超高效液相色譜法對面制品中甲醛次硫酸氫鈉的測定

趙卉 常南 岑琴

摘 要：使用超高效液相色譜設(shè)備、色譜柱類型為WatersTMRP18 （2.1毫米×50毫米，1.7微米）、Empower色譜工作站，以乙腈∶水=70∶30比例為流動相配合等度洗脫，采用二極管陣列檢測器在355納米處對面制品中甲醛次硫酸氫鈉進行檢測，整個分離過程在3分鐘內(nèi)完成。甲醛在0～8微克濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，方法檢出限為0.08微克/克，回收率為91.1%～99.0%，相對標準偏差為0.5%～2.5%。

關(guān)鍵詞：超高效液相色譜儀;甲醛;分離

甲醛次硫酸氫鈉，俗稱吊白塊或雕白粉，主要用于印染工業(yè)，禁止作為食品添加劑在食品中應用。普通人經(jīng)口攝入純吊白塊10克就會中毒致死。由于食品中大多含有不同水平的甲醛本底值。因此，建立簡單高效的測定方法十分必要。食品中甲醛次硫酸氫鈉的檢測方法主要以化學法為主，如變色酸法、乙酰丙酮法、4-氨基-3-聯(lián)氨-5-疏基-1，2，4-三氮雜茂（AHMT）分光光度法等，這些方法具有儀器價格低廉、操作簡便、易于推廣等優(yōu)點，但是基于化學反應的原理，檢測容易受到干擾，特異性不強等特點，本研究利用超高效液相色譜儀對甲醛次硫酸氫鈉擬建立一種高效快速的檢測方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器：超高效液相色譜儀（配二極管陣列檢測器）;色譜柱Waters RP18 （2.1毫米×50毫米，1.7微米）;電子天平;超純水制備系統(tǒng)。

試劑：甲醛標準溶液（100毫克/升）、磷酸氫二鈉、2，4-二硝基苯肼、正己烷、鹽酸、氯化鈉、乙腈。

1.2 試驗方法

樣品前處理：準確稱取樣品約20克搗碎均勻，加入200毫升鹽酸-氯化鈉溶液，轉(zhuǎn)入三角瓶中，振蕩提取40分鐘，將提取液倒入離心管中，于10000轉(zhuǎn)/分離心15分鐘，上清液備用。

衍生化：取2.0毫升上清液于比色管中，加入1毫升磷酸氫二鈉溶液、0.5毫升衍生劑，補加水至10毫升，蓋上蓋子搖勻，置于50℃水浴中加熱40分鐘，取出用流水冷卻至室溫，準確加入5.0毫升正己烷，將比色管橫置，水平方向輕輕振搖3～5次，1小時內(nèi)每隔5分鐘，輕輕振搖3～5次，靜置30分鐘，取10微升正己烷萃取液進樣。

色譜條件流動相的選擇：以乙腈∶水=70∶30為流動相配合等度洗脫，采用二極管陣列檢測器在355納米掃描，流速：0.3毫升/分，柱溫：室溫。在以上色譜條件下，進樣0.4微升，以色譜峰面積外標法定量。

標準曲線：分別量取0.00毫升、0.25毫升、0.50毫升、1.00毫升、2.00毫升、4.00毫升甲醛標準中間液（2微克/毫升）于25毫升比色管中（相當于0.0微克、0.5微克、1.0微克、2.0微克、4.0微克、8.0微克甲醛）。

方法回收率及精密度：為考察方法的可靠性，對面制品進行加標回收率測定。加標量分別取低、中、高三濃度（2微克/克、9微克/克、25微克/克）按照前文所提的“樣品前處理”及“衍生化”提取方法提取6份，計算回收率及精密度。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍及檢出限

檢測結(jié)果中色譜峰高為噪聲高3倍（S/N=3）相對應的濃度為檢出限。實驗得出甲醛在濃度范圍為0～8微克時，線性方程為：Y=9.78×103X，線性相關(guān)系數(shù)為：R=0.996。線性良好，滿足要求。

2.2 方法回收率及精密度

通過加標回收率試驗，對方法進行回收率和精密度測定，結(jié)果見表1。由表1可知，甲醛的平均回收率為91.1%～99.0%，相對標準偏差為0.5%～2.5%（測定次數(shù)n=6）。表明該方法精密度、準確度能滿足分析要求。

3 結(jié)論

本實驗建立的超高效液相色譜法具有以下特點：分析速度快且分離效果好，分離僅需3分鐘;由于采用小顆粒填充的短柱，因此具有較高的柱效和較低擴散體積。采用酸水解的方法解離出面制品中甲醛后，通過2，4-二硝基苯肼衍生法測定樣品中甲醛的含量，在0～8微克濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，靈敏度高，重復性好，方法檢出限為0.08微克/克，回收率為91.1%～99.0%，相對標準偏差為0.5%～2.5%。使用該法回收率及精密度滿足《國標GB/T27404-2008實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測》要求。