早發(fā)冠心病患者血清補體C3、C4水平與LDL-C的相關性分析

林瑞挺，蔡詩云，潘志瓊，陳浩然，陳 聰，張海峰

（1.茂名市人民醫(yī)院心內(nèi)一科，廣東茂名525000；

2.中山大學孫逸仙紀念醫(yī)院心內(nèi)科//廣東省心電生理與心律失常重點實驗室，廣東廣州510120）

冠心病是危害人類健康的常見心血管疾病［1-2］。近年來國內(nèi)外研究表明年輕人群的心血管死亡率呈增加趨勢［3］，早發(fā)冠心?。╬remature coronary artery disease，PCAD）是指發(fā)病年齡男性≤55歲，女性≤65歲的冠心病［4］，是一種特殊的冠心病類型，多表現(xiàn)為無先兆的急性冠脈綜合征［5-7］，其冠狀動脈病變發(fā)生早，病程發(fā)展迅速，值得引起重視。低密度脂蛋白（LDL-C）已明確為冠心病的獨立危險因素之一，血漿中LDL-C是運輸內(nèi)源性膽固醇的主要載體，正常情況下LDL-C是以非氧化［4］攜帶的膽固醇便積存在動脈壁上，導致粥樣硬化［8-9］。同時，炎癥因子影響動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）的發(fā)生及發(fā)展［10-11］。C3、C4與血漿C反應蛋白或其他炎癥標志物相關［12］，補體的激活的過度與不足均可能導致免疫失衡和炎性細胞的出現(xiàn)，從而引起組織損傷，加重臨床癥狀［13-14］。目前有很多研究提示C3和心血管疾病之間的存在聯(lián)系，在心肌梗死患者中補體成分激活［15］；補體系統(tǒng)在脈管系統(tǒng)中的激活可能與慢性炎癥有關，在血小板、中性粒細胞、單核細胞以及紅細胞和內(nèi)皮細胞均可發(fā)生［13，16］。而且，目前研究發(fā)現(xiàn)，血脂代謝和補體系統(tǒng)之間的聯(lián)系可能會增加心血管疾病的發(fā)病風險［17-18］，而早期活躍的炎癥反應，可促進LDL-C氧化從而形成軟斑塊，有可能增加早發(fā)冠心病發(fā)生的風險。綜上所述，在早發(fā)的心血管疾病患者中，補體有可能會協(xié)同LDL-C的炎癥反應，從而促進LDL-C的氧化過程。但是，目前在國內(nèi)外暫時未見早發(fā)冠心病亞組分類的人群中LDL-C與補體C3、C4的相關性報道，因此本課題通過研究早發(fā)冠心病人群血清血脂LDL-C及炎癥因子補體C3、C4水平的相關性，并以晚發(fā)冠心病及健康體檢人群作對照，以期探討早發(fā)冠心病人群LDL-C與補體C3、C4對早發(fā)冠心病的影響。

1 材料與方法

1.1 研究對象

收集2018年1月至9月于茂名市人民醫(yī)院心血管內(nèi)科住院經(jīng)冠狀動脈造影明確診斷為冠心病的患者，至少有一支主要冠脈血管狹窄≥75%，無論是否血運重建者；根據(jù)冠脈造影及年齡分為早發(fā)冠心病組（PCAD group）共108例，晚發(fā)冠心病組（late-onset coronary artery disease，LCAD group）共147例，同時納入健康體檢者組（healthy group）共100例為對照組；健康人群均經(jīng)冠脈造影或冠脈CTA排除冠脈病變。

所有患者需排除①風濕性心臟病、各種類型心肌病、肺心病、心臟瓣膜病等其他器質(zhì)性心臟??；②合并嚴重感染；③嚴重慢性肝腎功能不全；④甲狀腺功能亢進、甲狀腺功能低下、自身免疫性疾病、腫瘤、結締組織病、近2個月行大手術或發(fā)生外傷、燒傷等或重大應激事件；⑤既往降脂、調(diào)脂藥物應用史、非類固醇消炎鎮(zhèn)痛藥及抗氧化應用史；⑥其他潛在的炎癥相關因素疾?。虎呷焉?。

1.2 資料的收集

登記所有符合入選標準研究對象的年齡、性別、吸煙史、高血壓史、糖尿病史等一般資料；測量并登記體質(zhì)量、身高、血壓、腰圍等一般體格檢查指標；研究對象于冠狀動脈造影（coronary angiography，CAG）和/或介入治療前，空腹12 h以上采集肘靜脈血3 mL，EDTA或肝素抗凝，采血后送檢。各項生化指標采用茂名市人民醫(yī)院檢驗科全自動生化檢測儀檢驗的結果。本研究已通過茂名市人民醫(yī)院倫理委員會審核，所有患者及健康體檢者對本研究知情同意。

