打破玉玲花種子休眠的方法研究初報

謝雙嶺　石俁　莊倩倩

摘 要 對比物理方法、化學(xué)方法及兩者相結(jié)合的方法，得出打破玉玲花種子休眠的最佳方法。研究結(jié)果表明，物理方法與化學(xué)方法相結(jié)合的處理條件下，玉玲花種子的平均發(fā)芽率高于其他方法。其中低溫層積120 d與濃度為500 mg·L-1的GA溶液處理12 h，打破玉玲花種子休眠的水平最高，發(fā)芽率為64.3%。

關(guān)鍵詞 玉玲花;種子休眠;發(fā)芽率

中圖分類號：S685.99 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.36.065

玉玲花（Styrax obassia Sieb & Zucc）為紫茉莉科紫茉莉?qū)伲嘈棠?，稀灌木，總狀花序，花似玉鈴，花香素雅、清甜，小枝下部葉較小對生，上部葉較大互生;是一個新的芳香植物源，花、葉均可以提取芳香源;又因其木材光潔細(xì)膩、質(zhì)堅紋美，可用于加工和雕刻;其種子可用于榨油、供制肥皂及潤滑油等，具有很高的經(jīng)濟(jì)價值。除此之外，玉玲花還可作為園林綠化觀賞樹種在庭院、公園和街道內(nèi)孤植、叢植，具有較大的開發(fā)利用潛力，日益受到園林綠化的重視。但由于玉玲花的種子存在休眠的生物特性，直接播種很難發(fā)芽，難以滿足現(xiàn)今市場的需求[1-3]。近年來關(guān)于玉玲花的繁殖方面研究主要集中在扦插[4]、組織培養(yǎng)及嫁接方面[5-7]，關(guān)于其育種繁殖鮮有報道。本試驗從打破玉玲花種子萌發(fā)這一角度出發(fā)，研究促進(jìn)玉玲花種子萌發(fā)的最佳方法，為以后玉玲花種子繁殖的研究提供相關(guān)理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

玉玲花種子從姣之陽苗木有限公司購買，種子采于2018年11月，種子橢圓形或卵形，種皮具有花紋，千粒質(zhì)量為72.46 g，發(fā)芽率為3.4%。

1.2 種子預(yù)處理

種子消毒滅菌：0.5%的KMnO4泡種3 h，撈出密封

1 h，然后用無菌水沖洗干凈自然陰干，玻璃儀器及河沙使用高壓滅菌鍋滅菌20 min。

1.3 物理方法處理

1.3.1 機(jī)械處理

選取飽滿種子放入研缽內(nèi)與河沙按照1∶3的比例充分混合，研破種皮后，對種子及培養(yǎng)皿進(jìn)行消毒滅菌處理。

1.3.2 低溫層積處理

低溫層積處理又稱低溫沙藏法，在層積前先對種子、河沙及燒杯進(jìn)行消毒滅菌處理;河沙用無菌水浸濕，使河沙保持充分濕潤，無積水;將種子及河沙按照1∶3的比例在燒杯內(nèi)充分均勻混合后，上面再覆蓋一層厚5 cm左右的河沙，密封燒杯。放置在5 ℃冰箱環(huán)境中

30 d、60 d、90 d、120 d后，將種子與河沙分離，再用97%的無水乙醇進(jìn)行消毒處理后，用培養(yǎng)皿作為容器，放置在人工光照培養(yǎng)箱25 ℃的環(huán)境內(nèi)觀察其發(fā)芽情況。

1.3.3 變溫處理

利用水浴鍋將種子置于35 ℃的常溫水中3 h后，再將種子置于5 ℃的水中72 h，撈出來用97%的無水乙醇清洗一遍，再與濕潤的河沙按照1∶3的比例混合后，覆蓋一層0.5 cm左右的河沙，置于人工光照培養(yǎng)箱下進(jìn)行種子發(fā)芽試驗。

1.4 化學(xué)方法處理

1.4.1 生長調(diào)節(jié)劑處理

將GA、6-KT、6-BA用97%的無水乙醇分別配置成100 mg·L-1、200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的溶液，再將消毒滅菌后的種子分別放置在不同溶液的不同濃度中浸泡

6 h、12 h、18 h和24h。

將60%乙烯利分別稀釋成20%、40%濃度，把經(jīng)消毒滅菌后的種子分別放在20%、40%、60%的濃度中浸泡

6 h、12 h、18 h和24h。

1.4.2 酸堿試劑處理

將消毒滅菌后的種子分別置于濃度為40%、60%、80%的H2SO4溶液及NaOH溶液中，浸泡30 min、60 min后，用無菌水進(jìn)行流水沖洗。

1.5 物理方法與化學(xué)方法相結(jié)合

1.5.1 低溫層積與生長調(diào)節(jié)劑處理相結(jié)合

將低溫層積120 d的種子分別置于100 mg·L-1、

200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的GA溶液中，20%、40%、60%濃度的ETH中，100 mg·L-1、200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的6-KT及6-BT中密封浸泡6 h、12 h。

1.5.2 低溫層積與酸堿試劑處理相結(jié)合

將低溫層積120 d的種子分別置于濃度為40%、60%、80%的H2SO4及NaOH溶液中，浸泡30 min、60 min后，用無菌水進(jìn)行流水沖洗。

1.5.3 打破種皮與生長調(diào)節(jié)劑處理相結(jié)合

將打破種皮的種子分別置于100 mg·L-1、200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的GA溶液中，20%、40%、60%濃度的ETH中，100 mg·L-1、200 mg·L-1、500 mg·L-1濃度的6-KT及6-BT中密封浸泡6 h、12 h。

