夜福利在线看| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产色爽女视频免费观看| 国产又色又爽无遮挡免| 内射极品少妇av片p| 国产探花极品一区二区| 久久精品91蜜桃| 国产三级中文精品| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲精品成人久久久久久| 日韩制服骚丝袜av| 爱豆传媒免费全集在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 少妇高潮的动态图| 听说在线观看完整版免费高清| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲国产欧美人成| 免费黄色在线免费观看| 秋霞伦理黄片| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 亚洲美女视频黄频| 直男gayav资源| 国产 一区精品| 欧美3d第一页| 久久久午夜欧美精品| 久久6这里有精品| 人人妻人人看人人澡| 欧美bdsm另类| 亚洲久久久久久中文字幕| 日韩一本色道免费dvd|