1.3 統(tǒng)計分析

將收集的相關資料整理成Excel數(shù)據(jù)庫，應用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。分類變量資料以例數(shù)（百分比）進行描述，組間及兩兩比較應用卡方檢驗或精確概率法。定量資料先行正態(tài)性檢驗，符合正態(tài)性分布的定量資料以均數(shù)±標準差（x±s）進行表示，多組間定量資料數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，方差齊時用用方差分析，有統(tǒng)計學意義時用Bonferroni法兩兩比較；不符合正態(tài)分布的定量資料以M（P25，P75）表示，多組間定量資料數(shù)據(jù)非正態(tài)，方差不齊時應用H檢驗，有統(tǒng)計學意義時進行兩兩比較。在各組中以C3、C4作為自變量，LDL-C作為因變量，校正混雜因素后進行多重線性回歸分析并描繪散點圖。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 早發(fā)冠心病組、晚發(fā)冠心病組及健康體檢者組臨床資料比較

分析表明，3組的性別、年齡、吸煙史、飲酒史、冠心病家族史、高血壓病史、糖尿病病史水平比較，差異均具有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05，表1）。

表1 三組的臨床資料比較Table 1 Clinical data of three groups ［n（%）or（± s）］

表1 三組的臨床資料比較Table 1 Clinical data of three groups ［n（%）or（± s）］

PCAD：premature coronary artery disease；LCAD：late-onset coronary artery disease；CHD：coronary artery disease

P Male Age/years Smoking Drinking CHD family history Hypertension Diabetes PCAD group（n=108）62（57.4）51.43±8.122 46（42.6）26（24.1）34（31.5）86（79.6）28（25.9）LCAD group（n=147）105（71.4）70.69±8.913 57（38.8）46（31.3）32（21.8）126（85.7）47（32.0）Healthy group（n=100）58（58.0）44.94±4.557 19（19.0）4（4.0）2（2.0）0（0.0）0（0.0）χ2/F 7.010 385.315 14.976 27.003 30.249 207.348 38.656 0.03＜0.001 0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

進一步兩兩比較表明，早發(fā)冠心病組與晚發(fā)冠心病組的吸煙史、飲酒史、冠心病家族史、高血壓病史、糖尿病病史水平比較無統(tǒng)計學意義（P均＞0.05），性別、年齡水平比較差異具有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。早發(fā)冠心病組、晚發(fā)冠心病組與健康體檢者組的年齡、吸煙史、飲酒史、冠心病家族史、高血壓病史、糖尿病病史水平比較差異均具有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。早發(fā)冠心病組與健康體檢者組的性別水平比較無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），晚發(fā)冠心病組與健康體檢者組的性別水平比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

2.2 早發(fā)冠心病組、晚發(fā)冠心病組及健康體檢者組臨床資料比較補體C3、C4及LDL-C水平分析

三組人群補體C3、C4及LDL-C、HDL-C、TC、TG水平比較，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05，表2）。進一步兩兩比較分析表明，早發(fā)冠心病組與晚發(fā)冠心病組補體C3、C4及LDL-C、TG水平比較，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），HDL-C、TC水平差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；早發(fā)冠心病組與健康體檢者組補體C3、C4、LDL-C、HDLC、TC、TG水平比較，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；晚發(fā)冠心病組與健康體檢者組補體C3、C4、LDL-C、HDL-C、TC、TG水平比較，差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表2 三組補體C3、C4及HDL-C水平分析Table 2 Complement C3，complement C4 and LDL-C levels of three groups M（P25，P75）

2.3 三組患者補體C3、C4及LDL-C水平相關性分析

在3組患者中以分別以補體C3、C4為自變量，以LDL-C為因變量，校正性別、年齡、吸煙史、飲酒史、冠心病家族史、高血壓病史、糖尿病病史后進行多重線性回歸分析表明，在早發(fā)冠心病組中，補體C3、C4與LDL-C呈正相關（P＜0.05；表3，4），散點圖整體趨勢為正相關（圖1，2）；在晚發(fā)冠心病組和健康體檢者組中，補體C3、C4與LDL-C無明顯相關（P＞0.05；表5～8），散點圖離散，無明顯相關性。

表3 早發(fā)冠心病組補體C3、C4及LDL-C水平相關性分析Table 3 Estimation and test results of regression coefficients of LDL-C and complement C3 and C4 in PCAD Group

表4 早發(fā)冠心病組補體C3、C4及LDL-C相關系數(shù)及偏相關系數(shù)Table 4 Correlation coefficient and partial correlation coefficient of LDL-C with complement C3 and C4 in PCAD Group

圖1 早發(fā)冠心病組補體C3及LDL-C水平散點圖Fig.1 Scatter plots of complement C3 and LDL-C levels in PCAD group

圖2 早發(fā)冠心病組補體C4及LDL-C水平散點圖Fig.2 Scatter plots of complement C4 and LDL-C levels in PCAD group

表5 晚發(fā)冠心病組補體C3、C4及LDL-C水平相關性分析Table 5 Estimation and test results of regression coefficients of LDL-C and complement C3 and C4 in LCAD group

表6 晚發(fā)冠心病組補體C3、C4及LDL-C相關系數(shù)及偏相關系數(shù)Table 6 Correlation coefficient and partial correlation coefficient of LDL-C with complement C3 and C4 in LCAD group