1.5.4 打破種皮與化學(xué)試劑處理相結(jié)合

將打破種皮的種子分別置于濃度為40%、60%、80%的H2SO4及NaOH溶液中，浸泡0.5 h、1.0 h后，用無菌水進(jìn)行流水沖洗。

1.6 種子萌發(fā)條件及數(shù)據(jù)統(tǒng)計

每處理30粒種子，均3次重復(fù)試驗，將經(jīng)過處理的種子分別置于培養(yǎng)皿中，人工光照培養(yǎng)箱溫度25 ℃，濕度80%，光照100%，每天光照12 h，黑暗12 h。進(jìn)行種子發(fā)芽試驗。從第1粒種子發(fā)芽開始記錄直至種子發(fā)芽數(shù)保持不變3 d后停止記錄，重復(fù)3次，記錄整理數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 物理處理方法對發(fā)芽率的影響

由表1可知，在不同的物理方法處理下，層積處理120 d

后的玉鈴花種子發(fā)芽率最高，為41%;其次是變溫處理后的玉鈴花種子發(fā)芽率次之，發(fā)芽率為37%，發(fā)芽率最低的為打破種皮后的的玉鈴花種子，發(fā)芽率僅為4.5%。

2.2 不同化學(xué)方法處理對玉鈴花發(fā)芽率的影響

由表2可知，玉玲花種子由不同濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑在不同的時間處理下，GA溶液對打破玉玲花種子休眠的效果最佳，6-KT、6-BA溶液的影響效果次之，ETH溶液的效果相對來說較差。其中在不同溶度不同時間的處理下，濃度500 mg·L-1的GA溶液處理玉玲花種子24 h發(fā)芽率最高，為49%。

由表3可知，玉玲花種子由不同濃度的酸堿溶液在不同的時間處理下，NaOH溶液的影響效果最佳，但在不同濃度不同時間處理下，濃度為60%的H2SO4溶液處理0.5 h效果最佳，發(fā)芽率為35.7%。

2.3 物理方法與化學(xué)方法相結(jié)合對玉玲花種子發(fā)芽率的影響

由表4可知，低溫層積120 d后的玉玲花種子在經(jīng)過植物生長調(diào)節(jié)劑的處理下，GA溶液的效果最佳，其次是6-KT溶液，6-BA溶液處理的效果相對于6-KT溶液的處理效果較差。在4種溶液不同濃度不同時間的處理下，其中以低溫層積120 d與濃度為500 mg·L-1的GA溶液處理12 h的效果最佳，發(fā)芽率為64.3%。

由表5可知，低溫層積120 d后的玉玲花種子經(jīng)過不同濃度的酸堿溶液處理，效果相近，其中以低溫層積120 d與濃度為60%的H2SO4處理1 h效果最佳，發(fā)芽率為44.3%?？傮w來說，與H2SO4溶液溶液相比，NaOH溶液打破玉玲花種子休眠的效果較好。

綜合比較表4和表5，以低溫層積120 d與濃度為

500 mg·L-1的GA溶液處理12 h效果最佳，發(fā)芽率為64.3%。

由表6可知，在打破種皮與不同濃度植物生長調(diào)節(jié)劑的不同時間處理條件下，GA溶液對玉玲花種子發(fā)芽率的影響水平最高，其中在濃度為500 mg·L-1的GA溶液中處理被打破種皮的玉玲花種子12 h，玉玲花種子的發(fā)芽率最高，高達(dá)64.3%。利用6-KT與6-BA溶液以及ETH溶液處理種子，發(fā)芽水平相差不大。

由表7可知，在打破種皮與不同濃度的酸堿溶液在不同時間的處理條件下，NaOH溶液的效果比H2SO4溶液打破玉玲花種子休眠的效果好。

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

在褚澤龍[8]對玉玲花種子休眠與萌發(fā)特性研究的結(jié)論中提到，影響玉玲花種子休眠的原因有種皮限制，但這并不是主要原因，影響其休眠的主要原因可能是胚乳內(nèi)源抑制物的存在。本試驗從不同的角度出發(fā)，試驗各種方法得出低溫層積下與GA溶液結(jié)合是打破玉玲花種子休眠的最佳方法。在試驗過程中，GA溶液對打破玉玲花種子休眠起著至關(guān)重要的作用，但是在查閱的文獻(xiàn)中關(guān)于GA溶液對玉玲花種子休眠的影響缺乏例證，存在多種說法，關(guān)于GA溶液是否能有效打破玉玲花種子休眠，依舊需要進(jìn)一步的研究討論。

3.2 結(jié)論

經(jīng)過3種方法試驗對比得出打破玉玲花種子休眠的最佳方法是物理方法與化學(xué)方法相結(jié)合，在此方法下玉玲花種子的平均發(fā)芽率高于其他方法下玉玲花種子發(fā)芽率。其中最有效的試驗方法是低溫層積120 d與濃度為

500 mg·L-1的GA溶液處理12 h，該條件下打破玉玲花種子休眠的水平最高，發(fā)芽率為64.3%。

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[8] 褚澤龍.玉玲花種子休眠與萌發(fā)特性研究[D].泰安：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

（責(zé)任編輯：趙中正）