E-cadherin在前列腺癌中的表達(dá)及其臨床病理意義

前列腺癌（PCa）是最常見(jiàn)的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其病因不明，發(fā)病隱匿，早期癥狀不明顯，部分患者診斷時(shí)腫瘤已發(fā)生轉(zhuǎn)移，喪失手術(shù)根治切除的機(jī)會(huì)。因此迫切需要發(fā)現(xiàn)有效的腫瘤標(biāo)志物用于診斷前列腺癌?，F(xiàn)有研究表明，當(dāng)腫瘤細(xì)胞之間的相互黏附作用減弱，癌細(xì)胞便可能從原發(fā)病灶脫落，伴隨血液或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到人體其他部位，是惡性腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵。能抑制腫瘤細(xì)胞從原發(fā)灶脫落，最主要的指標(biāo)是E-鈣粘附素（E-cadherin）[1]。E-cadherin蛋白在前列腺癌中的表達(dá)研究不多，我們使用了免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)、測(cè)定E-cadherin基因在84例前列腺癌患者中的表達(dá)，其目的是開(kāi)發(fā)一種潛在的能診斷和監(jiān)測(cè)前列腺癌預(yù)后的標(biāo)志物，做到早診斷、早治療，提高患者的生存率。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取我科在2008年2月—2015年2月收集的84例接受了前列腺穿刺或手術(shù)治療的前列腺腺癌患者的石蠟標(biāo)本，并取20例良性前列腺增生組織作為對(duì)照組。84例前列腺癌患者中，39例患者年齡≤65歲，45例患者年齡＞65歲。標(biāo)本分為T(mén)1a-T2b期（40例）和T2c-T4期（44例）。55例血清PSA≤20 ng/mL，29例患者＞20 ng/mL。31例低Gleason評(píng)分4～7分，53例高Gleason評(píng)分8～10分。所有患者均未接受術(shù)前化療或放療。

1.2 方法

使用免疫組化SP法，實(shí)驗(yàn)操作參考文獻(xiàn)[2]，將標(biāo)本切成4 μm連續(xù)切片，60℃ 烘烤60 min，然后脫蠟。將切片浸入壓力鍋中，在EDTA抗原回收緩沖液中放置10 min，然后冷卻20 min，用3%雙氧水處理，然后與正常血清孵育，阻斷非特異性結(jié)合，切片用一抗（兔抗人E-cadherin抗體 1：100，北京博奧森生物技術(shù)有限公司），在4℃孵育，PBS緩沖液漂洗，添加二抗（北京博奧森生物技術(shù)有限公司），室溫孵育1 h，再添加鏈霉親和素-辣根過(guò)氧化物酶，室溫下孵育20 min。PBS緩沖液漂洗，然后加DAB顯色液顯色 。染色結(jié)果判斷：根據(jù)細(xì)胞染色強(qiáng)度分為0（陰性）、1（弱）、2（中）和3（強(qiáng)）；根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞染色率分為0（0%）、1（1%～25%）、2（26%～50%）、3（51%～75%）和4（76%～100%）。兩者之和為總分，其分?jǐn)?shù)＞2時(shí)，定義為陽(yáng)性（+，高表達(dá)）；當(dāng)分?jǐn)?shù)≤2時(shí)，為陰性（-，低表達(dá)）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SAS 9.2軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05時(shí)可認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

E-cadherin以細(xì)胞膜被染成棕黃色、棕褐色為陽(yáng)性細(xì)胞。E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)在前列腺癌組織中占39.3%（33/84），低于前列腺增生組織的90.0%（18/20）（P＜0.001）。其在不同臨床參數(shù)的前列腺癌組織中的表達(dá)比較見(jiàn)表1。

3 討論

E-cadherin是一種鈣依賴(lài)性細(xì)胞粘附分子，介導(dǎo)細(xì)胞連接，維持正常的上皮細(xì)胞形態(tài)和組織結(jié)構(gòu)的完整性，能抑制腫瘤細(xì)胞從原發(fā)灶脫落，抑制腫瘤轉(zhuǎn)移，是上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的分子標(biāo)志物[3-6]。上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化是指上皮細(xì)胞通過(guò)特定程序轉(zhuǎn)化成為間質(zhì)細(xì)胞的過(guò)程，其參與了惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展的多個(gè)環(huán)節(jié)，和腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[5-6]。E-cadherin在多種腫瘤如腎癌、食管鱗癌、結(jié)直腸癌、肝癌中下調(diào)或缺失，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[3，6-10]。

在本研究中，結(jié)果表明E-cadherin蛋白在良性前列腺增生組織中表達(dá)明顯高于前列腺癌組織，另外，E-cadherin蛋白表達(dá)的檢測(cè)在PSA高水平組（＞20 ng/mL）和低水平組（≤20 ng/mL）進(jìn)行比較，有顯著性差異，這表明E-cadherin基因的缺失，可能參與前列腺癌的發(fā)生。本研究中E-cadherin蛋白陽(yáng)性率在高Gleason評(píng)分組低于低Gleason評(píng)分組，此外，E-cadherin陽(yáng)性率在低TNM分期組（t1a-t2b）較高分期組（T2c-T4）更高，這些提示E-cadherin缺失在腫瘤發(fā)展中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)E-cadherin低表達(dá)或缺失與患者預(yù)后密切相關(guān)。秦樂(lè)等[7]研究發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌中E-cadherin蛋白低表達(dá)的患者相對(duì)于高表達(dá)者，預(yù)后差。趙海濤等[11]在胰腺癌中也有類(lèi)似發(fā)現(xiàn)。隨著分子生物學(xué)研究的發(fā)展，易敏等[12]發(fā)現(xiàn)下調(diào)E-cadherin基因后，甲狀腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵襲能力明顯增強(qiáng)，提示其有可能成為腫瘤基因治療的新靶點(diǎn)。

總之，結(jié)合文獻(xiàn)及本次研究結(jié)果，筆者認(rèn)為E-cadherin蛋白的下調(diào)或缺失有助于前列腺癌的診斷，并可用于患者預(yù)后監(jiān)測(cè)。E-cadherin的缺失，促進(jìn)前列腺癌發(fā)生、發(fā)展，對(duì)其具體作用機(jī)制進(jìn)行更深入研究，E-cadherin可能成為前列腺癌基因治療的新靶點(diǎn)。

表1 E-cadherin在前列腺癌組織中的表達(dá)[例（%）]