表7 健康體檢者組補體C3、C4及LDL-C水平相關性分析Table 7 Estimation and test results of regression coefficients of LDL-C and complement C3 and C4 in healthy group

表8 健康體檢者組補體C3、C4及LDL-C相關系數(shù)及偏相關系數(shù)Table 8 Correlation coefficient and partial correlation coefficient of LDL-C with complement C3 and C4 in healthy group

3 討論

冠心病是嚴重危害人類健康的常見心血管疾病［1-2］。根據(jù)NECP-ATP Ⅲ（The National Cholesterol Education Program—Adult Treatment PaneⅢ）定義：早發(fā)冠心?。≒CAD）是指發(fā)病年齡男性≤55歲，女性≤65歲的冠心?。?］，是一種特殊的冠心病類型。PCAD病理學研究表明，其動脈粥樣硬化斑塊富含脂質(zhì)泡沫細胞，為軟斑塊，與老年患者存在較多鈣化的硬斑塊有異，軟斑塊進展迅速、易破裂，是冠狀動脈血栓形成的主要原因，PCAD多無先兆癥狀，急性起病，多表現(xiàn)為急性冠脈綜合征，特別是急性心肌梗死［5-7］。

脂質(zhì)代謝的紊亂及氧化應激反應是AS的形成的主要因素［19］。血漿中LDL-C是運輸內(nèi)源性膽固醇的主要載體，其通過結合細胞膜上的低密度脂蛋白受體（LDL-R）被降解和轉(zhuǎn)化。正常情況下LDLC是以非氧化狀態(tài)存在，非氧化的LDL-C并不容易引起動脈粥樣硬化，只有LDL-C被氧化成了（Ox-LDL），才會沉積在血管內(nèi)壁，同時其攜帶的膽固醇便積存在動脈壁上，導致粥樣硬化［8-9］。LDL-C為冠心病的獨立危險因素之一，本研究可見LDL-C水平在早發(fā)冠心病組與晚發(fā)冠心病組中均高于健康體檢者組，而早發(fā)冠心病組患者的LDL-C水平高于晚發(fā)冠心病組患者（P＜0.05，表2），提示在早發(fā)冠心病患者中，脂質(zhì)代謝的紊亂更為明顯。動脈粥樣硬化（AS）屬于慢性炎癥性疾病的一種。在大樣本臨床研究中（n＞ 2000），C3，C4與血漿C反應蛋白或其他炎癥標志物相關［10，12］，提示炎癥因子與AS的發(fā)生及發(fā)展密切相關［10-11］。補體系統(tǒng)參與機體的特異性和非特異性免疫機制，在體內(nèi)作為一個效應系統(tǒng)和效應放大系統(tǒng)［20］發(fā)揮重要作用。研究表明，補體系統(tǒng)與臨床上許多免疫及炎癥性條件有關，補體的激活的過度與不足均可能導致免疫失衡和炎性細胞的出現(xiàn)，從而引起組織損傷，加重臨床癥狀［13］。在本研究中，可見補體C3、C4水平在早發(fā)冠心病組中最高，健康體檢者組中最低（P＜0.05），提示在早發(fā)冠心病患者中，氧化應激反應更為活躍。

近年的研究越來越重視補體系統(tǒng)在臨床炎癥性疾病上的動態(tài)變化。C3和心血管疾病之間的聯(lián)系在較多研究中已經(jīng)得到證實［13，21-22］。補體系統(tǒng)在脈管系統(tǒng)中的激活可能與慢性炎癥有關，在血小板、中性粒細胞、單核細胞以及紅細胞和內(nèi)皮細胞均可發(fā)生［13，16］。而且，有研究發(fā)現(xiàn)心肌梗死患者補體成分激活，并在冠狀動脈血栓中檢測到C3、C3a、C5a和 C1q［15］；目前研究發(fā)現(xiàn)，血脂代謝和補體系統(tǒng)之間的聯(lián)系可能會增加心血管疾病的發(fā)病風險［17-18］。本研究的結果顯示：在早發(fā)冠心病組中，補體C3、C4與LDL-C呈正相關（P＜0.05）；在晚發(fā)冠心病組和健康體檢者組中，補體C3、C4與LDL-C無明顯相關（P＞0.05）。提示在早發(fā)的心血管疾病患者中，補體有可能會協(xié)同LDL-C的炎癥反應，從而促進LDL-C的氧化過程；早期活躍的炎癥反應，有可能促進LDL-C氧化從而形成軟斑塊，增加早發(fā)冠心病發(fā)生的風險。

現(xiàn)在國內(nèi)年輕人群的心血管疾病的發(fā)病率呈上升趨勢，在目前已經(jīng)明確的相關預測指標如血脂異常、吸煙史、肥胖、糖尿病等之外，炎癥的活躍也越來越受重視。非單一因素的預測，多指標綜合及各因素的相關性均對CHD的診斷、預測具有重要意義。由于本研究納入的病例數(shù)比較少，故尚待更大、更全面的研究進一步證實，同時本研究為臨床研究，也需要進一步研究補體及LDL-C相關性的作用機制。